EUR-Lex Access to European Union law
This document is an excerpt from the EUR-Lex website
Document 02000R2870-20230313
Commission Regulation (EC) No 2870/2000 of 19 December 2000 laying down Community reference methods for the analysis of spirits drinks
Consolidated text: Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2870/2000 tad-19 ta’ Diċembru 2000 li jistabbilixxi l-metodi Komunitarji ta’ referenza għall-analiżi tax-xorb spirituż
Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2870/2000 tad-19 ta’ Diċembru 2000 li jistabbilixxi l-metodi Komunitarji ta’ referenza għall-analiżi tax-xorb spirituż
02000R2870 — MT — 13.03.2023 — 003.003
Dan it-test hu maħsub purament bħala għodda ta’ dokumentazzjoni u m’għandu l-ebda effett legali. L-istituzzjonijiet tal-Unjoni m'għandhom l-ebda responsabbiltà għall-kontenut tiegħu. Il-verżjonijiet awtentiċi tal-atti rilevanti, inklużi l-preamboli tagħhom, huma dawk ippubblikati fil-Ġurnal Uffiċjali tal-Unjoni Ewropea u disponibbli f’EUR-Lex. Dawk it-testi uffiċjali huma aċċessibbli direttament permezz tal-links inkorporati f’dan id-dokument
IR-REGOLAMENT TAL-KUMMISSJONI (KEE) Nru 2870/2000 tad-19 ta’ Diċembru 2000 li jistabbilixxi l-metodi Komunitarji ta’ referenza għall-analiżi tax-xorb spirituż (ĠU L 333 29.12.2000, p. 20) |
Emendat bi:
|
|
Il-Ġurnal Uffiċjali |
||
Nru |
Paġna |
Data |
||
IR-REGOLAMENT TAL-KUMMISSJONI (KE) Nru. 2091/2002 tas-26 ta' Novembru 2002 |
L 322 |
11 |
27.11.2002 |
|
REGOLAMENT TA' IMPLIMENTAZZJONI TAL-KUMMISSJONI (UE) 2016/635 tat-22 ta' April 2016 |
L 108 |
1 |
23.4.2016 |
|
REGOLAMENT TA’ IMPLIMENTAZZJONI TAL-KUMMISSJONI (UE) 2023/383 tas-16 ta’ Frar 2023 |
L 53 |
3 |
21.2.2023 |
Ikkoreġut bi:
IR-REGOLAMENT TAL-KUMMISSJONI (KEE) Nru 2870/2000
tad-19 ta’ Diċembru 2000
li jistabbilixxi l-metodi Komunitarji ta’ referenza għall-analiżi tax-xorb spirituż
Artikolu 1
Il-metodi Komunitarji tar-riferiment għall-analiżi tax-xorb spirituż sabiex tiġi żgurata l-konformità mar-Regolament (KEE) Nru 1576/89 u r-Regolament (KEE) Nru 1014/90:
għandhom ikunu dawk iddikjarati fl-Anness ta’ ma’ hawn.
Artikolu 1a
Madankollu, meta l-kampjun tal-alkoħol ma jkunx ċar jew il-partikoli sospiżi jkunu viżibbli, il-kampjun għandu jiġi distillat.
Artikolu 2
Minkejja l-ewwel inċiż ta’ l-Artikolu 1, għandhom ikunu permessi metodi analitiċi oħra, taħt ir-responsabbiltà tad-direttur tal-laboratorju, bil-kondizzjoni illi l-eżattezza u l-preċiżjoni (il-kapaċita tat-tennja u r-riproduċibbiltà) tal-metodi jkunu mill-inqas ekwivalenti għal dawk tal-metodi analitiċi tar-riferiment rilevanti mogħtija fl-Anness.
Artikolu 3
Meta l-metodi analitiċi Komunitarji tar-riferiment ma jkunx stabbiliti għall-kxif u l-kwantifikazzjoni tas-sustanzi li jkunu f’xarba spirituża partikolari, għandhom jintużaw il-metodi li ġejjin:
il-metodi analitiċi li huma vvalidati sa proċeduri kkonoxxuti internazzjonalment u b’mod partikolari jissodisfaw il-kriterji ffisati fl-Anness mad-Direttiva 85/591/KEE;
il-metodi analitiċi li jikkonformaw ma’ l-istandards irrakkommandati ta’ l-Organizzazzjoni Internazzjonali ta’ l-Istandardizazzjoni (ISO);
il-metodi analitiċi kkonoxxuti mill-Assmblea Ġenerali ta’ l-Uffiċċju Internazzjonali tad-Dwieli u l-Inbid (OIV) u ppublikati minn dan l-uffiċċju;
fin-nuqqas ta’ metodu kif indikat fil-(a), fil-(b) jew fiċ-(ċ), għar-raġuni ta’ l-eżattezza, il-kapaċità tat-tennija u r-reproduċibbiltà:
Artikolu 4
Għall-għanijiet ta’ dan ir-Regolament:
“il-limitu tal-kapaċità tat-tennija”: għandu jkun il-valur inqas jew ugwali li għalih id-differenza assoluta bejn ir-riżultati ta’ żewġ testijiet miksuba taħt il-kondizzjonijiet tal-kapaċità tat-tennija (l-istess operatur, l-istess apparat, l-istess laboratorju u intervall qasir taż-żmien) tista’ tkun mistennija li jkollha l-probabbilità ta’ 95 % ġISO 3534-1ħ;
“il-limitu tar-riproduċibbiltà”: għandu jkun il-valur inqas jew egwali li għalih id-differenza assoluta bejn ir-riżultati ta’ żewġ testijiet miksuba taħt il-kondizzjonijiet tar-reproduċibbiltà (operaturi differenti, apparat differenti, laboratorji differenti) tista’ tkun mistennija li jkollha l-probabbiltà ta’ 95 % ġISO 3534-1ħ;
“eżattezza”: għandha tkun il-qrubija tal-qbil bejn ir-riżultat ta’ test u u l-valur tar-riferiment aċċettat ġISO 3534-1ħ.
Artikolu 5
Dan ir-Regolament għandu jidħol fis-seħħ fis-seba’ jum wara l-publikazzjoni tiegħu fil-Ġurnal Uffiċjali tal-Komunitajiet Ewropej.
Għandu jibda japplika mill-1 ta’ Jannar 2001.
Dan ir-Regolament għandu jkun jorbot fl-intier tiegħu u japplika direttament fl-Istati Membri kollha.
L-ANNESS
ID-DESKRIZZJONI TAL-METODI ANALITIĊI TAR-RIFERIMENTl-qawwa alkolika skond il-volum |
|||||||
I |
Kif jiġu stabbiliti s-sustanzi volatili u l-metanol L-Appendiċi I : It-Tħejjija tad-distillat L-Appendiċi II : Il-Kejl tad-densità tad-distillat
|
||||||
II |
Kif jiġi stabbilit l-estratt niexef totali bil-gravimetrija |
||||||
III. |
Kif jiġu stabbiliti s-sustanzi volatili u l-metanol |
||||||
III.1 |
Rimarki Ġenerali |
||||||
III.2 |
Il-Konġeneri volatili: |
||||||
III.3 |
l-aldeidi, l-alkoli ogħla, l-etil aċetat u l-metanol (kromatografija bil- gass) |
||||||
IV. |
L-Aċidità volatili (p.m.) |
||||||
V. |
L-aċidu idroċjaniku ►M1 —————p.m.————— ◄ |
||||||
VI. |
L-Anetol ►M1 —————p.m.————— ◄ |
||||||
VII |
L-Aċidu gliċirriżiku ►M1 —————p.m.————— ◄ |
||||||
VIII |
It-tipi totali taz-Zokkor ►M2 —————p.m.————— ◄ |
||||||
IX. |
L-Isfar tal-bajd ►M1 —————p.m.————— ◄ |
||||||
X. |
Id-determinazzjoni tal-komposti tal-injam: furfural, 5-idrossimetilfurfural, 5-metilfurfural, vanillina, siringaldeid, koniferaldeid, sinapaldeid, aċidu galliku, aċidu ellaġiku, aċidu vanilliku, aċidu sirinġiku u skopoletina |
||||||
XI. |
Id-determinazzjoni tal-kontenut 14C fl-etanol |
||||||
I. KIF TIĠI STABBILITA L-QAWWA ALKOLIKA SKOND IL-VOLUM FIX-XORB SPIRITUŻ
Introduzzjoni
Il-metodu tar-riferiment jinkludi żewġ Appendiċi:
L-appendiċi I : It-tħejjija tad-distillat
L-Appendiċi II : Il-kejl tad-densità tad-distillat
1. L-Iskop
Il-metodu huwa xieraq għalbiex jistabbilixxi l-qawwa alkolika reali skond il-volum fix-xorb spirituż.
2. Ir-Riferimenti Normattivi
L-ISO 3696:1987: L-ilma għall-użu analitiku fil-laboratorju - l-ispeċifikazzjonijiet u l-metodi tat-
3. It-termini u d-definizzjonijiet
3.1. It-temperatura tar-riferiment:
It-temperatura tar-riferiment sabiex tiġi stabbilita l-qawwa alkolika skond il-volum, id-densità u l-gravità speċifika tax-xorb spirituż hija 20°Ċ.
Nota 1:
L-espressjoni “f’temperatura ta’ t°Ċ” hija riżervata għal meta jiġu stabbiliti kollha (id-densità jew il-qawwa alkolika skond il-volum) espressi f’temperatura għajr it-temperatura tar-riferiment ta’ 20°Ċ.
3.2. Id-Densità:
Id-densità hija l-massa għal kull unità tal-volum in vacuo fix-xorb spirituż f’temperatura ta’ 20 °Ċ. Hija espressa f’kilogrammi għal kull metru kubu u s-simbolu tagħha huwa ñ20°Ċ jew ñ20.
3.3. Il-Gravità speċifika:
Il-gravità speċifika hija l-proporzjon, espress bħala numru deċimali, tad-densità tax-xorb spirituż f’temperatura ta’ 20 °Ċ mad-densità ta’ l-ilma fl-istess temperatura. Hija murija bis-simbolu d20 °Ċ/20 °Ċ jew d20/20, jew sempliċement d meta ma jkunx hemm l-ebda possibbiltà ta’ konfuzjoni. Il-karatteristika li kienet imkejla trid tkun speċifikata fuq iċ-ċertifikat ta’ l-assaġġ bl-użu biss tas-simboli definiti hawn fuq.
Nota 2:
Huwa possibbli li tinkiseb il-gravità speċifika mid-densità ñ20 f’temperatura ta’ 20 °Ċ:
p20 = 998,203 × d20/20 = p20/998,203
fejn id-998,203 huwa d-densità ta’ l-ilma f’temperatura ta’ 20 °Ċ.
3.4. Il-qawwa alkolika reali skond il-volum:
Il-qawwa alkolika reali skond il-volum tax-xorb spirituż hija egwali għan-numru ta’ litri ta’ l-etil alkol li jkun jinsab f’100 l ta’ taħlita ta’ l-ilma ma’ l-alkohol li jkollha l-istess densità bħall-alkol jew l-ispirtu wara d-distillazzjoni. Il-valuri tar-riferiment għall-qawwa ta’ l-alkol skond il-volum ( % vol) f’temperatura ta’ 20 °Ċ kontra d-densità f’temperatura ta’ 20 °Ċ għal taħlitiet differenti ta’ l-ilma ma’ l-alkohol li jridu jintużaw huma dawk mogħtija fit-tabella internazzjonali adottata mill-Organizzazzjoni Internazzjonali tal-Metroloġija Legali fir-Rakkommandazzjoni tagħha Nru 22.
L-ekwazzjoni ġenerali li għandha x’taqsam mal-qawwa alkolika skond il-volum u d-densità ta’ taħlita ta’ ilma ma’ l-alkol f’temperatura partikolari hija mogħtija fil-paġna 40 tal-Kapitolu 3 “Il-qawwa alkolika skond il-volum” ta’ l-Anness mar-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2676/90 (ĠU L 272, tat-3.10.1990, p. 1) jew fil-manwal tal-metodi ta’ l-analiżi tal-OIV (1994) (p. 17).
Nota 3:
Għall-likuri u l-kremi li tagħhom huwa diffiċli li jitkejjel il-volum bl-eżatt, irid jintiżen il-kampjun u l-qawwa alkolika tiġi kkalkolata l-ewwel skond il-massa.
Il-formola ta’ konverżjoni:
fejn
ASM = il-qawwa alkolika skond il-massa,
P20 (alkol) = 789,24 kg/m3
4. Il-prinċipju
Wara d-distillazzjoni, il-qawwa alkolika skond il-volum tad-distillat tiġi stabbilita bil-piknometrija, id-densimetrija elettronika, jew id-densimetrija bl-użu ta’ miżien idrostatiku.
L-APPENDICI I: IT-THEJJIJA TAD- DISTILLAT
1. L-iskop
Il-metodu huwa addattat għat-tħejjija tad-distillati li għandhom jintużaw sabiex tiġi stabbilita l-qawwa alkolika reali skond il-volum tax-xorb spirituż.
2. Il-prinċipju
L-ispirti jiġu ddistillati għalbiex jiġu mifruda l-etil alkol u komponenti oħra volatili mill-materjal estrattiv (is-sustanzi li ma jiddistillawx).
3. Ir-Reaġenti u l-Materjali
3.1. Il-granuli ta’ kontra l-ħbit ma’ xulxin.
3.2. L-emulsjoni kkonċentrata ta’ kontra r-ragħwa (għall-likuri krema).
4. L-apparat u t-tagħmir
L-apparat normali tal-laboratorju u b’mod partikolari dan li ġej:
Banju ta’ l-ilma li kapaċi jinżamm bejn il-10°Ċ u l-15-il °Ċ.
Banju ta’ l-ilma li kapaċi jinżamm f’temperatura ta’ 20°Ċ (+/-0,2°Ċ).
Fjasketti volumetriċi tal-Klassi A, ta’ 100 ml u 200 ml, li jkun ġew iċċertifikati għal 0,1 % u 0,15 % rispettivament.
L-apparat tad-distillazzjoni:
Il-ħtiġijiet ġenerali
L-apparat tad-distillazzjoni jrid jissodisfa l-ispeċifikazzjonijiet li ġejjin:
li tinvolvi l-materjal estrattiv.
Eżempju ta’ apparat addattat tad-distillazzjoni huwa muri fil-Figura1u jinkludi l-partijiet li ġejjin:
Nota:
L-apparat deskritt hawn fuq huwa maħsub għal kampjun ta’ mill-inqas 200 ml. Madankollu, kampjun iżgħar (ta’ 100 ml) jista’ jiġi distillat bl-użu ta’ fjaskett iżgħar tad-distillazzjoni, sakemm jintużaw ras għal kontra t-titjir ta’ l-ilma jew mekkaniżmu ieħor li jipprevjieni t-tkaxkir ta’ l-ilma.
5. Il-ħażna tal-kampjuni tat-test
Il-kampjuni għandhom jinħażnu f’temperatura tal-kamra qabel l-analiżi.
6. Il-proċedura
Kumment preliminari:
6.1. |
Il-verifika ta’ l-apparat tad-distillazzjoni: L-apparat użat għandu jkun kapaċi għal dan li ġej: Id-distillazzjoni ta’ 200 ml ta’ taħlita ta’ ilma ma’ l-alkol b’konċentrazzjoni magħrufa qrib il-50 % vol ma tridx tikkawża telf ta’ alkohol ta’ aktar minn 0,1 % vol.
|
6.2. |
Ix-xorb spirituż b’qawwa alkolika taħt l-50 % vol. Kejjel 200 ml ta’ l-ispirtu fil-fjaskett volumentriku. Irreġistra t-temperatura ta’ dan il-likwidu, jew żommha f’temperatura standard (20°Ċ). Ferragħ il-kampjun fil-fjaskett tal-qiegħ ittundjat ta’ l-apparat tad-distillazzjoni u laħlaħ il-fjaskett volumetriku bi tliet alikwoti b’kull waħda ta’ madwar 20 ml ta’ ilma distillat. Żid kull alikwota ta’ l-ilma tat-tlaħliħ mal-kontenut tal-fjaskett tad-distillazzjoni. Nota: Din id-dilwita ta’ 60 ml hija bizzejjed għall-ispirti li jkun fihom anqas minn 250 g ta’ estratt niexef għal kull litru. Inkella, sabiex tipprevjieni l-pirolisi, il-volum ta’ l-ilma tat-tlaħliħ irid ikun mill-anqas 70 ml jekk il-konċentrazzjoni ta’ l-estratt niexef tkun 300 g/l, 85 ml għal kull 400 g/l ta’ l-estratt niexef, u 100 ml għal kull 500 g/l ta’ l-estratt niexef (uħud mil-likuri jew mill-kremi tal-frott). Aġġusta dawn il-volumi proporzjonalment għall-volumi tal-kampjuni differenti. Żid ftit granuli ta’ kontra l-ħbit ma’ xulxin (3.1) (u ta’ kontra r-ragħwa għall-likuri tal-krema). Ferragħ 20 ml ta’ ilma distillat fil-fjaskett volumetriku ta’ 200 ml li jrid jiġi wżat biex iżomm id-distillat. Dan il-fjaskett irid mbagħad jitqieghed f’banju ta’ l-ilma kiesaħ (4.1) (minn 10 sa 15-il °Ċ għax-xorb spirituż bit-togħma ta’ l-aniżetta). Iddistilla, filwaqt li tevita t-tkaxkir u l-ħruq faħam, billi kultant tħawwad il-kontenut tal-fjaskett, sakemm il-livell tad-distillat ikun ftit millimetri taħt il-marka tal-kalibrazzjoni tal-fjaskett volumetriku. Meta t-temperatura tad-distillat tkun tnizzlet sa qrib iż-0,5°Ċ tat-temperatura oriġinali tal-likwidu, żid sal-marka bl-ilma ddistillat u ħallat sew. Dan id-distillat jintuża sabiex tiġi stabbilita l-qawwa alkolika skond il-volum (Appendiċi II) |
6.3. |
Ix-xorb spirituż b’qawwa alkolika ta’ iktar minn 50 % vol. Kejjel 100 ml mix-xorb spirituż fi fjaskett volumetriku ta’ 100 ml u ferragħ fil-fjaskett tal-qiegħ ittundjat ta’ l-apparat tad-distillazzjoni. Laħlaħ il-fjaskett volumetriku numru ta’ drabi bl-ilma ddistillat u żid it-tlaħliħ mal-kontenut tal-fjaskett tad-distillazzjoni bil-qiegħ ittundjat. Uża bizzejjed ilma sabiex iżżid il-kontenut tal-fjaskett sa madwar 230 ml. Ferragħ 20 ml ta’ l-ilma ddistillat fil-fjaskett volumetriku ta’ 200 ml li jrid jiġi wżat għalbiex iżomm id-distillat. Dan il-fjaskett irid imbagħad jitqieghed fil-banju ta’ l-ilma kiesaħ (4.1) (minn 10 sa 15-il °Ċ għax-xorb spirituż bit-togħma ta’ l-anisetta). Iddistilla, billi kultant tħawwad il-kontenut, sakemm il-livell tad-distillat ikun ftit millimetri taħt il-marka tal-kalibrazzjoni tal-fjaskett volumetriku ta’ 200-ml. Meta t-temperatura ta’ dan id-distillat tkun tnizzlet sa qrib iż-0,5°Ċ tat-temperatura oriġinali tal-likwidu, żid sal-marka bl-ilma ddistillat u ħallat sewwa. Dan id-distillat jintuża sabiex tiġi stabbilita l-qawwa alkolika skond il-volum (Appendiċi II) Nota: Il-qawwa alkolika skond il-volum tax-xorb spirituż hija d-doppju tal-qawwa alkolika tad-distillat. |
APPENDICI II: IL-KEJL TAD-DENSITÀ TAD-DISTILLAT
IL-METODU A: KIF TIĠI STABBILITA L-QAWWA ALKOLIKA REALI SKOND IL-VOLUM TAX-XORB SPIRITUŻ - IMKEJJEL BIL-PIKNOMETRIJA
A.1. Il-prinċipju
Il-qawwa alkolika skond il-volum tinkiseb mid-densità tad-distillat imkejla bil-piknometrija.
A.2. Ir-Reaġenti u l-Materjali
Matul l-analiżi, għajr jekk iddikjarat xorta oħra, uża biss reaġenti ta’ grad analitiku konoxxut u ilma ta’ mill-inqas il-grad 3 kif iddefinit fl-3696:1987.
A.2.1. |
Is-soluzzjoni tal-klorur tas-sodju (2 % w/v) Sabiex tħejji litru 1, iżen 20 g tal-klorur tas-sodju u dewweb sa litru 1 bl-użu ta’ l-ilma. |
A.3. L-apparat u t-tagħmir
L-apparat tas-soltu tal-laboratorju u b’mod partikolari dan li ġej.
Miżien analitiku li kapaċi jaqra sa 0,1 mg.
Termometru, b’ġonta tal-ħġieġ immattjat, ikkalibrat f’parti minn kull 10 ta’ grad minn 10 sa 30 °Ċ. Dan it-termometru għandu jkun iċċertifikat u vverifikat ma’ termometru ċertifikat.
Piknometru tal-ħġieġ tal-Pyrex tal-kapaċità ta’ 100 ml volum iffittjat b’termometru ta’ ħġieġ immattjat li jista’ jinqala (A.3.2). Il-piknometru għandu tubu fil-ġenb ta’ 25 mm tul u 1 mm (massimu) fid-dijametru intern li jintemm b’ġonta konikali mmattjata. Jistgħu jintużaw piknometri oħra kif deskritti fl-3507, p.e. ta’ 50 ml jekk xieraq.
Fjaskett tat-tara ta’ l-istess volum estern (sa qrib 1 ml) bħall-piknometru u b’massa daqs il-massa tal-piknometru mimli b’likwidu ta’ densità 1,01 (is-soluzzjoni tal-klorur tas-sodju A.2.1).
Ġakketta iżolata termalment li tiffittja eżatt il-korp tal-piknometru.
Nota 1:
Il-metodu sabiex jiġu stabbiliri d-densitajiet in vacuo ta’ l-ispirti jitlob għall-użu ta’ miżien b’żewġ kefef, piknometru u fjaskett tat-tara ta’ l-istess volum estern fuq barra sabiex jikkanċella l-effett ta’ tal-galleġġjament ta’ l-arja f’kull mument. Dan il-metodu sempliċi jista’ jiġi applikat bl-użu ta’ miżien b’keffa waħda sakemm il-fjaskett tat-tara jerġa’ jintiżen sabiex jiġu mmonitorjati l-bidliet fil-galleġġjament ta’ l-arja matul il-ħin.
A.4. Il-proċedura
Kummenti preliminari:
A.4.1. Il-kalibrazzjoni tal-piknometru
Il-piknometru jiġi kkalibrat billi jiġu stabbiliti l-parametri li ġejjin:
A.4.1.1. |
Il-kalibrazzjoni bl-użu ta’ miżien ta’ keffa waħda: Istabbilixxi:
—
il-massa tal-piknomentru nadif u niexef (P),
—
il-massa tal-piknometru mimli bl-ilma f’temperatura ta’ t °Ċ (P1),
—
il-massa tal-fjaskett tat-tara (T0).
|
A.4.1.2. |
Il-metodu tal-kalibrazzjoni bl-użu ta’ miżien ta’ żewġ keffef
A.4.1.2.1.
Qiegħed il-fjaskett tat-tara fil-keffa tax-xellug u l-piknometru nadif u niexef bit-tapp tiegħu tal-ġbir fil-keffa tal-lemin. Ibbilanċjhom billi tqiegħed piżijiet fuq in-naħa tal-piknometru: ta’ p grammi.
A.4.1.2.2.
Imla l-piknometru b’attenzjoni bl-ilma distillat f’temperatura ambjentali u ffittja t-termometru; ixxotta sewwa l-piknometru u qiegħdu fil-ġakketta iżolata termalment; ħawwad billi taqleb rasu ‘l isfel il-kontenitur sakemm il-qari tat-temperatura tat-termometru jkun kostanti. Aġġusta bil-preċiż il-piknometru livell max-xifer ta’ fuq tat-tubu tal-ġenb. Naddaf it-tubu tal-ġenb, iffittja t-tapp tal-ġbir; aqra t-temperatura t °Ċ b’attenzjoni u meta meħtieġ ikkorreġi għalkull ineżattezza fl-iskala tat-temperatura. Iżen il-piknometru mimli bl-ilma, bil-p’ ikun il-piż fi grammi li jwassal għall-ekwilibriju.
A.4.1.2.3.
Il-kalkolu
—
It-tara tal-piknometru battal = p + m
fejn il-m hija l-massa ta’ l-arja fil-piknometru.
il-m- = 0,0012 x (p- p’)
—
Il-volum tal-piknometru f’temperatura ta’ 20 °Ċ:
fejn il-Ft hija l-fattur għat-temperatura t °Ċ meħuda mit-Tabella I tal-Kapitolu 1 “Id-Densità u l-Gravità speċifika” ta’ l-Anness mar-Regolament (KEE) Nru 2676/90 (p. 10).
Il-V20 °Ċ trid tkun magħrufa sa l-eqreb 0,001 ml.
—
Il-massa ta’ l-ilma fil-piknometru f’temperatura ta’ 20°Ċ:
fejn iż-0,998203 hija d-densità ta’ l-ilma f’temperatura ta’ 20°Ċ.
|
A.4.2. Kif tiġi stabbilita l-qawwa alkolika tal-kampjun tat-test
A.4.2.1. Bl-użu ta’ miżien ta’ keffa waħha:
A.4.2.1.1. Iżen il-fjaskett tat-tara, piż T1.
Iżen il-piknometru bid-distillat imħejji (ara l-Appendiċi I), il-P2 huwa l-piż tiegħu f’temperatura t °Ċ.
Il-Kalkolu
Nota 4:
Alternattivament żomm il-piknometru fil-banju ta’ l-ilma miżmum f’temperatura ta’ 20°Ċ (+/- 0,2°Ċ) meta timla sal-marka.
Ir-riżultat
Billi tuża d-densità ñ20 ikkalkola l-qawwa alkolika reali bl-użu tat-tabelli tal-qawwa alkolika identifikati hawn taħt:
It-tabella li tagħti l-valur tal-qawwa alkolika skond il-volum ( % vol) f’temperatura ta’ 20 °Ċ bħala funzjoni tad-densità f’temperatura ta’ 20 °Ċ tat-taħlitiet ta’ l-ilma ma’ l-alkol hija t-tabella internazzjonali adottata mill-Organizzazzjoni Internazzjonali tal-Metrologija Legali fir-Rakkommandazzjoni tagħha Nru 22.
Il-metodu bl-użu ta’ miżien ta’ keffa waħha:
Iżen il-piknometru bid-distillat imħejji (Ara t-Ttaqsima I), il-p” hija l-massa f“temperatura ta’ t °Ċ.
Il-Kalkolu
A.5. Il-karatteristiċi tal-metodu tat-twettiq tax-xogħol (il-preċiżjoni)
A.5.1. Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju
L-informazzjoni li ġejja ġiet miksuba minn studju tat-twettiq tax-xogħol ta’ metodu internazzjonali imwettaq skond roċeduri miftiehma internazzjonalment ġ1ħ ġ2ħ.
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
20 |
In-Numru tal-kampjuni |
6 |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
F |
In-Numru tal-laboratorjimiżmuma waral-eliminazzjoni ta' dawkli qegħdin 'il barra |
19 |
20 |
17 |
19 |
19 |
17 |
In-Numru ta' dawk li kienu'il barra (laboratorji) |
1 |
- |
2 |
1 |
1 |
3 |
In-Numru tar-riżultatiaċċettati |
38 |
40 |
34 |
38 |
38 |
34 |
Il-Valur medju
% vol |
23,77 |
40,04 |
40,29 |
39,20 |
42,24 |
57,03 |
26,51(*) |
|
|
42,93(*) |
45.73(*) |
63,03(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija(r) % vol |
0,106 |
0,176 |
0,72 |
0,103 |
0,171 |
0,190 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċità tat-tennija (r) (%) |
0,42 |
0,44 |
0,18 |
0,25 |
0,39 |
0,32 |
Il-Limitu tal-kapaċita tat-tennija () f'% vol |
0,30 |
0,49 |
0,20 |
0,29 |
0,48 |
0,53 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) % vol |
0,132 |
0,236 |
0,154 |
0,233 |
0,238 |
0,322 |
Id-Devjazzjoni relattiva tar-riproduċibbiltà(g) (%) |
0,52 |
0,59 |
0,38 |
0,57 |
0,54 |
0,53 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà() f'% vol |
0,37 |
0,66 |
0,43 |
0,65 |
0,67 |
0,90 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Likuri tal-Frott: livell maqsum (*) B, Il-Brandy: duplikati għomja Ċ. Il-Whisky: duplikati għomja D. Il-Grappa: livell maqsum (*) E. L-Aquavit: livell maqsum (*) F. Ir-Rum: livell maqsum (*) |
IL-METODU B: KIF TIĠI STABBILITA L-QAWWA ALKOLIKA REALI SKOND IL-VOLUM TAX-XORB SPIRITUŻ IMKEJJEL BID-DENSIMETRIJA ELETTRONIKA (IBBAŻATA FUQ L-OXXILLAZZJONI TA' FREKWENZA REŻONANTI TA' KAMPJUN F'CELLOLA TA' L-OXXILLAZZJONI)
B.1. Il-prinċipju
Id-densità tal-likwidu tiġi stabbilita bil-kejl elettroniku ta’ l-oxxillazzjonijiet ta’ tubu-U li jivvibra. Sabiex jitwettaq dan il-kejl, il-kampjun jiġi miżjud ma’ sistema li toxxilla, li l-frekwenza speċifika ta’ oxxillazzjoni tagħha tiġi hekk immodifikata bil-massa miżjuda.
B.2. Ir-Reaġenti u l-Materjali
Matul l-analiżi, għajr jekk iddikjarat xorta oħra, uża biss ir- reaġenti ta’ grad analitiku kkonoxxut u ilma ta’ mill-inqas il-grad ta’ 3 kif iddefinit fl-ISO 3696:1987.
L-Aċetone ►C2 (CAS 666-52-4) ◄ t jew l-alkol assolut
Arja niexfa.
B.3 L-apparat u t-tagħmir
L-apparat tas-soltu tal-laboratorju u b’mod partikolari dan li ġej:
Densimetru b’wirja diġitali
Densimetru elettroniku biex jitwettqu dawn il-miżuri irid ikun kapaċi jesprimi d-densità fi g/ml sa 5 ħames postijiet deċimali.
Nota 1:
Id-densimetru għandu jitqiegħed fuq stand perfettament stabbli li jkun iżolat mill-vibrazzjonijiet kollha.
Ir-regolazzjoni tat-temperatura
It-twettiq tax-xogħol tad-densimetru huwa validu biss jekk iċ-ċellola tal-kejl tiġi mgħaqqda ma’ regolatur tat-temperatura mibni minn ġewwa li jista’ jikseb l-istess stabbilita tat-temperatura ta’ +/- 0,02 °Ċ jew aħjar.
Nota 2:
Is-settjar preċiż u l-monitoraġġ tat-temperatura fiċ-ċellola tal-kejl huma importanti ħafna, għaliex żball ta’ 0,1°Ċ jista’ jwassal għalvarjazzjoni fid-densità fl-ordni ta’ 0,1 kg/m3.
Is-siringi ta’ l-njezzjoni tal-kampjun jew l-apparat tat-teħid tal-kampjuni minnu nnifsu.
B.4. Il-proċedura
Il-kalibrazzjoni tad-densimetru
L-apparat irid jiġi kalibrat skond l-istruzzjonijiet tal-fabbrikant ta’ l-istrument meta jintuża għall-ewwel darba. Irid jiġi kalibrat mill-gdid regolarment u vverifikat ma’ standard tar-riferiment attestat jew soluzzjoni interna tar-riferiment ta’ laboratorju msejsa fuq standard tar-riferiment attestat.
Kif tiġi stabbilita d-densita tal-kampjun
Jekk meħtieġ qabel il-kejl, naddaf u nixxef iċ-ċellola bl-aċetone jew bl-alkol assolut u l-arja niexfa. Laħlaħ iċ-ċellola bil-kampjun.
Injetta l-kampjun fiċ-ċellola (bl-użu ta’ siringa jew l-istrument li jieħu l-kampjuni minnu nnifsu) hekk illi ċ-ċella timtela kollha. Matul l-operazzjoni tal-mili, kun ċert illi l-bżieżaq kollha tal-arja jiġu eliminati kompletament. Il-kampjun irid ikun omoġenju u ma jrid ikun fih l-ebda partikola solida. Kull materjal sospiż għandu jitneħħa b’filtrazzjoni qabel l-analiżi.
Malli l-qari jkun ġie stabbilizzat, irreġistra d-densità ñ20 jew il-qawwa alkolika murija mid-densimetru.
Ir-riżultat
Meta tintuża d-densità ñ20, ikkalkola s-saħħa reali alkolika bl-użu tat-tabelli tal-qawwa alkolika indikati hawn taħt:
It-tabella li tagħti l-valur tal-qawwa alkolika skond il-volum ( % vol) f’temperatura ta’ 20 °Ċ bħala funzjoni tad-densità f’temperatura ta’ 20 °Ċ tat-taħlita ta’ l-ilma u l-alkol hija t-tabella internazzjonali adottata mill-Organizżzazzjoni Internazzjonali tal-Metrologija Legali fir-Rakkomandazzjoni tagħha Nru 22.
B.5. Il-karatteristiċi tal-metodu tat-twettiq tax-xogħol (il-preċiżjoni)
B.5.1. |
Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju L-informazzjoni li ġejja ġiet miksuba minn studju dwar it-twettiq tax-xogħol ta’ metodu internazzjonali imwettaq skond il-proċeduri ġ1ħ ġ2 ħmiftiehma internazzjonalment.
|
IL-METODU Ċ: KIF TIĠI STABBILITA L-QAWWA ALKOLIKA REALI SKOND IL-VOLUM TAX-XORB SPIRITUÆ - IL-KEJL BID-DENSIMETRU LI JUÆA L-MIÆIEN IDROSTATIKU
Ċ.1 Il-prinċipju
Il-qawwa alkolika ta’ l-ispirti tista’ titkejjel bid-densimetrija bl-użu ta’ miżien idrostatiku msejjes fuq il-prinċipju ta’ Arkimede fejn meta oġġetti jitgħaddas f’likwidu jirċievi tefgħa ‘l fuq mill-likwidu egwali għall-piż tal-likwidu li jkun intħad postu.
Ċ.2. Ir-Reaġenti u l-Materjali
Matul l-analiżi, sakemm għajr fejn iddikjarat xorta oħra, uża biss ir-reaġenti ta’ grad analitiku kkonoxxut u l-ilma ta’ mill-inqas il-grad ta’ 3 kif iddefinit fl-ISO 3696:1987.
Ċ.2.1. Is-soluzzjoni tat-tindif tal-galleġġjan (l-idrossidu tas-sodju, 30 % w/v)
Sabiex tħejji 100 ml, iżen 30 g ta’ l-idrossidu tas-sodju u żid sal-volum bl-użu ta’ 96 % ta’ l-etanol skond il-volum.
Ċ.3. L-apparat u t-tagħmir
Apparat tas-soltu tal-laboratorju u b’mod partikolari dan li ġej:
Il-miżien idrostatiku ta’ keffa waħda b’sensività ta’ 1 mg.
Galleġġjant b’volum ta’ mill-inqas 20 ml, addattat b’mod speċjali għall-miżien, sospiż b’ħajta ta’ dijametru li ma jaqbiżx iż-0,1 mm.
Cilindru tal-kejl li jkollu marka tal-livell. Il-galleġġjant irid ikun kapaċi li jiġi kontenut kollu kemm hu fil-volum taċ-ċilindru lokat ‘l isfel mill-marka; il-wiċċ tal-likwidu jista’ jiġi minfud biss bil-ħajta tas-sostenn. Iċ-ċilindru tal-kejl irid ikollu dijametru intern ta’ mill-inqas 6 mm akbar minn dak tal-galleġġjant.
Termometru (jew sonda li tkejjel it-temperatura) ggradati fi gradi u għexur ta’ grad minn 10 sa 40°Ċ, ikkalibrati għal sa 0,05°Ċ.
Piżijiet, ikkalibrati minn korp ikkonoxxut taċ-ċertifikazzjoni.
Nota 1:
L-użu ta’ miżien b’żewġ keffef huwa possibbli wkoll; il-prinċipju huwa deskritt fil-Kapitolu 1 “Id-Densit u l-gravità speċifika” ta’ l-Anness mar-Regolament (KEE) Nru 2676/90 (p. 7).
Ċ.4. Il-Proċedura
Il-galleġġjant u ċ-ċilindru tal-kejl iridu jiġu mnaddfa bejn kull kejl bl-ilma distillat, imnixxef b’karta ratba tal-laboratorju li ma xxerridx fibri u mlaħalħa bis-soluzzjoni li d-densità tagħha trid tiġi stabbilita. Il-kejlijiet iridu jsiru malli l-apparat ikun laħaq l-istabbiltà sabiex jiġi ristrett it-telf tal-alkol bl-evaportazzjoni.
Il-kalibrazzjoni tal-miżien
Għalkemm l-imwieżen is-soltu jkolljom sistema ta’ kalibrazzjoni interna, il-miżien idrostatiku jrid ikun kapaċi li jikkalibra b’piżijiet iċċekkjati minn korp uffiċjali taċ-ċertifikazzjoni.
Il-kalibrazzjoni tal-galleġġjant
Imla ċ-ċilindru tal-kejl sal-marka bl-ilma ddistillat doppjament (jew b’ilma ta’ safa ekwivalenti, p.e. ilma mmikroffiltrat b’konduttività ta’ 18,2 MÙ/ċm) f’temperatura ta’ bejn il-15 u l-25 °Ċ iżda preferibilment f’temperatura ta’ 20 °Ċ.
Għaddas il-galleġġjant u t-termometru, ħawwad, aqra d-densità tal-likwidu mill-apparat u, jekk meħtieġ, ikkorreġi l-qari sabiex ikun egwali għal dak ta’ l-ilma fit-temperatura tal-kejl.
Il-kontroll bl-użu ta’ taħlita ta’ ilma u alkol
Imla ċ-ċilindru tal-kejl sal-marka b’taħlita ta’ ilma u alkol ta’ qawwa magħrufa f’temperatura ta’ bejn il-15 u l-25°Ċ iżda preferibilment f’temperatura ta’ 20°Ċ.
Għaddas il-galleġġjant u t-termometru, ħawwad, aqra d-densità tal-likwidu (jew il-qawwa alkolika jekk dan ikun possibbli) mill-apparat. Il-qawwa alkolika hekk stabbilita għandha tkun egwali għall-qawwa alkoholika stabbilita qabel.
Nota 2:
Din is-soluzzjoni ta’ qawwa alkolika magħrufa tista’ tintuża wkoll sabiex jiġi kkalibrat il-galleġġjant minflok l-ilma distillat doppjament.
Il-kejl tad-densità ta’ distillat (jew tal-qawwa alkolika tiegħu jekk l-apparat jippermetti)
Ferragħ il-kampjun tat-test fiċ-ċilindru tal-kejl sal-marka tal-gradazzjoni.
Għaddas il-alleġġjant u t-termometru, ħawwad, aqra d-densità tal-likwidu (jew il-qawwa alkolika jekk dan ikun possibbli) mill-apparat. Innota d-densità jekk it-temperatura tiġi mkejla f’temperatura ta’ t °Ċ (ñt).
Ikkoreġi l-ñt sa l-20 bl-użu tat-tabella tad-densitajiet ñT għat-taħlitiet ta’ l-ilma u l-alkol (it-Tabella II ta’ l-Anness II fil-Manwal tal-metodi ta’ l-analiżi ta’ l-OIV (1994), pp. 17-29).
It-tindif tal-galleġġjant u ċ-ċilindru tal-kejl
Għaddas il-galleġġjant fis-soluzzjoni tat-tindif tal-galleġġjant fiċ-ċilindru tal-kejl.
Hallih jixxarrab għal siegħa waqt li ddawwar il-galleġġjant kultant.
Laħlaħ b’ammonti abbundanti ta’ l-ilma tal-vit segwit bl-ilma ddistillat.
Nixxef b’karta tal-laborarorju ratba li ma xxerridx fibri.
Wettaq din il-proċedura meta l-galleġġjant l-ewwel jintuża u wara jintuża regolarment kif meħtieġ.
Ir-riżultat
Bl-użu tad-densità ñ20 ikkalkola l-qawwa alkolika reali bl-użu tat-tabelli tal-qawwa alkolika indentifikati hawn taħt.
It-tabella li tagħti l-valur tal-qawwa alkolika skond il-volum ( % vol) f’temperatura ta’ 20°Ċ bħala funzjoni tad-densità f’temperatura ta’ 20°Ċ tat-taħlitiet ta’ l-ilma u l-alkol hija t-tabella internazzjonali addottata mill-Organizżzazzjoni Internazzjonali tal-Metrologija Legali fir-Rakkomandazzjoni tagħha Nru 22.
Ċ.5. Il-karatteristiċi tat-twettiq tax-xogħol tal-metodu (il-preċiżjoni)
Ċ.5.1. Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju
L-informazzjoni li ġejja inkisbet minn studju dwar it-twettiq tax-xogħol ta’ metodu internazzjonali imwettaq skond il-proċeduri ġ1ħ ġ2ħ miftiehma internazzjonalment.
tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-numru tal-laboratorji |
12 |
In-numru tal-kampjuni |
6 |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
F |
In-Numru tal-laboratorjimiżmuma wara l-eliminazzjonita' dawk li qegħfin 'il barra |
12 |
10 |
11 |
12 |
11 |
9 |
In-Numru ta' dawn li kienu'il barra (laboratorji) |
- |
2 |
1 |
- |
1 |
2 |
In-Numru ta' riżultati aċċettati |
24 |
20 |
22 |
24 |
22 |
18 |
Il-Valur medju
% vol |
23,00 |
40,09 |
40,29 |
39,26 |
42,38 |
57.16 |
26,31(*) |
|
|
43.09(*) |
45,89(*) |
63,44(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-Tennija(Sr) % vol |
0,048 |
0,065 |
0,042 |
0 099 |
0,094 |
0,016 |
Id-Devjazzjoni standardrelattitiva tal-kapaċità(r) (%) |
0,19 |
0,16 |
0,10 |
0,24 |
0,21 |
0,18 |
Il-Limitu ta' l-abbiltàtat-tennija () g/l |
0,13 |
0,18 |
0,12 |
0,28 |
0,26 |
0,30 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) % vol |
0,060 |
0,070, |
073 |
0,118 |
0,103 |
0,125 |
Id-Devjazzjoni relattiva tar-riproduċibbiltà (g) (%) |
0,24 |
0,19 |
0,18 |
0,29 |
0,23 |
0,21 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà () % vol |
0,17 |
0,21 |
0,20 |
0,33 |
0,29 |
0,35 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Likur tal-frott: livell maqsum (*). B. Il-Brandy: duplikati għomja. Ċ. Il-Whiskey: duplikati għomja. D. Il-Grappa: livell maqsum (*). E. L-Aquavit: livell maqsum (*). F. Ir-Rum: livell maqsum (*). |
Is-sena
1.Il-fjaskett ta’ litru 1 bil-qiegħ ittundjat b’ġonta ta’ ħġieġ immattjat standardizzat,
2.Il-kolonna ta’ rettifikazzjoni Vigreux ta’ 20 ċm.
3.Il-kondensatur West bix-xifer dritt ta’ 10-ċm.
4.Il-kojlatura tat-tkessiħ ta’ 40 ċm tul,
II. KIF JIĠI STABBILIT L-ESTRATT TOTALI NIEXEF TAX-XORB SPIRITUŻ BIL-GRAVIMETRIJA
1. L-iskop
Ir-Regolament (KEE) Nru 1576/89 jipprovdi dan il-metodi biss għall-aquavit li l-estratt niexef tiegħu huwa limitat għal 15-il g/l.
2. Ir-Referenzi Normattivi
L-ISO 3696:1987: L-ilma għall-użu fil-laboratorju analitiku - L-ispeċifikazzjonijiet u l-metodi tat-testijiet.
3. Id-definizzjoni
L-estratt totali niexef jew il-materjal totali niexef jinkludu l-materjal kollu li mhux volatili taħt kondizzjonijiet fiżiċi speċifikati.
4. Il-prinċipju
L-użin tal-fdal imħolli mill-evaporazzjoni ta’ l-ispritu fuq banju ta’ l-ilma jagħli u mnixxef f’forn tat-tnixxif.
5. L-Apparat u t-Tagħmir
5.1. |
Dixx ċilindriku ta’ l-evaporazzjoni bil-qiegħ ċatt ta’ 55 mm fid-dijametru. |
5.2. |
Banju ta’ l-ilma jagħli. |
5.3. |
Pipetta ta’ 25 ml, tal-klassi A. |
5.4. |
Forn tat-tnixxif. |
5.5. |
Desikkatur. |
5.6 |
Miżien analitiku preċiż sa 0,1 mg. |
6. It-teħid tal-kampjuni u l-kampjuni
Il-kampjuni jinħażnu f’temperatura tal-kamra qabel l-analiżi.
7. Il-proċedura
7.1. |
Pipetta ta’ 25 ml ta’ l-ispirtu li jkun fiha inqas minn 15-il g/l ta’ materjal niexef f’dixx ċilindriku ta’ l-evaporazzjoni bil-qiegħ ċatt ta’ dijametru ta’ 55 mm li jkun intiżen minn qabel. Matul l-ewwel siegħa ta’ l-evaporazzjoni d-dixx ta’ l-evaporazzjoni jitqiegħed fuq il-għatu ta’ banju ta’ l-ilma jagħli biex il-likwidu ma jagħlix, billi dan jista’ jwassal għat-telf bit-titjir. Halli għal siegħa oħra f’kuntatt dirett mal-fwar tal-banju ta’ l-ilma jagħli. |
7.2. |
Ikkompleta t-tnixxif billi tqiegħed id-dixx ta’ l-evaporazzjoni f’forn tat-tnixxif f’temperatura ta’ 105°Ċ +/- 3°Ċ għal sagħtejn. Halli d-dixx ta’ l-evaporazzjoni jiksaħ f’desikkatur u iżen id-dixx ta’ l-evaporazzjoni bil-kontenut tiegħu. |
8. Il-kalkolu
Il-massa tal-fdal immoltoplikata b’40 hija egwali għall-estratt niexef li jkun jinsab fl-ispirtu u jrid jiġi espress f’g/l sa post wieħed deċimali.
9. Il-karatteristiċi tat-twettiq tax-xogħol tal-metodu (il-preċiżjoni)
9.1. Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju
L-informazzjoni li ġejja ġiet miksuba minn studju ta’metodu internazzjonali tat-twettiq tax-xogħol imwettaq skond il-proċeduri miftiehma internazzjonalment ġ1ħ ġ2ħ.Is-Sena tat-test
interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboatorji |
10 |
In-Numru tal-kampjuni |
4 |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
In-Numru tal-laboratorjimiżmuma wara l-elimin azzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
9 |
9 |
9 |
9 |
In-Numru ta' dawk li jkunu'il barra |
1 |
1 |
2 |
- |
In-Numru tar-riżultatiaċċettati |
18 |
18 |
16 |
18 |
Il-Valur medju
g/l |
9,0 |
9,1 |
10,0 |
11,8 |
|
7,8 |
9,4 |
11,1 |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija(r) g/l |
0,075 |
0,441 |
0,028 |
0,123 |
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija(r) (%) |
0,8 |
5,2 |
0,3 |
1,1 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija () g/l |
0,2 |
1,2 |
0,1 |
0,3 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (p) |
0,148 |
0,451 |
0,039 |
0,200 |
Id-Devjazzjoni relattiva tar-riproduċibbiltà (g) (%) |
1,6 |
5,3 |
0,6 |
1,8 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà () g/l |
0,4 |
1,3 |
0,2 |
0,6 |
It-tipi tal-kampjuni: A. Il-: duplikati għomja B. Ir-Rum: livelli maqsuma C. Il-Grappa: livelli maqsuma D. L-: livelli maqsuma |
III. KIF JIĠU STABBILITI S-SUSTANZI VOLATILI U L-METANOL FIX-XORB SPIRITUŻ
III.1. KUMMENTI ĠENERALI
1. Id-definizzjoni
It-tifsirietIr-Regolament (KEE) Nru 1576/89 jiffissa l-limiti minimi tal-komposti volatili għajr għall-etanol u l-metanol għal serje ta’xorb spirituż (ir-rum, l-ispirti ta’ oriġini vitikulturali, l-ispirti tal-frott, eċċ.). Għal din is-serje ta’ xorb biss, dawn il-livelli huma kkunsidrati b’mod konvenzjonali li huma ekwivalenti għas-somma tal-konċentrati ta’:
l-aċidi volatili espressi f’aċidu aċetiku;
l-aldeidi espressi bħala etanal bis-somma ta’ l-etanal (l-aċetaldeid) u l-frazzjoni ta’ l-etanal li tkun fil-1,1-dietossietan (l-aċetal);
il-propan-1-ol, il-butan-1-ol, il-butan-2-ol, it-2-metilpropan-1-ol, assaġġjatt minn alkol individwali u t-2-metilbutan-1-ol, u t-3-metilbutan-1-ol assaġġjati bħala alkol individwali jew is-somma tat-tnejn;
l-etil aċetat.
Dawn li ġejjin huma miżuri konvenzjonali għall-kejl tal-komposti volatili:
2. L-analiżi tal-kromatografija bil-gass tal-komposti volatili
L-assaġġi kromatografiċi bil-gass tal-komposti volatili għajr għal dawk iddikjarati hawn fuq jistgħu jkunu partikolarment interessanti bħala mezz sabiex jiġu stabbiliti kemm l-oriġini tal-materja prima wżata fid-distillazzjoni u l-kondizzjonijiet attwali tad-distillazzjoni.
Uħud mill-ispirti jkun fihom komponenti volatili oħra, bħalma huma l-komposti aromatiċi, li huma karatteristiċi tal-materja prima wzata għalbiex jinkisbu l-alkol, l-aroma tax-xorb spirituż u l-fatturi speċjali għat-tħejjija ta’ l-ispirtu. Dawn il-komposti huma importanti għall-valutazzjoni tal-ħtiġiet iddikjarati fir-Regolament (KEE) Nru 1576/89.
III.2. KIF JIĠU STABBILITI L-KONĠENERI VOLATILI BIL-KROMATOGRAFIJA BIL-GASS: L-ALDEIDI, L-ALKOLI OG}LA, L-ETIL AĊETAT U L-METANOL
1. L-iskop
Dan il-metodu huwa addattat għall-użu sabiex jiġi stabbiliti l-1,1-dietossietan (aċetal), it-2-metilbutan-1-ol (l-alkol amil attiv), it-3-metilbutan-1-ol (l-alkol isoamil), il-metanol (il-metil alkol), l-etil etanoate(l-etil aċetat), il-butan-1-ol (l-n-butanol), il-butan-2-ol (is-sek-butanol), it-2-metilpropan-1-ol (l-alkol isobutil), il-propan-1-ol (l-n-propanol) u l-etanal (l-aċetaldeid) fix-xorb spirituż li juża l-kromatografija bil-gass. Il-metodu juża standard intern, per eżempju l-pentan-3-ol. Il-konċentrazzjonijiet ta’ l-analiti huma espressi fi grammi għal kull 100 litru ta’ alkol assolut; il-qawwa alkolika tal-prodott trid tiġi stabbilita qabel l-analiżi. Ix-xorb spirituż li jista’ jiġi analizzat bl-użu ta’ dan il-metodu jinkludi l-whisky, il-brandy, ir-rum, l-ispirtu ta’ l-inbid, l-ispirtu tal-frott jew l-ispirtu tal-għeneb marc.
2. Ir-Referenzi Normattivi
L-ISO 3696:1987: L-ilma għall-użu analitiku fil-laboratorju - L-ispeċifikazzjonijiet u l-metodi tat-testijiet.
3. Id-definizzjoni
Il-konġeneri huma sustanzi volatili ffurmati flimkien ma’ l-etanol waqt il-fermentazzjoni, id-distillazzjoni u l-maturazzjoni tax-xorb spirituż.
4. Il-prinċipju
Il-konġeneri fix-xorb spirituż jiġu stabbiliti bl-injezzjoni diretta tax-xorb spirituż, jew tax-xorb spirituż dilwit kif approprjat, f’sistema ta’ kromatografija bil-gass (GC). Il-konġeneri jiġu mifruda bil-programmazzjoni tat-temperatura fuq kolonna addattata u jinkixfu bl-użu ta’ apparat tal-kxif bil-fjamma għall-jonizzazzjoni (FID). Il-konċentrazzjoni ta’ kull konġeneru tiġi stabbilita rigward l-istandard intern mill-fatturi tar-rispons, li jiġu miksuba matul il-kalibrazzjoni taħt l-istess kondizzjonijiet kromatografiċi bħal dawk ta’ l-analiżi tax-xorb spirituż.
5. Ir-Reaġenti u l-Materjali
Għajr jekk iddikjarat xorta oħra, uża biss reaġenti ta’ safa aktar minn 97 %, mixtrija minn għand provveditur akkreditat ta’ l-ISO b’ċertifikat tas-safa, ħielsa minn konġeneri oħra fid-dilwit tat-test (dan jista’ jiġi kkonfermat bl-injezzjoni ta’ standards individwali tal-konġeneri fid-dilwita tat-test bl-użu tal- kondizzjonijiet tal-GC bħal fis-6.4) u l-ilma biss ta’ mill-inqas il-grad ta’ 3 kif iddefinit fl-ISO 3696. L-aċetal u l-aċetaldeid għandhom jinħażnu fid-dlam f’temperatura ta’ < 5°Ċ, ir-reaġenti l-oħra jistgħu jinħażnu f’temperatura tal-kamra.
5.1. |
L-etanol assolut ►C2 (CAS 64-17-5) ◄ . |
5.2. |
Il-metanol ►C2 (CAS 67-56-1) ◄ . |
5.3. |
Il-propan-1-ol ►C2 (CAS 71-23-8) ◄ . |
5.4. |
►C1 It-2-metilpropan-1-ol (CAS 78-83-1). ◄ |
5.5. |
L-istandards interni aċċettabbli: il-pentan-3-ol (CAS 584-02-1), il-pentan-1-ol (CAS 71-41-0), il-4- metilpentan-1-ol (CAS 626-89-1) jew il-metil nonanoat (CAS 1731-84-6). |
5.6. |
It-2-metilbutan-1-ol ►C2 (CAS 137-32-6) ◄ . |
5.7. |
It-3-metilbutan-1-ol ►C2 (CAS 123-51-3) ◄ . |
5.8. |
L-etil aċetat ►C2 (CAS 141-78-6) ◄ . |
5.9. |
Il-butan-1-ol ►C2 (CAS 71-36-3) ◄ . |
5.10. |
Il-butan-2-ol ►C2 (CAS 78-92-2) ◄ . |
5.11. |
L-aċetaldeid ►C2 (CAS 75-07-0) ◄ . |
5.12. |
L-aċetal ►C2 (CAS 105-57-7) ◄ . |
5.13. |
L-40 % v/v soluzzjoni ta’ l-etanol Sabiex tħejji 400 ml/l soluzzjoni ta’ l-etanol ferragħ 400 ml etanol (5.1) fi fjaskett volumetriku ta’ litru 1, żid sal-volum bl-ilma ddistillat u ħallat. |
5.13a. |
Għall-alkoħol etiliku ta’ oriġini agrikola biss, etanol assolut (CAS 64-17-5). |
5.14. |
It-tħejjija u l-ħażna tas-soluzzjonijiet standard (il-proċedura wżata għall-metodu validat). Is-soluzzjonijiet standard kollha għandhom jinħażnu f’temperatura ta’ < 5°Ċ u għandhom jitħejjew friski fuq bażi ta’ kull xahar. Il-mases u l-komponenti tas-soluzzjonijiet għandhom jiġu rreġistrati sa l-eqreb 0,1 mg.
|
6. L-apparat u t-tagħmir
6.1. |
L-apparat kapaċi li jkejjel id-densità u l-qawwa alkolika. |
6.2. |
Miżien analitiku, kapaċi li jkejjel sa erba’ postijiet deċimali. |
6.3. |
Kromatografu bil-gass ipprogrammat skond it-temperatura, iffittjat b’apparat tal-kxif bil-fjamma tal-jonizzazzjoni u integratur jew sistema oħra li timmaniġġja l-informazzjoni li kapaċi tkejjel l-ogħla żoni jew l-ogħla għoli. |
6.4. |
Il-kolonna/i kromatografika/ċi bil-gass, kapaċi li tissepara/jisseparaw l-analiti hekk illi r-reżoluzzjoni minima tal-komponenti individwali (għajr għat-2-metilbutan-1-ol u t-3-metilbutan-1-ol) tkun/ikunu mill-anqas 1.3. Nota 2: Il-kolonni u kondizzjonijiet tal-GC li ġejjin huma eżempji adattati:
1)
Spazju tar-ritenzjoni ta’ 1 m x 0,32 mm i.d. ikkonnettjat ma’ kolonna tas-CP-WAX 57 CB ta’ 50 m x 0,32 mm i.d. 0,2 ìm ħxuna tal-lega (polietilene glikol stabillizzat) segwit b’kolonna Carbowax 400 ta’ 50 m x 0,32 mm i.d. 0,2 ìm ħxuna tal-lega(Il-kolonni huma konnessi bl-użu ta’ konnetturi li jiffittjaw bil-pressa.)
2)
Spazju tar-ritenzjoni ta’ 1 m x 0,32 mm i.d. konness ma’ kolonna tas-CP-WAX 57 CB 50 m x 0,32 mm i.d. 0,2 ìm ħxuna tal-lega (polietilene glikol stabbilizzat). (L-ispazju tar-ritenzjoni huwa konness bl-użu ta’ konnettur li jiffittja bil-pressa.)
3)
Kolonna ppakkjata(5 % CW20M, Carbopak2 m x 2 mm i.d
|
7. It-teħid tal-kampjuni u l-kampjuni
7.1. |
Il-kampjun tal-laboratorju Malli jiġi rċevut, titkejjel il-qawwa alkolika ta’ kull wieħed mill-kampjuni (6.1). |
8. Il-proċedura (użata għall-metodu tal-validazzjoni)
8.1. |
Il-porzjon tat-test
|
8.2. |
It-test in bjank
|
8.3. |
It-test preliminari Injetta s-Soluzzjoni standard Ċ (5.14.3) sabiex tiżgura illi l-analiti kollha jiġu mifruda b’riżoluzzjoni minima ta’ 1.3 (għajr għat-2-metilbutan-1-ol u t-3-metilbutan-1-ol). |
8.4. |
Il-kalibrazzjoni Il-kalibrazzjoni għandha tiġi ċċekkjata bl-użu tal-proċedura li ġejja. Iżgura illi r-reazzjoni tkun lineari billi tanalizza suċċessivament għal tliet darbiet kull waħda mis-soluzzjonijiet standard lineari (5.14.6) li jkun fihom standard intern (IS). Miż-żoni l-aktar għolja jew il-qċaċet l-aktar għolja ta’ l-integratur ikkalkola għal kull injezzjoni l-proporzjon R għal kull konġeneru u pinġi l-grafika R kontra l-proporzjon tal-konċentrazzjoni tal-konġeneru għall-istandard intern (IS), Ċ. Għandha tinkiseb tpinġija linerai, b’koeffiċjent ta’ korrelazzjoni ta’ mill-inqas 0,99.Iż-żona l-aktar għolja jew il-għoli tal kongeneru
|
8.5. |
Kif tiġi stabbilita Injetta s-Soluzzjoni standard Ċ (5.14.3) u ż-żewġ soluzzjonijiet standard tal-QC (5.14.7). Segwi b’kampjuni mhux magħrufa (imħejjija skond it-8.1 u t-8.2) billi ddaħħal standard standard wieħed tal-QC f’kull 10 kampjuni sabiex tiżgura stabbiltà analitika. Injetta Soluzzjoni standard Ċ waħda (5.14.3) wara kull 5 kampjuni. |
9. Il-kalkolu
Tista’ tintuża sistema awtomata tal-maniġġjar ta’ l-informazzjoni, sakemm l-informazzjoni tista’ tiġi ċċekkjata permezz tal-prinċipji deskritti fil-metodu ta’ hawn taħt.
Kejjel jew iż-żoni l-iktar għolja jew l-għoljiet quċċata għall-konġeneru u l-għoljiet quċċata ta’ standard intern.
9.1. |
Il-kalkolu tal-fattur tar-rispons Mill-kromatogramma ta’ l-injezzjoni tas-Soluzzjoni standard Ċ (5.14.3), ikkalkola l-fattur tar-rispons għal kull wieħed mill-konġeneri bl-użu ta’ l-ekwazzjoni (1).Iż-żona l-iktar għoljaIl-konċ. tal-konġeneru
jew il-għoli IS = standard Intern Il-Konċ. tal-konġeneru = il-konċentrazzjoni tal-konġeneru fis-Soluzzjoni Ċ (5.14.3) Il-Konċ. IS = il-konċentrazzjoni ta’ l-istandard intern fis-Soluzzjoni Ċ (5.14.3).
|
9.2. |
Il-preżentazzjoni finali tar-riżultati Ir-riżultati jiġu kkonvertit mill- ì/g sa g għal kull 100 litru alkol assolut għall-kampjuni li jużaw l-ekwazzjoni (4): Il-Konċ. (ųg/g) x p x 10(il-qawwa ( % vol) x 1 000 )PIC FILE= fejn = id-densità f’ kg/m3. Ir-riżultati jiġu kwotati sa tliet ċifri sinifikanti u massimu ta’ post wieħed deċimali eż. 11,4 g għal kull 100 l alkol assolut. |
10. Il-garanzija u l-kontroll tal-kwalità (użati għall-metodu tal-validazzjoni)
Bl-użu ta’ l-ekwazzjoni (2) ta’ hawn fuq, ikkalkola l-konċentrazzjoni ta’ kull wieħed mill-konġeneri fis-soluzzjonijiet standard tal-kontroll tal-kwalità mħejjija billi tiġi segwita l-proċedura bħal minn fit-8.1.1 sat-8.1.4. Bl-użu ta’ l-ekwazzjoni (3), ikkalkola l-perċentwal ta’ l-irkupru għall-valur fil-mira. Jekk ir-riżultati analizzati jkunu fil-limitu ta’ +/- 10 % tal-valuri teoretiċi tagħhom għal kull konġenitur, l-analiżi tista’ tipproċedi. Jekk le, għandha ssir investigazzjoni sabiex tinstab il-kawża ta’ l-ineżattezza u tittieħed l-azzjoni ta’ rimedju kif xieraq.
11. Il-karatteristiċi tal-metodu tat-twettiq tax-xogħol (il-preċiżjoni)
Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorjuit-tabelli li ġejjin jagħtu l-valuri għall-komposti li ġejjin: l-etanal, l-etil aċetat, l-aċetal, l-etanal totali, il-metanol, il-butan-2-ol, il-propan-1-ol, il-butan-1-ol, il-2-metil-propan-1-ol, it-2 metul-butan-1-ol, it-3 metil-butan-1-ol.
L-informazzjoni li ġejja kienet miksuba minn studju internazzjonali tat-twetiq tax-xogħol tal-metodu mwettaq skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.
Is-Sena tat test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
l-Etanol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
28 |
26 |
27 |
27 |
28 |
In-Numru ta' dawk li kienu'il barra (laboratorji) |
2 |
4 |
3 |
3 |
2 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
56 |
52 |
54 |
54 |
56 |
Il-valur medju
() (pg/g) |
63,4 |
71,67 |
130,4 |
38, 2 |
28,6 |
|
|
|
13,8(*) |
52,2(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija (r) |
3,3 |
1,9 |
6,8 |
4,1 |
3,6 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċitàtat-tennija (r |
5,2 |
2,6 |
5,2 |
15, |
8,9 |
Il-Limitu tal-kapaċitàtat-tennija () |
9,3 |
5.3 |
19,1 |
11,6 |
10,1 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
12 |
14 |
22 |
6.8 |
8,9 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà () (%) |
18,9 |
19,4 |
17,1 |
26,2 |
22,2 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
33,5 |
38,9 |
62,4 |
19,1 |
25,1 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja C. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
POŻIZZJONI TAT-TABELLA |
Is-Sena tat-test tal-laboratorju 997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
l-Etil aċetat |
Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorjimiżmuma wara l-eliminazzjoni ta' dawkli qegħdin 'il barra |
24 |
24 |
25 |
24 |
24 |
In-Numru ta' dawk likienu 'l barra(laboratorji) |
2 |
2 |
1 |
2 |
2 |
In-Numru tar-riżultatiaċċettati |
48 |
48 |
50 |
48 |
48 |
Il-Valur medju
() pg/g |
96,8 1 |
046 |
120,3 |
112,5 |
99,1 |
|
|
|
91,8(*) |
117,0(*) |
|
Id-Devjazzjoni standardtal-kapaċità tat-tennija(r) |
2,2 |
15 |
2,6 |
2,1 |
2,6 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċitàtat-tennija (r) (*) |
2,3 |
1,4 |
2,1 |
2,0 |
2,4 |
Il-limitu tal-kapaċitàtat-tennija () |
6,2 |
40,7 |
7,2 |
5,8 |
7,3 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
6,4 |
79 |
8,2 |
6,2 |
7,1 |
Id-Devjazzjoni relattiva tar-riproduċibbiltà(g) (%) |
6,6 |
7,6 |
6,8 |
6,2 |
6,6 |
Il-limitu tar-riproduċibbiltà () |
17.9 |
221,9 |
22,9 |
17,5 |
20,0 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-: duplikati għomja B. Il-: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-: livelli maqsuma E. Ir-Rum: livelli maqsuma |
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
l-Aċetal |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorjiMiżmuma wara l-eliminazzjonita' dawk li qegħdin 'il barra |
20 |
20 |
22 |
17 |
21 |
In-Numru ta' dawk li jkunu'l barra (laboratorji) |
4 |
3 |
2 |
4 |
3 |
In-Numru tar-riżultatiaċċettati |
40 |
42 |
44 |
34 |
42 |
Il-Valur medju
() |
35,04 |
36,46 |
68,5 |
20.36 |
15,1 |
|
|
|
6.60(*) |
28,3(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija_(r) |
0,58 |
0.84 |
1,6 |
0,82 |
1,9 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċitàa tat-tennija (r) (%) |
1,7 |
2,3 |
2,3 |
6,1 |
8,7 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija () |
1,6 |
2,4 |
4,4 |
2,3 |
5,3 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
4,2 |
4,4 |
8,9 |
1,4 |
3,1 |
Id-Devjazzjoni relattiva tar-riproduċibbiltà(g) (%) |
12,1 |
12,0 |
13,0 |
10,7 |
14,2 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà() |
11,8 |
12,2 |
25.0 |
4.0 |
8,7 |
It-Tipi tal-Kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test tal-laboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboraorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
L-etanal totali |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
23 |
19 |
22 |
21 |
22 |
In-Numru ta' dawk li kienu 'ilbarra (laboratorji) |
1 |
5 |
2 |
3 |
2 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
46 |
38 |
44 |
42 |
44 |
Il-Valur medju
() |
76,5 |
85,3 |
156.5 |
45,4 |
32,7 |
|
|
|
15,8(*) |
61,8(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija (r) |
3,5 |
1,3 |
6.5 |
4,4 |
3,6 |
Id-Devjazzjoni standard relattivatal-kapċità tat-tennija (g) (%) |
4,6 |
1,5 |
4,2 |
14,2 |
7,6 |
Il-limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
9,8 |
3,5 |
18,3 |
12,2 |
7,6 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
13 |
15 |
24,1 |
7,3 |
9,0 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) (%) |
16,4 |
17,5 |
15,4 |
23,3 |
19,1 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà() |
35,2 |
41,8 |
67.4 |
20,3 |
25,2 |
It-Tipi tal-kampjuni: A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test tal-laboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
Il-Metanol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-elimininazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
26 |
27 |
27 |
28 |
25 |
In-Numru ta' dawk li kienu 'ilbarra (laboratorji) |
4 |
3 |
3 |
1 |
4 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
52 |
54 |
54 |
56 |
50 |
Il-Valur medju
() |
319,8 |
2 245 |
1 326 |
83,0 |
18,6 |
|
|
|
61,5(*) |
28,9(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija (r) |
4,4 |
27 |
22 |
1,5 |
1,3 |
Id-Devjazzjoni relattivatal-kapaċità tat-tennija (g) |
1,4 |
1,2 |
1,7 |
2,1 |
5,6 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
12,3 |
74,4 |
62,5 |
4,3 |
3,8 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
13 |
99 |
60 |
4,5 |
2,8 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) (%) |
3,9 |
4,4 |
4,6 |
6,2 |
11,8 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
35,2 |
278,3 |
169,1 |
12,5 |
7,9 |
It-tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test tal-laboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
4 |
L-Analit |
Il-Butan-2-ol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
21 |
27 |
29 |
22 |
In-Numru ta' dawk li kienu 'lbarra (laboratorji) |
4 |
3 |
1 |
1 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
42 |
54 |
58 |
44 |
Il-Valur medju
() |
5,88 |
250,2 |
27,57 |
5,83 |
|
|
|
14,12(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija (r) |
0,40 |
2.2 |
0.87 |
0.64 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċità tat-tennija (g) (%) |
6,8 |
0,9 |
3,2 |
6,4 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
1,1 |
6,1 |
2,5 |
1,8 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) |
0,89 |
13 |
3,2 |
0,87 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) (%) |
15,2 |
5,1 |
11,5 |
8,7 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
2,5 |
35,5 |
8,9 |
2,4 |
It-Tipi tal-kampjuni A.Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
Il-Propanol-1-ol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-kampjuni miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawkqegħdin 'il barra |
29 |
27 |
27 |
29 |
29 |
In-Numru ta dawk li kienu 'ilbarra (laboratorji) |
2 |
4 |
3 |
2 |
2 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
58 |
54 |
54 |
58 |
58 |
Il-Valur medju ()
ųg/g |
86,4 3 |
541 |
159,1 |
272,1 |
177,3 |
|
|
|
293,3(*) |
222,1(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċitàtat-tennija (r) |
3,0 |
24 |
3,6 |
2,3 |
3,3 |
Id-Devjazzjponi relattivatal-kapaċità tat-tennija (g) (%) |
3,4 |
0,7 |
2,3 |
0,9 |
1,6 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
8,3 |
68,5 |
10,0 |
6,4 |
9,1 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
5,3 |
150 |
6,3 |
9,0 |
8,1 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) (%) |
6,1 |
4,1 |
4,1 |
3,6 |
4,1 |
Il-Limiti tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
14,8 |
407,2 |
18,2 |
25,2 |
22,7 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
Il-propanol-1-ol |
Il-kampjuni |
A |
B |
Ċ |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
20 |
22 |
22 |
In-Numru ta' dawk li jkunu 'lbarra (laboratorji) |
4 |
4 |
6 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
40 |
44 |
44 |
Il-Valur medju
() |
3,79 |
5,57 |
7,54 |
Id-Devjazzoni tal-kapaċitàtat-tennija (r) |
0,43 |
0,20 |
0,43 |
Id-Devjazzjoni standard relattiva tal-kapaċità tat-tennija (g) (%) |
11,2 |
3,6 |
5.6 |
Il-limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
1,1 |
0,6 |
1,2 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
0,59 |
0,35 |
0,82 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà () (%) |
15,7 |
9,8 |
10,8 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
1,7 |
1,5 |
2,3 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja (*) |
Is-sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
it-2-metilpropan-1-ol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji wara l-eliminazzjoni ta' dawk li qegħdin'il barra |
28 |
31 |
30 |
26 |
25 |
In-Numru ta' dawk li huma 'ilbarra (laboratorji) |
3 |
0 |
1 |
5 |
4 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
56 |
62 |
60 |
52 |
50 |
Il-Valur medju ()
ųg/g |
174,2 |
111,7 |
185,0 |
291,0 |
115,99 |
|
|
|
246,8(*) |
133,78(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċità tat-tennija (r) |
2,3 |
1,6 |
2,5 |
1,8 |
0,6 |
Id-Devjazzjoni relattivatal-kapaċità tat-tennija (g) |
1,3 |
1,4 |
1,3 |
0,7 |
0,6 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija(r) |
6,4 |
4,5 |
6,9 |
5,0 |
2,1 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (r) (%) |
8,9 |
8,9 |
9,7 |
6,0 |
6,2 |
Id-Devjazzjoni standard relattiva tar-riproduċibbiltà (g) (%) |
5,1 |
8,0 |
5,2 |
2,2 |
5,0 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
24,9 |
24,9 |
27,2 |
16,9 |
17,4 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
it-2-metil-butan-1-ol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eleiminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
25 |
26 |
25 |
27 |
25 |
In-Numru ta' dawk li huma 'il barra(laboratorji) |
3 |
2 |
3 |
1 |
2 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
50 |
52 |
50 |
54 |
50 |
Il-Valur medju
(x) |
113,0 |
48,3 |
91,6 |
72,1 |
39,5 |
|
|
|
45,2(*) |
61,5(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċitàtat-tennija (r) |
2,1 |
1,3 |
1,8 |
2,3 |
2,3 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-Kapaċità tat-tennija (g) (%) |
1,9 |
3,1 |
1,8 |
3,9 |
4,3 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
6,0 |
4,2 |
4,7 |
6,4 |
6,3 |
Id-Devjazzjoni tar-riproduċibbiltà (g) |
7,4 |
3,8 |
6,6 |
4,7 |
4,5 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) (%) |
6,6 |
7,9 |
7,2 |
8,1 |
8,8 |
Il-Limitu tar-riproduċibbilta (R) ųg/g |
20,8 |
10.7 |
18,4 |
13.3 |
12,5 |
It-tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
Is-Sena tat-test interlaboratorju |
1997 |
In-Numru tal-laboratorji |
32 |
In-Numru tal-kampjuni |
5 |
L-Analit |
it-3-metil-butan-1-ol |
Il-Kampjuni |
A |
B |
Ċ |
D |
E |
In-Numru tal-laboratorji miżmumawara l-eliminazzjoni ta' dawk liqegħdin 'il barra |
23 |
23 |
24 |
27 |
21 |
In-Numru ta' dawk li kienu 'il barra |
5 |
5 |
4 |
1 |
6 |
In-Numru tar-riżultati aċċettati |
46 |
46 |
48 |
54 |
42 |
Il-Valur medju
(r) |
459,4 |
242,7 |
288,4 |
142,2 |
212,3 |
|
|
|
120,4(*) |
245.6(*) |
|
Id-Devjazzjoni tal-kapaċitàtat-tennija (r) |
5,0 |
2,4 |
3.4 |
2,4 |
3,2 |
Id-Devjazzjoni relattiva tal-kapaċita tat-tennija (r) (%) |
1.1 |
1.0 |
1,2 |
1,8 |
1,4 |
Il-Limitu tal-kapaċità tat-tennija() |
13,9 |
6.6 |
9,6 |
6,6 |
9,1 |
Id-Devjazzoni tar-riproduċibbiltà (r) |
29,8 |
13 |
21 |
8,5 |
6,7 |
Id-Devjazzjoni relattivatar-riproduċibbiltà (g) |
6,5 |
5,2 |
7,3 |
6,5 |
2,9 |
Il-Limitu tar-riproduċibbiltà (R) ųg/g |
83,4 |
35,4 |
58,8 |
23,8 |
18,7 |
It-Tipi tal-kampjuni A. Il-Brandy: duplikati għomja B. Il-Kirsch: duplikati għomja Ċ. Il-Grappa: duplikati għomja D. Il-Whisky: livelli maqsuma (*) E. Ir-Rum: livelli maqsuma (*) |
III.3. DETEMINAZZJONI TAL-AĊIDI VOLATILI TAL-ISPIRTI
1. Kamp tal-applikazzjoni
Il-metodu ġie vvalidat permezz ta' studju interlaboratorju għar-rum, il-brandy, il-marc u l-ispirti tal-frott, f'livelli li jvarjaw minn 30 mg/l sa 641 mg/l.
2. Referenzi Normattivi
ISO 3696: 1987 Ilma għall-użu analitiku — Speċifikazzjonijiet u metodi tal-ittestjar.
3. Definizzjonijiet
3.1. |
L-aċidità volatili hija kkalkulata billi titnaqqas l-aċidità fissa mill-aċidità totali. |
3.2. |
L-aċidità totali hija s-somma ta' aċiditajiet titrabbli. |
3.3. |
L-aċidità fissa hija l-aċidità tar-residwu li jibqa' wara l-evaporazzjoni tal-ispirtu sa ma jinxef. |
4. Prinċipju
L-aċidità totali u l-aċidità fissa huma ddeterminati permezz tat-titrazzjoni jew tal-potenzjometrija.
5. Reaġenti u Materjali
Matul l-analiżi, sakemm ma jiġix iddikjarat mod ieħor, uża biss reaġenti ta' grad analitiku rikonoxxut u ilma mill-inqas tal-grad 3 kif definit fl-ISO 3696:1987.
5.1. |
Soluzzjoni 0,01 M idrossidu tas-sodju (NaOH) |
5.2. |
Soluzzjoni tal-indikatur imħallat: Iżen 0,1 g ta' karminju indigo u 0,1 g ta' fenol aħmar.
Ħoll f'40 mL ilma u żid bl-etanol sa 100 mL.
|
6. Apparat u Tagħmir
Apparat tal-laboratorju indirett, oġġetti tal-ħġieġ tal-kategorija A u dan li ġej:
Pompa tal-ilma
Evaporatur rotatorju jew banju ultrasoniku
Tagħmir għat-titrazzjoni potenzjometrika (fakultattiv)
7. It-teħid tal-kampjuni u l-kampjuni
Il-kampjuni jinħażnu f'temperatura tal-kamra qabel l-analiżi.
8. Proċedura
8.1. Aċidità totali
8.1.1. Preparazzjoni tal-kampjun
L-ispirtu jiġi irradjat bl-ultrasoniku (ultrasonikazzjoni) jew imħawwad għal żewġ minuti f'vakwu biex jinħeles mid-dijossidu tal-karbonju jekk meħtieġ.
8.1.2. Titrazzjoni
B'pipetta iġbed 25 mL tal-ispirtu fi flask Erlenmeyer ta' 500 ml.
Żid madwar 200 mL ilma mgħolli, iddistillat u mkessaħ (imħejji frisk ta' kuljum) u 2-6 qatriet mis-soluzzjoni mħallta tal-indikatur (5.2).
Ittitra bis-soluzzjoni 0,01 M idrossidu tas-sodju (5.1) sakemm ikun hemm kambjament tal-kulur minn isfar fl-aħdar għal vjola fil-każ ta' spirti mingħajr kulur, u minn isfar fil-kannella għal kannella fl-aħmar fil-każ ta' spirtu ta' lewn kannella rispettivament.
It-titrazzjoni tista' titwettaq ukoll permezz ta' potenzjometrija, sa pH 7,5.
Nieħdu n1 mL bħala l-volum tas-soluzzjoni 0,01 M idrossidu tas-sodju miżjud.
8.1.3. Kalkolu
L-aċidità totali (AT) espressa f'milliekwivalenti għal kull L ta' spirtu hija ugwali għal 0,4 × n1.
L-aċidità totali (AT′) espressa f'mg ta' aċidu aċetiku għal kull L ta' spirtu hija ugwali għal 24 × n1.
8.2. Aċidità fissa
8.2.1. Tħejjija tal-kampjun
Evapora 25 mL tal-ispirtu sa ma jinxef:
8.2.2. Titrazzjoni
Ħoll ir-residwu li jibqa' wara l-evaporazzjoni b'ilma mgħolli, iddistillat u mkessaħ (imħejji frisk ta' kuljum) u żid sa ma l-volum ikun madwar 100 mL; u żid bejn 2 u 6 qatriet mis-soluzzjoni mħallta tal-indikatur (5.2).
Ittitra bis-soluzzjoni 0,01 M idrossidu tas-sodju (5.1).
It-titrazzjoni tista' titwettaq ukoll permezz ta' potenzjometrija, sa pH 7,5.
Meta n2 mL ikun il-volum tas-soluzzjoni 0,01 M idrossidu tas-sodju miżjud.
8.2.3. Kalkolu
L-aċidità fissa (AF) espressa f'milliekwivalenti kull L ta' spirtu hija ugwali għal 0,4 × n2.
L-aċidità fissa (AF) espressa f'mg ta' aċidu aċetiku għal kull L ta' spirtu hija ugwali għal 24 × n2.
9. Kalkolu ta' aċidità volatili
9.1. |
Espressjoni f'milliekwivalenti għal kull L: Nieħdu:
L-aċidità volatili, AV, f'milliekwivalenti għal kull L hija ugwali għal: AT – AF |
9.2. |
Espressjoni f'mg ta' aċidu aċetiku għal kull L: Meta:
L-aċidità volatili, AV, f'mg ta' aċidu aċetiku għal kull L hija ugwali għal: AT′ – AF′ |
9.3. |
Espressjoni fi g ta' aċidu aċetiku għal kull hl ta' alkoħol 100 % vol pur hija ugwali għal:
meta A hija l-qawwa alkoħolika skont il-volum tal-ispirtu. |
10. Karatteristiċi tal-prestazzjoni analitika (Preċiżjoni)
10.1. Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju
Din id-dejta nkisbet minn studju internazzjonali ta' prestazzjoni analitika mwettaq skont il-proċeduri miftiehma internazzjonalment [1] [2].
Sena tat-test interlaboratorju: |
2000 |
Għadd ta' laboratorji |
18 |
Għadd ta' kampjuni |
6 |
Kampjuni |
A |
B |
C |
D |
E |
F |
Għadd ta' laboratorji wara l-eliminazzjoni tal-eċċezzjonijiet |
16 |
18 |
18 |
14 |
18 |
18 |
Għadd ta' eċċezzjonijiet (Laboratorji) |
2 |
|
|
4 |
|
|
Għadd ta' riżultati aċċettati |
32 |
36 |
36 |
28 |
36 |
36 |
Mean value [mg/L] |
272* 241* |
30 |
591* 641* |
46 |
107 |
492 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/L] |
8,0 |
3,6 |
15,0 |
3,7 |
6,7 |
8,5 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' ripetibilità, RSDr [%] |
3,1 |
11,8 |
2,4 |
8,0 |
6,2 |
1,7 |
Limitu ta' ripetibilità r r [mg/L] |
23 |
10 |
42 |
10 |
19 |
24 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/L] |
8,5 |
8,4 |
25,0 |
4,55 |
13,4 |
24,4 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibilità, RSDR [%] |
3,3 |
27,8 |
4,1 |
9,9 |
12,5 |
5,0 |
Limitu ta' riproduċibilità, R [mg/L] |
24 |
23 |
70 |
13 |
38 |
68 |
Tipi ta' kampjuni:
A |
Spirtu tal-għajnbaqar; Livell maqsum * |
B |
Rum I; duplikati għomja |
C |
Rum II; livell maqsum * |
D |
Slivovitz; duplikati għomja |
E |
Brandy; duplikati għomja |
F |
Spirtu tal-Marc; duplikati għomja |
[1] “Protocol for the Design, Conduct and Interpretation of Method- Performance Studies”, Horwitz, W. (1995) Pure and Applied Chemistry 67, 332-343.
[2] Horwitz, W. (1982) Analytical Chemistry 54, 67 A-76 A
V. DETERMINAZZJONI KROMATOGRAFIKA B'ANETHOLE GAS TA' TRANS-ANETHOLE F'XORB ALKOĦOLIKU
1. Għan
Dan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni ta' trans-anethole f'xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi bl-użu tal-kromatografija b'gass kapillari.
2. Referenzi normattivi
ISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.
3. Prinċipju
Il-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fl-ispirtu hija ddeterminata bil-kromatografija tal-gass (GC). L-istess kwantità ta' internal standard, per eżempju 4-allylanisole (estragole) meta l-estragole m'huwiex preżenti b'mod naturali fil-kampjun, hija miżjuda mal-kampjun tat-test u ma' soluzzjoni ta' trans-anethole ta' konċentrazzjoni magħrufa wżata bħala referenza. It-tnejn li huma huma mbagħad dilwiti ma' soluzzjoni ta' 45 % ethanol u injettati direttament fis-sistema GC. Hemm bżonn li ssir estrazzjoni qabel il-preparazzjoni u l-analiżi ta' kampjun għal-likuri li fihom kwantitajiet kbar ta' zokkor.
4. Reaġenti u materjali
Waqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' purità ta' mill-inqas 98 %. Għandu jintuża ilma ta' mill-inqas grad 3 kif definit mill-ISO 3696.
Kimiċi ta' referenza għandhom jinħażnu kesħin (f'temperatura ta' 4 °C), fid-dlam, f'kontenituri ta' l-aluminju jew fi fliexken tar-reaġenti magħmula mill-ħġieġ kulurit (ambra). It-tappijiet għandhom ikunu preferibbilment imdaħħla fil-post b'siġill ta' l-aluminju. It-trans-anethole ikollu bżonn jitniżżel mill-istat kristallin tiegħu qabel jintuża, imma f'dan il-każ it-temperatura tiegħu m'għandha qatt taqbeż il-35 °C.
4.1. |
Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5) |
4.2. |
1-methoxy-4-(1-propenyl) benzene; (trans-anethole) (CAS 4180-23-8) |
4.3. |
4-allylanisole, (estragole) (CAS 140-67-0), internal standard suġġerit (IS) |
4.4. |
Ethanol 45 % vol. Żid 560 g ta' ilma distillat ma' 378 g ta' ethanol 96 % vol. |
4.5. |
Preparazzjoni ta' soluzzjonijiet standard
Is-soluzzjonijiet standard kollha għandhom jinħażnu f'temperatura ambjentali (15 sa 35!!! error character !!! Β!!! error character !!! ΊC) fid-dlam f'kontenituri ta' l-aluminju jew fi fliexken tar-reaġenti magħmula mill-ħġieġ kulurit (ambra). It-tapp għandu jkun preferibbilment imdaħħal fil-post b'siġill ta' l-aluminju. It-trans-anethole u l-4-allylanisole huma prattikament insolubbli fl-ilma, u għalhekk hemm bżonn li t-trans-anethole u l-4-allylanisole jiddewbu fi ftit 96 % ethanol (4.1) qabel iż-żieda ta' 45 % ethanol (4.4). Is-soluzzjonijiet għall-użu għandhom ikunu preparati kull ġimgħa. 4.5.1. Soluzzjoni Standard A Soluzzjoni għall-użu ta' trans-anethole (konċentrazzjoni: 2 g/l) Iżen 40 mg ta' trans-anethole (4.2) f'volumetric flask ta' 20 ml (jew 400 mg f'200 ml, eċċ.). Żid ftit 96 % ethanol (4.1) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew. 4.5.2 Soluzzjoni internal standard B Soluzzjoni għall-użu ta' internal standard, per eżempju estragole (konċentrazzjoni: 2 g/l) Iżen 40 mg ta' estragole (4.3) f'volumetric flask ta' 20 ml (400 mg f'200 ml, eċċ.). Żid ftit 96 % vol. ethanol (4.1) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew. 4.5.3 Soluzzjonijiet użati biex tiċċekkja l-linearity response tal-flame ionisation detector (FID) Il-linearity response tal-FID trid tkun iċċekkjata għall-analiżi waqt li tqis firxa ta' konċentrazzjonijiet ta' trans-anethole fi spirti minn 0 g/l sa 2.5 g/l. Fil-proċedura ta' l-analiżi, il-kampjuni mhux magħrufa li se jkunu analizzati huma dilwiti 10 darbiet (8.3). Għall-kondizzjonijiet ta' l-analiżi deskritti fil-metodu, soluzzjonijiet għall-użu li jikkorrispondu għal konċentrazzjonijiet ta' 0, 0,05, 0,1, 0,15, 0,2, u 0,25 g/l ta' trans-anethole fil-kampjun li se jkun analizzat huma preparati kif ġej: ħu 0,5, 1, 1,5, 2, u 2,5 ml ta' soluzzjoni għall-użu A (4.5.1) u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flasks separati ta' l-20 ml; ittrasferixxi bil-pipetta f'kull flask 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew. Il-blank solutions (8.4) hija wżata bħala soluzzjoni ta' 0 g/l. 4.5.4 Soluzzjoni standard C Ħu 2 ml ta' soluzzjoni standard A (4.5.1) u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flask ta' l-20 ml, imbagħad żid 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew. |
5. Apparat
5.1. |
Kromatografu b'gass kapillari li fih flame ionisation detector (FID) u integrator jew xi sistema oħra ta' data handling li kapaċi tkejjel il-peak heights jew areas, u b'automatic sampler jew l-apparat meħtieġ għall-injezzjoni manwali tal-kampjun. |
5.2. |
Split/splitless injector |
5.3. |
Kolonna kapillari, per eżempju: Tul: 50 m
Diametru ta' ġewwa: 0,32 mm
Ħxuna tal-film: 0,2 μm
Fażi stazzjonarja: FFAP – modified TPA polyethylene glycol cross-linked porous polymer.
|
5.4. |
Apparat komuni tal-laboratorji: A grade volumetric glassware, analytical balance (preċiżjoni: ±0,1 mg). |
6. Kondizzjonijiet tal-kromatografija
It-tip ta' kolonna u d-dimensjonijiet, u l-kondizzjonijiet tal-GC, għandhom ikunu dawk li l-anethole u l-internal standard ikunu separati minn xulxin u minn kull sustanza oħra li tista' tinterferixxi. Kondizzjonijiet tipiċi għall-kolonna mogħtija bħala eżempju f'5.3 huma:
6.1. |
Carrier gas: analytical helium |
6.2. |
Rata tal-fluss: 2 ml/min |
6.3. |
Injector temperature: 250 °C |
6.4. |
Detector temperature:: 250 °C |
6.5. |
Kondizzjonijiet tat-temperatura tal-forn: isothermal, 180°C, run time 10 minuti |
6.6. |
Injection volume: 1 μl, split 1:40. |
7. Kampjuni
Il-kampjuni għandhom jinħażnu f'temperatura ambjentali, f'post mudlam u mhux kiesaħ.
8. Proċedura
8.1 Screening tal-kampjun għall-estragole
Biex tassigura li m'hemm l-ebda estragole preżenti b'mod naturali fil-kampjun, għandha ssir analiżi blank mingħajr iż-żieda ta' ebda internal standard. Jekk l-estragole huwa preżenti b'mod naturali jrid jintgħażel internal standard ieħor (per eżempju menthol).
Ittrasferixxi bil-pipetta 2 ml tal-kampjun f'volumetric flask ta' l-20 ml u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.
8.2 Preparazzjoni ta' kampjuni mhux magħrufa
Ittrasferixxi bil-pipetta kampjun ta' 2 ml f'volumetric flask ta' l-20 ml imbagħad żid 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.
8.3 |
Blank Ittrasferixxi bil-pipetta 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) f'volumetric flask ta' l-20 ml u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew. |
8.4 |
Test ta' linearità Qabel tinbeda l-analiżi, il-linearità tar-response tal-FID għandha tkun iċċekkjata billi jiġu analizzati b'mod suċċessiv tliet kopji preċiżi ta' kull waħda mil-linearity standard solutions (4.5.3). Miż-żoni peak jew il-peak heights ta' l-integrator għal kull injezzjoni ipplottja graph tal-konċentrazzjoni tal-mother solution tagħhom fi g/l versus ir-ratio R għal kull wieħed. R = il-peak height jew żona tat-trans-anethole diviża bil-peak height jew żona ta' l-estragole. Għandu jingħata linear plot. |
8.5 |
Determinazzjoni Injetta l-blank solution (8.3), segwita mis-soluzzjoni standard C (4.5.4), segwita minn wieħed mil-linearity standards (4.5.3) li se jaħdem bħala kampjun tal-kontroll tal-kwalità (dan jista' jintgħażel b'referenza għall-konċentrazzjoni probabbli ta' trans-anethole f'dak li mhux magħruf) segwit minn ħamsa mhux magħrufa (8.2); daħħal kampjun ta' linearità (għall-kontroll tal-kwalità) wara kull ħames kampjuni mhux magħrufa, biex tassigura stabbilità analitika. |
9. Kalkolu tar-response factor
Kejjel iż-żoni peak (billi tuża integrator jew xi data system oħra) jew il-peak heights (manual integration) għat-trans-anethole u l-peaks ta' l-internal standard.
9.1 Kalkolu tar-response factor (RF i)
Ir-response factor huwa kkalkulat kif ġej:
Rfi = (Ci/area or heighti)*(area or heightis/Cis)
Fejn:
Ci |
hija l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fis-soluzzjoni standard A (4.5.1) |
Cis |
hija l-konċentrazzjoni ta' internal standard fis-soluzzjoni standard B (4.5.2) |
areai |
hija ż-żona (jew il-height) tal-peak tat-trans-anethole |
areais |
hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' l-internal standard |
RFi huwa kkalkulat mill-ħames kampjuni ta' soluzzjoni C (4.5.4).
9.2 Analiżi tas-soluzzjonijiet tal-linearity response test.
Injetta s-soluzzjonijiet tal-linearity response test. (4.5.3).
9.3 Analiżi tal-kampjun
Injetta s-soluzzjoni mhux magħrufa tal-kampjun (8.2).
10. Kalkolu tar-riżultati
Il-formola għall-kalkolu tal-konċentrazzjoni ta' trans-anethole hi din li ġejja:
ci = Cis * (żona jew heighti /żona jew heightis )*RFi
Fejn:
ci |
hija l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole mhux magħrufa |
Cis |
hija l-konċentrazzjoni ta' internal standard fis-soluzzjoni mhux magħrufa (4.5.2) |
Area jew heighti |
hija ż-żona jew il-height tal-peak tat-trans-anethole |
Area jew heightis |
hija ż-żona jew il-height tal-peak ta' l-internal standard |
RFi |
huwa r-response coefficient (ikkalkulat bħal dak f'9.1) |
Il-konċentrazzjoni ta' trans-anethole hija espressa fi grammi f'kull litru, sa punt deċimali wieħed.
11. Assigurazzjoni u kontroll tal-kwalità
Il-chromatograms iridu jkunu dawk li l-anethole u l-internal standard ikunu separati minn xulxin u minn kull sustanza oħra li tista' tinterferixxi. Il-valur tar-RFi huwa kkalkulat mir-riżultati għall-ħames injezzjonijiet ta' soluzzjoni C (4.5.4). Jekk il-coefficient of variation (CV % = (standard deviation/mean)*100) huwa sa plus jew minus 1 %, il-valur medju tar-RFi huwa aċċettabbli.
Il-kalkolu ta' hawn fuq għandu jintuża biex tkun kalkulata l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fil-kampjun magħżul għall-kontroll tal-kwalità mis-soluzzjonijiet tal-linearity control (4.5.3).
Jekk ir-riżultati medji kkalkulati mill-analiżi tal-linearity solution magħżula bħala kampjun għall-internal quality control (IQC) huma sa plus jew minus 2,5 % tal-valur teoretiku tagħhom, allura r-riżultati għall-kampjuni mhux magħrufa jistgħu jkunu aċċettati.
12. Trattament tal-kampjun tax-xorb alkoħoliku li fih ammont kbir ta' zokkor u tal-kampjun tal-likuri qabel l-analiżi bil-GC
Estrazzjoni ta' alkoħol mix-xorb alkoħoliku li fih ammont kbir ta' zokkor, sabiex tkun tista' tiġi ddeterminata l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole bl-użu tal-kromatografija b'gass kapillari.
12.1. Prinċipju
Parti milll-kampjun tal-likuri tittieħed u ma' din jinżied l-internal standard, f'konċentrazzjoni simili għal dik ta' l-analyte (trans-anethole) fil-likur. Ma' dan jinżiedu sodium phosphate dodecahydrate u anhydrous ammonium sulphate. It-taħlita li tirriżulta titħawwad sew u titkessaħ, żewġ saffi jiżviluppaw, u s-saff ta' alkoħol fil-wiċċ jitneħħa. Parti minn dan is-saff ta' alkoħol tittieħed u tiġi dilwita ma' soluzzjoni ta' 45 % ethanol (4.4) (Nota: l-ebda internal standard ma jiżdied f'din il-fażi, għax diġa żdied). Is-soluzzjoni li tirriżulta tiġi analizzata fil-kromatografija tal-gass.
12.2. Reaġenti u materjali
Waqt l-estrazzjoni uża biss reaġenti ta' purità ikbar muinn 99 %.
12.2.1. |
Ammonium sulphate, anhydrous, (CAS 7783-20-2). |
12.2.2. |
Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrate, (CAS 10039-32-4). |
12.3. Apparat
Conical flasks, separating flasks, friġġ.
12.4. Proċedura
12.4.1. Screening tal-kampju għall-estragole
Biex tassigura li m'hemm l-ebda estragole preżenti b'mod naturali fil-kampjun, għandhom isiru blank extraction (12.6.2) u analiżi mingħajr iż-żieda ta' ebda internal standard. Jekk l-estragole huwa preżenti b'mod naturali jrid jintgħażel internal standard ieħor.
12.4.2. Estrazzjoni
Ittrasferixxi bil-pipetta 5 ml ta' 96 % ethanol (4.1) f'conical flask, iżen f'dan il-flask 50 mg ta' internal standard (4.3), u żid 50 ml tal-kampjun. Żid 12 g ta' ammonium sulphate, anhydrous (12.2.1), 8.6 g ta' dibasic sodium phosphate, dodecahydrate (12.2.2). Agħlaq il-conical flask b'tapp.
Ħawwad il-flask għal mill-inqas 30 minuta. Jista' jintuża apparat mekkaniku għat-taħwid, imma mhux Teflon coated magnetic stirring bar, minħabba li t-Teflon jassorbi ftit mill-analyte. Ara li l-imluħa miżjuda ma jdubux kompletament.
Poġġi l-flask magħluq bit-tapp fi friġġ (T < 5 C) għal mill-inqas sagħtejn.
Wara dan il-ħin, suppost li jkun hemm żewġ saffi distinti ta' likwidi u residwu solidu. Is-saff ta' alkoħol għandu jkun ċar, jekk le, erġa' poġġi fil-friġġ sakemm ikun hemm separazzjoni ċara.
Meta s-saff ta' l-akoħol ikun ċar, ħu bil-galbu parti minnu (per eżempju 10 ml), mingħajr ma ċċaqlaq is-saff ta' l-ilma, poġġi f'tubu tal-ħġieġ kulur ambra u għalaq sew.
12.4.3. Preparazzjoni tal-kampjun estratt li se jkun analizzat
Ħalli l-estratt (12.4.2) jilħaq temperatura ambjentali.
Ħu 2 ml tas-saff ta' l-akoħol tal-kampjun estratt u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flask ta' l-20 ml, kompli l-volum b'45 % ethanol (4.4), ħallat sew.
12.5. Determinazzjoni
Segwi l-proċedura kif indikat f'8.5.
12.6. Kalkolu tar-riżultati
Uża l-formola li ġejja biex tikkalkula r-riżultati:
Ci = (mis/V)* (areai/areais)*RFi
fejn:
mis |
hija l-piż ta' internal standard (4.3) meħud (12.4.2) (f'milligrammi) |
V |
hija l-volum ta' kampjun mhux magħruf (50 ml) |
RFi |
hija r-response factor (9.1) |
areai |
hija ż-żona tal-peak tat-trans-anethole |
areais |
hija ż-żona tal-peak ta' internal standard |
Ir-riżultati huma espressi fi grammi f'kull litru, sa punt deċimali wieħed.
12.7 Kontroll u assigurazzjoni tal-kwalità
Segwi l-proċedura kif indikat fi 11 hawn fuq.
13. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)
Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:
It-tabelli li ġejjin jagħtu l-valuri għall-anethole.
L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftehma internazzjonalment.
Sena ta' test interlaboratorju |
1 998 |
Numru ta' laboratorji |
16 |
Numru ta' kampjuni |
10 |
Analyte |
anethole |
Kampjuni |
A |
B |
C |
D |
E |
F |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
15 |
15 |
15 |
13 |
16 |
16 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) |
1 |
1 |
1 |
3 |
— |
— |
Numru ta' riżultati aċċettati |
30 |
30 |
30 |
26 |
16 |
16 |
Valur medju g/l |
1,477 |
1,955 |
1,940 |
1,833 |
1,741 |
1,754 |
Repeatability standard deviation (Sr) g/l |
0,022 |
0,033 |
0,034 |
0,017 |
— |
— |
Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) |
1,5 |
1,7 |
1,8 |
0,9 |
— |
— |
Repeatability limit (r) g/l |
0,062 |
0,093 |
0,096 |
0,047 |
— |
— |
Reproducibility standard deviation (SR) g/l |
0,034 |
0,045 |
0,063 |
0,037 |
0,058 |
0,042 |
Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) |
2,3 |
2,3 |
3,2 |
2,0 |
3,3 |
2,4 |
Reproducibility limit (R) g/l |
0,094 |
0,125 |
0,176 |
0,103 |
0,163 |
0,119 |
Tipi ta' kampjuni:
A |
pastis, blind duplicates |
B |
pastis, blind duplicates |
C |
pastis, blind duplicates |
D |
pastis, blind duplicates |
E |
pastis, single duplicates |
F |
pastis, single duplicates |
Kampjuni |
G |
H |
I |
J |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
16 |
14 |
14 |
14 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) |
- |
2 |
1 |
1 |
Numru ta' riżultati aċċettati |
32 |
28 |
28 |
28 |
Valur medju g/l |
0,778 0,530 (*) |
1,742 |
0,351 |
0,599 |
Repeatability standard deviation (Sr) g/l |
0,020 |
0,012 |
0,013 |
0,014 |
Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) |
3,1 |
0,7 |
3,8 |
2,3 |
Repeatability limit (r) g/l |
0,056 |
0,033 |
0,038 |
0,038 |
Reproducibility standard deviation (SR) g/l |
0,031 |
0,029 |
0,021 |
0,030 |
Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) |
4,8 |
1,6 |
5,9 |
5,0 |
Reproducibility limit (R) g/l |
0,088 |
0,080 |
0,058 |
0,084 |
Tipi ta' kampjuni:
G |
ouzo, split levels (*) |
H |
anisi, blind duplicates |
I |
likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi, duplicates |
J |
likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi, duplicates. |
VI. GLYCYRRHIZIC ACID. DETERMINAZZJONI TA' GLYCYRRHIZIC ACID BL-UŻU TAL-KROMATOGRAFIJA HIGH-PERFORMANCE TAL-LIKWIDU
1. Għan
Dan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni ta' glycyrrhizic acid f'xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi bl-użu tal-kromatografija tal-likwidu high performance (HPLC). Ir-Regolament (KEE) Nru. 1576/89 jispeċifika li kull xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi msejjaħ “ pastis ” irid ikun fih bejn 0,05 u 0,5 g ta' glycyrrhizic acid f'kull litru.
2. Referenzi normattivi
ISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.
3. Prinċipju
Il-konċentrazzjoni ta' glycyrrhizic acid hija ddeterminata bl-użu tal-kromatografija tal-likwidu high performance (HPLC) bil-UV detection. Soluzzjoni standard u l-kampjun tat-test huma ffiltrati u huma injettati separatament direttament fis-sistema HPLC.
4. Reaġenti u materjali
Waqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' grad HPLC, absolute ethanol u ilma ta' grad 3 kif definit mill-ISO 3696.
4.1. |
Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5). |
4.2. |
Ammonium glycyrrhizinate, C42H62O16NH3 (Glycyrrhizic acid ammonium salt) (Mol. Wt.: 839,98) (CAS 53956-04-0): purità mill-anqas 90 % (Mol. Wt.: glycyrrhizic acid 822,94). |
4.3. |
Glacial acetic acid, CH3COOH, (CAS 64-19-7). |
4.4. |
Methanol, CH3OH (CAS 67-56-1). |
4.5 |
Ethanol 50 % vol. Għal 1 000 ml f'temperatura ta' 20°C:
—
96 % vol. ethanol (4.1): 521 ml
—
Ilma (2.0): 511 ml.
|
4.6 |
Preparazzjoni ta' l-HPLC elution solutions
4.6.1. Elution solvent A (eżempju) 80 parti (skond il-volum) ta' ilma (2.0) 20 parti (skond il-volum) ta' acetic acid (4.3). Neħħi l-gass mill-elution solvent għal ħames minuti. Nota: Jekk l-ilma wżat ma ġiex mikrofiltrat, aħjar tiffiltra l-elution solvent preparat fuq filter għall-organic solvents b'pore size inqas minn jew fid-daqs ta' 0,45μm. 4.6.2. Elution solvent B Methanol (4.4). |
4.7 |
Preparazzjonijiet ta' soluzzjonijiet standard Is-soluzzjonijiet standard kollha jridu jkunu preparati mill-ġdid wara xahrejn. 4.7.1. Soluzzjoni ta' referenza C Iżen għall-eqreb 0,1 mg, 25 mg ta' ammonium glycyrrhizinate (4.2) f'volumetric flask tal-100 ml. Żid ftit 50 % vol. ethanol (4.5) u dewweb l-ammonium glycyrrhizinate. Meta jkun dab kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5). Iffiltra minn filter għall-organic solvent. 4.7.2. Soluzzjonijiet standard użati biex tiċċekkja l-linearità tar-response ta' l-istrumentazzjoni Soluzzjoni għall-użu ta' 1,0 g/l hija preparata billi tiżen, bl-iktar mod preċiż possibbli 0,1 mg, 100 mg ta' ammonium glycyrrhizinatef'volumetric flask tal-100 ml. Żid ftit 50 % vol. ethanol (4.5) u dewweb l-ammonium glycyrrhizinate. Meta jkun dab kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5). Mill-inqas erba' soluzzjonijiet oħra li jikkorrispondu għal 0,05, 0,1, 0,25 u 0,5 g/l ta' ammonium glycyrrhizinate huma preparati billi jiġu trasferiti bil-pipetta rispettivament 5 ml, 10 ml, 25 ml u 50 ml tas-soluzzjoni għall-użu ta' 1,0 g/l f'volumetric flasks separati tal-100 ml. Imbagħad kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5) u ħallat sew. Iffiltra s-soluzzjonijiet kollha minn filter għall-organic solvents |
5. Apparat
5.1. Sistema ta' separazzjoni
5.1.1 |
Kromatografu high-performance tal-likwidu. |
5.1.2. |
Sistema ta' ppumpjar li tippermettilek li tilħaq u żżomm rata ta' fluss kostanti jew ipprogrammata bi preċiżjoni kbira. |
5.1.3. |
UV spectrophotometric detection system: għandu jkun issettjat fuq 254 nm. |
5.1.4. |
Solvent degassing system. |
5.2. |
Computational integrator jew recorder, li l-performance tiegħu hija kompatibbli mal-bqija tas-sistema. |
5.3. |
Kolonna (eżempju): Materjal: stainless steel jew ħġieġ Diametru ta' ġewwa: 4 sa 5 mm Tul: 100 sa 250 mm Fażi stazzjonarja: cross-linked silica ma' octadecyl functional group (C18) (preferibbilment sferiku), particle size massimu: 5 μm. |
5.4. |
Apparat tal-laboratorju
|
6. Kondizzjonijiet tal-kromatografija
6.1. |
Karatteristiċi ta' l-elution: (eżempju)
—
rata tal-fluss: 1 ml/minuta,
—
solvent A = 30 %,
—
solvent B = 70 %.
|
6.2. |
Detection:
—
UV = 254 nm
|
7. Proċedura
7.1. Preparazzjoni tal-kampjun tax-xorb alkoħoliku
Iffiltra, jekk ikun hemm bżonn, minn filter għall-organic solvents (pore diameter: 0,45 μm).
7.2. Determinazzjoni
Meta l-kondizzjonijiet tal-kromatografija jkunu stabbilew ruħhom,
fejn:
c |
hija l-konċentrazzjoni fi grammi f'kull litru ta' glycyrrhizic acid fix-xorb alkoħoliku li jkun qed jiġi analizzat |
C |
hija l-konċentrazzjoni fi grammi f'kull litru ta' ammonium glycyrrhizinate fis-soluzzjoni ta' referenza |
h |
hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' glycyrrhizic acid tax-xorb alkoħoliku li jkun qed jiġi analizzat |
H |
hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' glycyrrhizic acid tas-soluzzjoni ta' referenza |
P |
hija l-purità tar-referenza ammonium glycyrrhizinate (f' %) |
823 |
hija l-massa ta' mole wieħed ta' glycyrrhizic acid |
840 |
hija l-massa ta' mole wieħed ta' ammonium glycyrrhizinate. |
8. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)
Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:
It-tabella li ġejja tagħti l-valuri għall-glycyrrhizic acid.
L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.
Sena ta' test interlaboratorju |
1 998 |
Numru ta' laboratorji |
16 |
Numru ta' kampjuni |
5 |
Analyte |
glycyrrhizic acid |
Kampjuni |
A |
B |
C |
D |
E |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
13 |
14 |
15 |
16 |
16 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) |
3 |
2 |
1 |
- |
- |
Numru ta' riżultati aċċettati |
26 |
28 |
30 |
32 |
32 |
Valur medju g/l |
0,046 |
0,092 (*) 0,099 |
0,089 |
0,249 |
0,493 |
Repeatability standard deviation (Sr) g/l |
0,001 |
0,001 |
0,001 |
0,002 |
0,003 |
Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) |
1,5 |
1,3 |
0,7 |
1,0 |
0,6 |
Repeatability limit (r) g/l |
0,002 |
0,004 |
0,002 |
0,007 |
0,009 |
Reproducibility standard deviation (SR) g/l |
0,004 |
0,007 |
0,004 |
0,006 |
0,013 |
Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) |
8,6 |
7,2 |
4,0 |
2,5 |
2,7 |
Reproducibility limit (R) g/l |
0,011 |
0,019 |
0,010 |
0,018 |
0,037 |
Tipi ta' kampjuni:
A |
pastis, blind duplicates |
B |
pastis, split levels (*) |
C |
pastis, blind duplicates |
D |
pastis, blind duplicates |
E |
pastis, blind duplicates |
VII. CHALCONES, METODU TAL-KROMATOGRAFIJA TAL-LIKWIDU HIGH-PERFORMANCE BIEX TIVVERIFIKA L-PREŻENZA TA' CHALCONES FIL-PASTIS
1. Għan
Dan il-metodu huwa addattat biex tiddetermina jekk iċ-chalcones humiex preżenti fix-xorb alkoħoliku b'togħma ta' l-anisi jew le. Chalcones huma koloranti naturali tal-familja flavanoid li huma preżenti fl-għeruq tal-likurizja (Glycyrrhiza glabra).
Biex xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi jissejjaħ “ pastis ”, irid ikun fih iċ-chalcones (Regolament (KEE) Nru. 1576/89).
2. Referenzi normattivi
ISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.
3. Prinċipju
Soluzzjoni ta' referenza ta' estratt tal-likurizja hija preparata. Il-preżenza jew l-assenza ta' chalcones hija ddeterminata bl-użu tal-kromatografija high-performance tal-likwidu (HPLC) bil-UV detection.
4. Reaġenti u materjali
Waqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' grad HPLC. L-ethanol għandu jkun 96 % vol. Għandu jintuża ilma ta' grad 3 biss kif definit mill-ISO 3696.
4.1. |
Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5) |
4.2. |
Acetonitrile, CH3CN, (CAS 75-05-8) |
4.3. |
Sustanza ta' referenza: Glycyrrhiza glabra: likurizja, “sweet root” Għeruq tal-likurizja mitħunin mhux fini (Glycyrrhiza glabra). Dimensjonijiet medji tal-biċċiet tawwalin: tul: 10 sa 15 mm, ħxuna: 1 sa 3 mm. |
4.4. |
Sodium acetate, CH3COONa, (CAS 127-09-3) |
4.5. |
Glacial acetic acid, CH3COOH, (CAS 64-19-7) |
4.6. |
Preparazzjoni tas-soluzzjonijiet 4.6.1. Ethanol 50 % volume Għal 1 000 ml f'temperatura ta' 20 °C:
—
96 % vol. ethanol (4.1): 521 ml,
—
Ilma (2.0): 511 ml.
4.6.2. Solvent A: acetonitrile Acetonitrile (4.2) ta' purità għall-analiżi HPLC. Neħħi l-gass 4.6.3. Solvent B: 0,1 M sodium acetate buffer solution, pH 4,66. Iżen 8,203 g ta' sodium acetate (4.4), żid 6,005 g ta' glacial acetic acid (4.5) u kompli għal 1 000 ml bl-ilma (2) f'volumetric flask. |
5. Preparazzjoni ta' l-estratt ta' referenza mill-Glycyrrhiza glabra (4.3)
5.1. |
Iżen 10 g ta' għeruq tal-likurizja (Glycyrrhiza glabra) (4.3) u poġġiha f'distillation flask bil-qiegħ tond.
—
żid 100 ml ta' 50 % vol. ethanol (4.6.1),
—
għalli taħt reflux għal siegħa,
—
iffiltra,
—
poġġi l-likwidu filtrat għalih biex tużah iktar tard
|
5.2. |
Ħu l-estratt tal-likurizja mill-filter
—
poġġih f'distillation flask bil-qiegħ tond,
—
żid 100 ml ta' 50 % vol. ethanol (4.6.1),
—
għalli taħt reflux għal siegħa,
—
iffiltra. Poġġi l-likwidu filtrat għalih biex tużah iktar tard.
|
5.3. |
L-estrazzjoni tal-likurizja trid issir tliet darbiet wara xulxin. |
5.4. |
Ħallat it-tliet likwidi filtrati. |
5.5. |
Evapora s-solvent phase (ta' 5.4.) fuq rotary evaporator. |
5.6. |
Ħu l-estratt residwu (ta' 5.5) ma' 100 ml 50 % vol. ethanol (4.6.1). |
6. Apparat
6.1. Sistema ta' separazzjoni.
6.1.1. |
Kromatografija tal-likwidu high-performance. |
6.1.2. |
Sistema ta' ppumpjar li kapaċi tilħaq u żżomm rata ta' fluss kostanti jew programmata bi pressjoni għolja. |
6.1.3. |
UV/visible spectrophotometric detection system li tista' tkun issettjata fuq 254 u 370 nm. |
6.1.4. |
Solvent degassing system: |
6.1.5. |
Column oven li jista' jkun issettjat għal temperatura ta' 40 ± 0,1 °C. |
6.2. |
Computational integrator jew recorder, li l-performance tiegħu hija kompatibbli mal-bqija tas-sistema ta' separazzjoni. |
6.3. |
Kolonna Materjal: stainless steel jew ħġieġ Diametru ta' ġewwa: 4 sa 5 mm Fażi stazzjonarja: cross-linked silica ma' octadecyl derived functional group (C18), particle size: 5 μm l-iktar (fażi cross-linked). |
6.4. |
Apparat komuni tal-laboratorju, inkluż:
|
6.5. |
Kondizzjonijiet tal-kromatografija (eżempju).
|
7. Proċedura
7.1. Preparazzjoni tal-kampjun tax-xorb alkoħoliku
Iffiltra minn filter għall-organic solvents (pore diameter: 0,45 μm).
7.2. Preparazzjoni ta' l-estratt ta' likurizja residwu (5.6)
Għamel dilution wieħed f'għaxra b'50 % vol. ethanol (4.6.1) qabel l-analiżi.
7.3. Determinazzjoni
7.3.1. |
Injetta 20 μl ta' l-estratt ta' likurizja preparat (7.2). Għamel l-analiżi billi tuża l-kondizzjonijiet tal-kromatografija deskritti hawn fuq (6.5). |
7.3.2. |
Injetta 20 μl tal-kampjun (7.1) (kampjun tax-xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-aniżi). Għamel l-analiżi billi tuża l-kondizzjonijiet tal-kromatografija deskritti hawn fuq (6.5). |
7.3.3. |
Qabbel iż-żewġ chromatograms. Għandu jkun hemm xebh kbir bejn iż-żewġ chromatograms fil-chalcone exit zone (waqt id-detection ta' 370 nm taħt il-kondizzjonijiet ta' l-analiżi deskritti hawn fuq) (ara Tabella 1). |
8. Chromatogram karatteristiku għal pastis
Figura 1
Il-chromatogram li jirriżulta mill-metodu deskritt hawn fuq, li juri l-preżenza ta' chalcones f'“pastis”. Il-Peaks 1 sa 8 huma chalcones u peak 9 hija glycyrrhizic acid.
9. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)
Riżultati tat-test interlaboratorju:
It-tabella li ġejja tagħti l-performance għal rikonoxximent ta' preżenza jew assenza ta' chalcones fil-pastis u f'xorb alkoħoliku bit-togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi.
L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.
Sena ta' test interlaboratorju |
1 998 |
Numru ta' laboratorji |
14 |
Numru ta' kampjuni |
11 |
Analyte |
chalcones |
Kampjuni |
A |
B |
C |
D |
E |
F |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
14 |
14 |
14 |
14 |
14 |
13 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna minn oħrajn (laboratorji) |
— |
— |
— |
— |
— |
1 (*1) |
Numru ta' riżultati aċċettati |
28 |
14 |
14 |
28 |
28 |
26 |
Numru ta' riżultati għall-preżenza ta' chalcones |
28 |
14 |
14 |
0 |
28 |
0 |
Numru ta' riżultati għall-assenza ta' chalcones |
0 |
0 |
0 |
28 |
0 |
26 |
Persentaġġ ta' riżultati tajbin (%) |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
(*1)
Riżultati inkonsistenti bejn iż-żewġ duplicates attribwiti għal żball ta' sampling |
Kampjuni |
G |
H |
I |
J |
K |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
14 |
14 |
14 |
14 |
14 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) |
— |
— |
— |
— |
— |
Numru ta' riżultati aċċettati |
28 |
14 |
14 |
28 |
28 |
Numru ta' riżultati għall-preżenza ta' chalcones |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
Numru ta' riżultati għall-assenza ta' chalcones |
28 |
14 |
14 |
28 |
28 |
Persentaġġ ta' riżultati tajbin (%) |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
Tipi ta' kampjuni:
A |
pastis, blind duplicates |
B |
pastis, single sample |
C |
pastis, single sample |
D |
“pastis” (li ma fihx chalcones), blind duplicates |
E |
pastis (li ma fihx chalcones), blind duplicates |
F |
likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicates |
G |
likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicates |
H |
ouzo (li ma fihx chalcones), single sample |
I |
ouzo (li ma fihx chalcones), single sample |
J |
anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicates |
K |
“pastis” (li ma fihx chalcones), blind duplicates. |
VIII. ZOKKOR TOTALI
1. Kamp tal-applikazzjoni
Il-metodu HPLC–RI jiġi applikat biex jiddetermina t-total ta' zokkor (espress bħala zokkor invertit) fl-ispirti, bl-esklużjoni ta' likuri li fihom il-bajd u l-prodotti tal-ħalib.
Il-metodu ġie vvalidat fi studju interlaboratorju għall-pastis, l-aniżetta distillata, il-likur taċ-ċirasa, il-crème de (segwit bl-isem ta' frotta jew il-materja prima użata) u l-crème de cassis, fil-livelli li jvarjaw bejn 10,86 g/l sa 509,7 g/l. Madankollu, il-linearità tar-rispons tal-istrument ġiet ippruvata għall-medda tal-konċentrazzjoni 2,5 g/l sa 20,0 g/l.
Dan il-metodu mhuwiex maħsub biex jiddetermina l-livelli baxxi ta' zokkor.
2. Referenzi Normattivi
ISO 3696:1987 Ilma għall-użu analitiku — Speċifikazzjonijiet u metodi tal-ittestjar.
3. Prinċipju
Assaġġi ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja tas-soluzzjonijiet taz-zokkor, biex jiġu determinati l-konċentrazzjonijiet tal-glukożju, tal-fruttożju, tas-sukrożju, tal-maltożju u tal-lattożju.
Dan il-metodu juża fażi stazzjonarja alkilammina u d-detezzjoni ta' riffrattometrija differenzjali u qed jingħata bħala eżempju. L-użu ta' reżini ta' skambju anjoniku bħala fażi stazzjonarja għandu jkun possibbli wkoll.
4. Reaġenti u Materjali
4.1. |
Glukożju (CAS 50-99-7), b'purezza tal-inqas 99 %. |
4.2. |
Fruttożju (CAS 57-48-7), b'purezza tal-inqas 99 %. |
4.3. |
Sukrożju (CAS 57-50-1), b'purezza tal-inqas 99 %. |
4.4. |
Lattożju (CAS 5965-66-2), b'purezza tal-inqas 99 %. |
4.5. |
Maltożju monoidrat (CAS 6363-53-7), b'purezza tal-inqas 99 %. |
4.6. |
Aċetonitril pur (CAS 75-05-8) għall-analiżi HPLC. |
4.7. |
Ilma distillat jew demineralizzat, preferibbilment mikrofiltrat. |
4.8. |
Solventi (eżempju) Is-solvent tal-elwizzjoni huwa magħmul minn: 75 parti b'volum ta' aċetonitril (4.6),
25 parti b'volum ta' ilma distillat (4.7).
Għaddi l-elju minnu b'rata baxxa għal 5-10 minuti qabel jintuża biex ineħħi l-gass. Jekk l-ilma użat ma jkunx ġie mikrofiltrat, is-solvent għandu jiġi ffiltrat b'filter għas-solventi organiċi b'daqs tal-pori 0,45 μm jew inqas. |
4.9. |
Etanol assolut (CAS 64-17-5). |
4.10. |
Soluzzjoni ta' etanol (5 %, v/v). |
4.11. |
Tħejjija ta' soluzzjoni ewlenija standard (20 g/L) Iżen 2 g minn kull zokkor li jrid jiġi analizzat (4.1. sa 4.5.), ittrasferihom mingħajr telf fi flask volumetriku ta' 100 mL. (NB 2.11 g ta' maltożju monoidrat huwa ekwivalenti għal 2 g ta' maltożju). Aġġusta għal 100 mL b'5 % alkoħol (4.10), ħawwad u aħżen f'madwar + 4 °C. Ħejji soluzzjoni ewlenija ġdida darba fil-ġimgħa. |
4.12. |
Tħejjija ta' soluzzjonijiet standard tax-xogħol (2,5, 5,0, 7,5, 10,0 u 20,0 g/L) Iddilwa s-soluzzjoni ewlenija, 20 g/L, (4.11) bejn wieħed u ieħor b'5 % vol. ta' soluzzjoni ta' alkoħol (4.10) biex tagħti ħames standards ta' xogħol ta' 2,5, 5,0, 7,5, 10,0 u 20,0 g/L. Iffiltra b'filter b'daqs tal-pori 0,45 μm jew anqas (5.3). |
5. Apparat u Tagħmir
5.1. Is-sistema HPLC tista' tikseb riżoluzzjoni bażi taz-zokkor kollu.
5.1.1. |
Il-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja b'valv tal-injezzjoni b'sitt passaġġi mgħammar b'loop ta' 10 μL jew kwalunkwe apparat ieħor, kemm jekk awtomatiku jew manwali, għall-injezzjoni affidabbli tal-mikrovolumi. |
5.1.2. |
Sistema ta' ppumpjar li tippermettilek tilħaq u żżomm rata ta' fluss kostanti jew ipprogrammata bi preċiżjoni kbira. |
5.1.3. |
Rifrattometru differenzjali. |
5.1.4. |
Integratur jew recorder komputazzjonali, li l-prestazzjoni tiegħu hija kompatibbli mal-bqija tas-sistema. |
5.1.5. |
Prekolonna: Huwa rrakkomandat li tinhemeż prekolonna adattata mal-kolonna analitika. |
5.1.6. |
Kolonna (eżempju):
|
5.1.7. |
Kundizzjonijiet tal-kromatografija (eżempju): Solvent tal-elwizzjoni (4,8), rata ta' fluss: 1 mL/minuta.
Detezzjoni: Rifrattometrija differenzjali.
Biex jiġi żgurat li d-ditekter ikun perfettament stabbli, għandu jinxtegħel ftit sigħat qabel l-użu. Iċ-ċellola ta' referenza trid timtela bis-solvent ta' elwizzjoni. |
5.2. |
Bilanċ analitiku preċiż sa 0,1 mg. |
5.3. |
Apparat għall-filtrazzjoni għal volumi żgħar bl-użu ta' mikromembrana 0,45 μm. |
6. Ħażna tal-kampjuni
Meta jaslu, il-kampjuni jinħażnu f'temperatura tal-kamra qabel l-analiżi.
7. Proċedura
7.1. PARTI A: Tħejjija tal-Kampjun
7.1.1. |
Ħawwad il-kampjun. |
7.1.2. |
Iffiltra l-kampjun minn ġo filtru b'daqs tal-pori 0,45 μm jew inqas (5.3). |
7.2. PARTI B: HPLC
7.2.1. Determinazzjoni
Injetta 10 μL tas-soluzzjoni standard (4.12.) u l-kampjuni (7.1.2.). Agħmel l-analiżi skont il-kundizzjonijiet adattati tal-kromatografija, pereżempju dawk deskritti hawn fuq.
7.2.2. |
Jekk xi massimu ta' kampjun ikollu erja (jew għoli) akbar mill-ogħla livell korrispondenti fl-aktar standard ikkonċentrat, il-kampjun għandu jiġi dilwit bl-ilma ddistillat u analizzat mill-ġdid. |
8. Kalkolu
Qabbel iż-żewġ kromotogrami miksuba mis-soluzzjoni standard u l-ispirtu. Identifika l-qċaċet permezz tal-ħinijiet tagħhom ta' retenzjoni. Kejjel l-erjas (jew l-għoli) tagħhom biex tikkalkula l-konċentrazzjonijiet permezz tal-metodu standard estern. Qis kull dilwizzjoni magħmula fuq il-kampjun.
Ir-riżultat finali huwa s-somma ta' sukrożju, maltożju, lattożju, glukożju u fruttożju, espressa bħala zokkor invertit fi g/L.
Iz-zokkor invertit huwa kkalkulat bħala s-somma tal-monosakkaridi u d-disakkaridi bi proprjetajiet ta' riduzzjoni kollha preżenti, flimkien mal-ammont stojkjometriku ta' glukożju u fruttożju ikkalkulat mis-sukrożju preżenti.
Zokkor invertit (g/L) |
= |
glukożju (g/L) + fruttożju (g/L) + maltożju (g/L) + lattożju (g/L) + (sukrożju (g/L) × 1,05) |
1,05 |
= |
(Piż Molekulari ta' fruttożju + Piż Molekolari ta' glukożju)/Piż Molekulari ta' sukrożju |
9. Karatteristiċi tal-prestazzjoni analitika (Preċiżjoni)
9.1. Ir-riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju
Din id-dejta nkisbet minn studju internazzjonali ta' prestazzjoni analitika mwettaq skont il-proċeduri miftiehma internazzjonalment [1] [2].
Sena tat-test interlaboratorju |
2000 |
Għadd ta' laboratorji |
24 |
Għadd ta' kampjuni |
8 |
[1] “Protocol for the Design, Conduct and Interpretation of Method-Performance Studies” Horwitz, W. (1995) Pure and Applied Chemistry 67, 332-343.
[2] Horwitz, W. (1982) Analytical Chemistry 54, 67 A-76 A.
Tabella 1
Fruttożju, Glukożju, Maltożju
Analita |
Fruttożju |
Glukożju |
Maltożju |
||||
Kampjuni (× 2) |
Crème de Cassis |
Standard (50 g/l) |
Spirti bit-togħma tal-aniżetta |
Crème de Cassis |
Standard (50 g/l) |
Spirti bit-togħma tal-aniżetta |
Standard (10 g/l) |
Valur medju [g/l] |
92,78 |
50,61 |
15,62 |
93,16 |
50,06 |
15,81 |
9,32 |
Għadd ta' Laboratorji mingħajr eċċezzjonijiet |
21 |
22 |
21 |
23 |
19 |
21 |
22 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr, [g/l] |
2,34 |
2,12 |
0,43 |
3,47 |
1,01 |
0,48 |
0,54 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
2,53 |
4,2 |
2,76 |
3,72 |
2,03 |
3,02 |
5,77 |
Limitu ta' ripetibilità, r [g/l] (r = 2,8 × sr) |
6,56 |
5,95 |
1,21 |
9,71 |
2,84 |
1,34 |
1,51 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [g/l] |
7,72 |
3,13 |
0,84 |
9,99 |
2,7 |
0,88 |
1,4 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
8,32 |
6,18 |
5,37 |
10,72 |
5,4 |
5,54 |
15,06 |
Limitu ta' riproduċibilità, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
21,62 |
8,76 |
2,35 |
27,97 |
7,57 |
2,45 |
3,93 |
Tabella 2
Sukrożju
Analita |
Sukrożju |
|||||
Kampjuni |
Pastis |
Ouzo |
Likur taċ-ċirasa |
Crème de Menthe |
Crème de Cassis |
Standard (100 g/l) |
Valur medju [g/l] |
10,83 |
29,2 19,7 (*1) |
103,33 |
349,96 |
319,84 |
99,83 |
Għadd ta' Laboratorji mingħajr eċċezzjonijiet |
19 |
19 |
20 |
18 |
18 |
18 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [g/l] |
0,09 |
0,75 |
2,17 |
5,99 |
4,31 |
1,25 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
0,81 |
3,07 |
2,1 |
1,71 |
1,35 |
1,25 |
Limitu ta' ripetibilità, r [g/l] (r = 2,8 × sr) |
0,25 |
2,1 |
6,07 |
16,76 |
12,06 |
3,49 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [g/l] |
0,79 |
0,92 |
4,18 |
9,94 |
16,11 |
4,63 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
7,31 |
3,76 |
4,05 |
2,84 |
5,04 |
4,64 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
2,22 |
2,57 |
11,7 |
27,84 |
45,12 |
12,97 |
(*1)
livell maqsum |
Tabella 3
Total ta' Zokkor
Kampjuni |
Pastis |
Ouzo |
Spirti bit-togħma tal-aniżetta |
Likur taċ-ċirasa |
Crème de Menthe |
Crème de Cassis |
Standard (220 g/l) |
Valur medju [g/l] |
10,86 |
29,2 19,7 (*1) |
31,59 |
103,33 |
349,73 |
509,69 |
218,78 |
Għadd ta' Laboratorji mingħajr eċċezzjonijiet |
20 |
19 |
20 |
20 |
18 |
18 |
19 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [g/l] |
0,13 |
0,75 |
0,77 |
2,17 |
5,89 |
5,59 |
2,71 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
1,16 |
3,07 |
2,45 |
2,1 |
1,69 |
1,1 |
1,24 |
Limitu ta' ripetibilità, r [g/l] (r = 2,8 × sr) |
0,35 |
2,1 |
2,17 |
6,07 |
16,5 |
15,65 |
7,59 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità sR [g/l] |
0,79 |
0,92 |
1,51 |
4,18 |
9,98 |
14,81 |
8,53 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
7,25 |
3,76 |
4,79 |
4,04 |
2,85 |
2,91 |
3,9 |
Limitu ta' riproduzzjoni R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
2,21 |
2,57 |
4,24 |
11,7 |
27,94 |
41,48 |
23,89 |
(*1)
livell maqsum |
IX. ISFAR TAL-BAJD. DETERMINAZZJONI TAL-KONĊENTRAZZJONI TA' ISFAR TAL-BAJD FIX-XORB ALKOĦOLIKU – METODU FOTOMETRIKU
1. Għan
Dan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni ta' isfar tal-bajd minn 40 sa 250 g/l fil-likuri tal-bajd u l-likuri bil-bajd.
2. Referenzi normattivi
ISO 3696: 1897 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.
3. Prinċipju
L-ethanol-soluble phosphorus compounds li jinsabu fl-isfar tal-bajd huma estratti u l-konċentrazzjoni tagħhom hija determinata bil-fotometrija bħala phosphorus molybdate complex.
4. Reaġenti u materjali
4.1. |
Ilma double-distilled |
4.2. |
Diatomaceous earth |
4.3. |
Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5) |
4.4. |
Soluzzjoni 15 % magnesium acetate (CAS 16674-78-5) |
4.5. |
10 % sulphuric acid (CAS 7664-93-9) |
4.6. |
1 N sulphuric acid. |
4.7. |
0,16 g/l potasssium dihydrogen phosphate (CAS 778-77-0), soluzzjoni KH2PO4 |
4.8. |
Reaġent għad-determinazzjoni tal-fosfat: dewweb 20 g ta' ammonium molybdate (CAS 12054-85-2), (NH4)6Mo7O24.4H2O f'400 ml ilma f'temperatura ta' 50°C; dewweb, f'kontenitur ieħor, gramma ta' ammonium vanadate (CAS 7803-55-6), NH4VO3, f'300 ml ilma jaħraq, ħallih jibred, imbagħad żid 140 ml ta' nitric acid konċentrat (CAS 7697-37-2). Ħallat is-soluzzjonijiet imberrda f'volumetric flask ta' l-1 000 ml u kompli sal-marka ta' l-1 000 ml. |
5. Apparat
5.1. |
Conical flask tal-100 ml |
5.2. |
Ultrasonic bath (jew magnetic stirrer) |
5.3. |
Volumetric flask tal-100 ml |
5.4. |
Banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C |
5.5. |
Filter (Whatman No 4 jew ekwivalenti) |
5.6. |
Crucible tal-porċellana (jew tal-platinum) |
5.7. |
Banju bl-ilma jagħli |
5.8. |
Hot plate |
5.9. |
Muffle furnace |
5.10. |
Volumetric flask tal-50 ml |
5.11. |
Volumetric flask ta' l-20 ml |
5.12. |
Spectrophotometer issettjat fuq 420 nm |
5.13. |
Cuvette ta' ċentimetru. |
6. Kampjuni
Il-kampjuni huma maħżuna f'temperatura ambjentali qabel l-analiżi.
7. Proċedura
7.1. Preparazzjoni tal-kampjun
7.1.1. |
Iżen 10 g tal-kampjun f'conical flask tal-100 ml (5.1). |
7.1.2. |
Żid gradwalment 70 ml ta' ethanol (4.3) f'porzjonijiet żgħar, ħawwad ma' kull żieda, u poġġi f'banju ultrasoniku (5.2) għal 15-il minuta (jew ħawwad it-taħlita b'magnetic stirrer (5.2) għal 10 minuti f'temperatura ambjentali). |
7.1.3. |
Ittrasferixxi l-kontenut tal-flask f'volumetric flask tal-100 ml (5.3) b'washings ta' ethanol (4.3). Aġġusta sal-calibration mark b'ethanol (4.3) u poġġi l-flasks f'water bath f'temperatura ta' 20 °C (5.4). Aġġusta sal-calibration mark f'temperatura ta' 20 °C. |
7.1.4. |
Żid ammont żgħir ta' diatomaceous earth (4.2) u ffiltra (5.5), u armi l-ewwel 20ml. |
7.1.5. |
Ittrasferixxi 25 ml tal-likwidu filtrat f'crucible tal-porċellana (jew tal-platinum) (5.6). Il-likwidu filtrat irid imbagħad jiġi konċentrat b'gentle evaporation f'boiling water bath (5.7), biż-żieda ta' 5ml ta' soluzzjoni 15 % magnesium acetate (4.4). |
7.1.6. |
Poġġi l-crucibles fuq hot plate (5.8) u saħħan sakemm jixxuttaw. |
7.1.7. |
Ġib ir-residwu rmied billi ssaħħan sa l-inkandexxenza f'temperatura ta' 600 °C f'muffle furnace(5.9) sakemm l-irmied isir abjad, minimu ta' siegħa u nofs imma jista' jitħalla matul il-lejl. |
7.1.8. |
Ħu l-irmied ma' 10 ml ta' 10 % sulphuric acid (4.5) u ttrasferieh b'washings ta' ilma distillat (4.1) f'volumetric flask ta' 50 ml (5.10), u imla sal-marka f'temperatura ambjentali b'ilma distillat (4.1).Parti ta' 5 ml ta' din is-soluzzjoni ta' rmied għandha tintuża biex tkun ippreparatas-soluzzjoni tal-kampjun tad-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-fosfat bil-fotometrija. |
7.2. Determinazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-fosfat bil-fotometrija
7.2.1. Soluzzjoni komparattiva
7.2.1.1. |
Poġġi 10 ml ta' 10 % sulphuric acid (4.5) f'volumetric flask tal-50 ml (5.10) u imla sal-marka b'ilma distillat (4.1). |
7.2.1.2. |
Żid ma' parti ta' 5 ml ta' din is-soluzzjoni (7.2.1.1.), li qiegħda f'volumetric flask ta' l-20 ml (5.11), millilitru ta' l N sulphuric acid (4.6) u 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) u kompli sa 20 ml b'ilma distillat (4.1). |
7.2.1.3. |
Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli (5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta. |
7.2.1.4. |
Imla cuvette ta' ċentimetru (5.13) b'din is-soluzzjoni komparattiva. |
7.2.2. Soluzzjoni tal-kampjun
7.2.2.1. |
Żid ma' parti ta' 5 ml tas-soluzzjoni ta' l-irmied (7.1.8), li qiegħda f'volumetric flask ta' l-20 ml (5.11), millilitru ta' 1 N sulphuric acid (4.6) u 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) u kompli sa 20 ml b'ilma distillat (4.1). |
7.2.2.2. |
Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli (5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta. |
7.2.2.3. |
Is-soluzzjoni safra li tiżviluppa hija analizzata mmedjatament bl-ispectrophotometry (5.12) f'cuvette ta' ċentimetru (5.13) b'420 nm kontra s-soluzzjoni komparattiva (7.2.1.4.). |
7.2.3. Calibration curve
7.2.3.1. |
Biex tibni l-calibration curve, żid partijiet ta' 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) f'volumetric flasks ta' l-20 ml (5.11) u li kull wieħed fih 1 N sulphuric acid (4.6) u 0, 2, 4, 6, 8 u 10 ml tas-soluzzjonita' potassium dihydrogen phosphate (4.7) rispettivament, u kompli sal-marka ta' 20 ml b'ilma distillat (4.1). |
7.2.3.2. |
Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli(5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta u analizza bl-ispectrophotometry (5.12) f'cuvette ta' ċentimetru(5.13) b'420 nm kontra s-soluzzjoni komparattiva (7.2.1.4). |
7.2.3.3. |
Binja tal-calibration curve:
|
8. Espressjoni tar-riżultati
Il-kontenut ta' isfar tal-bajd fi g/l huwa kkalkulat mill-formola li ġejja:
Fejn:
110 |
conversion factor għal total P2O5 fi g f'100 g ta' isfar tal-bajd |
mg P2O5 |
valur stabbilit mill-calibration curve |
density |
massa per unit volume (g/ml) tal-likur ibbażat fuq il-bajd f'temperatura ta' 20 °C |
E |
piż tal-likur ibbażat fuq il-bajd fi g |
40 |
dilution factor għal parti ta' 5 ml ta' soluzzjoni ta' rmied. |
9. Karatteristiċi ta' (preċiżjoni)
Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:
It-tabella li ġejja tagħti l-valuri għall-isfar tal-bajd.
L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.
Sena ta' test interlaboratorju |
1 998 |
Numru ta' laboratorji |
24 |
Numru ta' kampjuni |
5 |
Analyte |
isfar tal-bajd |
Kampjuni |
A |
B |
C |
D |
E |
Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna |
19 |
20 |
22 |
20 |
22 |
Numru ta' dawk li varjaw ħafna minn oħrajn (laboratorji) |
3 |
4 |
2 |
4 |
2 |
Numru ta' riżultati aċċettati |
38 |
40 |
44 |
40 |
44 |
Valur medju g/l |
147,3 |
241,1 |
227,4 |
51,9 (*) 72,8 (*) |
191,1 |
Repeatability standard deviation (Sr) g/l |
2,44 |
4,24 |
3,93 |
1,83 |
3,25 |
Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) |
1,7 |
1,8 |
1,8 |
2,9 |
1,7 |
Repeatability limit (r) g/l |
6,8 |
1,9 |
11,0 |
5,1 |
9,1 |
Reproducibility standard deviation (SR) g/l |
5,01 |
6,06 |
6,66 |
3,42 |
6,87 |
Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) |
3,4 |
2,5 |
2,9 |
5,5 |
3,6 |
Reproducibility limit (R) g/l |
14,0 |
17,0 |
18,7 |
9,6 |
19,2 |
Tipi ta' kampjuni
A |
Advocaat, blind duplicates |
B |
Advocaat, blind duplicates |
C |
Advocaat, blind duplicates |
D |
Advocaat (diluted), split levels (*) |
E |
Advocaat, blind duplicates |
X. DETERMINAZZJONI TAL-KOMPOSTI TAL-INJAM LI ĠEJJIN FL-ISPIRTI PERMEZZ TA' KROMATOGRAFIJA LIKWIDA BI PRESTAZZJONI GĦOLJA (HPLC): FURFURAL, 5-IDROSSIMETILFURFURAL, 5-METILFURFURAL, VANILLINA, SIRINGALDEID, KONIFERALDEID, SINAPALDEID, AĊIDU GALLIKU, AĊIDU ELLAGIKU, AĊIDU VANILLIKU, AĊIDU SIRINĠIKU U SKOPOLETINA
1. Kamp tal-applikazzjoni
Il-metodu qiegħed biex jiddetermina s-sustanzi li ġejjin: furfural, 5-idrossimetilfurfural, 5-metilfurfural, vanillina, siringaldeid, koniferaldeid, sinapaldeid, aċidu galliku, aċidu ellagiku, aċidu vanilliku, aċidu sirinġiku u skopoletina, permezz ta' kromatografija likwida bi prestazzjoni għolja.
2. Referenzi normattivi
Il-metodu analitiku rikonoxxut mill-Assemblea Ġenerali tal-Organizzazzjoni Internazzjonali tad-Dielja u l-Inbid (OIV) u ppubblikat mill-OIV bir-referenza OIV-MA-BS-16: R2009.
3. Prinċipju
Id-determinazzjoni bil-kromatografija likwida bi prestazzjoni għolja (HPLC), b'detezzjoni permezz ta' spettrofotometrija ultravjola b'tul ta' mewġ differenti u permezz ta' spettrofluworimetrija.
4. Reaġenti
Ir-reaġenti kollha jridu jkunu ta' kwalità analitika. L-ilma użat irid ikun ilma distillat jew ilma b'tal-anqas purità ekwivalenti. Preferibbilment jintuża ilma mikroffiltrat b'qawwa ta' reżistenza ta' 18,2 M Ω.cm.
4.1. |
96 % vol. ta' alkoħol. |
4.2. |
Metanol bi kwalità għall-HPLC (Solvent B). |
4.3. |
Aċidu aċetiku dilwit għal 0,5 % vol. (Solvent A). |
4.4. |
Fażijiet mobbli: (mogħti biss bħala eżempju) Solvent A (0,5 % aċidu aċetiku) u solvent B (metanol pur). Iffiltra minn membrana (b'porożità ta' 0,45 μm). Neħħi l-gass f'banju ultrasoniku, jekk ikun meħtieġ. |
4.5. |
Standards ta' referenza ta' 99 % purità minima: furfural, 5-idrossimetil furfural, 5-metilfurfural, vanillina, siringaldeid, koniferaldeid, sinapaldeid, aċidu galliku, aċidu ellagiku, aċidu vanilliku, aċidu sirinġiku u skopoletina. |
4.6. |
Soluzzjoni ta' referenza: is-sustanzi standard maħlula f'soluzzjoni ta' 50 % vol. soluzzjoni ta' alkoħol milwiema. Il-konċentrazzjonijiet finali fis-soluzzjoni ta' referenza għandhom ikunu fl-ordni ta': furfural: 5 mg/L; 5-idrossimetil furfural: 10 mg/L; 5-metilfurfural 2 mg/L; vanillina: 5 mg/L; siringaldeid: 10 mg/L; koniferaldeid: 5 mg/L; sinapaldeid: 5 mg/L; aċidu galliku: 10 mg/L; aċidu ellagiku: 10 mg/L; aċidu vanilliku: 5 mg/L; aċidu sirinġiku: 5 mg/L; skopoletina: 0,5 mg/L. |
5. Tagħmir
Apparat standard tal-laboratorju
5.1. |
Kromatografija likwida bi prestazzjoni għolja li tista' taħdem f'modalità ta' gradjent binarju u mgħammra bi:
5.1.1.
Ditekter spettrofotometriku li jista' jkejjel tul ta' mewġ bejn 260 u 340 nm. Madankollu, preferibbilment ikun jaħdem b'ditekter ta' tul ta' mewġ multiplu b'arranġament dijodu jew simili, biex jikkonferma l-purità tal-qċaċet.
5.1.2.
Ditettur spettrofloworimetriku — tul ta' mewġ ta' eċċitament: 354 nm, tul ta' mewġ ta' emissjoni: 446 nm (għad-determinazzjoni ta' traċċi ta' skopoletina; li huwa wkoll osservabbli f'313 nm bl-ispettrofotometrija).
5.1.3.
Apparat ta' injezzjoni li jista' jintroduċi 10 jew 20 μl (pereżempju) tal-kampjun tat-test.
5.1.4.
Kolonna ta' kromatografika likwida bi prestazzjoni għolja, tip RP C18, daqs massimu tal-partiċella 5 μm. |
5.2. |
Siringi għal HPLC. |
5.3. |
Apparat għall-filtrazzjoni b'membrana ta' volumi żgħar. |
5.4. |
Kompjuter-integratur jew rekorder bi prestazzjoni kompatibbli mal-apparat kollu, u b'mod partikolari, għandu jkollu diversi kanali ta' akkwist. |
6. Proċedura
6.1. Tħejjija tas-soluzzjoni li għandha tiġi injettata
Is-soluzzjoni ta' referenza u l-ispirtu huma ffiltrati, jekk ikun meħtieġ, permezz ta' membrana b'dijametru massimu tal-pori ta' 0,45 μm.
6.2. |
Kundizzjonijiet tat-tħaddim kromatografiku: agħmel l-analiżi f'temperatura ambjentali permezz tat-tagħmir deskritt f'(5.1) u bl-użu tal-fażijiet mobbli f'(4.4) bi fluss ta' madwar 0,6 ml kull minuta b'segwiment tal-gradjent ta' hawn taħt (mogħti biss bħala eżempju) Ħin: 0 min 50 min 70 min 90 min Solvent A (aċidu-ilma): 100 % 60 % 100 % 100 % solvent B (metanol): 0 % 40 % 0 % 0 % Innota li f'ċerti każijiet dan il-gradjent għandu jiġu modifikat biex tevita l-koelwizzjoni. |
6.3. |
Determinazzjoni
|
7. Preżentazzjoni tar-riżultati
Ippreżenta l-konċentrazzjoni ta' kull kostitwent f'mg/l.
8. Karatteristiċi tal-prestazzjoni tal-metodu (preċiżjoni)
Din id-dejta nkisbet minn studju internazzjonali ta' prestazzjoni analitika mwettaq skont il-proċeduri miftiehma internazzjonalment [1], [2].
8.1. Furfural
Analita |
Furfural |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
15 |
15 |
15 |
15 |
15 |
15 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
14 |
12 |
13 |
14 |
13 |
13 |
Valur medju [mg/l] |
2,9 |
1,2 |
1,7 |
10,6 |
15,3 |
13,9 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,04 |
0,05 |
0,04 |
0,18 |
0,23 |
0,20 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
1,4 |
4,5 |
2,3 |
1,7 |
1,5 |
1,5 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,1 |
0,2 |
0,1 |
0,5 |
0,6 |
0,6 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,24 |
0,18 |
0,09 |
1,4 |
0,49 |
0,69 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
8 |
15 |
5 |
13 |
3 |
5 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,7 |
0,5 |
0,3 |
3,8 |
1,4 |
1,9 |
8.2. 5-idrossimetilfurfural
Analita |
5-idrossimetilfurfural |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
16 |
16 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
14 |
14 |
14 |
14 |
14 |
14 |
Valur medju [mg/l] |
5,0 |
11,1 |
9,4 |
33,7 |
5,8 |
17,5 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,09 |
0,09 |
0,09 |
0,42 |
0,07 |
0,13 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
1,7 |
0,8 |
1,0 |
1,3 |
1,2 |
0,8 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,2 |
0,3 |
0,3 |
1,2 |
0,2 |
0,4 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,39 |
1,01 |
0,50 |
4,5 |
0,4 |
1,6 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
8 |
9 |
5 |
13 |
7 |
9 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
1,1 |
2,8 |
1,4 |
12,5 |
1,1 |
4,6 |
8.3. 5-Metilfurfural
Analita |
5-Metilfurfural |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
11 |
11 |
11 |
11 |
11 |
11 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
11 |
11 |
8 |
11 |
10 |
11 |
Valur medju [mg/l] |
0,1 |
0,2 |
0,1 |
0,5 |
1,7 |
0,8 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,01 |
0,01 |
0,02 |
0,02 |
0,03 |
0,07 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
10,7 |
6,1 |
13,6 |
4,7 |
2,0 |
10,0 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,0 |
0,0 |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
0,2 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,03 |
0,04 |
0,03 |
0,18 |
0,20 |
0,26 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
35 |
18 |
22 |
39 |
12 |
35 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
0,5 |
0,6 |
0,7 |
8.4. Vanillina
Analita |
Vanillina |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
16 |
15 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
16 |
15 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Valur medju [mg/l] |
0,5 |
0,2 |
1,2 |
1,2 |
3,2 |
3,9 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,03 |
0,02 |
0,06 |
0,11 |
0,11 |
0,09 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
6,8 |
9,6 |
4,6 |
8,9 |
3,5 |
2,3 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,1 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
0,3 |
0,3 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,09 |
0,06 |
0,18 |
0,27 |
0,41 |
0,62 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
19 |
25 |
15 |
22 |
13 |
16 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,3 |
0,2 |
0,5 |
0,8 |
1,2 |
1,7 |
8.5. Siringaldeid
Analita |
Siringaldeid |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
16 |
15 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
13 |
13 |
13 |
12 |
14 |
13 |
Valur medju [mg/l] |
1,0 |
0,2 |
4,8 |
3,2 |
10,5 |
9,7 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,03 |
0,02 |
0,04 |
0,08 |
0,10 |
0,09 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
2,6 |
8,1 |
0,8 |
2,6 |
0,9 |
0,9 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
0,3 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,08 |
0,07 |
0,23 |
0,19 |
0,39 |
0,43 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
8 |
33 |
5 |
6 |
4 |
4 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,2 |
0,2 |
0,7 |
0,5 |
1,1 |
1,2 |
8.6. Koniferaldeid
Analita |
Koniferaldeid |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
13 |
12 |
13 |
12 |
13 |
13 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
12 |
12 |
13 |
12 |
13 |
13 |
Valur medju [mg/l] |
0,2 |
0,2 |
0,6 |
0,8 |
4,6 |
1,3 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,02 |
0,02 |
0,03 |
0,03 |
0,09 |
0,06 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
9,2 |
9,8 |
4,6 |
4,3 |
1,9 |
4,5 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,04 |
0,04 |
0,07 |
0,09 |
0,24 |
0,16 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,04 |
0,04 |
0,11 |
0,18 |
0,38 |
0,25 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
23 |
27 |
21 |
23 |
8 |
19 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,1 |
0,1 |
0,3 |
0,5 |
1,1 |
0,7 |
8.7. Sinapaldeid
Analita |
Sinapaldeid |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
14 |
14 |
14 |
14 |
15 |
14 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
14 |
13 |
12 |
13 |
13 |
12 |
Valur medju [mg/l] |
0,3 |
0,2 |
0,2 |
1,6 |
8,3 |
0,3 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,02 |
0,01 |
0,02 |
0,06 |
0,14 |
0,03 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
7,5 |
4,6 |
11,2 |
3,7 |
1,6 |
11,4 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,06 |
0,03 |
0,06 |
0,17 |
0,38 |
0,08 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,09 |
0,05 |
0,08 |
0,20 |
0,81 |
0,18 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
31 |
27 |
46 |
13 |
10 |
73 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,6 |
2,3 |
0,5 |
8.8. aċidu galliku
Analita |
Aċidu galliku |
|||||
Kampjun |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
16 |
15 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
15 |
14 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Valur medju [mg/l] |
1,2 |
0,4 |
2,0 |
6,1 |
7,3 |
21,8 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,07 |
0,04 |
0,06 |
0,18 |
0,18 |
0,60 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
6,1 |
8,1 |
2,9 |
3,0 |
2,4 |
2,8 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,2 |
0,1 |
0,2 |
0,5 |
0,5 |
1,7 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,43 |
0,20 |
0,62 |
3,3 |
2,2 |
7,7 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
36 |
47 |
31 |
53 |
30 |
35 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
1,2 |
0,6 |
1,7 |
9,1 |
6,2 |
21,7 |
8.9. Aċidu ellagiku
Analita |
Aċidu ellagiku |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
6 |
Valur medju [mg/l] |
3,2 |
1,0 |
9,5 |
13 |
13 |
36 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,20 |
0,16 |
0,30 |
0,41 |
0,95 |
0,34 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
6,3 |
16 |
3,2 |
3,2 |
7,4 |
1,0 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,6 |
0,4 |
0,9 |
1,1 |
2,7 |
1,0 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
1,41 |
0,42 |
4,0 |
5,0 |
4,9 |
14 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
44 |
43 |
42 |
39 |
39 |
40 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
4,0 |
1,2 |
11 |
14 |
14 |
40 |
8.10. Aċidu vanilliku
Analita |
Aċidu vanilliku |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
15 |
15 |
15 |
15 |
15 |
15 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
12 |
11 |
14 |
14 |
15 |
14 |
Valur medju [mg/l] |
0,2 |
0,2 |
1,5 |
0,8 |
2,4 |
2,7 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,03 |
0,04 |
0,03 |
0,10 |
0,13 |
0,21 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
14,2 |
16,5 |
2,3 |
12,6 |
5,3 |
7,7 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
0,3 |
0,4 |
0,6 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,06 |
0,05 |
0,51 |
0,2 |
1,22 |
0,70 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
28 |
20 |
35 |
31 |
51 |
26 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,2 |
0,1 |
1,4 |
0,7 |
3,4 |
2,0 |
8.11. Aċidu sirinġiku
Analita |
Aċidu sirinġiku |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
16 |
15 |
16 |
16 |
16 |
16 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
16 |
15 |
15 |
15 |
16 |
15 |
Valur medju [mg/l] |
0,4 |
0,2 |
2,5 |
1,4 |
3,4 |
4,8 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,03 |
0,02 |
0,06 |
0,13 |
0,08 |
0,11 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
6,7 |
12,6 |
2,3 |
9,0 |
2,3 |
2,3 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,1 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,2 |
0,3 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,08 |
0,05 |
0,29 |
0,26 |
0,43 |
0,67 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
19 |
29 |
11 |
18 |
13 |
14 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,2 |
0,1 |
0,8 |
0,7 |
1,2 |
1,9 |
8.12. Skopoletina
Analita |
Skopoletina |
|||||
Kampjuni |
Whisky |
Brandy |
Rum |
Cognac 1 |
Bourbon |
Cognac 2 |
Għadd ta' laboratorji parteċipanti |
10 |
10 |
10 |
10 |
10 |
10 |
Għadd ta' riżultati aċċettati (laboratorji) |
9 |
8 |
9 |
8 |
8 |
8 |
Valur medju [mg/l] |
0,09 |
0,04 |
0,11 |
0,04 |
0,65 |
0,15 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, sr [mg/l] |
0,0024 |
0,0008 |
0,0018 |
0,0014 |
0,0054 |
0,0040 |
Devjazzjoni standard ta' ripetibilità, RSDr [%] |
2,6 |
2,2 |
1,6 |
3,3 |
0,8 |
2,7 |
Limitu ta' ripetibilità, r [mg/l] (r = 2,8 × sr) |
0,007 |
0,002 |
0,005 |
0,004 |
0,015 |
0,011 |
Devjazzjoni standard ta' riproduċibilità, sR [mg/l] |
0,01 |
0,01 |
0,03 |
0,01 |
0,09 |
0,02 |
Devjazzjoni standard relattiva ta' riproduċibbilità, RSDR [%] |
15 |
16 |
23 |
17 |
15 |
15 |
Limitu ta' riproduzzjoni, R [g/l] (R = 2,8 × sR) |
0,04 |
0,02 |
0,07 |
0,02 |
0,26 |
0,06 |
[1] “Protocol for the Design, Conduct and Interpretation of Method- Performance Studies” Horwitz, W. (1995) Pure and Applied Chemistry 67, 332-343
[2] Horwitz, W. (1982) Analytical Chemistry 54, 67 A-76 A.
XI. DETERMINAZZJONI TAL-KONTENUT 14C FL-ETANOL
1. Introduzzjoni
Id-determinazzjoni tal-kontenut 14C fl-etanol tippermetti li ssir distinzjoni bejn alkoħol minn karburant tal-fossili (sinteżi tal-alkoħol) u alkoħol minn materja prima reċenti (fermentazzjoni ta’ alkoħol).
2. Definizzjoni
Il-kontenut ta’ 14C ta’ etanol għandu jitqies bħala l-kontenut ta’ 14C iddeterminat bl-użu tal-metodu deskritt hawnhekk jew il-metodu deskritt fl-istandard EN 16640 Metodu C.
Il-kontenut naturali ta’ 14C fl-atmosfera (il-valur ta’ referenza), li huwa assorbit minn veġetazzjoni ħajja permezz ta’ assimilazzjoni, mhuwiex valur kostanti. Għalhekk, il-valur ta’ referenza huwa iddeterminat fuq etanol minn materja prima tal-aktar perjodu reċenti ta’ veġetazzjoni. Dan il-valur annwali ta’ referenza huwa iddeterminat skont l-istandard EN 16640. Madankollu, valur ta’ referenza ieħor jista’ jiġi aċċettat meta jiġi ċċertifikat minn korp akkreditat.
3. Prinċipju
Il-kontenut 14C ta’ kampjuni li jkun fihom alkoħol b’massa ta’ etanol ta’ mill-anqas 85 % huwa iddeterminat direttament permezz ta’ għadd bix-xintillazzjoni likwida.
4. Reaġenti
4.1. Xintillatur tat-toluwen
5,0 g 2,5-difeniloxażol (PPO)
0,5 g p-bis-[4-metil-5-feniloxażolil(2)]-benżen (dimetil-POPOP) f’litru wieħed tat-toluwen ta’ grad analitiku.
Xintillaturi tat-toluwen kummerċjali lesti għall-użu ta’ din il-kompożizzjoni jistgħu jintużaw ukoll.
4.2. Standard 14C
n-Eżadekan 14C b’attività ta’ madwar 1 × 106 dpm/g (madwar 1,67 × 106 cBq/g) u eżattezza garantita ta’ attività iddeterminata ta’ ± 2 % rel.
4.3. etanol ħieles mill-14C
Alkoħol ta’ sinteżi minn materja prima ta’ oriġini mill-fossili b’massa ta’ etanol ta’ mill-inqas 85 %, biex jiġi iddeterminat l-isfond.
4.4. Alkoħol minn materja prima reċenti tal-aktar perjodu reċenti ta’ veġetazzjoni b’massa ta’ etanol ta’ mill-inqas 85 %, bħala materjal ta’ referenza.
5. Apparat
5.1. Spettrometru ta’ xintillazzjoni ta’ likwidu minn diversi kanali bi proċessur u standardizzazzjoni awtomatika esterna u wiri tal-istandard estern/proporzjon ta’ kanal (disinn normali: kanal ta’ tlett metri u żewġ kanali esterni standard).
5.2. Tubu b’għadd ta’ potassju baxx adattat għall-ispettrometru, b’tappijiet oskuri bil-kamin li jkun fihom daħla tal-polietilen.
5.3. Pipetti volumetriċi, 10 ml.
5.4. Dożatur awtomatiku ta’ 10 ml.
5.5. Flixkun ta’ 250 ml bil-qiegħ tond b’tapp ta’ ħġieġ matt.
5.6. Apparat tad-distillazzjoni tal-alkoħol b’mantell tat-tisħin, pereżempju tip Micko.
5.7. Siringa mikrolitru ta’ 50 μl.
5.8. Lembut tal-piknometru, piknometri, 25 ml u 50 ml. Jenħtieġ li jkun permess tagħmir ekwivalenti alternattiv, bħal densimetrija elettronika.
5.9. Termostat bi stabilità tat-temperatura ta’ ± 0,01 °C.
6. Proċedura
6.1. Aġġustament tat-tagħmir
It-tagħmir għandu jkun aġġustat skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Il-kondizzjonijiet tal-kejl ikunu l-aħjar meta l-valur E2/B, l-indiċi tal-kwalità, jkun fl-aqwa tiegħu.
E = effiċjenza
B = sfond
Kanali ta’ żewġ metri biss huma ottimizzati. It-tielet wieħed jitħalla miftuħ kollu għall-finijiet ta’ kontroll.
6.2. Għażla ta’ tubi tal-għadd
Numru akbar ta’ tubi tal-għadd milli jkun meħtieġ aktar tard jiġu mimlija kull wieħed b’10 ml ta’ etanol sintezzizat ħieles mill-14C u 10 ml ta’ xintillatur tat-toluwen. Kull wieħed jitkejjel għal tal-anqas 4 ċikli × 100 minuta. It-tubi li l-isfondi tagħhom ivarjaw b’aktar minn ± 1 % rel. mill-medja jitwarrbu. Tubi ġodda mill-fabbrika u mill-istess lott biss jistgħu jintużaw.
6.3. Determinazzjoni tal-istandard estern/proporzjon tal-kanal (ESCR).
Matul il-proċess tal-issettjar tal-kanali (punt 6.1) l-ESCR jiġi iddeterminat billi jintuża l-programm adattat tal-kompjuter meta tiġi iddeterminata l-effiċjenza. L-istandard estern użat huwa 137ċesju, li jkun diġà ġie inkluż mill-manifattur.
6.4. Preparazzjoni tal-kampjun
Kampjuni li jkollhom kontenut ta’ etanol ta’ massa ta’ mill-anqas 85 % u ħieles minn impuritajiet, li jassorbu f’tul tal-mewġa ta’ inqas minn 450 nm jistgħu jitkejlu. Ir-residwu baxx ta’ esteri u aldeidi ma jkollu l-ebda effett ta’ tfixkil. Il-kontenut tal-alkoħol tal-kampjun huwa iddeterminat minn qabel b’approssimazzjoni ta’ 0,1 %.
7. Kejl tal-kampjuni billi jintuża l-istandard estern
7.1. Kampjuni b’assorbenza baxxa kif deskritti fil-punt 6.4 b’valur ESCR ta’ madwar 1,8 jistgħu jitkejlu permezz tal-ESCR, li jipprovdi miżura tal-proporzjon tal-effiċjenza.
7.2. Kejl
10 ml minn kul wieħed mill-kampjuni preparati skont il-punt 6.4 jiġu miġbuda b’pipetti f’tubu tal-għadd magħżul ivverifikat għall-isfond u jiżdiedu 10 ml ta’ xintillatur tat-toluwen permezz ta’ dożatur awtomatiku. Il-kampjuni fit-tubi jiġu omoġenizzati permezz ta’ movimenti ta’ tidwir adattati; il-likwidu m’għandux jitħalla jxarrab il-polietilen imdaħħal fit-tap bil-kamin. Tubu li jkun fih etanol fossili ħieles mill-14C jiġi preparat bl-istess mod biex ikejjel l-isfond. Sabiex tivverifika l-valur rilevanti annwali ta’ 14C jiġi preparat duplikat ta’ etanol reċenti mill-aħħar perjodu ta’ veġetazzjoni, b’tubu jiġi mħallat bl-istandard intern, ara l-punt 8.
Il-kampjuni ta’ kontroll u tal-isfond jitqiegħdu fil-bidu tas-serje ta’ kejl, li għandu jkun fiha mhux aktar minn 10 kampjuni għall-analiżi. Il-ħin totali ta’ kejl għal kull kampjun huwa tal-anqas ta’ 2 × 100 minuta, bil-kampjuni individwali jitkejlu f’partijiet ta’ stadji ta’ 100 minuta sabiex xi ċaqliq tat-tagħmir jew xi difett ieħor jinkixef. (Għalhekk ċiklu wieħed jikkorrispondi ma’ intervall ta’ kejl ta’ 100 minuta għal kull kampjun).
Il-kampjuni tal-isfond u ta’ kontroll għandhom jitħejjew friski kull erba’ ġimgħat.
Fil-każ ta’ kampjuni estinti (ESCR madwar 1,8) l-effiċjenza hija affettwata b’mod negliġibbli bil-bidla f’dan il-valur. Jekk il-bidla hija fil-limitu ta’ ± 5 % rel. tista’ tkun mistennija l-istess effiċjenza. Għal kampjuni aktar estinti, bħal alkoħol żnaturat, l-effiċjenza tista’ tiġi iddeterminata permezz tal-korrezzjoni tal-estinzjoni tal-graff. Jekk programm adattat tal-kompjuter ma jkunx disponibbli għandu jintuża l-istandard intern, u dan jagħti riżultat mhux ambigwu.
8. Kampjuni ta’ kejl billi jintuża l-istandard intern eżadekan14C
8.1. Proċedura
Kampjuni ta’ kontroll u tal-isfond (etanol reċenti u mill-fossili) u l-materjal mhux magħruf jitkejlu bħala duplikati. Kampjun tad-duplikat jiġi preparat f’tubu mhux magħżul u kwantità dożata eżatta (30 μl) ta’ eżadekan14C tiżdied bħala standard intern (attività miżjuda ta’ madwar 26 269 dpm/gC bejn wieħed u ieħor 43 782 cBq/gC). Għall-preparazzjoni tal-kampjun u l-ħin tal-kejl tal-kampjuni l-oħra ara l-punt 7.2, iżda l-ħin ta’ kejl għall-kampjuni bl-istandard intern jista’ jitnaqqas b’xi ħames minuti bi ssettjar minn qabel f’105 taħbita. Jintuża duplikat wieħed għal kull kampjun tal-isfond u ta’ kontroll jintużaw għas-serje tal-kejl; dawn jitqiegħdu fil-bidu tas-serje tal-kejl.
8.2. Immaniġġar tal-istandard intern u t-tubi tal-għadd
Biex tiġi evitata l-kontaminazzjoni waqt il-kejl bl-istandard intern dawn għandhom jinħażnu u jiġu mmaniġġati ’l bogħod miż-żona fejn il-kampjuni għall-analiżi huma preparati u mkejla. Wara l-kejl it-tubi użati għall-isfond jistgħu jerġgħu jintużaw. Il-tappijiet bil-kamin u t-tubi li jkun fihom l-istandard intern għandhom jintremew.
9. Espressjoni tar-riżultati
9.1. L-unità tal-attività ta’ sustanza radjuattiva hija l-becquerel; 1 Bq = 1 diżintegrazzjoni/sec.
L-indikazzjoni tar-radjuattività speċifika hija espressa bħala becquerels relattivi għal gramma waħda karbonju = Bq/gC.
Biex jinkisbu riżultati aktar prattiċi, dawn għandhom jiġu espressi f’centi-bequerels = cBq/gC.
Id-deskrizzjonijiet u l-formoli użati fil-letteratura, ibbażati fuq dpm, jistgħu jintużaw ukoll. Biex tikseb figuri li jikkorrispondu f’cBq sempliċement immoltiplika l-figura dpm b’100/60.
9.2. Espressjoni tar-riżultati bl-istandard estern
9.3. Espressjoni tar-riżultati bl-istandard intern
9.4. Abbrevjazzjonijiet
cpmpr |
= |
ir-rata medja tal-għadd tal-kampjun fuq il-ħin totali tal-kejl. |
cpmNE |
= |
ir-rata medja tal-isfond tat-taħbit kalkolata bl-istess mod. |
cpmIS |
= |
ir-rata tal-għadd tal-kampjuni, bl-istandard intern. |
dpmIS |
= |
il-kwantità ta’ standard intern miżjud (kalibrazzjoni dpm ta’ radjuattività). |
V |
= |
il-volum tal-kampjuni użati f’ml. |
F |
= |
il-kontenut fi grammi ta’ alkoħol għal kull ml li jikkorrispondi mal-konċentrazzjoni tiegħu. |
Z |
= |
l-effiċjenza li tikkorrispondi mal-valur ESCR. |
1,918 |
= |
in-numru ta’ grammi ta’ alkoħol għal kull gramma ta’ karbonju. |
10. Affidabbiltà tal-metodu
10.1. Ripetibbiltà (r)
r = 0,632 cBq/g C; S(r) = ± 0,223 cBq/g C
10.2. Riproduċibilità (R)
S(r) = ± 0,821 cBq/g C S(R) = ± 0,290 cBq/g C.
( 1 ) Ir-Regolament (UE) 2019/787 tal-Parlament Ewropew u tal-Kunsill tas-17 ta’ April 2019 dwar id-definizzjoni, id-deskrizzjoni, il-preżentazzjoni u t-tikkettar ta’ xorb spirituż, l-użu tal-ismijiet ta’ xorb spirituż fil-preżentazzjoni u t-tikkettar ta’ oġġetti tal-ikel oħra, il-protezzjoni ta’ indikazzjonijiet ġeografiċi ta’ xorb spirituż, l-użu ta’ alkoħol etiliku u distillati ta’ oriġini agrikola f’xorb alkoħoliku, u li jħassar ir-Regolament (KE) Nru 110/2008 (ĠU L 130, 17.5.2019, p. 1).