13/Sv. 012

HR

Službeni list Europske unije

1

---

---

/

SLUŽBENI LIST EUROPSKE UNIJE

01.07.2013.

---

Uvodna napomena

U skladu s člankom 52. Akta o uvjetima pristupanja Republike Hrvatske i prilagodbama Ugovora o Europskoj uniji, Ugovora o funkcioniranju Europske unije i Ugovora o osnivanju Europske zajednice za atomsku energiju, potpisanog 9. prosinca 2011., tekstovi akata institucija donesenih prije pristupanja koje su te institucije sastavile na hrvatskom jeziku od dana pristupanja vjerodostojni su pod istim uvjetima kao i tekstovi sastavljeni na sadašnjim službenim jezicima. Tim se člankom također predviđa da se tekstovi objavljuju u Službenom listu Europske unije ako su tekstovi na sadašnjim jezicima tako objavljeni.

U skladu s tim člankom objavljuje se posebno izdanje Službenog lista Europske unije na hrvatskom jeziku, koje sadržava tekstove obvezujućih općih akata. To izdanje obuhvaća akte usvojene u razdoblju od 1952. godine do dana pristupanja.

Objavljeni tekstovi podijeljeni su na 20 poglavlja koja slijede raspored iz Registra važećeg zakonodavstva Europske unije, i to:

01	Opća, financijska i institucionalna pitanja
02	Carinska unija i slobodno kretanje robe
03	Poljoprivreda
04	Ribarstvo
05	Sloboda kretanja radnika i socijalna politika
06	Pravo poslovnog nastana i sloboda pružanja usluga
07	Prometna politika
08	Politika tržišnog natjecanja
09	Porezi
10	Ekonomska i monetarna politika i slobodno kretanje kapitala
11	Vanjski odnosi
12	Energetika
13	Industrijska politika i unutarnje tržište
14	Regionalna politika i koordinacija strukturnih instrumenata
15	Okoliš, potrošači i zaštita zdravlja
16	Znanost, informiranje, obrazovanje i kultura
17	Pravo poduzećâ
18	Zajednička vanjska i sigurnosna politika
19	Područje slobode, sigurnosti i pravde
20	Europa građana

Spomenuti registar, koji vodi Ured za publikacije, dostupan je na internetu (eur-lex.europa.eu) na službenim jezicima Europske unije. Bibliografskoj bilješci svakog akta može se pristupiti putem registra, gdje se mogu pronaći upućivanja na posebno izdanje i na ostale analitičke metapodatke.

Akti objavljeni u posebnom izdanju, uz određene iznimke, objavljuju se u obliku u kojem su bili objavljeni u Službenom listu na izvornim službenim jezicima. Stoga pri uporabi posebnog izdanja treba uzeti u obzir naknadne izmjene, prilagodbe ili odstupanja koje su usvojile institucije, Europska središnja banka ili su predviđene u Aktu o pristupanju.

Iznimno, kad se opsežni tehnički prilozi poslije zamijene novim prilozima, navodi se samo upućivanje na posljednji akt koji zamjenjuje prilog. Takav je slučaj u pojedinim aktima koji sadržavaju popise carinskih oznaka (poglavlje 02), aktima o prijevozu opasnih tvari, aktima o pakiranju i označivanju tih tvari (poglavlja 07 i 13) te nekima od protokola i priloga Sporazumu o Europskom gospodarskom prostoru.

Također, Pravilnik o osoblju objavljuje se kao pročišćeni tekst koji obuhvaća sve izmjene do kraja 2012. godine. Daljnje izmjene objavljuju se u izvornom obliku.

Posebno izdanje sadržava dva sustava numeracije stranica:

i.

izvorna numeracija stranica, zajedno s datumom objave francuskog, talijanskog, njemačkog i nizozemskog izdanja Službenog lista, engleskog i danskog izdanja od 1. siječnja 1973., grčkog izdanja od 1. siječnja 1981., španjolskog i portugalskog izdanja od 1. siječnja 1986., finskog i švedskog izdanja od 1. siječnja 1995., češkog, estonskog, latvijskog, litavskog, mađarskog, malteškog, poljskog, slovačkog i slovenskog izdanja od 1. svibnja 2004. te bugarskog i rumunjskog izdanja od 1. siječnja 2007. U numeraciji stranica postoje praznine jer svi akti objavljeni u to vrijeme nisu objavljeni u posebnom izdanju. Kada se prilikom citiranja akata upućuje na Službeni list, potrebno je navesti stranicu sukladno izvornoj numeraciji;

ii.	numeracija stranica posebnog izdanja neprekinuta je i ne smije se navoditi prilikom citiranja akata.

Do lipnja 1967. numeracija stranica u Službenom listu počinjala je iznova svake godine. Od tada nadalje svaki broj Službenog lista počinje na prvoj stranici.

Od 1. siječnja 1968. Službeni list podijeljen je na dva dijela:

—	Zakonodavstvo („L”),

—	Informacije i objave („C”).

Od 1. veljače 2003. prijašnje ime „Službeni list Europskih zajednica” promijenjeno je, na temelju Ugovora iz Nice, u „Službeni list Europske unije”.

---

13/Sv. 012

HR

Službeni list Europske unije

3

---

31979L0796

---

L 239/24

SLUŽBENI LIST EUROPSKE UNIJE

26.07.1979.

---

PRVA DIREKTIVA KOMISIJE

od 26. srpnja 1979.

o utvrđivanju metoda analize koje se koriste u Zajednici za ispitivanje određenih šećera namijenjenih prehrani ljudi

(79/796/EEZ)

KOMISIJA EUROPSKIH ZAJEDNICA,

uzimajući u obzir Ugovor o osnivanju Europske ekonomske zajednice,

uzimajući u obzir Direktivu Vijeća 73/437/EEZ od 11. prosinca 1973. o usklađivanju zakonodavstava država članica u odnosu na određene šećere namijenjene prehrani ljudi (1), a posebno njezin članak 11.,

budući da se člankom 11. te Direktive utvrđuje da se sastav određenih šećera mora provjeriti metodama analize koje se primjenjuju unutar Zajednice;

budući da je poželjno da se donese početni niz metoda za koje su provedene studije;

budući da su u Prilogu Direktivi 73/437/EEZ utvrđene metode za određivanje tipa boje za šećer ili bijeli šećer i za ekstra bijeli šećer, metoda mjerenja vodljivosti pepela u ekstra bijelom šećeru, u otopini šećera, u otopini invertnog šećera i u sirupu invertnog šećera te metoda određivanja boje u otopini ekstra bijelog šećera i otopini šećera;

budući da bi, s druge strane bilo uputno, dok se ne formuliraju daljnje metode Zajednice za određivanje reducirajućih šećera, dopustiti državama članicama mogućnost da nastave odobravati upotrebu Laneove i Eynonove metode (u Prilogu II. točki III. 3. i točki III. 4., metode 7. i 8.) umjesto Luff-Schoorlove metode (u Prilogu II. točki III. 3. i točki III. 4., metoda 6.);

budući da su metode analize predviđene ovom Direktivom u skladu s mišljenjem Stalnog odbora za hranu,

DONIJELA JE OVU DIREKTIVU:

Članak 1.

1.   Države članice zahtijevaju da se analize potrebne za provjeru kriterija navedenih u Prilogu I., izvode u skladu s metodama opisanim u Prilogu II. ovoj Direktivi.

2.   Ne dovodeći u pitanje drugi podstavak, za određivanje reducirajućih šećera u sljedećim šećerima upotrebljavat će se Luff-Schoorlova metoda (u Prilogu II., metoda 6.):

—	otopini šećera,

—	otopini bijelog šećera,

—	otopini invertnog šećera,

—	otopini bijelog invertnog šećera,

—	sirupu invertnog šećera,

—	glukoznom sirupu,

—	osušenom glukoznom sirupu,

—	dekstroza monohidratu,

—	bezvodnoj dekstrozi.

Države članice, međutim, mogu na svom državnom području za određivanje reducirajućih šećera u jednom ili više gore navedenih šećera zahtijevati upotrebu Laneove i Eynonove metode (Prilog II., metode 7. i/ili 8. prema potrebi).

3.   Ako država članica koristi mogućnost iz stavka 2. drugog podstavka, ona o tome odmah obavješćuje Komisiju i druge države članice.

Članak 2.

Države članice donose zakone i druge propise potrebne za usklađivanje s ovom Direktivom najkasnije 18 mjeseci nakon njezine objave. One o tome odmah obavješćuju Komisiju.

Članak 3.

Ova je Direktiva upućena državama članicama.

---

(1)  SL L 356, 27.12.1973., str. 71.

---

PRILOG I.

PODRUČJE PRIMJENE METODA ANALIZE KOJE SE KORISTE U ZAJEDNICI ZA ODREĐENE ŠEĆERE NAMIJENJENE PREHRANI LJUDI

I.   Određivanje gubitka mase sušenjem u:
— polubijelom šećeru		(upotrebom metode 1., iz Priloga II.)
— šećeru ili bijelom šećeru
— ekstra bijelom šećeru
II.   Određivanje suhe tvari u:
II.1.	— glukoznom sirupu	(upotrebom metode 2., iz Priloga II.)
	— osušenom glukoznom sirupu
	— dekstroza monohidratu
	— bezvodnoj dekstrozi
II.2.	— otopini šećera ili otopini bijelog šećera	(upotrebom metode 3., iz Priloga II.)
	— otopini invertnog šećernoj ili otopini bijelog invertnog šećera
	— sirupu invertnog šećera ili sirupu bijelog invertnog šećera
III.   Mjerenje reducirajućih šećera u:
III.1.	— polubijelom šećeru	(upotrebom metode 4., iz Priloga II.)
III.2.	— šećeru ili bijelom šećeru	(upotrebom metode 5., iz Priloga II.)
	— ekstra bijelom šećeru
III.3.	— otopini šećera	(upotrebom metode 6. ili 7., iz Priloga II.)
	— otopini bijelog šećera
	— otopini invertnog šećera
	— otopini bijelog invertnog šećera
	— sirupu invertnog šećera
	— sirupu bijelog invertnog šećera
III.4.	— glukoznom sirupu	(upotrebom metode 6. ili 8., iz Priloga II.)
	— osušenom glukoznom sirupu
	— dekstroza monohidratu
	— bezvodnoj dekstrozi
IV.   Određivanje sulfatnog pepela u:
— glukoznom sirupu		(upotrebom metode 9., iz Priloga II.)
— osušenom glukoznom sirupu
— dekstroza monohidratu
— bezvodnoj dekstrozi
V.   Određivanje polarizacije u:
— polubijelom šećeru		(upotrebom metode 10., iz Priloga II.)
— šećeru ili bijelom šećeru
— ekstra bijelom šećeru

---

PRILOG II.

METODE ANALIZE ZA PROVJERU SASTAVA ODREĐENIH ŠEĆERA NAMIJENJENIH PREHRANI LJUDI

UVOD

1.   Priprema uzorka za analizu

Uzorak dostavljen u laboratorij treba dobro promiješati.

Odvojiti dio uzorka od najmanje 200 g i prenijeti ga odmah u čistu, suhu, hermetički zatvorenu posudu.

2.   Reagensi i oprema

Popis opreme sadrži samo posebne instrumente i opremu ili onu koja zahtijeva posebne standarde.

Pojam voda, podrazumijeva destiliranu vodu ili demineraliziranu vodu najmanje jednake čistoće.

Ako nije drukčije navedeno, sve kemijske tvari koje se koriste moraju biti priznate analitičke čistoće.

Pojam otopina reagensa, ukoliko nije drukčije navedeno, podrazumijeva vodenu otopinu.

3.   Izražavanje rezultata

Rezultat naveden u službenom izvješću o analizi predstavlja srednju vrijednost dobivenu iz najmanje između dva određivanja koja zadovoljavaju kriterij ponovljivosti.

Ukoliko nije drukčije određeno, rezultati se izražavaju kao maseni udio u uzorku zaprimljenom u laboratoriju.

Broj decimalnih mjesta u tako izraženom rezultatu određen je preciznošću metode.

METODA 1.

ODREĐIVANJE GUBITKA MASE SUŠENJEM

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje gubitak mase sušenjem u:

—	polubijelom šećeru,

—	šećeru ili bijelom šećeru,

—	ekstra bijelom šećeru.

2.   Definicija

„Gubitak mase sušenjem”: iznos gubitka mase pri sušenju, određen opisanom metodom.

3.   Princip

Gubitak mase sušenjem određuje se sušenjem pri temperaturi 103 ± 2 °C.

4.   Oprema

4.1.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.

4.2.   Sušionik s odgovarajućom ventilacijom i regulatorom temperature s mogućnošću održavanja temperature na 103 ± 2 °C.

4.3.   Metalna posudica za vaganje s ravnim dnom, otporna na djelovanje uzorka i uvjete analize, promjera najmanje 100 mm i dubine najmanje 30 mm.

4.4.   Eksikator sa svježe aktiviranim silika-gelom ili odgovarajućim sušilom s indikatorom prisutnosti vode.

5.   Postupak

Napomena:

postupci opisani u točkama od 5.3. do 5.7. moraju se provesti odmah nakon otvaranja posude s uzorkom.

5.1.   Osušiti posudicu (4.3.) do konstantne mase u sušioniku (4.2.) pri 103 ± 2 °C.

5.2.   Ostaviti posudicu da se hladi u eksikatoru (4.4.) najmanje 30 do 35 minuta i zatim je izvagati s točnošću 0,1 mg.

5.3.   U posudicu izvagati približno 20 do 30 g uzorka s točnošću 0,1 mg.

5.4.   Staviti posudicu u sušionik (4.2.) na tri sata pri 103 ± 2 °C.

5.5.   Ostaviti posudicu da se ohladi u eksikatoru (4.4.) i zatim izvagati s točnošću 0,1 mg.

5.6.   Ponovo postaviti posudice u sušionik na 30 minuta pri 103 ± 2 °C.

Ostaviti da se ohladi u eksikatoru (4.4.) i zatim izvagati s točnošću 0,1 mg. Ponoviti ovaj postupak ako je razlika između dva vaganja veća od 1 mg. Ako se masa poveća, za izračun upotrijebiti najnižu izmjerenu vrijednost.

5.7.   Ukupno vrijeme sušenja ne smije biti duže od četiri sata.

6.   Izražavanje rezultata

6.1.   Formula i metoda izračunavanja:

Gubitak mase sušenjem izražava se kao postotak u odnosu na masu originalnog uzorka i izračunava se na sljedeći način:

gdje je:

m0	početna masa uzorka u gramima,
m1	masa uzorka nakon sušenja u gramima.

6.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istodobno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,02 g na 100 g uzorka.

METODA 2.

ODREĐIVANJE SUHE TVARI

Metoda s vakuum sušionikom

1.   Opseg i područje primjene:

Ovom se metodom određuje udio suhe tvari u:

—	glukoznom sirupu,

—	sušenom glukoznom sirupu,

—	dekstroza monohidratu,

—	bezvodnoj dekstrozi.

2.   Definicija

„Udio suhe tvari”: udio suhe tvari određen opisanom metodom.

3.   Princip

Udio suhe tvari određuje se pri temperaturi od 70 ± 1 °C upotrebom vakuum sušionika, pri tlaku od najviše 3,3 kPa (34 mbar). Kod glukoznog sirupa ili sušenoga glukoznog sirupa, uzorci se prije sušenja pripremaju miješanjem s vodom i kremenim pijeskom.

4.   Reagensi

4.1.   Kremeni pijesak: pročistiti u Buchnerovom lijevku višekratnim ispiranjem razrijeđenom klorovodičnom kiselinom (1 ml koncentrirane kiseline, gustoće 1,19 g/ml pri 20 °C, na litru vode). Postupak je završen kada je otopina nakon ispiranja kisela. Ispiranje nastaviti vodom sve dok pH filtrata ne bude veći od 4. Osušiti u sušoniku pri 103 ± 2 °C i pohraniti u hermetički zatvorenu posudu.

5.   Oprema

5.1.   Vakuum sušionik, nepropustan, sa termostatom, termometrom i opremljen termometrom i vakuum manometrom. Sušionik mora biti konstruiran tako da omogućuje brzi prijenos topline na posudice za vaganje postavljene na njezinim policama.

5.2.   Uređaj za sušenje zraka koji se sastoji od staklene kolone napunjene svježe aktiviranim suhim silika - gelom ili odgovarajućim sredstvom za sakupljanje vlage i koji sadrži indikator prisutnosti vode. Ova staklena kolona se povezana je s uređajem za ispiranje plinova koji sadrži koncentriranu sumpornu kiselinu i povezan je sa dovodom zraka u sušionik.

5.3.   Vakuum pumpa kojom se u sušioniku može održavati tlak od 3,3 kPa (34 mbar) ili manji.

5.4.   Metalna posudica za vaganje s ravnim dnom, otporna na djelovanje uzoraka i uvjete analize, promjera najmanje 100 mm i dubine najmanje 300 mm.

5.5.   Stakleni štapić, dovoljno dug da ne može u potpunosti upasti u posudu.

5.6.   Eksikator koji sadrži svježe aktivirani suhi silika - gel ili odgovarajući adsorbent za sakupljanje vlage s indikatorom sadržine vode.

5.7.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.

6.   Postupak

6.1.   U posudicu za vaganje (5.4.) opremljenu staklenim štapićem (5.5.) potrebno je usipati približno 30 g kremenog pijeska (4.1.). To se sve zajedno postavi u sušionik (5.1.) pri 70 ± 1 °C i tlak se smanji na 3,3 kPa (34 mbar) ili manje.

Sušiti najmanje 5 sati, dovodeći spori dotok zraka u sušionik kroz uređaj za sušenje zraka. Povremeno treba provjeriti tlak i ako je potrebno korigirati ga.

6.2.   U sušioniku ponovo uspostaviti atmosferski tlak, povećavajući pažljivo dotok suhog zraka. Posudu zajedno sa staklenim štapićem treba odmah staviti u eksikator (5.6.). Ostaviti da se ohladi i tada izvagati.

6.3.   U čašu od 100 ml izvagati 10 g uzorka s točnošću od približno 1 mg.

6.4.   Uzorak razrijediti s 10 ml tople vode i otopinu kvantitativno prenijeti u posudu za vaganje koristeći stakleni štapić (5.5.).

6.5.   Posudicu s uzorkom i staklenim štapićem staviti u sušionik i smanjiti tlak na 3,3 kPa (34 mbar) ili manje. Sušiti pri 70 ± 1 °C, propuštajući spori protok suhog zraka kroz sušionik.

Postupak sušenja traje 20 sati; krajem prvog dana smanjenje mase je najveće. Nužno je da vakuum pumpa radi na prethodno prilagođenom tlaku i omogući spor dotok suhog zraka u sušionik kako bi se tijekom noći održavao tlak od približno 3,3 kPa (34 mbar) ili manje.

6.6.   Ponovo uspostaviti atmosferski tlak u sušioniku, povećavajući pažljivo dotok suhog zraka. Posudicu za vaganje zajedno sa sadržajem staklenim štapićem treba odmah staviti u eksikator. Ostaviti da se ohladi i tada izvagati uz točnost od 1 mg.

6.7.   Nastaviti s postupkom (6.5.) još 4 sata. Ponovo uspostaviti atmosferski tlak u sušioniku i odmah staviti posudicu u eksikator. Ostaviti da se ohladi i tada izvagati. Provjeriti je li postignuta konstantna masa. Smatra se da je konstantna masa postignuta na zadovoljavajući način ako razlika između dvaju vaganja iste posudice nije veća od 2 mg. Ako je razlika veća, ponoviti postupak 6.7.

6.8.   Za određivanje suhe tvari u uzorcima bezvodne dekstroze ili monohidrata dekstroze nije potrebna upotrijebiti kremeni pijesak i vodu.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

Udio suhe tvari, izražen kao postotak u odnosu na masu uzorka, izražen je jednadžbom:

pri čemu je:

m0= početna masa uzorka u gramima;

m1= masa posudice za vaganje i kremenog pijeska, staklenog štapića i ostatka uzorka nakon sušenja, u gramima;

m2= masa posude za vaganje, kremenog pijeska i staklenog štapića u gramima.

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,12 g na 100 g uzorka.

METODA 3.

ODREĐIVANJE UKUPNE SUHE TVARI

(Refraktometrijska metoda)

1.   Opseg i područje primjene:

Ovom se metodom određuje udio suhe tvari u:

—	otopini šećera,

—	otopini bijelog šećera,

—	otopini invertnog šećera,

—	otopini bijelog invertnog šećera,

—	sirupu invertnog šećera,

—	sirupu bijelog invertnog šećera.

2.   Definicija

„Udio suhe tvari”: udio suhe tvari određen opisanom metodom.

3.   Princip

Indeks refrakcije uzorka određuje se pri 20 °C te se udio suhe tvari očita pomoću referentne tablice u kojoj je navedena koncentracija kao funkcija indeksa refrakcije.

4.   Oprema

4.1.   Refraktometar, točnosti 4 decimalna mjesta, s termometrom i pumpom za vodu povezanom s termostatski kontroliranom vodenom kupelji temperature 20 ± 0,5 °C.

4.2.   Izvor svjetlosti koji se sastoji od natrijeve svjetiljke.

5.   Postupak

5.1.   Ako su u uzorku prisutni kristali, treba ih ponovo otopiti razrjeđivanjem uzorka u omjeru 1 : 1 (m/m).

5.2.   U refraktometru (4.1.) izmjeriti indeks refrakcije uzorka pri 20 °C.

6.   Izražavanje i izračunavanje rezultata

6.1.   Izračunati udio suhe tvari iz indeksa refrakcije za otopinu saharoze pri 20 °C navedenog u tablici i korigirati rezultat dobiven iz tablice za prisutnost invertnih šećera, dodavajući 0,022 za svaki 1 % invertnog šećera prisutnog u analiziranom uzorku.

6.2.   Ako je uzorak bio razrijeđen vodom u omjeru 1:1 (m/m), izračunani udio suhe tvari množi se s dva.

6.3.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,2 g suhe tvari na 100 g uzorka.

REFERENTNE TABLICE

Refrakcijski indeksi (n) otopine saharoze pri 20 °C  (1)

n (20 °C)	Saharoza (%)
1,3330	0,009
1,3331	0,078
1,3332	0,149
1,3333	0,218
1,3334	0,288
1,3335	0,358
1,3336	0,428
1,3337	0,498
1,3338	0,567
1,3339	0,637
1,3340	0,707
1,3341	0,776
1,3342	0,846
1,3343	0,915
1,3344	0,985
1,3345	1,054
1,3346	1,124
1,3347	1,193
1,3348	1,263
1,3349	1,332
1,3350	1,401
1,3351	1,470
1,3352	1,540
1,3353	1,609
1,3354	1,678
1,3355	1,747
1,3356	1,816
1,3357	1,885
1,3358	1,954
1,3359	2,023
1,3360	2,092
1,3361	2,161
1,3362	2,230
1,3363	2,299
1,3364	2,367
1,3365	2,436
1,3366	2,505
1,3367	2,574
1,3368	2,642
1,3369	2,711
1,3370	2,779
1,3371	2,848
1,3372	2,917
1,3373	2,985
1,3374	3,053
1,3375	3,122
1,3376	3,190
1,3377	3,259
1,3378	3,327
1,3379	3,395
1,3380	3,463
1,3381	3,532
1,3382	3,600
1,3383	3,668
1,3384	3,736
1,3385	3,804
1,3386	3,872
1,3387	3,940
1,3388	4,008
1,3389	4,076
1,3390	4,144
1,3391	4,212
1,3392	4,279
1,3393	4,347
1,3394	4,415
1,3395	4,483
1,3396	4,550
1,3397	4,618
1,3398	4,686
1,3399	4,753
1,3400	4,821
1,3401	4,888
1,3402	4,956
1,3403	5,023
1,3404	5,091
1,3405	5,158
1,3406	5,225
1,3407	5,293
1,3408	5,360
1,3409	5,427
1,3410	5,494
1,3411	5,562
1,3412	5,629
1,3413	5,696
1,3414	5,763
1,3415	5,830
1,3416	5,897
1,3417	5,964
1,3418	6,031
1,3419	6,098
1,3420	6,165
1,3421	6,231
1,3422	6,298
1,3423	6,365
1,3424	6,432
1,3425	6,498
1,3426	6,565
1,3427	6,632
1,3428	6,698
1,3429	6,765
1,3430	6,831
1,3431	6,898
1,3432	6,964
1,3433	7,031
1,3434	7,097
1,3435	7,1642
1,3436	7,230
1,3437	7,296
1,3438	7,362
1,3439	7,429
1,3440	7,495
1,3441	7,561
1,3442	7,627
1,3443	7,693
1,3444	7,759
1,3445	7,825
1,3446	7,891
1,3447	7,957
1,3448	8,023
1,3449	8,089
1,3450	8,155
1,3451	8,221
1,3452	8,287
1,3453	8,352
1,3454	8,418
1,3455	8,484
1,3456	8,550
1,3457	8,615
1,3458	8,681
1,3459	8,746
1,3460	8,812
1,3461	8,878
1,3462	8,943
1,3463	9,008
1,3464	9,074
1,3465	9,139
1,3466	9,205
1,3467	9,270
1,3468	9,335
1,3469	9,400
1,3470	9,466
1,3471	9,531
1,3472	9,596
1,3473	9,661
1,3474	9,726
1,3475	9,791
1,3476	9,856
1,3477	9,921
1,3478	9,986
1,3479	10,051
1,3480	10,116
1,3481	10,181
1,3482	10,246
1,3483	10,311
1,3484	10,375
1,3485	10,440
1,3486	10,505
1,3487	10,570
1,3488	10,634
1,3489	10,699
1,3490	10,763
1,3491	10,828
1,3492	10,892
1,3493	10,957
1,3494	11,021
1,3495	11,086
1,3496	11,150
1,3497	11,215
1,3498	11,279
1,3499	11,343
1,3500	11,407
1,3501	11,472
1,3502	11,536
1,3503	11,600
1,3504	11,664
1,3505	11,728
1,3506	11,792
1,3507	11,856
1,3508	11,920
1,3509	11,984
1,3510	12,048
1,3511	12,112
1,3512	12,176
1,3513	12,240
1,3514	12,304
1,3515	12,368
1,3516	12,431
1,3517	12,495
1,3518	12,559
1,3519	12,623
1,3520	12,686
1,3521	12,750
1,3522	12,813
1,3523	12,877
1,3524	12,940
1,3525	13,004
1,3526	13,067
1,3527	13,131
1,3528	13,194
1,3529	13,258
1,3530	13,321
1,3531	13,384
1,3532	13,448
1,3533	13,511
1,3534	13,574
1,3535	13,637
1,3536	13,700
1,3537	13,763
1,3538	13,826
1,3539	13,890
1,3540	13,953
1,3541	14,016
1,3542	14,079
1,3543	14,141
1,3544	14,204
1,3545	14,267
1,3546	14,330
1,3547	14,393
1,3548	14,456
1,3549	14,518
1,3550	14,581
1,3551	14,644
1,3552	14,707
1,3553	14,769
1,3554	14,832
1,3555	14,894
1,3556	14,957
1,3557	15,019
1,3558	15,082
1,3559	15,144
1,3560	15,207
1,3561	15,269
1,3562	15,332
1,3563	15,394
1,3564	15,456
1,3565	15,518
1,3566	15,581
1,3567	15,643
1,3568	15,705
1,3569	15,767
1,3570	15,829
1,3571	15,891
1,3572	15,953
1,3573	16,016
1,3574	16,078
1,3575	16,140
1,3576	16,201
1,3577	16,263
1,3578	16,325
1,3579	16,387
1,3580	16,449
1,3581	16,511
1,3582	16,573
1,3583	16,634
1,3584	16,696
1,3585	16,758
1,3586	16,819
1,3587	16,881
1,3588	16,943
1,3389	17,004
1,3590	17,066
1,3591	17,127
1,3592	17,189
1,3593	17,250
1,3594	17,311
1,3595	17,373
1,3596	17,434
1,3597	17,496
1,3598	17,557
1,3599	17,618
1,3600	17,679
1,3601	17,741
1,3602	17,802
1,3603	17,863
1,3604	17,924
1,3605	17,985
1,3606	18,046
1,3607	18,107
1,3608	18,168
1,3609	18,229
1,3610	18,290
1,3610	18,351
1,3611	18,412
1,3613	18,473
1,3614	18,534
1,3615	18,595
1,3616	18,655
1,3617	18,716
1,3618	18,777
1,3619	18,837
1,3620	18,898
1,3621	18,959
1,3622	19,019
1,3623	19,080
1,3624	19,141
1,3625	19,201
1,3626	19,262
1,3627	19,322
1,3628	19,382
1,3629	19,443
1,3630	19,503
1,3631	19,564
1,3632	19,624
1,3633	19,684
1,3634	19,745
1,3635	19,805
1,3636	19,865
1,3637	19,925
1,3638	19,985
1,3639	20,045
1,3640	20,106
1,3641	20,166
1,3642	20,226
1,3643	20,286
1,3644	20,346
1,3645	20,406
1,3646	20,466
1,3647	20,525
1,3648	20,585
1,3649	20,645
1,3650	20,705
1,3651	20,765
1,3652	20,825
1,3653	20,884
1,3654	20,944
1,3655	21,004
1,3656	21,063
1,3657	21,123
1,3658	21,183
1,3659	21,242
1,3660	21,302
1,3661	21,361
1,3662	21,421
1,3563	21,480
1,3664	21,540
1,3665	21,599
1,3666	21,658
1,3667	21,718
1,3668	21,777
1,3669	21,836
1,3670	21,896
1,3671	21,955
1,3672	22,014
1,1673	22,073
1,3674	22,132
1,3675	22,192
1,3676	22,251
1,1677	22,310
1,3678	22,369
1,3679	22,428
1,3680	22,487
1,3681	22,546
1,3682	22,605
1,3683	22,664
1,3684	22,723
1,3685	22,781
1,3686	22,840
1,3687	22,899
1,3688	22,958
1,3689	23,017
1,3690	23,075
1,3691	23,134
1,3692	23,193
1,3693	23,251
1,3694	23,310
1,3695	23,369
1,3696	23,427
1,3697	23,486
1,3698	23,544
1,3699	23,603
1,3700	23,661
1,3701	23,720
1,3702	23,778
1,3703	23,836
1,3704	23,895
1,3705	23,953
1,3706	24,011
1,3707	24,070
1,3708	24,128
1,3709	24,186
1,3710	24,244
1,3711	24,302
1,3712	24,361
1,3713	24,419
1,3714	24,477
1,3715	24,535
1,3716	24,593
1,3717	24,651
1,3718	24,709
1,3719	24,767
1,3720	24,825
1,3721	24,883
1,3722	24,941
1,3723	24,998
1,3724	25,056
1,3725	25,114
1,3726	25,172
1,3727	25,230
1,3728	25,287
1,3729	25,345
1,3730	25,403
1,3731	25,460
1,3732	25,518
1,3733	25,576
1,3734	25,633
1,3735	25,691
1,3736	25,748
1,3737	25,806
1,3738	25,863
1,3739	25,921
1,3740	25,978
1,3741	26,035
1,3742	26,093
1,3743	26,150
1,3744	26,207
1,3745	26,265
1,3746	26,322
1,3747	26,379
1,3748	26,436
1,3749	26,493
1,3750	26,551
1,3751	26,608
1,3752	26,665
1,3753	26,722
1,3754	26,779
1,3755	26,836
1,3756	26,893
1,3757	26,950
1,3758	27,007
1,3759	27,064
1,3760	27,121
1,3761	27,178
1,3762	27,234
1,3763	27,291
1,3764	27,348
1,3765	27,405
1,3765	27,462
1,3767	27,518
1,3768	27,575
1,3769	27,632
1,3770	27,688
1,3771	27,745
1,3772	27,802
1,3773	27,858
1,3774	27,915
1,3775	27,971
1,3776	28,028
1,3777	28,084
1,3778	28,141
1,3779	28,197
1,3780	28,253
1,3781	28,310
1,3782	28,366
1,3783	28,422
1,3784	28,479
1,3785	28,535
1,3786	28,591
1,3787	28,648
1,3788	28,704
1,3789	28,760
1,3790	28,816
1,3791	28,872
1,3792	28,928
1,3793	28,984
1,3794	29,040
1,3795	29,096
1,3796	29,152
1,3797	29,208
1,3798	29,264
1,3799	29,320
1,3800	29,376
1,3801	29,432
1,3802	29,488
1,3803	29,544
1,3804	29,600
1,3805	29,655
1,3806	29,711
1,3807	29,767
1,3808	29,823
1,3809	29,878
1,3810	29,934
1,3811	29,989
1,3812	30,045
1,3813	30,101
1,3814	30,156
1,3815	30,212
1,3816	30,267
1,3817	30,323
1,3818	30,378
1,3819	30,434
1,3820	30,489
1,3821	30,544
1,3822	30,600
1,3823	30,655
1,3824	30,711
1,3825	30,766
1,3826	30,821
1,3827	30,876
1,3828	30,932
1,3829	30,987
1,3830	31,042
1,3831	31,097
1,3832	31,152
1,3833	31,207
1,3834	31,262
1,3835	31,317
1,3836	31,372
1,3837	31,428
1,3838	31,482
1,3839	31,537
1,3840	31,592
1,3841	31,647
1,3842	31,702
1,3843	31,757
1,3844	31,812
1,3845	31,867
1,3846	31,922
1,3847	31,976
1,3848	32,031
1,3849	32,086
1,3850	32,140
1,3851	32,195
1,3852	32,250
1,3853	32,304
1,3854	32,359
1,3855	32,414
1,3856	32,468
1,3857	32,523
1,3858	32,577
1,3859	32,632
1,3860	32,686
1,3861	32,741
1,3862	32,795
1,3863	32,849
1,3864	32,904
1,3865	32,958
1,3866	33,013
1,3867	33,067
1,3868	33,121
1,3889	33,175
1,3870	33,230
1,3871	33,284
1,3872	33,338
1,3873	33,392
1,3874	33,446
1,3875	33,500
1,3876	33,555
1,3877	33,609
1,3878	33,663
1,3879	33,717
1,3880	33,771
1,3881	33,825
1,3882	33,879
1,3883	33,933
1,3884	33,987
1,3885	34,040
1,3886	34,094
1,3887	34,148
1,3888	34,202
1,3889	34,256
1,3890	34,310
1,3891	34,363
1,3892	34,417
1,3893	34,471
1,3894	34,524
1,3895	34,578
1,3896	34,632
1,3897	34,685
1,3898	34,739
1,3899	34,793
1,3900	34,846
1,3901	34,900
1,3902	34,953
1,3903	35,007
1,3904	35,060
1,3905	35,114
1,3906	35,167
1,3907	35,220
1,3908	35,274
1,3909	35,327
1,3910	35,380
1,3911	35,434
1,3912	35,487
1,3913	35,540
1,3914	35,593
1,3915	35,647
1,3916	35,700
1,3917	35,753
1,3918	35,806
1,3919	35,859
1,3920	35,912
1,3921	35,966
1,3922	36,019
1,3923	36,072
1,3924	36,125
1,3925	36,178
1,3926	36,231
1,3927	36,284
1,3928	36,337
1,3929	36,389
1,3930	36,442
1,3931	36,495
1,3932	36,548
1,3933	36,601
1,3934	36,654
1,3935	36,706
1,3936	36,759
1,3937	36,812
1,3938	36,865
1,3939	36,917
1,3940	36,970
1,3941	37,023
1,3942	37,075
1,3943	37,128
1,3944	37,180
1,3945	37,233
1,3946	37,286
1,3947	37,338
1,3948	37,391
1,3949	37,443
1,3950	37,495
1,3951	37,548
1,3952	37,600
1,3953	37,653
1,3954	37,705
1,3955	37,757
1,3956	37,810
1,3957	37,862
1,3958	37,914
1,3959	37,967
1,3960	38,019
1,3961	38,071
1,3962	38,123
1,3963	38,175
1,3964	38,228
1,3965	38,280
1,3966	38,332
1,3967	38,384
1,3968	38,436
1,3969	38,488
1,3970	38,540
1,3971	38,592
1,3972	38,644
1,3973	38,696
1,3974	38,748
1,3975	38,800
1,3976	38,852
1,3977	38,904
1,3978	38,955
1,3979	39,007
1,3980	39,059
1,3981	39,111
1,3982	39,163
1,3983	39,214
1,3984	39,266
1,3985	39,318
1,3986	39,370
1,3987	39,421
1,3988	39,473
1,3989	39,525
1,3990	39,576
1,3991	39,628
1,3992	39,679
1,3993	39,731
1,3994	39,782
1,3995	39,834
1,3996	39,885
1,3997	39,937
1,3998	39,988
1,3999	40,040
1,4000	40,091
1,4001	40,142
1,4002	40,194
1,4003	40,245
1,4004	40,296
1,4005	40,348
1,4006	40,399
1,4007	40,450
1,4008	40,501
1,4009	40,553
1,4010	40,604
1,4011	40,655
1,4012	40,706
1,4013	40,757
1,4014	40,808
1,4015	40,860
1,4016	40,911
1,4017	40,962
1,4018	41,013
1,4019	41,064
1,4020	41,115
1,4021	41,166
1,4022	41,217
1,4023	41,268
1,4024	41,318
1,4025	41,369
1,4026	41,420
1,4027	41,471
1,4028	41,522
1,4029	41,573
1,4030	41,623
1,4031	41,674
1,4032	41,725
1,4033	41,776
1,4034	41,826
1,4035	41,877
1,4036	41,928
1,4037	41,978
1,4038	42,029
1,4039	42,080
1,4040	42,130
1,4041	42,181
1,4042	42,231
1,4043	42,282
1,4044	42,332
1,4045	42,383
1,4046	42,433
1,4047	42,484
1,4048	42,534
1,4049	42,585
1,4050	42,635
1,4051	42,685
1,4052	42,736
1,4053	42,786
1,4054	42,836
1,4055	42,887
1,4056	42,937
1,4057	42,987
1,4058	43,037
1,4059	43,088
1,4060	43,138
1,4061	43,188
1,4062	43,238
1,4063	43,288
1,4064	43,338
1,4065	43,388
1,4066	43,439
1,4067	43,489
1,4068	43,539
1,4069	43,589
1,4070	43,639
1,4071	43,689
1,4072	43,739
1,4073	43,789
1,4074	43,838
1,4075	43,888
1,4076	43,938
1,4077	43,988
1,4078	44,038
1,4079	44,088
1,4080	44,138
1,4081	44,187
1,4082	44,237
1,4083	44,287
1,4084	44,337
1,4085	44,386
1,4086	44,436
1,4087	44,486
1,4088	44,535
1,4089	44,585
1,4090	44,635
1,4091	44,684
1,4092	44,734
1,4093	44,783
1,4094	44,833
1,4095	44,882
1,4096	44,932
1,4097	44,981
1,4098	45,031
1,4099	45,080
1,4100	45,130
1,4101	43,179
1,4102	45,228
1,4103	45,278
1,4104	45,327
1,4105	45,376
1,4106	45,426
1,4107	45,475
1,4108	45,524
1,4109	45,574
1,4110	45,623
1,4111	45,672
1,4112	45,721
1,4113	45,770
1,4114	45,820
1,4115	45,869
1,4116	45,918
1,4117	46,967
1,4118	46,016
1,4119	46,065
1,4120	46,114
1,4121	46,163
1,4122	46,212
1,4123	46,261
1,4124	46,310
1,4125	46,359
1,4126	46,408
1,4127	46,457
1,4128	46,506
1,4129	46,555
1,4130	46,604
1,4131	46,652
1,4132	46,701
1,4133	46,750
1,4134	46,799
1,4135	46,848
1,4136	46,896
1,4137	46,945
1,4138	46,994
1,4139	47,043
1,4140	47,091
1,4141	47,140
1,4141	47,188
1,4143	47,237
1,4144	47,286
1,4145	47,334
1,4146	47,383
1,4147	47,431
1,4148	47,480
1,4149	47,528
1,4150	47,577
1,4151	47,625
1,4152	47,674
1,4153	47,722
1,4154	47,771
1,4155	47,819
1,4156	47,868
1,4157	47,916
1,4158	47,964
1,4159	48,013
1,4160	48,061
1,4161	48,109
1,4162	48,158
1,4163	48,206
1,4164	48,254
1,4165	48,302
1,4166	48,350
1,4167	48,399
1,4168	48,447
1,4169	48,495
1,4170	48,543
1,4171	48,591
1,4172	48,639
1,4173	48,687
1,4174	48,735
1,4175	48,784
1,4176	48,832
1,4177	48,880
1,4178	48,928
1,4179	48,976
1,4180	49,023
1,4181	49,071
1,4182	49,119
1,4183	49,167
1,4184	49,215
1,4185	49,263
1,4186	49,311
1,4187	49,359
1,4188	49,407
1,4189	49,454
1,4190	49,502
1,4191	49,550
1,4192	49,598
1,4193	49,645
1,4194	49,693
1,4195	49,741
1,4196	49,788
1,4197	49,836
1,4198	49,884
1,4199	49,931
1,4200	49,979
1,4201	50,027
1,4202	50,074
1,4203	50,122
1,4204	50,169
1,4205	50,217
1,4206	50,264
1,4207	50,312
1,4208	50,359
1,4209	50,407
1,4210	50,454
1,4211	50,502
1,4212	50,549
1,4213	50,596
1,4214	50,644
1,4215	50,691
1,4216	50,738
1,4217	50,786
1,4218	50,833
1,4219	50,880
1,4220	50,928
1,4221	50,975
1,4222	51,022
1,4223	51,069
1,4224	51,116
1,4225	51,164
1,4226	51,211
1,4227	51,258
1,4228	51,305
1,4229	51,352
1,4230	51,399
1,4231	51,446
1,4232	51,493
1,4233	51,540
1,4234	51,587
1,4235	51,634
1,4236	51,681
1,4237	51,728
1,4238	51,775
1,4239	51,822
1,4240	51,869
1,4241	51,916
1,4242	51,963
1,4243	52,010
1,4244	52,057
1,4245	52,104
1,4246	52,150
1,4247	52,197
1,4248	52,244
1,4249	52,291
1,4250	52,338
1,4251	52,384
1,4252	52,431
1,4253	52,478
1,4254	52,524
1,4255	52,571
1,4256	52,618
1,4257	52,664
1,4258	52,711
1,4259	52,758
1,4260	52,804
1,4261	52,851
1,4261	52,897
1,4263	52,944
1,4264	52,990
1,4265	53,037
1,4266	53,083
1,4267	53,130
1,4268	53,176
1,4269	53,223
1,4270	53,269
1,4271	53,316
1,4272	53,362
1,4273	53,408
1,4274	53,455
1,4275	53,501
1,4276	53,548
1,4277	53,594
1,4278	53,640
1,4279	53,686
1,4280	53,733
1,4281	53,779
1,4282	53,825
1,4283	53,871
1,4284	53,918
1,4285	53,964
1,4286	54,010
1,4287	54,056
1,4288	54,102
1,4289	54,148
1,4290	54,194
1,4291	54,241
1,4292	54,287
1,4293	54,333
1,4294	54,379
1,4295	54,425
1,4296	54,471
1,4297	54,517
1,4298	54,563
1,4299	54,609
1,4300	54,655
1,4301	54,701
1,4302	54,746
1,4303	54,792
1,4304	54,838
1,4305	54,884
1,4306	54,930
1,4307	54,976
1,4308	55,022
1,4309	55,067
1,4310	55,113
1,4311	55,159
1,4312	55,205
1,4313	55,250
1,4314	55,296
1,4315	55,342
1,4316	55,388
1,4317	55,433
1,4318	55,479
1,4319	55,524
1,4320	55,570
1,4321	55,616
1,4322	55,661
1,4323	55,707
1,4324	55,752
1,4325	55,798
1,4326	55,844
1,4327	55,889
1,4328	55,935
1,4329	55,980
1,4330	56,026
1,4331	56,071
1,4332	56,116
1,4133	56,162
1,4334	56,207
1,4335	56,253
1,4336	56,298
1,4337	56,343
1,4338	56,389
1,4339	56,434
1,4340	56,479
1,4341	56,525
1,4342	56,570
1,4343	56,615
1,4344	56,660
1,4345	56,706
1,4346	56,751
1,4347	56,796
1,4348	56,841
1,4349	56,887
1,4350	56,932
1,4351	56,977
1,4352	57,022
1,4353	57,067
1,4354	57,112
1,4355	57,157
1,4356	57,202
1,4357	57,247
1,4358	57,292
1,4359	57,337
1,4360	57,382
1,4361	57,427
1,4362	57,472
1,4363	57,517
1,4364	57,562
1,4365	57,607
1,4366	57,652
1,4367	57,697
1,4368	57,742
1,4369	57,787
1,4370	57,832
1,4371	57,877
1,4372	57,921
1,4373	57,966
1,4374	58,011
1,4375	58,056
1,4376	58,101
1,4377	58,145
1,4378	58,190
1,4379	58,235
1,4380	58,279
1,4381	58,324
1,4382	58,369
1,4383	58,413
1,4384	53,458
1,4385	58,503
1,4386	58,547
1,4387	58,592
1,4388	58,637
1,4389	58,681
1,4390	58,726
1,4391	58,770
1,4392	58,815
1,4393	58,859
1,4394	58,904
1,4395	58,948
1,4396	58,993
1,4397	59,037
1,4398	59,082
1,4399	59,126
1,4400	59,170
1,4401	59,215
1,4402	59,259
1,4403	59,304
1,4404	59,348
1,4405	59,392
1,4406	59,437
1,4407	59,481
1,4408	59,525
1,4409	59,569
1,4410	59,614
1,4411	59,658
1,4412	59,702
1,4413	59,746
1,4414	59,791
1,4415	59,835
1,4416	59,879
1,4417	59,923
1,4418	59,967
1,4419	60,011
1,4420	60,056
1,4421	60,100
1,4422	60,144
1,4423	60,188
1,4424	60,232
1,4425	60,276
1,4426	60,320
1,4427	60,364
1,4428	60,408
1,4429	60,452
1,4430	60,496
1,4431	60,540
1,4432	60,584
1,4433	60,628
1,4434	60,672
1,4435	60,716
1,4436	60,759
1,4437	60,803
1,4438	60,847
1,4439	60,891
1,4440	60,935
1,4441	60,979
1,4442	61,023
1,4443	61,066
1,4444	61,110
1,4445	61,154
1,4446	61,198
1,4447	61,241
1,4448	61,285
1,4449	61,329
1,4450	61,372
1,4451	61,416
1,4452	61,460
1,4453	61,503
1,4454	61,547
1,4455	61,591
1,4456	61,634
1,4457	61,678
1,4458	61,721
1,4459	61,765
1,4460	61,809
1,4461	61,852
1,4462	61,896
1,4463	61,939
1,4464	62,983
1,4465	62,026
1,4466	62,070
1,4467	62,113
1,4468	62,156
1,4469	62,200
1,4470	62,243
1,4471	62,287
1,4472	62,330
1,4473	62,373
1,4474	62,417
1,4475	62,460
1,4476	62,503
1,4477	62,547
1,4478	62,590
1,4479	62,633
1,4480	62,677
1,4481	62,720
1,4482	62,763
1,4483	62,806
1,4184	62,849
1,4485	62,893
1,4486	62,936
1,4487	62,979
1,4488	63,022
1,4489	63,065
1,4490	63,108
1,4491	63,152
1,4492	63,195
1,4493	63,238
1,4494	63,281
1,4495	63,324
1,4496	63,367
1,4497	63,410
1,4498	63,453
1,4499	63,496
1,4500	63,539
1,4501	63,582
1,4502	63,625
1,4503	63,668
1,4304	63,711
1,4505	63,754
1,4506	63,797
1,4507	63,840
1,4508	63,882
1,4509	63,925
1,4510	63,968
1,4511	64,011
1,4512	64,054
1,4513	64,097
1,4514	64,139
1,4515	64,182
1,4516	64,225
1,4517	64,268
1,4518	64,311
1,4519	64,353
1,4520	64,396
1,4521	64,439
1,4522	64,481
1,4523	64,524
1,4524	64,567
1,4525	64,609
1,4526	64,652
1,4527	64,695
1,4528	64,737
1,4529	64,780
1,4530	64,823
1,4531	64,865
1,4532	64,908
1,4533	64,950
1,4534	64,993
1,4535	65,035
1,4536	65,078
1,4537	65,120
1,4538	65,163
1,4539	65,205
1,4540	65,248
1,4541	65,290
1,4542	65,333
1,4543	65,375
1,4544	65,417
1,4545	65,460
1,4546	65,502
1,4547	65,544
1,4548	65,587
1,4549	65,629
1,4550	65,672
1,4551	65,714
1,4552	65,756
1,4553	65,798
1,4554	65,841
1,4555	65,883
1,4556	65,925
1,4557	65,967
1,4558	66,010
1,4559	66,052
1,4560	66,094
1,4561	66,136
1,4562	66,178
1,4563	66,221
1,4564	66,263
1,4565	66,305
1,4566	66,347
1,4567	66,389
1,4568	66,431
1,4569	66,473
1,4570	66,515
1,4571	66,557
1,4572	66,599
1,4573	66,641
1,4574	66,683
1,4575	66,725
1,4576	66,767
1,4577	66,809
1,4578	66,851
1,4579	66,893
1,4580	66,935
1,4581	66,977
1,4582	67,019
1,4583	67,061
1,4584	67,103
1,4585	67,145
1,4586	67,186
1,4587	67,228
1,4588	67,270
1,4589	67,312
1,4590	67,354
1,4591	67,396
1,4592	67,437
1,4593	67,479
1,4594	67,521
1,4595	67,563
1,4596	67,604
1,4597	67,646
1,4598	67,688
1,4599	67,729
1,4600	67,771
1,4601	67,813
1,4602	67,854
1,4603	67,896
1,4604	67,938
1,4605	67,979
1,4606	68,021
1,4607	68,063
1,4608	68,104
1,4609	68,146
1,4610	68,187
1,4611	68,229
1,4611	68,270
1,4613	68,312
1,4614	68,353
1,4615	68,395
1,4616	68,436
1,4617	68,478
1,4618	68,519
1,4619	68,561
1,4620	68,602
1,4621	68,643
1,4622	68,685
1,4623	68,726
1,4624	68,768
1,4625	68,809
1,4626	68,850
1,4627	68,892
1,4628	68,933
1,4629	68,974
1,4630	69,016
1,4631	69,057
1,4632	69,098
1,4633	69,139
1,4634	69,181
1,4635	69,222
1,4636	69,263
1,4637	69,304
1,4638	69,346
1,4639	69,387
1,4640	69,428
1,4641	69,469
1,4642	69,510
1,4643	69,551
1,4644	69,593
1,4645	69,634
1,4646	69,675
1,4647	69,716
1,4648	69,757
1,4649	69,798
1,4650	69,839
1,4651	69,880
1,4652	69,921
1,4653	69,962
1,4654	70,003
1,4655	70,044
1,4656	70,085
1,4657	70,126
1,4658	70,167
1,4659	70,208
1,4660	70,249
1,4661	70,290
1,4662	70,331
1,4663	70,372
1,4664	70,413
1,4665	70,453
1,4666	70,494
1,4667	70,535
1,4668	70,576
1,4669	70,617
1,4670	70,658
1,4671	70,698
1,4672	70,739
1,4673	70,780
1,4674	70,821
1,4675	70,861
1,4676	70,902
1,4677	70,943
1,4678	70,984
1,4679	71,024
1,4680	71,065
1,4681	71,106
1,4681	71,146
1,4683	71,187
1,4684	71,228
1,4685	71,268
1,4686	71,309
1,4687	71,349
1,4688	71,390
1,4689	71,431
1,4690	71,471
1,4691	71,512
1,4692	71,552
1,4693	71,593
1,4694	71,633
1,4695	71,674
1,4696	71,714
1,4697	71,755
1,4698	71,795
1,4699	71,836
1,4700	71,876
1,4701	71,917
1,4702	71,957
1,4703	71,998
1,4704	72,038
1,4705	72,078
1,4706	72,119
1,4707	72,159
1,4708	72,199
1,4709	72,240
1,4710	72,280
1,4711	72,320
1,4712	72,361
1,4713	72,401
1,4714	72,441
1,4715	72,482
1,4716	72,522
1,4717	72,562
1,4718	72,602
1,4719	72,643
1,4720	72,683
1,4721	72,723
1,4722	72,763
1,4723	72,803
1,4724	72,843
1,4725	72,884
1,4726	72,924
1,4727	72,964
1,4728	73,004
1,4729	73,044
1,4730	73,084
1,4731	73,124
1,4732	73,164
1,4733	73,204
1,4734	73,244
1,4735	73,285
1,4736	73,325
1,4737	73,365
1,4738	73,405
1,4739	73,445
1,4740	73,485
1,4741	73,524
1,4742	73,564
1,4743	73,604
1,4744	73,644
1,4745	73,684
1,4746	73,724
1,4747	73,764
1,4748	73,804
1,4749	73,844
1,4750	73,884
1,4751	73,924
1,4752	73,963
1,4753	74,003
1,4754	74,043
1,4755	74,083
1,4756	74,123
1,4757	74,162
1,4758	74,202
1,4759	74,242
1,4760	74,282
1,4761	74,321
1,4762	74,361
1,4763	74,401
1,4764	74,441
1,4765	74,480
1,4766	74,520
1,4767	74,560
1,4768	74,599
1,4769	74,639
1,4770	74,678
1,4771	74,718
1,1772	74,758
1,4773	74,797
1,4774	74,837
1,4775	74,876
1,4776	74,916
1,4777	74,956
1,4778	74,995
1,4779	75,035
1,4780	75,074
1,1781	75,114
1,4782	75,153
1,4783	75,193
1,4784	75,232
1,4785	75,272
1,4786	75,311
1,4787	75,350
1,4788	75,390
1,4789	75,429
1,4790	75,469
1,4791	75,508
1,4792	75,547
1,4793	75,587
1,4794	75,626
1,4795	75,666
1,4796	75,705
1,4797	75,744
1,4798	75,784
1,4799	75,823
1,4800	75,862
1,4801	75,901
1,4802	75,941
1,4803	75,980
1,4804	76,019
1,4805	76,058
1,4806	76,098
1,4807	76,137
1,4808	76,176
1,4809	76,215
1,4810	76,254
1,4810	76,294
1,4812	76,333
1,4813	76,372
1,4814	76,411
1,4815	76,450
1,4816	76,489
1,4817	76,528
1,4818	76,567
1,4819	76,607
1,4820	76,646
1,4821	76,685
1,4822	76,724
1,4823	76,763
1,4824	76,802
1,4825	76,841
1,4826	76,880
1,4827	76,919
1,4828	76,958
1,4829	76,997
1,4830	77,036
1,4831	77,075
1,4832	77,113
1,4833	77,152
1,4834	77,191
1,4835	77,230
1,4336	77,269
1,4837	77,308
1,4838	77,347
1,4839	77,386
1,4840	77,425
1,4841	77,463
1,4842	77,502
1,4843	77,541
1,4844	77,580
1,4845	77,619
1,4846	77,657
1,4847	77,696
1,4848	77,735
1,4849	77,774
1,4850	77,812
1,4851	77,851
1,4852	77,890
1,4853	77,928
1,4854	77,967
1,4855	78,006
1,4856	78,045
1,4857	78,083
1,4858	78,122
1,4859	78,160
1,4860	78,199
1,4861	78,238
1,4862	78,276
1,4863	78,315
1,4864	78,353
1,4865	78,392
1,4866	78,431
1,4867	78,469
1,4868	78,508
1,4869	78,546
1,4870	78,585
1,4871	78,623
1,4872	78,662
1,4873	78,700
1,4874	78,739
1,4875	78,777
1,4876	78,816
1,4877	78,854
1,4878	78,892
1,4879	78,931
1,4880	78,969
1,4881	79,008
1,4882	79,046
1,4883	79,084
1,4884	79,123
1,4885	79,161
1,4886	79,199
1,4887	79,238
1,4888	79,276
1,4889	79,314
1,4890	79,353
1,4891	79,391
1,4892	79,429
1,4893	79,468
1,4894	79,506
1,4895	79,544
1,4896	79,582
1,4897	79,620
1,4898	79,659
1,4899	79,697
1,4900	79,735
1,4901	79,773
1,4902	79,811
1,4903	79,850
1,4904	79,888
1,4905	79,926
1,4906	79,964
1,4907	80,002
1,4908	80,040
1,4909	80,078
1,4910	80,116
1,4911	80,154
1,4912	80,192
1,4913	80,231
1,4914	80,269
1,4915	80,307
1,4916	80,345
1,4917	80,383
1,4918	80,421
1,4919	80,459
1,4920	80,497
1,4921	80,534
1,4922	80,572
1,4923	80,610
1,4924	80,648
1,4925	80,686
1,4926	80,724
1,4927	80,762
1,4928	80,800
1,4929	80,838
1,4930	80,876
1,4931	80,913
1,4932	80,951
1,4933	80,989
1,4934	81,027
1,4935	81,065
1,4936	81,103
1,4937	81,140
1,4938	81,178
1,4939	81,216
1,4940	81,254
1,4941	81,291
1,4942	81,329
1,4943	81,367
1,4944	81,405
1,4945	81,442
1,4946	81,480
1,4947	81,518
1,4948	81,555
1,4949	81,593
1,4950	81,631
1,4951	81,668
1,4952	81,706
1,4953	81,744
1,4954	81,781
1,4955	81,819
1,4956	81,856
1,4957	81,894
1,4958	81,932
1,4959	81,969
1,4960	82,007
1,4961	82,044
1,4962	82,082
1,4963	82,119
1,4964	82,157
1,4965	82,194
1,4966	82,232
1,4967	82,269
1,4968	82,307
1,4969	82,344
1,4970	82,381
1,4971	82,419
1,4972	82,456
1,4973	82,494
1,4974	87,531
1,4975	82,569
1,9976	82,606
1,4977	82,643
1,4978	82,681
1,4979	82,718
1,4980	82,755
1,4981	82,793
1,4982	82,830
1,4983	82,867
1,4984	82,905
1,4985	82,942
1,4986	82,979
1,4987	83,016
1,4988	83,054
1,4989	83,091
1,4990	83,128
1,4991	83,165
1,4992	83,202
1,4993	83,240
1,4994	83,277
1,4995	83,314
1,4996	83,351
1,4997	83,388
1,4998	83,425
1,4999	83,463
1,5000	83,500
1,5001	83,537
1,5002	83,574
1,5003	83,611
1,5004	83,648
1,5005	83,685
1,5006	83,722
1,5007	83,759
1,5008	83,796
1,5009	83,833
1,5010	83,870
1,5011	83,907
1,5012	83,944
1,5013	83,981
1,5014	84,018
1,5015	84,055
1,5016	84,092
1,5017	84,129
1,5018	84,166
1,5019	84,203
1,5020	84,240
1,5021	84,277
1,5022	84,314
1,5023	84,351
1,5024	84,388
1,5025	84,424
1,5026	84,461
1,5027	84,498
1,5028	84,535
1,5029	84,572
1,5030	84,609
1,5031	84,645
1,5032	84,682
1,5033	84,719
1,5034	84,756
1,5035	84,792
1,5036	84,829
1,5037	84,866
1,5038	84,903
1,5039	84,939
1,5040	84,976
1,5041	85,013
1,5042	85,049
1,5043	85,086
1,5044	85,123
1,5045	85,159
1,5046	85,196
1,5047	85,233
1,5048	85,269
1,5049	85,306
1,5050	85,343
1,5051	85,379
1,5052	85,416
1,5053	85,452
1,5054	85,489
1,5055	85,525
1,5056	85,562
1,5057	85,598
1,5058	85,635
1,5059	85,672
1,5060	85,708
1,5061	85,744
1,5062	85,781
1,5063	85,817
1,5064	85,854
1,5065	85,890
1,5066	85,927
1,5067	85,963
1,5068	86,000
1,5069	86,036
1,5070	86,072
1,5071	86,109
1,5072	86,145
1,5073	86,182
1,5074	86,218
1,5075	86,254
1,5076	86,291
1,5077	86,327
1,5078	86,363
1,5079	86,399

METODA 4.

MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆERI

(Metoda Berlinskog instituta)

Opseg i područje primjene

1.	Ovom se metodom određuje količina reducirajućih šećera, izraženih kao invertni šećer, u polubijelom šećeru.

2.   Definicija

„Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.

3.   Princip

Otopina uzorka koji sadrži reducirajuće šećere koristi se za redukciju otopine bakrovog (II) kompleksa. Nastali bakrov (I) oksid tada se oksidira standardnom otopinom joda, čiji se suvišak određuje povratnom titracijom standardnom otopinom natrijevog tiosulfata.

4.   Reagensi

4.1.   Otopina bakra (II) (Müllerova otopina)

4.1.1.   U 400 ml kipuće vode otopiti 35 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O). Ostaviti da se ohladi.

4.1.2.   U 500 ml kipuće vode otopiti 173 g natrij-kalijevog tartarat tetrahidrata (Rochelle ili Seignette sol; KNaC4H4O6×4H2O) i 68 g bezvodnog natrijevog karbonata. Ostaviti da se ohladi.

4.1.3.   Obje otopine (4.1.1. i 4.1.2.) preliti u odmjernu tikvicu od jedne litre i nadopuniti vodom do 1 litre. Dodati 2 g aktivnog ugljena, protresti, ostaviti da stoji nekoliko sati i profiltrirati preko debelog filter papira ili membranskog filtra.

Ako se tijekom stajanja pojave male količine bakrovog (I) oksida, otopinu treba ponovo profiltrirati.

4.2.   Otopina octene kiseline, 5 mol/litra

4.3.   Otopina joda 0,01665 mol/litra (tj. 0,0333 N; 4,2258 g/litra)

4.4.   Otopina natrijevog tiosulfata 0,0333 mol/litra

4.5.   Otopina škroba: jednoj litri kipuće vode dodati suspenziju 5 g topljivog škroba u 30 ml vode. Ostaviti da vrije 3 minute, ostaviti da se ohladi i dodati, ako je potrebno, 10 mg živinog (II) jodida kao konzervans.

5.   Oprema

5.1.   Erlenmeyerova tikvica, 300 ml; birete i pipete

5.2.   Kipuća vodena kupelj

6.   Postupak

6.1.   U Erlenmeyerovu tikvicu od 300 ml odvagati uzorak (10 g ili manje) koji sadrži do 30 mg invertnog šećera i otopiti u približno 100 ml vode.

U Erlenmeyerovu tikvicu koja sadrži otopinu uzorka otpipetirati 10 ml otopine bakra (II) (4.1.). Sadržaj tikvice promiješati kružnim pokretima i tikvica se ostavi točno 10 minuta u kipućoj vodenoj kupelji (5.2.).

Razina otopine u Erlenmeyerovoj tikvici mora biti barem 20 mm ispod razine vode u vodenoj kupelji. Tikvicu treba brzo ohladiti mlazom hladne vode. Tijekom ovog postupka otopina se ne smije miješati, jer bi u protivnom atmosferski kisik ponovo oksidirao istaloženi bakrov (I) oksid.

Bez protresanja tikvice otpipetirati 5 ml octene kiseline 5 mol/litra (4.2.) i odmah iz birete dodati suvišak (između 20 i 40 ml) otopine joda 0,01665 mol/litra (4.3.).

Promiješati kako bi se otopio talog bakra. Titrirati suvišak joda s otopinom natrijevog sulfata 0,0333 mol/litra (4.4.) koristeći otopinu škroba (4.5.) kao indikator. Indikator se dodaje pri kraju titracije.

6.2.   Provesti slijepu probu s vodom. Ovo je potrebno provesti za svaku novu otopinu bakra (II) (4.4.). Titracija ne smije prijeći 0,1 ml.

6.3.   Provesti hladnu kontrolnu probu s otopinom šećera. Ostaviti na sobnoj temperaturi 10 minuta kako bi reagirale sve eventualno prisutne reducirajuće tvari kao što je sumporni dioksid.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

Volumen upotrijebljenog joda = ml 0,01665 mol/litra joda dodanog u suvišku minus ml 0,0333 mol/litra natrijevog tiosulfata utrošenog pri titraciji.

Volumen (u ml) 0,01665 mol/litra utrošenog joda korigira se oduzimanjem:

7.1.1.

Broj ml utrošenih za slijepu probu provedenu s vodom (6.2.).

7.1.2.

Broj ml utrošenih za hladnu probu s otopinom šećera (6.3.).

7.1.3.

Vrijednosti od 2,0 ml za svakih 10 g saharoze u upotrijebljenom alikvotu, ili proporcionalne količine ako uzorak sadrži manje od 10 g saharoze (korekcija za saharozu).

Nakon ovih korekcija, svaki ml otopine joda (4.3.) koji je reagirao, odgovara jednom miligramu invertnog šećera.

Količina invertnog šećera, izražena kao postotak u uzorku, izračunava se na sljedeći način:

pri čemu je:

V1= broj ml otopine joda (4.3.) nakon korekcije,

m0= masa upotrijebljenog uzorka, u gramima.

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja, koja na istom uzorku provodi isti analitičar istodobno ili neposredno jedno za drugim, u istim uvjetima, ne smije prelaziti 0,02 g na 100 g uzorka.

METODA 5.

MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER

(Metoda po Knightu i Allenu)

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje količina reducirajućih šećera, izraženih kao invertni šećer u:

—	šećeru ili bijelom šećeru,

—	ekstra bijelom šećeru.

2.   Definicija

„Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.

3.   Princip

Otopini uzorka dodaje se u suvišku bakrovog (II) reagensa koji se reducira, a nereducirani dio se povratno titrira otopinom EDTA.

4.   Reagensi

4.1.   Otopina etilen diamin tetraoctene kiseline (di-natrijeva sol) (EDTA) 0,0025 mol/litra: otopiti 0,930 g EDTA u vodi i nadopuniti vodom do jedne litre.

4.2.   Otopina mureksid indikatora: u 50 ml vode otopiti 0,25 g mureksida i pomiješati s 20 ml vodene otopine metilenskog modrila 0,2 g/100 ml.

4.3.   Alkalni bakreni reagens: U približno 600 ml vode koja sadrži 40 ml 1,0 mol/litra natrijevog hidroksida, otopiti 25 grama bezvodnog natrijevog karbonata i 25 g kalij-natrijevog tartarat tetrahidrata. U približno 100 ml vode otopiti 6,0 grama bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) i dodati otopini tartarata. Razrijediti vodom do 1 litre.

Napomena:

otopina ima ograničen rok trajanja (jedan tjedan).

4.4.   Standardna otopina invertnog šećera: u odmjernoj tikvici od 250 ml otopiti 23,750 g čiste saharoze (4.5.) u približno 120 ml vode, dodati 9 ml klorovodične kiseline (ζ = 1,16) i ostaviti da stoji osam dana pri sobnoj temperaturi. Otopinu dopuniti do 250 ml i provjeriti je li hidroliza potpuna mjerenjem polarimetrom ili saharimetrom u 200 mm cijevi. Vrijednost mora biti 11,80 ° ± 0,05 °S (vidi napomenu 8.). Otpipetirati 200 ml ove otopine u odmjernu tikvicu od 2 000 ml. Razrijediti vodom i uz protresanje (da ne bi došlo do prevelike lokalne alkalnosti) dodati 71,4 ml otopine natrijevog hidroksida (1 mol/litra) u kojoj je otopljeno 4 g benzojeve kiseline. Dopuniti do 2 000 ml da se dobije otopina invertnog šećera 1 g/100 ml. pH vrijednost ove otopine mora biti približno 3.

Ovu stabilnu osnovnu otopinu smije se razrijediti samo neposredno prije upotrebe.

4.5.   Čista saharoza: uzorak čiste saharoze koji sadrži invertnog šećera najviše 0,001 g/100 g.

5.   Oprema

5.1.   Epruvete: 150 mm × 20 mm.

5.2.   Bijela porculanska zdjelica.

5.3.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.

6.   Postupak

6.1.   U epruveti (5.1.) otopiti 5 g uzorka šećera u 5 ml hladne vode. Dodati 2,0 ml bakrovog reagensa (4.3.) i promiješati. Epruvetu pet minuta uroniti u kipuću vodenu kupelj, a zatim ohladiti u hladnoj vodi.

6.2.   Otopinu iz epruvete se kvantitativno prenijeti u bijelu porculansku zdjelicu (5.2.) koristeći što manju količinu vode, dodati 3 kapi indikatora (4.2.) te titrirati otopinom EDTA (4.1.). V0 je utrošeni volumen otopine ml EDTA pri titraciji.

Neposredno prije završne točke boja otopine mijenja se od zelene preko sive do ljubičaste, na završnoj točki. Ljubičasta boja zatim polako nestaje zbog oksidacije bakrovog (I) oksida u bakrov (II) oksid brzinom koja ovisi o koncentraciji prisutnog reduciranog bakra. Stoga završnoj točki titracije treba pristupiti prilično brzo.

6.3.   Konstruirati baždarnu krivulju dodavajući poznate količine invertnog šećera (u obliku prikladno razrijeđene otopine 4.4.) k 5 g čiste saharoze (4.5.) i dodati dovoljnu količinu hladne vode tako da je ukupno dodano 5 ml otopine. Nacrtati dijagram volumena utrošenog pri titraciji (u ml) u ovisnosti o udjelu invertnog šećera dodanog k 5 g saharoze: dobiveni dijagram je linearan u području od 0,001 do 0,019 g/100 g invertnog šećera/100 g uzorka.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Metoda izračunavanja

Iz baždarne krivulje očitati udio invertnog šećera koji odgovara vrijednosti V0 ml EDTA upotrijebljene pri analizi uzorka.

7.2.   Kod uzoraka za analizu s koncentracijom većom od 0,017g invertnog šećera/100 g uzorka, potrebno je količinu uzorka koji je uzet sukladno postupku (6.1.) odgovarajuće smanjiti, a uzorak za analizu dopuniti do 5 g s čistom saharozom (4.5.).

7.3.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jedno za drugim na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,005 g na 100 g uzorka.

8.   Napomena

Za pretvorbu °S u polarimetrijske stupnjeve, podijeliti °S s 2,889 (cijevi od 200 mm; izvor svjetlosti koji se sastoji od natrijeve svjetiljke; instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C).

METODA 6.

ODREĐIVANJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER ILI DEKSTROZNI EKVIVALENT

(Luff-Schoorlova metoda)

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje:

1.1.   Količina reducirajućih šećera izražena kao invertni šećer u:

—	otopini šećera,

—	otopini bijelog šećera,

—	otopini invertnog šećera,

—	otopini bijelog invertnog šećera,

—	sirupu invertnog šećerna,

—	sirupu bijelog invertnog šećernom.

1.2.   Količina reducirajućih šećera izražena i izračunana (na bazi suhe tvari) kao dekstrozni ekvivalent u:

—	glukoznom sirupu,

—	sušenom glukoznom sirupu.

1.3.   Količina reducirajućih šećera izražena kao D-glukoza u:

—	dekstroza monohidratu,

—	bezvodnoj dekstrozi.

2.   Definicija

„Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećeri, D-glukoza ili dekstrozni ekvivalent”: količina reducirajućih šećera izraženih kao invertni šećer, D-glukoza ili dekstrozni ekvivalent, određena opisanom metodom.

3.   Princip

Reducirajući šećeri u uzorku (ako je potrebno pročišćenom) zagrijavaju se do točke vrenja u standardiziranim uvjetima s otopinom bakrovih (II) iona, koji se djelomično reducira u bakar (I). Višak bakrovih (II) iona određuje se jodometrijski.

4.   Reagensi

4.1.   Carrez otopina (I): otopiti u vodi 21,95 g cinkovog acetata dihidrata (Zn(CH3COO)2 ·2H2O) (ili 24 g cinkovog acetat trihidrata (Zn(CH3COO)2·3H2O) i 3 ml ledene octene kiseline i nadopuniti do 100 ml vodom.

4.2.   Carrez otopina (II): otopiti u vodi 10,6 g kalijevog heksacijanoferata (II) trihidrata K4[Fe(CN)6] ·3H2O i nadopuniti vodom do 100 ml.

4.3.   Luff-Schoorlov reagens: pripremiti sljedeće otopine:

4.3.1.   Otopina bakrovog (II) sulfata: u 100 ml vode otopiti 25 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) koji ne sadrži željezo.

4.3.2.   Otopina limunske kiseline: u 50 ml vode otopiti 50 g limunske kiseline monohidrata (C6H8O7·H2O).

4.3.3.   Otopina natrijevog karbonata: otopiti 143,8 g bezvodnog natrijevog karbonata u oko 300 ml tople vode i ostaviti da se ohladi.

4.3.4.   U odmjernoj tikvici od jedne litre dodati otopinu limunske kiseline (4.3.2.) otopini natrijevog karbonata (4.3.3.) miješajući laganim kružnim pokretima. Miješati kružnim pokretima dok burna reakcija ne prestane, a zatim dodati otopinu bakrovog (II) sulfata (4.3.1.) i nadopuniti do 1 000 ml vodom. Ostaviti otopinu da stoji preko noći i zatim, ako je potrebno, profiltrirati. Provjeriti molaritet dobivenog reagensa metodom opisanom u točki 6.1. (Cu 0,1 mol/litra; Na2CO3 1 mol/litra).

4.4.   Otopina natrijevog tiosulfata, 0,1 mol/litra.

4.5.   Otopina škroba: u jednu litru kipuće vode dodati mješavinu koja se sastoji od 5 g topljivog škroba i 30 ml vode. Ostaviti da vrije tri minute, a zatim ostaviti da se ohladi i dodati, ako je potrebno, 10 mg živinog (II) jodida, koji služi kao konzervans.

4.6.   Sumporna kiselina, 3 mol/litra.

4.7.   Otopina kalijevog jodida, 30 % (m/v).

4.8.   Listići plovućca, prokuhani u klorovodičnoj kiselini, isprani vodom od kiseline i zatim osušeni.

4.9.   Izopentanol

4.10.   Natrijev hidroksid, 0,1 mol/litra.

4.11.   Klorovodična kiselina, 0,1 mol/litra.

4.12.   Otopina fenolftaleina, 1 % (m/v) u etanolu.

5.   Oprema

5.1.   Erlenmeyerova tikvica, 300 ml, s povratnim kondenzatorom.

5.2.   Štoperica.

6.   Postupak

6.1.   Standardizacija Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.).

6.1.1.   U 25 ml Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.) dodati 3 g kalijevog jodida i 25 ml 3 mol/litra sumporne kiseline (4.6.).

Titrirati s 0,1 mol/litra natrijevim tiosulfatom (4.4.) koristeći otopinu škroba (4.5.) kao indikator dodan pred kraj titracije. Ukoliko volumen utrošenog 0,1 mol/litra natrijevog tiosulfata nije 25 ml, reagens treba ponovo pripremiti.

6.1.2.   U odmjernu tikvicu od 100 ml otpipetirati 10 ml reagensa i razrijediti vodom do određenog volumena.

Otpipetirati 10 ml razrijeđenog reagensa u 25 ml 0,1 mol/litra klorovodične kiseline (4.11.) u Erlenmeyerovoj tikvici i zagrijavati u kipućoj vodenoj kupelji 1 sat. Ohladiti, nadopuniti do originalnog volumena svježe prokuhalom vodom i titrirati s 0,1 mol/l natrijevim hidroksidom (4.10.) koristeći fenolftalein (4.12.) kao indikator.

Volumen utrošenog 0,1 mol/litra natrijevog hidroksida (4.10.) mora biti između 5,5 i 6,5 ml.

6.1.3.   Titrirati 10 ml razrijeđenog reagensa (6.1.2.) s 0,1 mol/litra klorovodičnom kiselinom (4.11.) koristeći fenolftalein (4.12.) kao indikator. U završnoj točki titracije nestaje ljubičasta boja.

Volumen utrošene 0,1 mol/litra klorovodične kiseline (4.11.) mora biti između 6,0 i 7,5 ml.

6.1.4.   pH vrijednost Luff-Schoorlovog reagensa pri 20 °C mora biti između 9,3 i 9,4 ml.

6.2.   Priprema otopine

6.2.1.   S točnošću 1 mg izvagati 5 g uzorka i kvantitativno prenijeti u odmjernu tikvicu od 250 ml s 200 ml vode. Izbistriti, ako je potrebno, dodavanjem 5 ml Carrezove otopine (I) (4.1.) i zatim 5 ml Carrezove otopine (II) (4.2.). Promiješati nakon svakog dodavanja. Nadopuniti vodom do 250 ml. Dobro promiješati. Profiltrirati ako je potrebno.

6.2.2.   Razrijediti otopinu (6.2.1.) tako da 25 ml otopine sadrži najmanje 15 mg i najviše 60 mg reducirajućih šećera izraženih kao glukoza.

6.3.   Titracija po Luff-Schoorlovoj metodi

U Erlenmeyerovu tikvicu od 300 ml (5.1.). otpipetirati 25 ml Luff-Schoorlovog reagensa (4.3.) i 25 ml otopine šećera (6.2.2.) te dodati dva listića plovućca (4.8.). Na Erlenmeyerovu tikvicu (5.1.) spojiti povratno hladilo i aparaturu odmah postvaiti na azbestnu mrežicu iznad Bunsenovog plamenika. Srednji dio mrežice mora na azbestnom dijelu biti istog promjera kao dno tikvice. Zagrijavati tekućinu do vrenja 2 minute i pustiti da lagano vrije točno 10 minuta. Odmah ohladiti u hladnoj vodi i nakon 5 minuta titrirati na sljedeći način:

Dodati 10 ml otopine kalijevog jodida (4.7.) i odmah zatim dodati oprezno (zbog burne reakcije) 25 ml 3 mol/litra sumporne kiseline (4.6.). Titrirati s 0,1 mol/litra otopinom natrijevog tiosulfata (4.4.) dok otopina ne postane gotovo bezbojna, zatim dodati nekoliko ml otopine škroba (4.5.) kao indikator i nastaviti titraciju dok plava boja ne nestane.

Provesti kontrolnu probu koristeći 25 ml vode umjesto 25 ml otopine šećera (6.2.2.).

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i način izračunavanja

Iz donje tablice očitati (interpolirati ako je potrebno) masu glukoze ili invertnog šećera u mg koja odgovara razlici između dva očitanja titracija, koji su izraženi u ml 0,1 mol/litra natrijevog tiosulfata.

Rezultat se izražava kao invertni šećer ili D-glukozu, kao postotak (m/m) suhe tvari.

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dviju titracija koje provodi isti analitičar istovremeno ili neposredno jednu iza druge, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije biti veća od 0,2 ml.

8.   Napomena

Prije zakiseljavanja sumpornom kiselinom može se dodati mala količina izopentanola (4.9.) kako bi se smanjilo pjenjenje.

Tablice vrijednosti prema Luff-Schoorlovom reagensu

0,1 mol/litra Na2S2O3	Glukoza, fruktoza, invertni šećeri C6H12O6
ml	mg	razlika
1	2,4
2	4,8	2,4
3	7,2	2,4
4	9,7	2,5
5	12,2	2,5
6	14,7	2,5
7	17,2	2,5
8	19,8	2,6
9	22,4	2,6
10	25,0	2,6
11	27,6	2,6
12	30,3	2,7
13	33,0	2,7
14	35,7	2,7
15	38,5	2,8
16	41,3	2,8
17	44,2	2,9
18	47,1	2,9
19	50,0	2,9
20	53,0	3,0
21	56,0	3,0
22	59,1	3,1
23	62,2	3,1

METODA 7.

MJERENJE REDUCIRAJUĆIH ŠEĆERA IZRAŽENIH KAO INVERTNI ŠEĆER

(Laneova i Eynonova modifikacija konstantnog volumena)

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuju reducirajući šećeri, izraženi kao invertni šećer u:

—	otopini šećerna,

—	otopini bijelog šećera,

—	otopini invertnog šećera,

—	otopini bijelog invertnog šećera,

—	sirupu invertnog šećera,

—	sirupu bijelog invertnog šećera.

2.   Definicija

„Reducirajući šećeri izraženi kao invertni šećer”: količina reducirajućih šećera određena opisanom metodom.

3.   Princip

Određeni volumen pripremljene Fehlingove otopine titrira se u točki vrenja s određenim volumenom uz korištenje metilenskog modrila kao unutarnjeg indikatora.

4.   Reagensi

4.1.   Fehlingova otopina:

4.1.1.

Otopina A: Otopiti 69,3 g bakrovog (II) sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) u vodi i dopuniti do 1 000 ml.

4.1.2.

Otopina B: Otopiti 346,0 g natrij-kalijevog tartrata tetrahidrata (KNaC4H4O6·4H2O) i 100,0 g natrijevog hidroksida u vodi idopuniti do 1 000 ml. Prije upotrebe dekantirati bistru otopinu od taloga koji s vremenom može nastati.

Napomena:

Ove dvije otopine treba čuvati u smeđim bocama ili bocama boje jantara.

4.2.   Otopina natrijevog hidroksida, 1 mol/litra.

4.3.   Standardna otopina invertnog šećera: u odmjernoj tikvici od 250 ml otopiti 23,750 g čiste saharoze u približno 120 ml vode, dodati 9 ml klorovodične kiseline (ζ = 1,16) i ostaviti da stoji osam dana na sobnoj temperaturi. Otopinu dopuniti do 250 ml i mjerenjem polarimetrom ili saharimetrom u 200 mm cijevi provjeriti je li hidroliza potpuna. Vrijednost mora biti 11,80 ° ± 0,05 °S (vidi napomenu 8.). Otpipetirati 200 ml ove otopine u odmjernu tikvicu od 2 000 ml. Razrijediti vodom i uz protresanje (da ne bi došlo do prevelike lokalne alkalnosti) dodati 71,4 ml otopine natrijevog hidroksida (1 mol/litra) u kojoj je otopljeno 4 g benzojeve kiseline. Dopuniti do 2 000 ml da se dobije otopina invertnog šećera 1 g/100 ml. pH vrijednost ove otopine mora biti približno 3.

Ovu stabilnu osnovnu otopinu smije se razrijediti neposredno prije upotrebe.

Za pripremu otopine invertnog šećera 0,25 g/100 ml, pri 20 °C do oznake napuniti odmjernu tikvicu od 250 ml otopinom invertnog šećera 1 g/100 ml. Sadržaj tikvice prelije se u odmjernu tikvicu od 1 000 ml i nadopuni vodom do oznake, opet pri 20 °C.

4.4.   Otopina metilenskog modrila, 1 g/100 ml.

5.   Oprema

5.1.   Laboratorijska tikvica od vatrostalnog stakla s uskim grlom, 500 ml.

5.2.   Bireta, 50 ml, sa slavinom i vrhom za istjecanje, graduirana na 0,05 ml.

5.3.   Graduirane pipete, 20 ml, 25 ml i 50 ml.

5.4.   Odmjerne tikvice s jednom oznakom, 250 ml, 1 000 ml i 2 000 ml.

5.5.   Plamenik koji omogućava vrenje u skladu s uvjetima opisanim u 6.1., i uočavanje promjene boje u završnoj točki bez potrebe uklanjanja tikvice (5.1.) od izvora topline.

5.6.   Zaporni sat koji mjeri sekunde.

6.   Postupak

6.1.   Standardizacija Fehlingove otopine

6.1.1.   U čistu, suhu čašu otpipetirati 50 ml otopine B (4.1.2.), a zatim 50 ml otopine A (4.1.1.) i dobro promiješati.

6.1.2.   Isprati i napuniti biretu 0,25 % (0,25 g/100 ml) standardnom otopinom invertnog šećera (4.3.).

6.1.3.   Otpipetirati alikvot od 20 ml mješavine otopina A i B (6.1.1.) u tikvicu od vatrostalnog stakla od 500 ml (5.1.). U tikvicu dodati 15 ml vode. Iz birete dodati 39 ml otopine invertnog šećera, dodati malu količinu granula protiv stvaranja plinskih mjehura i laganim kružnim pokretima promiješati sadržaj tikvice.

6.1.4.   Tikvicu sa sadržajem zagrijavati do vrenja i pustiti da vrije točno dvije minute; tikvica se ne smije ukloniti s plamenika tijekom daljnjeg postupka niti vrenje smije prestati.

Na kraju dvominutnog perioda vrenja, dodati tri ili četiri kapi otopine metilenskog modrila (4.4.): otopina mora biti intenzivno plave boje.

6.1.5.   Nastaviti standardizaciju dodajući iz birete postupno standardnu otopinu invertnog šećera, najprije po 0,2 ml; zatim 0,1 ml i na kraju kap po kap do završne točke. U završnoj točki nestaje plava boja metilenskog modrila. Otopina poprima crvenkastu boju kao rezultat suspendiranog bakrovog (I) oksida.

6.1.6.   Završna bi se točka trebala postići tri minute od početka vrenja otopine. Konačni titar, V0, treba biti između 39,0 i 41,0 ml. Ukoliko je V0 izvan tih granica, potrebno je prilagoditi koncentraciju bakra u Fehlingovoj otopini A (4.1.1.) i ponoviti postupak standardizacije.

6.2.   Priprema otopina uzorka

Koncentracija otopine uzorka treba biti takva da sadrži između 250 i 400 mg invertnog šećera u 100 ml.

6.3.   Preliminarna proba

6.3.1.   Preliminarnu probu je potrebno provesti kako bi se osiguralo da je količina vode koja se dodaje u 20 ml miješane otopine A i B dovoljna da se dobije konačni volumen od 75 ml nakon titracije.

Provesti isti postupak kako je opisano u 6.1.4., ali umjesto standardne otopine invertnog šećera koristiti otopinu uzorka, tj. iz birete u tikvicu dodati 25 ml otopine uzorka. Dodati 15 ml vode i pustiti da vrije dvije minute, a zatim titrirati do završne točke kako je opisano u 6.1.5.

6.3.2.   Ako nakon dodavanja otopine metilenskog modrila ostane crvenkasta boja, znači da je koncentracija otopine uzorka prevelika. U tom slučaju, probu treba odbaciti i ponoviti s otopinom uzorka manje koncentracije.

Ukoliko je potrebno više od 50 ml otopine uzorka za dobivanje crvenkaste boje, mora se upotrijebiti otopina uzorka veće koncentracije.

Količinu vode koju je potrebno dodati, izračunati tako da se volumen mješavine Fehlingovih otopina (20 ml) i volumen otopine uzorka oduzmu od 75 ml.

6.4.   Završna analiza otopine uzorka

6.4.1.   U tikvicu od vatrostalnog stakla otpipetirati 20 ml miješane Fehlingove otopine i količinu vode određenu kako je opisano u 6.3.

6.4.2.   Iz birete dodati određeni titar otopine uzorka (kako je određeno u 6.3.) 1 ml manje. Dodati granule protiv stvaranja plinskih mjehura, kružnim pokretima promiješati sadržaj tikvice, zagrijati tikvicu i sadržaj do vrenja i titrirati kako je opisano u (6.3.). Završna točka bi se trebala postići jednu minutu nakon dodavanja otopine metilenskog modrila. Konačni titar = V1.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

Količina reducirajućih šećera u uzorku, izraženih kao invertni šećer, izračunava se na sljedeći način:

% reducirajućih šećera (kao invertni šećer) =

gdje je:

C	=	koncentracija otopine uzorka u g na 100 ml;
V0	=	volumen standardne invertne otopine upotrijebljen pri standardizacijskoj titraciji, u ml;
V1	=	volumen otopine uzorka upotrijebljene za preciznu analizu opisanu u točki 6.4.2., u ml;
f	=	faktor korekcije kojim se uzima u obzir koncentracija saharoze u otopini uzorka. Vrijednosti su prikazane u sljedećoj tablici:

Saharoza (g u kipućoj smjesi)	Faktor korekcije f
0	1,000
0,5	0,982
1,0	0,971
1,5	0,962
2,0	0,954
2,5	0,946
3,0	0,939
3,5	0,932
4,0	0,926
4,5	0,920
5,0	0,915
5,5	0,910
6,0	0,904
6,5	0,898
7,0	0,893
7,5	0,888
8,0	0,883
8,5	0,878
9,0	0,874
9,5	0,869
10,0	0,864

Korekcije za različite količine saharoze u otopini uzorka mogu se iz tablice izračunavati interpolacijom.

Napomena:

Približna koncentracija saharoze može se izračunati tako da se od ukupne koncentracije otopljenih čvrstih tvari izraženih kao saharoza, koji se određuju pomoću indeksa refrakcije otopine koristeći metodu 3. iz ovog dokumenta oduzme koncentracija otopljenih čvrstih tvari, koje potječu od invertnog šećera (za potrebe ovog izračuna f = 1,0).

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 1,0 % njihove aritmetičke sredine.

8.   Napomena:

Za pretvorbu °S u polarimetrijske stupnjeve, podijeliti °S s 2,889 (cijevi od 200 mm; izvor svjetlosti natrijeva svjetiljka; instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C).

METODA 8.

ODREĐIVANJE DEKSTROZNOG EKVIVALENTA

(Laneova i Eynonova konstanta)

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje dekstrozni ekvivalent u:

—	glukoznom sirupu,

—	sušenom glukoznom sirupu,

—	dekstroza monohidratu,

—	bezvodnoj dekstrozi.

2.   Definicija

2.1.   „Reducirajuća snaga” je količina reducirajućih šećera, određena opisanom metodom, izražena kao bezvodna dekstroza (D-glukoza) i izračunana kao maseni udio u uzorku.

2.2.   „Ekvivalent dekstroze” je reducirajuća snaga, izračunana kao maseni udio u suhoj tvari uzorka.

3.   Princip

Otopina uzorka u točki vrenja, u strogo specificiranim uvjetima, titrira se s određenim volumenom pripremljene Fehlingove otopine uz korištenje metilenskog modrila kao unutarnjeg indikatora.

4.   Reagensi

4.1.   Fehlingova otopina:

4.1.1.   Otopina A.

Otopiti 69,3 g bakar (II) sulfata pentahidrata (CuSO4 ·5H2O) u vodi i dopuniti do 1 000 ml u odmjernoj tikvici.

4.1.2.   Otopina B.

Otopiti 346,0 g natrij-kalijevog tartarat tetrahidrata (KNaC4H4O6·4H2O) i 100 g natrijevog hidroksida u vodi. Dopuni do 1 000 ml u odmjernoj tikvici. Prije upotrebe dekantirati bistru otopinu od taloga koji s vremenom može nastati.

Napomena:

Ove dvije otopine (4.1.1. i 4.1.2.) treba pohraniti u smeđe boce ili boce boje jantara.

4.1.3.   Priprema miješane Fehlingove otopine

U čistu i suhu čašu otpipetirati 50 ml otopine B (4.1.2.), a zatim 50 ml otopine A (4.1.1.) i dobro promiješati.

Napomena:

Miješana Fehlingova otopina ne smije se pohranjivati nego ju je uvijek potrebno pripremiti svježu i standardizirati (6.1.).

4.2.   Bezvodna dekstroza (D-glukoza) (C6H12O6)

Prije upotrebe materijal treba sušiti četiri sata u vakuum sušioniku na temperaturi 100 ± 1 °C ili manje i pri unutarnjem tlaku približno 10 kPa (103 mbar).

4.3.   Standardna otopina dekstroze, 0,600 g/100 ml

S točnošću od 0,1 mg izvagati 0,6 g bezvodne dekstroze (4.2.), otopiti je u vodi, otopinu kvantitativno prenijeti u odmjernu tikvicu od 100 ml (5.4), nadopuniti vodom do oznake i promiješati.

Ova se otopina prije svake upotrebe mora svježe pripremiti.

4.4.   Otopina metilenskog modrila, 0,1 g/100 ml

Otopiti 0,1 g metilenskog modrila u 100 ml vode.

5.   Oprema

5.1.   Laboratorijska tikvica od vatrostalnog stakla s uskim grlom, 250 ml

5.2.   Bireta, 50 ml, sa slavinom i vrhom za istjecanje, graduirana na 0,05 ml.

5.3.   Pipete s jednom oznakom, 25 ml i 50 ml.

5.4.   Odmjerne tikvice s jednom oznakom, 100 ml i 500 ml.

5.5.   Plamenik koji omogućava vrenje u skladu s uvjetima opisanim u točki 6.1. i uočavanje promjene boje u završnoj točki bez potrebe uklanjanja tikvice (5.1.) od izvora topline (vidi točku 6.1., napomenu 3.).

5.6.   Zaporni sat koji mjeri sekunde.

6.   Postupak

6.1.   Standardizacija Fehlingove otopine

6.1.1.   U čistu, suhu vatrostalnu tikvicu (5.1.). otpipetirati 25 ml Fehlingove otopine (4.1.3.)

6.1.2.   Napuniti biretu (5.2.) standardnom otopinom dekstroze (4.3.) i podesiti meniskus na oznaku nula.

6.1.3.   U vatrostalnu tikvicu (5.1.) iz birete dodati 18 ml standardne otopine dekstroze (4.3.). Kružnim pokretima izmiješati sadržaj tikvice.

6.1.4.   Vatrostalnu tikvicu postaviti na plamenik (5.5.) koji je prethodno podešen tako da vrenje počne nakon 120 ± 15 sekundi.

Plamenik se tijekom titracije ne smije dodatno podešavati (vidi napomenu 1.).

6.1.5.   Kad započne vrenje, uključiti zaporni sat.

6.1.6.   Sadržaj tikvice pustiti da vrije 120 sekundi, mjereći vrijeme zapornim satom.

Pri kraju vrenja dodati 1 ml otopine metilenskog modrila (4.4.).

6.1.7.   Nakon 120 sekundi vrenja (mjerenih zapornim satom) početi iz birete (6.1.2.) u vatrostalnu tikvicu (5.1.) dodavati po 0,5 ml standardne otopine dekstroze dok u potpunosti ne nestane plava boja metilenskog modrila (vidi napomene 2. i 3.).

Zabilježiti ukupni dodani volumen standardne otopine dekstroze uključujući predzadnje dodavanje 0,5 ml (X ml).

6.1.8.   Ponoviti postupak pod točkama 6.1.1. i 6.1.2.

6.1.9.   U vatrostalnu tikvicu (5.1.) iz birete dodati (X–0,3) ml standardne otopine dekstroze.

6.1.10.   Ponoviti postupak pod točkama 6.1.4., 6.1.5 i 6.1.6.

6.1.11.   Nakon 120 sekundi vrenja (mjereno zapornim satom) početi iz birete dodavati standardnu otopinu dekstroze u vatrostalnu tikvicu (5.1.), najprije po 0,2 ml, zatim kap po kap, dok ne nestane plava boja metilenskog modrila.

Pri kraju postupka standardnu otopinu glukoze treba dodavati u intervalima od 10 do 15 sekundi.

Ova dodavanja bi trebala biti završena u vremenu do 60 sekundi, a ukupno vrijeme vrenja ne smije biti duže od 180 sekundi.

Kako bi se to postiglo, mogla bi biti potrebna i treća titracija, s malo većim, prikladno podešenim, početnim dodatkom standardne otopine dekstroze (6.1.9.).

6.1.12.   Zabilježiti volumen standardne otopine dekstroze (V0 ml), utrošen do završne točke zadnje titracije (vidi napomenu 4.).

6.1.13.   V0 mora biti između 19,0 i 21,0 ml standardne otopine dekstroze (4.3).

Ako je V0 izvan tih granica, treba prilagoditi koncentraciju Fehlingove otopine A (4.1.1.) i ponoviti postupak standardizacije.

6.1.14.   Budući da je V0 poznat, za svakodnevnu standardizaciju miješane Fehlingove otopine potrebna je samo jedna titracija, s početnim volumenom dodavanja standardne otopine dekstroze (V0 – 0,5) ml.

Napomena 1.:

Ovim se osigurava da, kad započne vrenje, stvaranje pare bude neprekidno tijekom cijelog procesa titracije, čime se u najvećoj mogućoj mjeri sprečava ulazak zraka u tikvicu i reoksidacija njezinog sadržaja.

Napomena 2.:

Nestajanje modre boje metilenskog modrila najbolje se uočava tako da se promatraju gornji slojevi i meniskus otopine u tikvici, jer je u njemu relativno malo istaloženog crvenog bakar (I) oksida. Nestajanje modre boje najbolje se uočava ako se koristi indirektno svjetlo. Korisno je i postaviti bijeli zaslon iza tikvice.

Napomena 3.:

Tijekom određivanja bireta mora biti što je više moguće izolirana od izvora topline.

Napomena 4.:

Budući da je uvijek prisutan ljudski faktor, svaki analitičar treba provesti vlastitu standardizaciju i u izračunu koristiti vlastite vrijednosti za V0 (7.1.).

6.2.   Preliminarno ispitivanje pripremljenog uzorka

6.2.1.   Ukoliko približna vrijednost reducirajuće snage (2.1.) pripremljenog uzorka nije poznata, potrebno je provesti preliminarno ispitivanje kojim se određuje približna vrijednost potrebna za izračunavanje masenog udjela u uzorku (6.3.).

Ovo se ispitivanje provodi na sljedeći način:

6.2.2.   Pripremiti 2 % otopinu m/v uzorka s procijenjenom vrijednosti „Z”.

6.2.3.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.2., koristeći otopinu uzorka (6.2.2.) umjesto standardne otopine dekstroze.

6.2.4.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.1.

6.2.5.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.3., koristeći 10,0 ml otopine uzorka umjesto 18,0 ml standardne otopine dekstroze.

6.2.6.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.4.

6.2.7.   Sadržaj tikvice zagrijati do vrenja. Dodati 1 ml otopine metilenskog modrila (4.4.).

6.2.8.   Odmah po početku vrenja, treba uključiti zaporni sat (5.6.) i započeti s dodavanjem po 1,0 ml otopine uzorka iz birete u tikvicu u intervalima od približno 10 sekundi, dok ne nestane boja metilenskog modrila.

Zabilježiti ukupni dodani volumen otopine uzorka uključujući predzadnje dodavanje (Y ml).

6.2.9.   „Y” ne smije biti veći od 50 ml. Ukoliko jest, treba povećati koncentraciju otopine uzorka i ponoviti titraciju.

6.2.10.   Približna reducirajuća snaga pripremljenog uzorka, izražena kao maseni udio, izračunava se na sljedeći način:

6.3.   Uzorak za analizu

S točnošću 0,1 mg izvagati pripremljeni uzorak (mg) koja sadrži između 2,85 i 3,15 g reducirajućih šećera izraženih kao bezvodna dekstroza (D-glukoza), koristeći pri izračunavanju ili poznatu približnu vrijednost reducirajuće snage (2.1.) ili približnu vrijednost dobivenu u točki 6.2.10.

6.4.   Otopina uzorka

Otopiti uzorak u vodi i nadopuniti do 500 ml u odmjernoj tikvici.

6.5.   Određivanje

6.5.1.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.1.

6.5.2.   Napuniti biretu (5.2.) otopinom uzorka (6.4.) i podesiti meniskus na oznaku nula.

6.5.3.   U vatrostalnu tikvicu birete dodati 18,5 ml otopine uzorka. Izmiješati sadržaj kružnim kretnjama.

6.5.4.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.4.

6.5.5.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.5.

6.5.6.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.6.

6.5.7.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.7., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.

6.5.8.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.8.

6.5.9.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.9., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.

6.5.10.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.10.

6.5.11.   Postupiti kako je opisano u točki 6.1.11., koristeći otopinu uzorka umjesto standardne otopine dekstroze.

6.5.12.   Zabilježiti volumen otopine uzorka (V1) upotrijebljen do završne točke zadnje titracije.

6.5.13.   V1 mora biti između 19,0 i 21,0 ml otopine uzorka.

Ukoliko je V1 izvan tih granica, treba prilagoditi koncentraciju otopine uzorka i ponoviti postupak pod točkama 6.5.1. do 6.5.12.

6.5.14.   Treba provesti dva određivanja na istoj otopini uzorka.

6.6.   Količina suhe tvari

Odrediti udio suhe tvari metodom 2. pripremljenog uzorka.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

7.1.1.   Reducirajuća snaga

Reducirajuća snaga, izražena kao maseni udio u pripremljenom uzorku, izračunava se na sljedeći način:

pri čemu je:

V0= volumen standardne otopine dekstroze (4.3.) upotrijebljen pri standardizacijskoj titraciji (6.1), izražen u ml;

V1= volumen otopine uzorka (6.4.) upotrijebljen pri titraciji utvrđivanja (6.5.), izražen u ml;

M= masa uzorka (6.3.) upotrijebljena za pripremu 500 ml otopine uzorka, izražena u gramima.

7.1.2.   Dekstrozni ekvivalent

Dekstrozni ekvivalent, izračunan kao postotak u odnosu na masu suhe tvari u pripremljenom uzorku, izražen je na sljedeći način:

pri čemu je:

RP	=	reducirajuća snaga, izračunana kao maseni udio pripremljenog uzorka (7.1.1.);
D	=	količina suhe tvari u pripremljenom uzorku, izražena kao postotak mase.

7.1.3.   Rezultat je aritmetička sredina dvaju određivanja, pod uvjetom da su zadovoljen kriterij ponovljivosti (7.2.).

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 1,0 % njihove aritmetičke sredine.

METODA 9.

ODREĐIVANJE SULFATNOG PEPELA

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje količina sulfatnog pepela u:

—	glukoznom sirupu,

—	sušenom glukoznom sirupu,

—	dekstroza monohidratu,

—	bezvodnoj dekstrozi.

2.   Definicija

„Količina sulfatnog pepela”: količina sulfatnog pepela određena opisanom metodom.

3.   Princip

Određuje se ostatak mase uzorka nakon spaljivanja u oksidacijskoj atmosferi pri 525 °C u prisutnosti sumporne kiseline i izračunava se kao maseni udio u uzorku.

4.   Reagensi

4.1.   Sumporna kiselina, razrijeđena otopina: uz miješanje i hlađenje polako i pažljivo dodati 100 ml koncentrirane sumporne kiseline (gustoća pri 20 °C = 1,84 g/ml; 96 % m/m) u 300 ml vode

5.   Oprema

5.1.   Električna mufolna peć opremljena pirometrom, radne temperature 525 ± 25 °C.

5.2.   Analitička vaga, točnosti 0,1 mg.

5.3.   Lončići za žarenje, od platine ili kvarcnog stakla, odgovarajućeg kapaciteta.

5.4.   Eksikator, sa svježe aktiviranim silikagelom ili odgovarajućim sušilom i s indikatorom prisutnosti vode.

6.   Postupak

Lončić za žarenje (5.3.) zagrijati na temperaturu spaljivanja, ohladiti u eksikatoru i izvagati. S točnošću 0,1 mg u lončić za žarenje izvagati 5 g glukoznog sirupa ili sušenoga glukoznog sirupa, ili približno 10 g dekstroza monohidrata ili bezvodne dekstroze.

Dodati 5 ml otopine sumporne kiseline (4.1.) (vidi napomenu 8.1.) i uzorak pažljivo zagrijavati u lončiću za žarenje iznad plamena ili na žarnoj ploči dok potpuno ne pougljeni. Postupak karbonizacije, pri kojem iz uzorka izlaze pare (vidi napomenu 8.2.), treba izvoditi u digestoru.

Lončić za žarenje (5.3.) staviti u mufolnu peć (5.1.) u kojoj je temperatura 525 ± 25 °C i spaljivati do nastanka bijelog pepela. To obično traje dva sata (vidi napomenu 8.3.).

Uzorak hladiti približno 30 minuta u eksikatoru (5.4.) i zatim izvagati.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

Količina sulfatnog pepela, izražena kao maseni udio u analiziranom uzorku, izračunava se na sljedeći način:

pri čemu je:

m1= masa pepela u gramima;

m0= masa uzorka u gramima.

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dvaju određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku pod istim uvjetima, ne smije prelaziti 2 % njihove aritmetičke sredine.

8.   Napomene

8.1.   Sumpornu kiselinu dodavati u malim količinama kako bi se spriječilo prekomjerno pjenjenje.

8.2.   Pri prvoj karbonizaciji potreban je veliki oprez kako bi se spriječio gubitak uzorka ili pepela zbog prekomjernog nabreknuća uzorka.

8.3.   Ukoliko uzorak ne sagori potpuno (tj. ostanu crne čestice), lončić za žarenje treba izvaditi iz peći, ohladiti, ostatak uzorka nakon hlađenja navlažiti s nekoliko kapi vode i vratiti u peć.

METODA 10.

ODREĐIVANJE POLARIZACIJE

1.   Opseg i područje primjene

Ovom se metodom određuje polarizacija u:

—	polubijelom šećeru,

—	šećeru ili bijelom šećeru,

—	ekstra bijelom šećeru.

2.   Definicija

Polarizacija je optička rotacija polarizirane svjetlosti otopine šećera 26 g šećera na 100 ml u cijevi duljine 200 mm.

3.   Princip

Polarizacija se određuje upotrebom saharimetra ili polarimetra pod uvjetima opisanim u sljedećoj metodi.

4.   Reagensi

4.1.   Sredstvo za bistrenje: alkalna otopina olovnog acetata.

U približno 1 000 ml netom provrele vode dodati 560 g suhog alkalnog olovnog acetata. Pustiti mješavinu da vrije 30 minuta i zatim ostaviti da stoji preko noći.

Pretočiti površinsku tekućinu i razrijediti je netom provrelom vodom kako bi se dobila otopina gustoće 1,25 g/ml, pri 20 °C.

Zaštititi otopinu od kontakta sa zrakom.

4.2.   Dietil eter

5.   Oprema

5.1.   Saharimetar, graduiran za normalnu masu od 26 g saharoze, ili polarimetar.

Ovaj instrument mora biti instaliran u prostoriji u kojoj je moguće održavati temperaturu na približno 20 °C. Instrument kalibrirati standardnim kvarcnim pločicama.

5.2.   Izvor svjetlosti sastoji se od natrijeve svjetiljke.

5.3.   Precizne polarimetrijske cijevi duge 200 mm, greška ne smije biti veća od ± 0,02 mm.

5.4.   Analitička vaga točnosti 0,1 mg.

5.5.   Pojedinačno kalibrirane odmjerne tikvice od 100 ml s čepom. Tikvice stvarnog volumena 100,00 ± 0,01 ml mogu se koristiti bez korekcije. Tikvice volumena izvan ovih granica moraju se koristiti s prikladnom korekcijom kojom se volumen podešava na 100 ml.

5.6.   Vodena kupelj, s termostatski kontroliranom temperaturom od 20 ± 0,1 °C.

6.   Postupak

6.1.   Priprema otopine.

Što je brže moguće izvagati 26 ± 0,002 g uzorka i kvantitativno ga prenijeti u odmjernu tikvicu od 100 ml (5.5.) s približno 60 ml vode.

Otopiti kružnim pokretima, bez zagrijavanja.

Ako je potrebno bistrenje, dodati 0,5 ml olovo acetata (4.1.).

Promiješati otopinu rotirajući tikvicu i ispirući pritom stjenke tikvice, sve dok volumen ne bude takav da je meniskus približno 10 mm ispod oznake.

Tikvicu staviti u kontroliranu vodenu kupelj (5.6.) na 20 ± 0,1 °C dok temperatura otopine šećera ne bude konstantna.

Dodavanjem kapi dietil etera (4.2.).ukloniti mjehuriće na površini tekućine

Nadopuniti vodom do oznake.

Začepiti i temeljito promiješati preokrećući tikvicu barem tri puta.

Ostaviti da stoji pet minuta.

6.2.   Polarizacija

Održavati temperaturu na 20 ± 1 °C u svim daljnjim postupcima.

6.2.1.   Uređaj namjestiti na nulu.

6.2.2.   Uzorak profiltrirati kroz filtar papira. Prvih 10 ml filtrata odbaciti. Sakupiti sljedećih 50 ml filtrata.

6.2.3.   Cijev polarimetra oprati ispirući je dvaput otopinom uzorka za analizu (6.2.2).

6.2.4.   Cijev pažljivo napuniti otopinom uzorka za analizu pri 20 ± 0,1 °C.

Ukloniti sve mjehuriće zraka pri stavljanju na mjesto krajnje ploče. Postaviti napunjenu cijev u ležište uređaja.

6.2.5.   Zabilježiti rotaciju s točnošću 0,05 °S ili 0,02 kutnih stupnjeva. Ponoviti postupak još četiri puta. Izračunati srednju vrijednost pet očitanja.

7.   Izražavanje rezultata

7.1.   Formula i metoda izračunavanja

Rezultati se izražavaju u stupnjevima S s točnošću 0,1 °S. Za pretvorbu kutnih stupnjeva u stupnjeve S, koristi se sljedeća formula:

7.2.   Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja, koja provodi isti analitičar, istovremeno ili neposredno jedno za drugim, na istom uzorku te pod istim uvjetima, tako da svaki predstavlja srednju vrijednost pet očitanja, ne smije prelaziti 0,1 °S.

---

(1)  n vrijednosti u ovoj tablici izračunane su iz jednadžbe koju je razvio K. Rosenhauer za ICUMSA, a programirao ih je i izračunao Frank G. Carpenter iz UDSA te su objavljene u časopisu Sugar J. br. 33., str. 15.-22. (lipanj 1970.). Refrakcijski indeks se mjerio pri 20 °C s nultom crtom Na. Stupnjevi Brixa (% saharoze prema težini) dobiveni su vaganjem pri 20 °C u zraku pri tlaku od 760 Torra (mm Hg) i relativnoj vlazi 50 %. Ova tablica zamjenjuje prijašnju tablicu 47.012, 11. izdanje, uzetu iz časopisa Intern. Sugar J. 39., 22s (1937.).

---