PRILOGA I

SPLOŠNE SKUPNE SPECIFIKACIJE

Del I – Zahteve glede značilnosti učinkovitosti pripomočkov, zajetih v prilogah II do XIII

Značilnosti učinkovitosti

Zahteva

Vse zahteve glede značilnosti učinkovitosti, določene v oddelku 9.1, točki (a) in (b), oddelku 9.3 in oddelku 9.4, točka (a), Priloge I k Uredbi (EU) 2017/746

1.Določanje značilnosti učinkovitosti se izvede v neposredni primerjavi z najsodobnejšim pripomočkom. Pripomoček, ki se uporablja za primerjavo, ima oznako CE, če je ob času ocene učinkovitosti ta pripomoček na trgu.

2.Pripomočki, ki se uporabljajo za določanje statusa vzorcev, ki se uporabljajo pri določanju značilnosti učinkovitosti, so najsodobnejši pripomočki z oznako CE.

3.Če se med seboj različni rezultati prepoznajo kot del določanja značilnosti učinkovitosti, se ti rezultati, kolikor je to mogoče, pojasnijo, na primer z:

–vrednotenjem neskladnega vzorca v nadaljnjih pripomočkih,

–uporabo alternativne metode ali označevalca,

–ponovnim pregledom pacientovega kliničnega stanja in diagnoze ter

–testiranjem nadaljnjih vzorcev.

4.Določanje značilnosti učinkovitosti se izvede na populaciji, enakovredni evropski populaciji.

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

5.Kot del predpisane analize tveganja se stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema, ki povzroča lažno negativne rezultate, določi s ponovljenimi testi na nizko pozitivnih vzorcih.

Analizna občutljivost in analizna specifičnost, motnje

6.Za pripomočke, ki so namenjeni uporabi s plazmo, proizvajalec preveri učinkovitost pripomočka z vsemi antikoagulanti, ki jih proizvajalec navede za uporabo s pripomočkom, in sicer za vsaj 50 vzorcev plazme (za pripomočke, namenjene detekciji in/ali kvantifikaciji povzročiteljev okužb, 25 pozitivnih in 25 negativnih).

Analizna in diagnostična specifičnost, motnje in navzkrižna reaktivnost

7.Proizvajalec izbere morebitne moteče snovi, ki se ovrednotijo ob upoštevanju sestave reagentov in konfiguracije pripomočka.

Konsistentnost med serijami

8.Za pripomočke, namenjene detekciji antigenov in protiteles, proizvajalčeva merila za preskušanje serij zagotavljajo, da se v vsaki seriji dosledno opredelijo ustrezni antigeni, epitopi in protitelesa ter je primerna za navedene vrste vzorcev.

9.Proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi serij za teste prve izbire zajema vsaj 100 vzorcev, negativnih na zadevni analit 1 .

Del II – Zahteve glede značilnosti učinkovitosti pripomočkov iz prilog III do XIII

Značilnosti učinkovitosti	Zahteva
Analizna in diagnostična občutljivost	10.Pripomočki, ki jih je proizvajalec namenil testiranju telesnih tekočin razen seruma ali plazme, npr. urina, sline itn., morajo izpolnjevati enake zahteve kot pripomočki za testiranje seruma ali plazme. Proizvajalec preskusi testne vzorce istih posameznikov tako pri pripomočkih v procesu odobritve kot pri zadevnem pripomočku za testiranje seruma ali plazme. 2 11.Pripomočki za samotestiranje morajo izpolnjevati enake zahteve kot ustrezni pripomočki za strokovno uporabo. 12.Pozitivni vzorci, uporabljeni pri oceni učinkovitosti, se izberejo tako, da odražajo različne stadije ustreznih bolezni, različne vzorce protiteles, različne genotipe, različne podtipe, mutante itn. 13.Serokonverzijski paneli se začnejo z negativnimi vzorci krvi, intervali med pregledi krvi pa so po možnosti kratki. Kadar to ni mogoče, proizvajalci v poročilu o oceni učinkovitosti navedejo utemeljitev. 14.Za pripomočke, ki jih je proizvajalec namenil za uporabo s serumom in plazmo, je pri oceni učinkovitosti treba dokazati enakovrednost seruma in plazme. To se dokaže za vsaj 25 pozitivnih vzorcev darovalcev krvi. 15.Za pripomočke za detekcijo ali kvantifikacijo antigenov ali nukleinskih kislin se v navodilih za uporabo navedejo ciljni antigeni oziroma ciljna območja nukleinskih kislin. 16.Za pripomočke za detekcijo ali kvantifikacijo protiteles proti povzročitelju okužbe so v navodilih za uporabo navedeni ciljni antigeni navedenih protiteles.
Analizna in diagnostična specifičnost	17.Pripomočki, ki jih je proizvajalec namenil testiranju telesnih tekočin razen seruma ali plazme, npr. urina, sline itn., morajo izpolnjevati enake zahteve kot pripomočki za testiranje seruma ali plazme. Pri oceni učinkovitosti se preskusijo testni vzorci istih posameznikov tako pri pripomočkih v procesu odobritve kot pri zadevnem pripomočku za uporabo s serumom ali plazmo.1 18.Pripomočki za samotestiranje morajo izpolnjevati enake zahteve kot ustrezni pripomočki za strokovno uporabo. 19.Negativni vzorci, ki se uporabijo pri oceni učinkovitosti, se določijo tako, da predstavljajo ciljno populacijo, ki ji je pripomoček namenjen, na primer krvodajalce, hospitalizirane paciente, nosečnice itn. 20.Specifičnost temelji na večkrat reaktivnih lažno pozitivnih rezultatih pri vzorcih, negativnih na ciljni označevalec. 21.Za pripomočke, ki jih je proizvajalec namenil za uporabo s serumom in plazmo, je pri oceni učinkovitosti treba dokazati enakovrednost seruma in plazme. To se dokaže za vsaj 25 negativnih vzorcev darovalcev krvi.
Analizna in diagnostična specifičnost, motnje in navzkrižna reaktivnost	22.Proizvajalec po potrebi vključi vzorce, kot so: –vzorce, ki predstavljajo sorodne okužbe, –vzorce, ki so bili odvzeti pri ženskah, ki so večkrat zanosile, ali pacientih, pozitivnih na revmatoidni faktor (RF), –vzorce, ki vsebujejo človeška protitelesa proti komponentam sistema za izražanje genov, na primer proti E. coli ali proti kvasovkam.
Učinkovitost, ki jo dosežejo nestrokovnjaki	23.Ustrezne dele ocene učinkovitosti izvedejo (ali ponovijo) nestrokovnjaki za potrditev delovanja pripomočka in ustreznost navodil za uporabo. Nestrokovnjaki, ki so bili izbrani za oceno učinkovitosti, so reprezentativni za predvidene skupine uporabnikov.

PRILOGA II

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ANTIGENOV KRVNIH SKUPIN V SISTEMIH KRVNIH SKUPIN ABO, RH, KELL, DUFFY IN KIDD

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji antigenov krvnih skupin v sistemih krvnih skupin ABO, Rh, Kell, Duffy in Kidd.

Preglednica 1 se uporablja za oceno učinkovitosti pripomočkov, namenjenih detekciji antigenov krvnih skupin v sistemih krvnih skupin ABO, Rh, Kell, Duffy in Kidd.
Preglednica 2 se uporablja za proizvajalčevo preskušanje skladnosti med serijami reagentov in reagenčnih proizvodov za določanje antigenov krvnih skupin v sistemih krvnih skupin ABO, Rh, Kell, Duffy in Kidd (testni reagenti, kontrolni materiali).

Preglednica 1. Ocena učinkovitosti pripomočkov, namenjenih detekciji antigenov krvnih skupin v sistemih krvnih skupin ABO, Rh, Kell, Duffy in Kidd

Specifičnost reagenta	Število testov na metodo, ki jih navede proizvajalec	Skupno število vzorcev, ki se testirajo, preden je pripomoček dan na trg	Skupno število vzorcev, ki se testirajo za novo formulacijo ali uporabo jasno opredeljenih reagentov	Splošna merila glede kvalifikacij	Specifična merila glede kvalifikacij	Merila sprejemljivosti
Anti-ABO1 (anti-A), anti-ABO2 (anti-B), anti-ABO3 (anti-A,B)	≥ 500	≥ 3 000	≥ 1 000	Klinični vzorci: 10 % testne populacije Vzorci novorojenčkov: > 2 % testne populacije	Vzorci ABO vključujejo > 40 % vzorcev, pozitivnih na antigena A in B, ki lahko vključujejo vzorce iz skupine A, skupine B in skupine AB.	Pri vseh reagentih je učinkovitost v zvezi z navedeno reaktivnostjo pripomočka primerljiva z najsodobnejšimi pripomočki z oznako CE. Za pripomočke z oznako CE, katerih področje ali način uporabe je spremenjeno ali razširjeno, se izvedejo nadaljnji testi v skladu z zahtevami iz stolpca 2 zgoraj (Število testov na metodo, ki jih navede proizvajalec).
Anti-RH1 (anti-D)	≥ 500	≥ 3 000	≥ 1 000		Ocena učinkovitosti anti-D reagentov vključuje teste za vzorce z različno šibko izraženim antigenom RH1 (D) in delno izraženim antigenom RH1 (D), glede na predvideno uporabo proizvoda. Celice s šibko in/ali delno izraženim antigenom D predstavljajo > 2 % vzorcev, pozitivnih na RH1 (D).
Anti-RH2 (anti-C), anti-RH4 (anti-c), anti-RH3 (anti-E)	≥ 100	≥ 1 000	≥ 200
Anti-RH5 (anti-e)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti KEL1 (anti-K)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti-JK1 (Jka), anti-JK2 (Jkb)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti-FY1 (Fya), anti-FY2 (Fyb)	≥ 100	≥ 500	≥ 200

Opomba: Pozitivni vzorci, uporabljeni pri oceni učinkovitosti, se izberejo tako, da odražajo varianto antigena in šibko izražene antigene.

Preglednica 2. Proizvajalčevo preskušanje skladnosti med serijami reagentov in reagenčnih proizvodov za določanje antigenov krvnih skupin v sistemih krvnih skupin ABO, Rh, Kell, Duffy in Kidd

1.Testni reagenti

Reagenti za določanje krvnih skupin

Najmanjše število testiranih kontrolnih celic kot del testiranja specifičnosti

Merila sprejemljivosti

Pozitivne reakcije

Negativne reakcije

Vsaka serija reagenta izkazuje nedvoumne pozitivne ali negativne rezultate z vsemi tehnikami, ki jih navede proizvajalec v skladu z rezultati, pridobljenimi iz podatkov o oceni učinkovitosti.

A1

A2B

Ax

B

O

Anti-ABO1 (anti-A)

2

2

2 I

2

2

B

A1B

A1

O

Anti-ABO2 (anti-B)

2

2

2

2

A1

A2

Ax

B

O

Anti-ABO3 (anti-A,B)

2

2

21

2

4

R1r

R2r

šibek D

r’r

r”r

rr

Anti-RH1 (anti-D)

2

2

21

1

1

1

R1R2

R1r

r’r

R2R2

r”r

rr

Anti-RH2 (anti-C)

2

1

1

1

1

1

R1R2

R1r

r’r

R1R1

Anti-RH4 (anti-c)

1

2

1

3

R1R2

R2r

r”r

R1R1

r’r

rr

Anti-RH3 (anti-E)

2

1

1

1

1

1

R1R2

R2r

r”r

R2R2

Anti-RH5 (anti-e)

2

1

1

3

Kk

kk

Anti KEL1 (anti-K)

4

3

Jk (a+b+)

Jk (a−b+)

Anti-JK1 (anti-Jka)

4

3

Jk (a+b+)

Jk (a+b−)

Anti-JK2 (anti-Jkb)

4

3

Fy (a+b+)

Fy (a−b+)

Anti-FY1 (anti-Fya)

4

3

Fy (a+b+)

Fy (a+b−)

Anti-FY2 (anti-Fyb)

4

3

Opomba: Poliklonalni reagenti se testirajo na številnih celicah, da se potrdi specifičnost ter izključi prisotnost nezaželenih protiteles, ki kontaminirajo vzorec.

2.Kontrolni materiali (rdeče krvničke)

Fenotip rdečih krvničk, uporabljenih za kontrolo zgoraj navedenih reagentov za določanje krvnih skupin, se potrdi z uporabo uveljavljenega pripomočka.

PRILOGA III

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE Z VIRUSOM HUMANE IMUNSKE POMANJKLJIVOSTI (HIV)

Področje uporabe

1. Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe z virusom humane imunske pomanjkljivosti (HIV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti HIV-1/2 (anti-HIV-1/2) in kombinirane teste prve izbire na antigene HIV-1/2/protitelesa proti HIV-1/2 (HIV-1/2 Ag/Ab), ki niso hitri testi.
Preglednica 2 se uporablja za teste prve izbire na anti-HIV-1/2 in HIV-1/2 Ag/Ab, ki so hitri testi.
Preglednica 3 se uporablja za potrditvene teste na anti-HIV-1/2.
Preglednica 4 se uporablja za antigenske teste na HIV-1 in teste HIV Ag/Ab.

Preglednica 5 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za dokazovanje prisotnosti ribonukleinske kisline (RNK) virusa HIV.
Preglednica 6 se uporablja za samoteste za HIV-1/2.

Opredelitev pojmov

2. V tej prilogi se uporabljajo naslednje opredelitve pojmov:

(1)„serokonverzijski vzorec HIV“ pomeni:

–vzorec, pozitiven na antigen p24 in/ali RNK virusa HIV, ter

–prepoznajo ga testi prve izbire na protitelesa in

–rezultati potrditvenih testov so pozitivni ali nedoločeni;

(2)„zgodnji serokonverzijski vzorec HIV“ pomeni:

–vzorec, pozitiven na antigen p24 in/ali RNK virusa HIV, ter

–testi prve izbire na protitelesa ga ne prepoznajo in

–rezultati potrditvenih testov so nedoločeni ali negativni.

Preglednica 1. Test prve izbire: anti-HIV-1/2, HIV-1/2 Ag/Ab (zahteve za detekcijo protiteles)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 HIV-1 ≥ 100 HIV-2, vključno s 40 podtipi, ki niso podtipi B; vključno s 25 pozitivnimi vzorci svežega seruma, odvzetimi na dan testiranja (≤ 1 dan po odvzetju vzorca). Vsi razpoložljivi podtipi HIV/1 so zastopani z vsaj 3 vzorci za vsak podtip	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	≥ 30 panelov Testira se vsaj 40 zgodnjih serokonverzijskih vzorcev HIV	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Vsi serokonverzijski vzorci HIV se prepoznajo kot pozitivni
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) II	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100 (kot je RF+, iz sorodnih virusnih okužb, vzorci nosečnic, posameznikov, ki so bili pred kratkim cepljeni proti kateremu koli povzročitelju okužbe)

Preglednica 2. Hitri testi: anti-HIV-1/2, HIV-1/2 Ag/Ab (zahteve za detekcijo protiteles)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 HIV-1 ≥ 100 HIV-2, vključno s 40 podtipi, ki niso podtipi B. Vsi razpoložljivi podtipi HIV/1 so zastopani z vsaj 3 vzorci za vsak podtip	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	≥ 30 panelov Testira se vsaj 40 zgodnjih serokonverzijskih vzorcev HIV	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Vsi serokonverzijski vzorci HIV se prepoznajo kot pozitivni
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič)	≥ 1 000	≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 200 vzorcev nosečnic ≥ 100 drugih potencialno navzkrižno reaktivnih vzorcev skupaj (npr. RF+, iz sorodnih okužb)

Preglednica 3. Potrditveni testi: anti-HIV-1/2

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 200 HIV-1 ≥ 100 HIV-2 Vključno z različnimi fazami okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles	Opredelitev vzorca kot „potrjeno pozitivnega“ ali „nedoločenega“, ne kot „negativnega“
	Serokonverzijski paneli	≥ 15 serokonverzijskih panelov/panelov z nizkimi titri ≥ 40 zgodnjih serokonverzijskih vzorcev HIV	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Vsi serokonverzijski vzorci HIV se prepoznajo kot pozitivni
Diagnostična specifičnost	Krvodajalci	≥ 200	Brez lažno pozitivnih rezultatov/brez nevtralizacije
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupno ≥ 50 (vključno z vzorci nosečnic, vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih)

Preglednica 4. Antigenski testi: HIV-1, HIV Ag/Ab (zahteve za detekcijo antigena)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 50 na antigen HIV-1 pozitivnih vzorcev ≥ 50 supernatantov celičnih kultur, vključno z različnimi podtipi HIV-1 in HIV-2	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni (po potrebi po nevtralizaciji)
	Serokonverzijski paneli	≥ 20 serokonverzijskih panelov/panelov z nizkimi titri ≥ 40 zgodnjih serokonverzijskih vzorcev HIV	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Vsi serokonverzijski vzorci HIV se prepoznajo kot pozitivni
Analizna občutljivost	Prvi mednarodni referenčni reagent za odkrivanje antigena HIV-1 p24, oznaka NIBSC: 90/636		≤ 2 IU/ml
Diagnostična specifičnost	Krvodajalci	≥ 200	≥ 99,5 % po nevtralizaciji ali, če test nevtralizacije ni na voljo, po določitvi statusa vzorca
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 50

Preglednica 5. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za odkrivanje RNK virusa HIV

1.Za pripomočke s pomnoževanjem ciljnega zaporedja se kontrola funkcionalnosti za vsak vzorec (notranja kontrola) izvaja v skladu z najnovejšo tehnologijo. Ta kontrola se, če je le mogoče, uporablja med celotnim procesom, tj. ekstrakcijo, pomnoževanjem/hibridizacijo, detekcijo.

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

3.Morebitna navzkrižna reaktivnost zaporedij neciljnih nukleinskih kislin se analizira s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem izbranih vzorcev.

4.Rezultati kvantitativnih pripomočkov NAT se lahko izsledijo nazaj do mednarodnih standardov ali umerjenih referenčnih materialov, če so ti na voljo, ter se izrazijo v mednarodnih enotah, uporabljenih na določenem področju uporabe.

5.Kvalitativni pripomočki NAT za HIV, ki so namenjeni detekciji prisotnosti HIV v krvi, komponentah krvi, celicah, tkivih ali organih ali v katerem koli od njihovih derivatov, da se oceni njihova ustreznost za transfuzijo, presaditev ali dajanje celic, so zasnovani za detekcijo tako HIV-1 kot tudi HIV-2.

6.Kvalitativni pripomočki NAT za HIV, razen pripomočkov za tipizacijo virusa, so zasnovani tako, da se nadoknadi morebitna neuspešna detekcija ciljnega območja testa NAT za HIV-1, na primer z uporabo dveh neodvisnih ciljnih območij.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorec

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Mednarodni standard SZO za RNK virusa HIV-1; mednarodni standard SZO za RNK virusa HIV-2; ali umerjeni referenčni materiali

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). III

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje kvantifikacije, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“.

Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Občutljivost genotipa/podtipa virusa HIV

Vsi ustrezni genotipi/podtipi, po možnosti iz mednarodnih referenčnih materialov

Možni nadomestki redkih podtipov virusa HIV (ki jih je treba količinsko opredeliti z ustreznimi metodami): supernatanti celičnih kultur; transkripcije in vitro; plazmidi

Kvantitativni NAT: najmanj 10 vzorcev/genotip ali podtip

Kvantitativni NAT: redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična občutljivost

Pozitivni vzorci, pri katerih se upoštevajo rutinski pogoji, v katerih delajo uporabniki (npr. brez predizbora vzorcev)

Kvantitativni NAT: ≥ 100

Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Serokonverzijski paneli

Kvantitativni NAT: ≥ 10 panelov

Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Vzorci krvodajalcev

Kvantitativni NAT: ≥ 500

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

≥ 10 vzorcev, pozitivnih na humani retrovirus (npr. HTLV)

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitiven na RNK virusa HIV;

negativen na RNK virusa HIV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Detekcija v zvezi s stanjem protiteles

Pozitivni na RNK virusa HIV: negativni na anti-HIV, pozitivni na anti-HIV

Vzorci, odvzeti pred serokonverzijo (negativni na anti-HIV) in po serokonverziji (pozitivni na anti-HIV)

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Nizko pozitivni na RNK virusa HIV

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na RNK virusa HIV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

Preglednica 6. Dodatne zahteve za samoteste za HIV-1/2

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci IV	Število nestrokovnjakov
Razlaga rezultatov V	Razlaga rezultatov VI s strani nestrokovnjakov, ki odražajo naslednji razpon ravni reaktivnosti: ·nereaktivni ·reaktivni ·šibko reaktivni VII ·neveljavni	≥ 100
Diagnostična občutljivost	Nestrokovnjaki, za katere se ve, da so pozitivni	≥ 200
Diagnostična specifičnost	Nestrokovnjaki, ki ne poznajo svojega statusa	≥ 400
	Nestrokovnjaki, pri katerih obstaja veliko tveganje za okužbo	≥ 200

PRILOGA IV

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE S HUMANIM T-CELIČNIM LIMFOTROPNIM VIRUSOM (HTLV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe s humanim T-celičnim limfotropnim virusom (HTLV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti HTLV I ali II (anti-HTLV I/II), ki niso hitri testi.

Preglednica 2 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti HTLV I/II, ki so hitri testi.

Preglednica 3 se uporablja za potrditvene teste na anti-HTLV I/II.

Preglednica 4 se uporablja za pripomočke NAT za HTLV I/II.

Preglednica 1. Testi prve izbire: anti-HTLV I/II

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti

Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 300 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II, vključno s 25 pozitivnimi vzorci svežega seruma, odvzetimi na dan testiranja (≤ 1 dan po odvzetju vzorca).	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo, če je ustrezno
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) VIII	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100 (npr. RF+, iz sorodnih virusnih okužb, vzorci nosečnic)

Preglednica 2. Hitri testi: anti-HTLV I/II

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 300 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo, če je ustrezno
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič)	≥ 1 000	≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 200 vzorcev nosečnic ≥ 100 drugih potencialno navzkrižno reaktivnih vzorcev skupaj (npr. RF+, iz sorodnih okužb)

Preglednica 3. Potrditveni testi: anti-HTLV I/II

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 200 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II	Opredelitev vzorca kot „potrjeno pozitivnega“ ali „nedoločenega“, ne kot „negativnega“
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo, če je ustrezno
Diagnostična specifičnost	Krvodajalci	≥ 200	Brez lažno pozitivnih rezultatov
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupno ≥ 50 (vključno z vzorci nosečnic, vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih)

Preglednica 4. Pripomočki NAT za HTLV I/II

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorec

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Mednarodni referenčni pripravki

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). IX

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“.

Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Občutljivost genotipov HTLV I in HTLV II

Vsi ustrezni genotipi, po možnosti iz mednarodnih referenčnih materialov

Možni nadomestki redkih genotipov HTLV (ki jih je treba količinsko opredeliti z ustreznimi metodami): supernatanti celičnih kultur; transkripcije in vitro; plazmidi

Kvantitativni NAT: najmanj 10 vzorcev/genotip ali podtip

Kvantitativni NAT: redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Vzorci krvodajalcev

Kvantitativni NAT: ≥ 500

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

≥ 10 vzorcev, pozitivnih na humani retrovirus (npr. HIV-1, HIV-2)

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitiven na RNK virusa HTLV;

negativen na RNK virusa HTLV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Detekcija v zvezi s stanjem protiteles

Pozitivni na RNK virusa HTLV: negativni na anti-HTLV, pozitivni na anti-HTLV

Vzorci, odvzeti pred serokonverzijo (negativni na anti-HTLV) in po serokonverziji (pozitivni na anti-HTLV)

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Nizko pozitivni na RNK virusa HTLV

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na RNK virusa HTLV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

PRILOGA V

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE Z VIRUSOM HEPATITISA C (HCV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe z virusom hepatitisa C (HCV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti virusu HCV (anti-HCV) in kombinirane teste na antigene HCV/protitelesa proti HCV (HCV Ag/Ab), ki niso hitri testi.
Preglednica 2 se uporablja za teste prve izbire na anti-HCV in teste HCV Ag/Ab, ki so hitri testi.
Preglednica 3 se uporablja za potrditvene in dodatne teste na anti-HCV.
Preglednica 4 se uporablja za antigenske teste HCV in teste HCV Ag/Ab.

Preglednica 5 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za RNK virusa HCV.
Preglednica 6 se uporablja za samoteste na HCV.

Preglednica 1. Test prve izbire: anti-HCV, HCV Ag/Ab (zahteve za detekcijo protiteles)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi virusa HCV 1–4: > 20 vzorcev na genotip (vključno s podtipi genotipa 4 razen podtipa a); genotipa virusa HCV 5 in 6: > 5 vzorcev za vsakega; vključno s 25 pozitivnimi vzorci svežega seruma, odvzetimi na dan testiranja (≤ 1 dan po odvzetju vzorca).	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	≥ 30 panelov Serokonverzijski paneli HCV za oceno kombiniranih testov na antigene HCV in protitelesa proti HCV (HCV Ag/Ab) se začnejo z enim ali več negativnimi vzorci krvi, zajemajo pa vzorce z znaki zgodnje okužbe s HCV (na jedrni antigen HCV in/ali na RNK virusa HCV pozitivne, vendar na anti-HCV negativne vzorce).	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Testi HCV Ag/Ab kažejo povečano občutljivost pri zgodnji okužbi s HCV v primerjavi s testi samo na protitelesa proti HCV.
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) X	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100 (npr. RF+, iz sorodnih virusnih okužb, vzorci nosečnic)

Preglednica 2. Hitri testi: anti-HCV, HCV Ag/Ab (zahteve za detekcijo protiteles)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi virusa HCV 1–4: > 20 vzorcev na genotip (vključno s podtipi genotipa 4 razen podtipa a); genotipa virusa HCV 5 in 6: > 5 vzorcev za vsakega.	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	≥30 panelov Serokonverzijski paneli HCV za oceno kombiniranih testov na antigene HCV in protitelesa proti HCV (HCV Ag/Ab) se začnejo z enim ali več negativnimi vzorci krvi, zajemajo pa vzorce z znaki zgodnje okužbe s HCV (na jedrni antigen HCV in/ali na RNK virusa HCV pozitivne, vendar na anti-HCV negativne vzorce).	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Testi HCV Ag/Ab kažejo povečano občutljivost pri zgodnji okužbi s HCV v primerjavi s testi samo na protitelesa proti HCV.
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič)1	≥ 1 000	≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 200 vzorcev nosečnic ≥ 100 drugih potencialno navzkrižno reaktivnih vzorcev skupaj (npr. RF+, iz sorodnih okužb)

Preglednica 3. Potrditveni in dodatni testi: anti-HCV

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 300 Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi virusa HCV 1–4: > 20 vzorcev (vključno s podtipi genotipa 4 razen podtipa a); genotip virusa HCV 5: > 5 vzorcev; genotip virusa HCV 6: če je na voljo	Opredelitev vzorca kot „potrjeno pozitivnega“ ali „nedoločenega“, ne kot „negativnega“
	Serokonverzijski paneli	≥ 15 serokonverzijskih panelov/panelov z nizkimi titri	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo
Diagnostična specifičnost	Krvodajalci	≥ 200	Brez lažno pozitivnih rezultatov/brez nevtralizacije
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupno ≥ 50 (vključno z vzorci nosečnic, vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih)

Preglednica 4. Antigenski testi: antigen HCV, HCV Ag/Ab (zahteve za detekcijo antigenov)

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 25 na jedrni antigen HCV in/ali na RNK virusa HCV pozitivnih, vendar na anti-HCV negativnih vzorcev, ki zajemajo genotipe HCV 1–6 (če genotip ni na voljo, se to utemelji)	Vsi resnično pozitivni vzorci se prepoznajo kot pozitivni
	Serokonverzijski paneli	≥ 20 serokonverzijskih panelov/panelov z nizkimi titri Serokonverzijski paneli HCV za oceno kombiniranih testov na antigene HCV in protitelesa proti HCV se začnejo z enim ali več negativnimi vzorci krvi, zajemajo pa vzorce z znaki zgodnje okužbe s HCV (na jedrni antigen HCV in/ali na RNK virusa HCV pozitivne, vendar na anti-HCV negativne vzorce).	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo Kombinirani testi na antigen HCV in protitelesa proti HCV kažejo povečano občutljivost pri zgodnji okužbi s HCV v primerjavi s testi samo na protitelesa proti HCV.
Analizna občutljivost	Mednarodni standard SZO za jedrni antigen HCV (PEI 129096/12)	Redčitvene vrste
Diagnostična specifičnost	Krvodajalci	≥ 200	≥ 99,5 % po nevtralizaciji ali, če test nevtralizacije ni na voljo, po določitvi statusa vzorca
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 50

Preglednica 5. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za RNK virusa HCV

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Analizna občutljivost	Mednarodni standard SZO za RNK virusa HCV (ali umerjeni referenčni materiali)	Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne. Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). XI Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti, „linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“. Obnovljivost pri različnih koncentracijah	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Genotipska občutljivost HCV	Vsi ustrezni genotipi/podtipi, po možnosti iz mednarodnih referenčnih materialov Možni nadomestki redkih genotipov HCV (ki jih je treba količinsko opredeliti z ustreznimi metodami): transkripcije in vitro; plazmidi	Kvantitativni NAT: ≥ 10 vzorcev/genotip ali podtip Kvantitativni NAT: redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci, pri katerih se upoštevajo rutinski pogoji, v katerih delajo uporabniki (npr. brez predizbora vzorcev)	Kvantitativni NAT: ≥ 100 Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT	V skladu z najnovejšo tehnologijo
	Serokonverzijski paneli	Kvantitativni NAT: ≥ 10 panelov Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Diagnostična specifičnost	Vzorci krvodajalcev	Kvantitativni NAT: ≥ 500 Kvantitativni NAT: ≥ 100	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	> 10 vzorcev, ki so pozitivni na humani flavivirus (npr. HGV, YFV)	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Prenos	Visoko pozitiven na RNK virusa HCV; negativen na RNK virusa HCV	Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Detekcija v zvezi s stanjem protiteles	Pozitivni na RNK virusa HCV: negativni na anti-HCV, pozitivni na anti-HCV	Vzorci, odvzeti pred serokonverzijo (negativni na anti-HCV) in po serokonverziji (pozitivni na anti-HCV)	V skladu z najnovejšo tehnologijo
Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema	Nizko pozitivni na RNK virusa HCV	Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na RNK virusa HCV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.	≥ 99 % pozitivnih

Preglednica 6. Dodatne zahteve za samoteste na HCV

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci XII	Število nestrokovnjakov
Razlaga rezultatov XIII	Razlaga rezultatov XIV s strani nestrokovnjakov, ki odražajo naslednji razpon ravni reaktivnosti: ·nereaktivni ·reaktivni ·šibko reaktivni XV ·neveljavni	≥ 100
Diagnostična občutljivost	Nestrokovnjaki, za katere se ve, da so pozitivni	≥ 200
Diagnostična specifičnost	Nestrokovnjaki, ki ne poznajo svojega statusa	≥ 400
	Nestrokovnjaki, pri katerih obstaja veliko tveganje za okužbo	≥ 200

PRILOGA VI

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE Z VIRUSOM HEPATITISA B (HBV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe z virusom hepatitisa B (HBV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na površinski antigen hepatitisa B (HBsAg) in protitelesa proti jedrnemu antigenu hepatitisa B (anti-HBc), ki niso hitri testi.
Preglednica 2 se uporablja za teste prve izbire na HBsAg in anti-HBc, ki so hitri testi.
Preglednica 3 se uporablja za potrditvene teste na HBsAg.
Preglednica 4 se uporablja za teste za označevalce virusa hepatitisa B: površinska protitelesa proti hepatitisu B (anti-HBs), protitelesa IgM proti jedrnemu antigenu hepatitisa B (anti-HBc IgM), protitelesa proti antigenu e hepatitisa B (anti-HBe) in antigen e hepatitisa B (HBeAg).

Preglednica 5 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za deoksiribonukleinsko kislino (DNK) virusa HBV.

Preglednica 6 se uporablja za samoteste na HBV.

Preglednica 1. Testi prve izbire: HBsAg, anti-HBc

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 anti-HBc: vključno z vrednotenjem različnih označevalcev HBV HBsAg: vključno z različnimi genotipi/podtipi/mutanti HBV anti-HBc ali HBsAg: vključno s 25 pozitivnimi vzorci svežega seruma, odvzetimi na dan testiranja (≤ 1 dan po odvzetju vzorca)	Celotna učinkovitost je vsaj enakovredna učinkovitosti primerjalnega pripomočka.
	Serokonverzijski paneli	Testi HBsAg: ≥ 30 panelov Testi anti-HBc: opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo (to velja za anti-HBc, če je ustrezno)
Analizna občutljivost	Tretji mednarodni standard SZO za HBsAg (podtipa ayw1/adw2, genotip HBV B4, oznaka NIBSC: 12/226)		Za teste HBsAg: < 0,130 IU/ml
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) XVI	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100 (npr. RF+, iz sorodnih virusnih okužb, vzorci nosečnic)

Preglednica 2. Hitri testi: HBsAg, anti-HBc

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 Vključno z vrednotenjem različnih označevalcev HBV Vključno z različnimi genotipi/podtipi/mutanti HBV	Celotna učinkovitost je vsaj enakovredna učinkovitosti primerjalnega pripomočka.
	Serokonverzijski paneli	Testi HBsAg: ≥ 30 panelov Testi anti-HBc: opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo (to velja za anti-HBc, če je ustrezno)
Diagnostična specifičnost	Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič)	≥ 1 000	Testi HBsAg: ≥ 99 % Testi anti-HBc: ≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 200 vzorcev nosečnic ≥ 100 drugih potencialno navzkrižno reaktivnih vzorcev skupaj (npr. RF+, iz sorodnih okužb)

Preglednica 3. Potrditveni testi: HBsAg

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 300 Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe Vključno z 20 visoko pozitivnimi vzorci (> 26 IU/ml); 20 vzorcev v razmejitvenem območju	Pravilna identifikacija vzorca kot pozitivnega (ali nedoločenega), ne negativnega
	Serokonverzijski paneli	≥ 15 serokonverzijskih panelov/panelov z nizkimi titri	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo
Analizna občutljivost	Tretji mednarodni standard SZO za HBsAg, podtipa ayw1/adw2, genotip HBV B4, oznaka NIBSC: 12/226
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci	≥ 10 lažno pozitivnih vzorcev pri oceni učinkovitosti testa prve izbire	Brez lažno pozitivnih rezultatov/brez nevtralizacije
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 50

Preglednica 4. Testi za označevalce HBV: anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBe, HBeAg

Značilnosti učinkovitosti		anti-HBs	anti-HBc IgM	anti-HBe	HBeAg	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 100 cepljenih ≥ 100 po naravni poti okuženih oseb	≥ 200 Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe (akutna/kronična itn.)	≥ 200 vzorcev Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe (akutna/kronična itn.)	≥ 200 vzorcev Vključno z vzorci iz različnih faz okužbe (akutna/kronična itn.)	≥ 98 % (za anti-HBc IgM: uporablja se samo za vzorce iz akutne faze okužbe)
	Serokonverzijski paneli	10 serokonverzijskih panelov anti-HBs ali nadaljnjih serij	Kadar so na voljo	Kadar so na voljo	Kadar so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo (to velja za anti-HBc IgM, anti-HBe, HBeAg, če je ustrezno)
Analizna občutljivost	Standardi	Drugi mednarodni standard SZO za humani imunglobulin proti površinskemu antigenu hepatitisa B (anti-HBs), oznaka NIBSC: 07/164		Prvi mednarodni standard SZO za protitelesa proti antigenu e virusa hepatitisa B (anti-HBe), oznaka PEI 129095/12	Prvi mednarodni standard SZO za antigen e virusa hepatitisa B (HBeAg), oznaka PEI 129097/12	anti-HBs: < 10 IU/ml
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci	≥ 500 Vključno s kliničnimi vzorci ≥ 50 potencialno motečih vzorcev	≥ 200 darovanj krvi ≥ 200 kliničnih vzorcev ≥ 50 potencialno motečih vzorcev	≥ 200 darovanj krvi ≥ 200 kliničnih vzorcev ≥ 50 potencialno motečih vzorcev	≥ 200 darovanj krvi ≥ 200 kliničnih vzorcev ≥ 50 potencialno motečih vzorcev	≥ 98 %

Preglednica 5. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za DNK virusa HBV

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorec

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Mednarodni standard SZO za DNK virusa HBV (ali umerjeni referenčni materiali)

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). XVII

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“. Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Genotipska občutljivost HBV

Mednarodni referenčni panel SZO za DNK virusa HBV (genotipi HBV)

Vsi ustrezni genotipi/podtipi, po možnosti iz mednarodnih referenčnih materialov

Možni nadomestki redkih genotipov HBV (ki jih je treba količinsko opredeliti z ustreznimi metodami): plazmidi; sintetična DNK

Kvantitativni NAT: najmanj 10 vzorcev/genotip ali podtip

Kvantitativni NAT: redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična občutljivost

Pozitivni vzorci, pri katerih se upoštevajo rutinski pogoji, v katerih delajo uporabniki (brez predizbora vzorcev)

Kvantitativni NAT: ≥ 100

Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Serokonverzijski paneli

Kvantitativni NAT: ≥ 10 panelov

Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate z drugim sistemom NAT

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Vzorci krvodajalcev

Kvantitativni NAT: ≥ 500

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitiven na DNK virusa HBV;

negativen na DNK virusa HBV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri visoko pozitivnih vzorcev predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Detekcija v zvezi s stanjem protiteles

Pozitivni na DNK virusa HBV: negativni na anti-HBV, pozitivni na anti-HBV

Vzorci, odvzeti pred serokonverzijo (negativni na anti-HBV) in po serokonverziji (pozitivni na anti-HBV)

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Nizko pozitivni na DNK virusa HBV

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na DNK virusa HBV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

Preglednica 6. Dodatne zahteve za samoteste na HBV

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci XVIII	Število nestrokovnjakov
Razlaga rezultatov XIX	Razlaga rezultatov XX s strani nestrokovnjakov, ki odražajo naslednji razpon ravni reaktivnosti: ·nereaktivni ·reaktivni ·šibko reaktivni XXI ·neveljavni	≥ 100
Diagnostična občutljivost	Nestrokovnjaki, za katere se ve, da so pozitivni	≥ 200
Diagnostična specifičnost	Nestrokovnjaki, ki ne poznajo svojega statusa	≥ 400
	Nestrokovnjaki, pri katerih obstaja veliko tveganje za okužbo	≥ 200

PRILOGA VII

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE Z VIRUSOM HEPATITISA D (HDV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe z virusom hepatitisa D (HDV).

Preglednica 1 se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji (vključno s potrditvijo) ali kvantifikaciji naslednjih označevalcev virusa hepatitisa D: protitelesa proti virusu hepatitisa D (anti-HDV), protitelesa IgM proti virusu hepatitisa D (anti-HDV IgM), antigen delta.

Preglednica 2 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za RNK virusa HDV.

Preglednica 1. Testi za označevalce HDV: anti-HDV, anti-HDV IgM, antigen delta

Značilnosti učinkovitosti

anti-HDV

anti-HDV IgM

Antigen delta

Merila sprejemljivosti

Diagnostična občutljivost

Pozitivni vzorci

≥ 100

Določitev označevalcev sočasne okužbe s HBV

≥ 50

Določitev označevalcev sočasne okužbe s HBV

≥ 10

Določitev označevalcev sočasne okužbe s HBV

≥ 98 %

Diagnostična specifičnost

Negativni vzorci

≥ 200

Vključno s kliničnimi vzorci

≥ 50 potencialno motečih vzorcev

≥ 200 vzorcev

Vključno s kliničnimi vzorci

≥ 50 potencialno motečih vzorcev

≥ 200 vzorcev

Vključno s kliničnimi vzorci

≥ 50 potencialno motečih vzorcev

≥ 98 %

Preglednica 2. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za RNK virusa HDV

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorec

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Prvi mednarodni standard SZO za RNK virusa HDV, oznaka PEI 7657/12

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). XXII

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“. Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Genotipska občutljivost HDV

Vsi ustrezni genotipi/podtipi, po možnosti iz mednarodnih referenčnih materialov

Možni nadomestki redkih genotipov HDV (ki jih je treba količinsko opredeliti z ustreznimi metodami): plazmidi; sintetična RNK

Kvantitativni NAT: redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Vzorci krvodajalcev

Kvantitativni NAT: ≥ 100

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitivni vzorci na RNK virusa HDV;

negativni na RNK virusa HDV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri visoko pozitivnih vzorcev predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na RNK virusa HDV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

PRILOGA VIII

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI OZNAČEVALCEV VARIANTNE CREUTZFELDT-JAKOBOVE BOLEZNI (vCJB)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji označevalcev variantne Creutzfeldt-Jakobove bolezni (vCJB).

Preglednica 1 se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji označevalcev vCJB.

Preglednica 1. Naprave za detekcijo označevalcev vCJB

Značilnosti učinkovitosti	Material	Število vzorcev	Merila sprejemljivosti
Analizna občutljivost	Beljakovinske bodice možganskega tkiva pri vCJB v človeški plazmi (referenčna številka SZO NHBY0/0003)	≥ 24 ponovitev vsake od treh razredčitev materiala SZO številka NHBY0/0003 (1×104, 1×105, 1×106)	23 od 24 podvojitev, zaznanih pri 1×104
	Beljakovinske bodice vraničnega tkiva pri vCJB v človeški plazmi (10-odstotni homogenat vranice – referenčna številka NIBSC NHSY0/0009)	≥ 24 ponovitev vsake od treh razredčitev materiala številka NIBSC NHSY0/0009 (1×10, 1×102, 1×103)	23 od 24 podvojitev, zaznanih pri 1×10
Diagnostična občutljivost	Vzorci ustreznih živalskih modelov	Toliko vzorcev, kot je razumno mogoče in na voljo, ter ≥ 10 vzorcev	90 %
	Vzorci pacientov s potrjeno klinično vCJB	Toliko vzorcev, kot je razumno mogoče in na voljo, ter ≥ 10 vzorcev	90 %
		Samo če 10 vzorcev ni na voljo: – število testiranih vzorcev je od 6 do 9 – testirajo se vsi razpoložljivi vzorci	Največ en lažno negativen rezultat
Analizna specifičnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	≥ 100
Diagnostična specifičnost	Vzorci normalne človeške plazme z območij z nizko izpostavljenostjo bovini spongiformni encefalopatiji (BSE)	≥ 5 000	≥ 99,5 %

PRILOGA IX

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE S CITOMEGALOVIRUSOM (CMV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe s citomegalovirusom (CMV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na skupna protitelesa proti CMV (skupna anti-CMV) in protitelesa IgG proti CMV (anti-CMV IgG).

Preglednica 2 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za DNK virusa CMV.

Preglednica 1. Testi prve izbire: skupna anti-CMV in anti-CMV IgG

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400, vključno z vzorci nedavne in pretekle okužbe s CMV, nizko in visoko pozitivnimi vzorci titrov	≥ 99-odstotna občutljivost za preteklo okužbo, ki jo je mogoče potrditi XXIII ; splošna občutljivost, vključno z nedavno okužbo XXIV , je vsaj enakovredna občutljivosti primerjalnega pripomočka
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo
Analizna občutljivost	Standardi	Mednarodni standard SZO za anti-CMV IgG (oznaka PEI 136616/17) V primeru določitev titrov in kvantitativnih navedb
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci	≥ 400 XXV na CMV negativnih vzorcev neizbranih darovalcev v primerjavi z drugim testom na CMV.	≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti XXVI	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija XXVII	Skupaj ≥ 100 (npr. RF+, sorodni virusi ali drugi povzročitelji okužbe, vzorci nosečnic itd.)

Preglednica 2. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za DNK virusa CMV

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Prvi mednarodni standard SZO za DNK humanega CMV (09/162; 5 000 000 IU/vialo) (ali umerjenih referenčnih materialov)

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). XXVIII

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“.

Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična občutljivost

Občutljivost seva CMV

Vzorci pacientov, določeni kot pozitivni na DNK virusa CMV s primerjalnim pripomočkom

Redčitvene vrste na CMV pozitivnih celičnih kultur se lahko uporabljajo kot možni nadomestki

Kvantitativni NAT: ≥ 100

Kvantitativni NAT: ≥ 100

redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Vzorci krvodajalcev

Kvantitativni NAT: ≥ 500

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

Skupaj ≥ 20 vzorcev

Vključno s človeškimi vzorci, pozitivnimi na sorodne humane herpesviruse, npr. EBV, HHV6, VZV

Celične kulture, pozitivne na herpesvirus, se lahko uporabljajo kot možni nadomestki

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitivi vzorci na DNK virusa CMV,

negativni na DNK virusa CMV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Nizko pozitivni na DNK virusa CMV

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na DNK virusa CMV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

PRILOGA X

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE Z EPSTEIN-BARROVIM VIRUSOM (EBV)

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe z Epstein-Barrovim virusom (EBV).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa IgG proti virusnemu kapsidnemu antigenu EBV (anti-EBV VCA IgG).

Preglednica 2 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za DNK virusa EBV.

Preglednica 1: Testi prve izbire: anti-EBV VCA IgG

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400, vključno z vzorci nedavne in pretekle okužbe z virusom EBV, nizko in visoko pozitivnimi vzorci titrov	≥ 99 % za preteklo okužbo, ki jo je mogoče potrditi XXIX , splošna občutljivost, vključno z nedavno okužbo XXX , je vsaj enakovredna občutljivosti primerjalnega pripomočka
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo
Analizna občutljivost	Standardi	Mednarodni referenčni reagenti, kadar so na voljo
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci	≥ 200 XXXI na EBV negativnih vzorcev neizbranih darovalcev v primerjavi z drugim pripomočkom EBV.	≥ 99 %
	Hospitalizirani pacienti XXXII	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100 (npr. RF+, sorodni virusi ali drugi povzročitelji okužbe, vzorci nosečnic itd.)

Preglednica 2. Kvalitativni in kvantitativni pripomočki NAT za DNK virusa EBV

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Prvi mednarodni standard SZO za DNK humanega EBV (09/260; 5 000 000 IU/vialo) (ali umerjenih referenčnih materialov)

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit). XXXIII

Kvantitativni NAT: opredelitev spodnje, zgornje meje določljivosti, natančnosti, točnosti,

„linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“.

Obnovljivost pri različnih koncentracijah

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična občutljivost

Občutljivost seva EBV

Vzorci pacientov, določeni kot pozitivni na DNK virusa EBV s primerjalnim pripomočkom

Redčitvene vrste na EBV pozitivnih celičnih kultur se lahko uporabljajo kot možni nadomestki

Kvantitativni NAT: ≥ 100

Kvantitativni NAT: ≥ 100

redčitvene vrste za dokazovanje učinkovitosti kvantifikacije

Diagnostična specifičnost

Negativni vzorci

Kvantitativni NAT: ≥ 500

Kvantitativni NAT: ≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

Skupaj ≥ 20 vzorcev

Vključno s človeškimi vzorci, pozitivnimi na sorodne humane herpesviruse, npr. CMV, HHV6, VZV

Celične kulture, pozitivne na herpesvirus, se lahko uporabljajo kot možni nadomestki

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Visoko pozitivi vzorci na DNK virusa EBV,

negativni na DNK virusa EBV

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Nizko pozitivni na DNK virusa EBV

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na DNK virusa EBV. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije virusa.

≥ 99 % pozitivnih

PRILOGA XI

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE S TREPONEMA PALLIDUM

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji označevalcev okužbe s Treponema pallidum (T. pallidum).

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti T. pallidum (anti-T.pallidum).

Preglednica 2 se uporablja za potrditvene in dodatne teste na protitelesa proti T. pallidum.

Preglednica 1. Testi prve izbire: anti-T.pallidum

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Diagnostična

občutljivost

Pozitivni vzorci

Skupaj ≥ 200 pozitivnih vzorcev

v različnih fazah okužbe, če obstajajo,

vključno z visoko pozitivnimi in nizko pozitivnimi vzorci,

ki so bili opredeljeni kot pozitivni z vsaj dvema različnima serološkima testoma (od katerih je eden encimski imunski test) na različna protitelesa proti T.pallidum

Splošna občutljivost ≥ 99,5 %

Serokonverzijski paneli

Vsaj 1 serokonverzijski panel, po možnosti ≥ 1, vključno s posameznimi vzorci iz zgodnje faze okužbe

Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo

Analizna

občutljivost

Standardi

Mednarodni standardi SZO

Oznaka NIBSC 05/132, če je na voljo

Diagnostična specifičnost

Neizbrani krvodajalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) XXXIV

≥ 5 000

≥ 99,5 %

Hospitalizirani pacienti

≥ 200

Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

Skupaj ≥ 100,

vključno z naslednjimi vzorci: pozitivni na bakterijo Borrelia burgdorferi sensu lato, potrjeno z imunoblotom IgG; pozitivni na anti-HIV; RF+; druge povezane mikrobne snovi/povzročitelji okužbe; vzorci pacientov s sistemskim eritematoznim lupusom (SLE); pozitivni na antifosfolipidna protitelesa; vzorci nosečnic itd.

Preglednica 2. Potrditveni in dodatni testi: anti-T.pallidum

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Diagnostična

občutljivost

Pozitivni vzorci

≥ 300 pozitivnih vzorcev v različnih fazah okužbe (zgodnji primarni sifilis, sekundarna faza in pozni sifilis), vključno z visoko pozitivnimi vzorci, 50 nizko pozitivnimi vzorci,

potrjenimi z vsaj dvema različnima serološkima testoma (od katerih je eden encimski imunski test) na različna protitelesa proti T.pallidum

99 % opredelitev vzorca kot „potrjeno pozitivnega“ ali „nedoločenega“

Serokonverzijski paneli

Vsaj 1 serokonverzijski panel, po možnosti ≥ 1, vključno s posameznimi vzorci iz zgodnje faze okužbe

Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo

Analizna

občutljivost

Standardi

Mednarodni standardi SZO

Oznaka NIBSC 05/132

Diagnostična

specifičnost

Krvodajalci

≥ 200

≥ 99 %

Klinični vzorci

≥ 200

Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

Skupno ≥ 50, vključno z vzorci nosečnic in vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih.

PRILOGA XII

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE S TRYPANOSOMA CRUZI

Področje uporabe

Ta priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe s Trypanosoma cruzi (T. cruzi)

Preglednica 1 se uporablja za teste prve izbire na protitelesa proti T. cruzi (anti-T. cruzi).

Preglednica 2 se uporablja za potrditvene in dodatne teste na anti-T. cruzi.

Preglednica 3 se uporablja za kvalitativne in kvantitativne pripomočke NAT za DNK T. cruzi.

Preglednica 1. Testi prve izbire: anti-T. cruzi

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400 pozitivnih vzorcev, vključno z zelo pozitivnimi vzorci, ki so bili potrjeni z vsaj dvema različnima serološkima testoma na različna protitelesa proti T. cruzi. Od navedenih 400 ≥ 25 vzorcev, pozitivnih na parazite, ki so bili potrjeni z neposredno detekcijo.	Splošna občutljivost ≥ 99,5 %
	Serokonverzijski paneli	Opredelijo se, ko so na voljo	Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo
Analizna občutljivost	Standardi	Mednarodni standardi SZO Oznaka NIBSC: 09/186 Oznaka NIBSC: 09/188
Diagnostična specifičnost	Neizbrani darovalci (vključno z darovalci, ki so darovali prvič) XXXV	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Hospitalizirani pacienti	≥ 200	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100, vključno z naslednjimi vzorci: pozitivni na anti-Toxoplasma gondii; vsaj 5 vzorcev, pozitivnih na anti-Leishmania; RF+; sorodne mikrobne snovi ali drugi povzročitelji okužbe; vzorci bolnikov s SLE; vzorci bolnikov, pozitivnih na antifosfolipidna protitelesa; vzorci nosečnic itd.

Preglednica 2. Potrditveni in dodatni testi: anti-T. cruzi

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Diagnostična

občutljivost

Pozitivni vzorci

≥ 300 pozitivnih vzorcev, vključno z zelo pozitivnimi vzorci, ki so bili potrjeni z vsaj dvema različnima serološkima testoma na različna protitelesa proti T. cruzi.

Od navedenih 300 ≥ 25 vzorcev, pozitivnih na parazite, ki so bili potrjeni z neposredno detekcijo.

≥ 99 % opredelitev vzorca kot „potrjeno pozitivnega“ ali „nedoločenega“

Serokonverzijski paneli

Če so na voljo

Diagnostična občutljivost med serokonverzijo predstavlja najnovejšo tehnologijo, če je ustrezno

Analizna

občutljivost

Standardi

Mednarodni standardi SZO

Oznaka NIBSC: 09/186

Oznaka NIBSC: 09/188

Diagnostična

specifičnost

Negativni vzorci

≥ 200

≥ 99 %

Klinični vzorci

≥ 200

Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti, če obstajajo.

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

Skupno ≥ 50, vključno z vzorci nosečnic in vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih.

Preglednica 3: pripomočki NAT za DNK T. cruzi

2.Detekcija genotipa in/ali podtipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave oligonukleotidnega začetnika ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

Značilnosti učinkovitosti

Vzorci

Število vzorcev, značilnosti, uporaba

Merila sprejemljivosti

Analizna občutljivost

Opredeljeni interni referenčni pripravki (dokler mednarodni referenčni materiali niso na voljo)

Občutljivost NAT in meja detekcije NAT se potrdita z redčitvenimi vrstami referenčnih materialov, testiranjem ponovitev (najmanj 24) pri različnih koncentracijah analita, vključno s tistimi, ki so z zadevnim pripomočku NAT po prvotnem pozitivnem rezultatu postale negativne.

Meja detekcije se izrazi kot 95-odstotna pozitivna razmejitvena vrednost (IU/ml) po statistični analizi (npr. probit) 3 .

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična občutljivost: različni sevi/izolati parazita T. cruzi

Vzorci pacientov iz različnih regij, določeni kot pozitivni na DNK T. cruzi s primerjalnim pripomočkom; variante zaporedja

≥ 100

Redčitvene vrste celičnih kultur (izolati), pozitivnih na T. cruzi, ali snovi iz živalskih modelov, pozitivne na T. cruzi, se lahko uporabijo kot možni nadomestki

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Diagnostična specifičnost

Negativni vzorci

≥ 100

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Navzkrižna reaktivnost

Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija

≥ 10 človeških vzorcev, pozitivnih na druge parazite, npr. vrste Plasmodium, Trypanosoma brucei. Pozitivne celične kulture se lahko uporabljajo kot možni nadomestki

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Prenos

Med študijami ponovljivosti se izvede vsaj pet serij testov, izmenično z visoko pozitivnimi in negativnimi vzorci. Titri T. cruzi v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke titre T. cruzi.

V skladu z najnovejšo tehnologijo

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Testira se ≥ 100 nizko pozitivnih vzorcev na DNK T. cruzi. Ti vzorci vsebujejo koncentracijo T. cruzi, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni razmejitveni vrednosti koncentracije T. cruzi.

≥ 99 % pozitivnih

PRILOGA XIII

SKUPNE SPECIFIKACIJE ZA PRIPOMOČKE, NAMENJENE DETEKCIJI ALI KVANTIFIKACIJI OZNAČEVALCEV OKUŽBE S KORONAVIRUSOM HUDEGA AKUTNEGA RESPIRATORNEGA SINDROMA 2

Področje uporabe

Ta Priloga se uporablja za pripomočke, namenjene detekciji ali kvantifikaciji označevalcev okužbe s koronavirusom hudega akutnega respiratornega sindroma 2 (SARS-CoV-2).

Preglednica 1 se uporablja za naslednje teste prve izbire (vključno s hitrimi testi) na protitelesa proti SARS-CoV-2 (anti-SARS-CoV-2): skupna protitelesa, samo IgG, IgG v kombinaciji z IgM in/ali IgA.

Preglednica 2 se uporablja za teste prve izbire (vključno s hitrimi testi) za detekcijo protiteles IgM in/ali IgA proti SARS-CoV-2.

Preglednica 3 se uporablja za potrditvene ali dodatne teste na anti-SARS-CoV-2.

Preglednica 4 se uporablja za antigenske teste na SARS-CoV-2, vključno s hitrimi antigenskimi testi.

Preglednica 5 se uporablja za teste NAT za RNK virusa SARS-CoV-2.

Preglednica 6 se uporablja za antigenske samoteste na SARS-CoV-2, pri katerih je že bila opravljena ocena učinkovitosti za profesionalno uporabo.

Preglednica 7 se uporablja za samoteste na protitelesa proti SARS-CoV-2, pri katerih je že bila opravljena ocena učinkovitosti za profesionalno uporabo.

Preglednica 1: testi prve izbire (vključno s hitrimi testi) na anti-SARS-CoV-2: skupna protitelesa, samo IgG, IgG v kombinaciji XXXVI z IgM in/ali IgA

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 400, vključno z vzorci iz zgodnje faze okužbe in po serokonverziji XXXVII (v prvih 21 dneh in po 21 dneh po pojavu simptomov); vključno z vzorci asimptomatskih ali subkliničnih in blago simptomatskih (ambulantno zdravljenje) posameznikov; vključno z vzorci z nizkimi in visokimi titri; vključno po potrebi z vzorci cepljenih posameznikov XXXVIII ; upoštevanje genskih različic	≥ 90-odstotna občutljivost XXXIX za vzorce, odvzete > 21 dni po pojavu simptomov XL ; splošna občutljivost, vključno v zgodnji fazi okužbe, je vsaj enakovredna občutljivosti primerjalnega pripomočka XLI
	Serokonverzijski paneli	Če so na voljo	Občutljivost med serokonverzijo, primerljiva z drugimi pripomočki z oznako CE
Analizna občutljivost	Referenčni pripravki	Mednarodni standard SZO za anti-SARS-CoV-2 (oznaka NIBSC 20/136), Mednarodni referenčni panel SZO za anti-SARS-CoV-2 (oznake NIBSC 20/140, 20/142, 20/144, 20/148, 20/150)	Mednarodni standard: za določitev titrov/kvantitativni XLII prikaz rezultatov; Referenčni panel: vsi testi protiteles
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci XLIII	≥ 400 vzorcev neokuženih in necepljenih posameznikov XLIV	Specifičnost > 99 % XLV
		≥ 200 vzorcev hospitaliziranih pacientov (brez okužbe s SARS-CoV-2)	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100, vključno z vzorci, pozitivnimi na RF, vzorci nosečnic, vzorci s protitelesi proti endemičnim humanim koronavirusom 229E, OC43, NL63, HKU1 in drugim patogenom, ki povzročajo bolezni dihal, kot so virusi influence tipa A, B, RSV itd.

Preglednica 2: testi prve izbire (vključno s hitrimi testi) na anti-SARS-CoV-2: detekcija IgM in/ali IgA

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 200 XLVI vzorcev XLVII z znatnim deležem iz zgodnje faze okužbe (v 21 dneh po pojavu simptomov) v primerjavi z vzorci po serokonverziji (> 21 dni po pojavu simptomov); vključno z vzorci asimptomatskih, subkliničnih in blago simptomatskih (ambulantno zdravljenje) posameznikov; po potrebi vključno z nedavno cepljenimi XLVIII posamezniki; upoštevanje genskih različic	≥ 80-odstotna občutljivost XLIX za vzorce, odvzete v prvih 21 dneh po pojavu simptomov L ; splošna občutljivost je vsaj enakovredna občutljivosti primerjalnega pripomočka LI istega tipa (tj. IgM in/ali IgA).
	Serokonverzijski paneli	Če so na voljo	Občutljivost med serokonverzijo, primerljiva z drugimi pripomočki z oznako CE
Analizna občutljivost	Standardi	n. r.	n. r.
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci LII	≥ 200 vzorcev neokuženih in necepljenih posameznikov LIII	≥ 98-odstotna specifičnost LIV
		≥ 100 vzorcev hospitaliziranih pacientov (brez okužbe s SARS-CoV-2)	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 100, vključno z vzorci, pozitivnimi na RF, vzorci nosečnic, vzorci s protitelesi proti endemičnim humanim koronavirusom 229E, OC43, NL63, HKU1 in drugim patogenom, ki povzročajo bolezni dihal, kot so virusi influence tipa A, B, RSV itd.

Preglednica 3: Potrditveni ali dodatni LV testi na anti-SARS-CoV-2

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 200, vključno z vzorci pred serokonverzijo in po njej (v prvih 21 dneh in po 21 dneh po pojavu simptomov)	Pravilna določitev vzorca kot „pozitivnega“ (ali „nedoločenega“)
	Serokonverzijski paneli/ paneli z nizkimi titri	Če so na voljo
Analizna občutljivost	Standardi	n. r.	n. r.
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci LVI	≥ 200 vzorcev neokuženih/necepljenih posameznikov	Brez lažno pozitivnih rezultatov; pravilna določitev vzorca kot „pozitivnega“ (ali „nedoločenega“)
		≥ 200 vzorcev hospitaliziranih pacientov (brez okužbe s SARS-CoV-2)
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 50, vključno z vzorci s protitelesi proti endemičnim humanim koronavirusom 229E, OC43, NL63, HKU1 in drugim patogenom, ki povzročajo bolezni dihal, kot so virusi influence tipa A, B, RSV itd.; vključno z vzorci z nedoločenimi ali lažno pozitivnimi rezultati pri drugih testih proti SARS-CoV-2

Preglednica 4: Antigenski testi (vključno s hitrimi testi): SARS-CoV-2

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Število vzorcev, značilnosti, uporaba	Merila sprejemljivosti
Diagnostična občutljivost	Pozitivni vzorci	≥ 100 LVII Pozitivni vzorci NAT LVIII iz zgodnje faze okužbe v prvih sedmih dneh po pojavu simptomov LIX ; vzorci predstavljajo naravno prisotno virusno obremenitev LX ; upoštevanje genskih različic LXI ; upoštevanje razlik pri odvzemu vzorcev in/ali ravnanju z njimi LXII	Detekcija > 80 % (hitri testi); detekcija > 85 % (laboratorijski testi LXIII ); glede na pripomoček NAT za SARS-CoV-2 LXIV , LXV
Analizna občutljivost	Standardi	Ko bodo na voljo	Določitev meje detekcije LXVI
Diagnostična specifičnost	Negativni vzorci	≥ 300 neokuženih posameznikov	Specifičnost > 98 % (hitri testi) Specifičnost > 99 % (laboratorijski testi7)
		≥ 100 hospitaliziranih bolnikov	Opredelijo se morebitne omejitve specifičnosti.
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija	Skupaj ≥ 50, vključno z vzorci endemičnih humanih koronavirusov 229E, OC43, NL63, HKU1, ki so pozitivni na virus; virusov influence tipa A, B, RSV in drugih patogenov, ki povzročajo bolezni dihal, primerni za diferencialno diagnozo; vključno z bakterijami LXVII , prisotnimi na območju odvzema vzorcev

Preglednica 5: pripomočki NAT za RNK virusa SARS-CoV-2

Značilnosti učinkovitosti	Vzorec	Pripomoček za kvalitativno detekcijo RNK virusa SARS-CoV-2	Pripomoček za kvantitativno detekcijo RNK virusa SARS-CoV-2
Občutljivost
Analizna občutljivost: meja detekcije	Prvi mednarodni standard SZO za RNK virusa SARS-CoV-2 (oznaka NIBSC 20/146; 7,70 log10 IU/mL) Sekundarni standardi, umerjeni glede na mednarodne standarde SZO	Glede na Evropsko farmakopejo. Smernice za potrjevanje NAT: več redčitvenih vrst do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza probit) na podlagi vsaj 24 ponovitev; izračun 95-odstotne razmejitvene vrednosti	Glede na Evropsko farmakopejo. Smernice za potrjevanje NAT: več redčitvenih vrst umerjenih referenčnih pripravkov do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza probit) na podlagi vsaj 24 ponovitev; izračun 95-odstotne razmejitvene vrednosti kot meje detekcije
Meja kvantifikacije; značilnosti kvantifikacije	Prvi mednarodni standard SZO za RNK virusa SARS-CoV-2 (oznaka NIBSC 20/146; 7,70 log10 IU/mL) Sekundarni standardi, umerjeni glede na mednarodne standarde SZO		Redčitve (polovica log10 ali manj) umerjenih referenčnih pripravkov; določanje spodnje in zgornje meje kvantifikacije, meje detekcije, natančnosti, točnosti, „linearnega“ merilnega območja, „dinamičnega območja“. Sintetična ciljna nukleinska kislina se lahko uporabi kot sekundarni standard za doseganje višjih ravni koncentracij. Prikaže se obnovljivost pri različnih koncentracijah
Diagnostična občutljivost: različni sevi RNK virusa SARS-CoV-2	Vzorci pacientov, ugotovljeni kot pozitivni na RNK virusa SARS-CoV-2 s primerjalnim pripomočkom, iz različnih regij in skupin izbruhov; variante zaporedja Redčitvene vrste na SARS-CoV-2 pozitivnih celičnih kultur (izolati) se lahko uporabljajo kot možni nadomestki	≥ 100 LXVIII
Učinkovitost kvantifikacije	Na RNK virusa SARS-CoV-2 pozitivni vzorci pacientov iz različnih regij in skupin izbruhov; variante zaporedja s kvantitativnimi vrednostmi, pridobljenimi s primerjalnim pripomočkom Redčitvene vrste na RNK virusa SARS-CoV-2 pozitivnih celičnih kultur se lahko uporabljajo kot možni nadomestki		≥ 100
Vključevanje	Analiza in silico LXIX ; vsaj dve neodvisni ciljni območji gena v eni izvedbi testa (zasnova z dvojnim ciljem)	Dokazi o ustrezni zasnovi pripomočka: poravnave zaporedij oligonukleotidnega začetnika/sonde z objavljenimi zaporedji SARS-CoV-2	Dokazi o ustrezni zasnovi pripomočka: poravnave zaporedij oligonukleotidnega začetnika/sonde z objavljenimi zaporedji SARS-CoV-2
Specifičnost
Diagnostična specifičnost	Na RNK virusa SARS-CoV-2 negativni človeški vzorci	≥ 500	≥ 100
Analiza in silico2;		Dokazi o ustrezni zasnovi pripomočka (poravnave zaporedij); redno preverjanje zaporedij oligonukleotidnega začetnika/sonde glede na vnose v podatkovnih zbirkah zaporedij	Dokazi o ustrezni zasnovi pripomočka (poravnave zaporedij); redno preverjanje zaporedij oligonukleotidnega začetnika/sonde glede na vnose v podatkovnih zbirkah zaporedij
Navzkrižna reaktivnost	Vzorci, pozitivni na (različne koncentracije) sorodne humane koronaviruse 229E, HKU1, OC43, NL63, koronavirus bližnjevzhodnega respiratornega sindroma; SARS CoV-1, če so na voljo; virus influence tipov A, B; RSV; Legionella pneumophila; pozitivne celične kulture se lahko uporabljajo kot možni nadomestki	Skupaj ≥ 20	Skupaj ≥ 20
Ponovljivost
Prenos		Vsaj 5 izvedb testov, pri katerih se izmenično uporabijo visoko pozitivni in negativni vzorci Virusni titri v visoko pozitivnih vzorcih predstavljajo naravno visoke virusne titre.	Vsaj 5 izvedb testov, pri katerih se izmenično uporabijo visoko pozitivni (za katere je znano, da se pojavljajo naravno) in negativni vzorci
Inhibicija		Notranja kontrola, najbolje med celotnim postopkom testa NAT	Notranja kontrola, najbolje med celotnim postopkom testa NAT
Stopnja neustreznega odzivanja celotnega sistema, ki vodi v lažno negativne rezultate: 99/100 testov pozitivnih		≥ 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije (3 x meja detekcije)	≥ 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije (3 x meja detekcije)

Preglednica 6: Dodatne zahteve za antigenske samoteste na SARS-CoV-2 LXX

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci LXXI	Število nestrokovnjakov
Razlaga rezultatov LXXII	Razlaga rezultatov LXXIII s strani nestrokovnjakov, ki odražajo naslednji razpon ravni reaktivnosti: ·nereaktivni ·reaktivni ·šibko reaktivni LXXIV ·neveljavni	≥ 100
Diagnostična občutljivost LXXV	Nestrokovnjaki, za katere se ve, da so pozitivni na antigen LXXVI , LXXVII	≥ 30
Diagnostična specifičnost LXXVIII	Nestrokovnjaki, ki ne poznajo svojega statusa5	≥ 60

Preglednica 7: Dodatne zahteve za samoteste na protitelesa proti SARS-CoV-2 LXXIX

Značilnosti učinkovitosti	Vzorci LXXX	Število nestrokovnjakov
Razlaga rezultatov LXXXI	Razlaga rezultatov LXXXII s strani nestrokovnjakov, ki odražajo naslednji razpon ravni reaktivnosti: ·nereaktivni ·reaktivni ·šibko reaktivni LXXXIII ·neveljavni	≥ 100
Diagnostična občutljivost LXXXIV	Nestrokovnjaki, za katere se ve, da so pozitivni na protitelesa LXXXV	≥ 100
Diagnostična specifičnost LXXXVI	Nestrokovnjaki, ki ne poznajo svojega statusa5	≥ 100

(1)

Ta zahteva se ne uporablja za pripomočke, zajete v preglednicah 1 in 2 Priloge XIII.

(2)

Ta zahteva se ne uporablja za pripomočke iz preglednic 4, 5 in 6 Priloge XIII.

(3)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(I)

Samo kjer velja, da reagirajo na te antigene.

(II)

Populacije krvodajalcev se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(III)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(IV)

Za vsako telesno tekočino, s katero naj bi se pripomoček uporabljal, npr. polno kri, urin, slino itd., se občutljivost in specifičnost pripomočka za samotestiranje, ki ga uporabljajo nestrokovnjaki, opredelita glede na potrjeni status pacienta v zvezi z okužbo.

(V)

V študijo o razlagi rezultatov sta vključena odčitavanje in razlaga rezultatov testov, ki ju opravi vsaj 100 nestrokovnjakov, pri čemer je vsak nestrokovnjak moral odčitati rezultate, ki zajemajo določen razpon ravni reaktivnosti rezultatov. Proizvajalec določi skladnost med odčitavanjem nestrokovnjakov in poklicnih uporabnikov.

(VI)

Testi se opravijo pred študijo razlage rezultatov, pri čemer, kadar je mogoče, uporabijo vrsto vzorca, ki jo določi proizvajalec. Testi se lahko opravijo na umetnih vzorcih na podlagi naravnega matriksa zadevne vrste vzorca.

(VII)

Višji delež vzorcev je v območju nizke pozitivnosti blizu razmejitvene vrednosti ali meje detekcije testa.

(VIII)

Krvodajalske populacije se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(IX)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(X)

Krvodajalske populacije se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(XI)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(XII)

(XIII)

(XIV)

(XV)

Višji delež vzorcev je v območju šibke pozitivnosti blizu razmejitvene vrednosti ali meje detekcije testa.

(XVI)

Krvodajalske populacije se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(XVII)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(XVIII)

(XIX)

(XX)

(XXI)

Višji delež vzorcev je v območju nizke pozitivnosti blizu razmejitvene vrednosti ali meje detekcije testa.

(XXII)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(XXIII)

Vključno s testiranjem drugih parametrov CMV (npr. CMV-IgM, avidnost, imunoblot) ali predhodnih/nadaljnjih vzorcev za ocenitev resničnega statusa vzorca.

(XXIV)

Dodatno testiranje za potrditev nedavne okužbe s CMV (primarna ali ponovna okužba): npr. CMV-IgM, avidnost IgG, imunoblot.

(XXV)

Ustreza prvotnemu številu 1 000 darovalcev pri domnevni razširjenosti CMV 60 %.

(XXVI)

Vključno s prejemniki pred presaditvijo.

(XXVII)

Vključno s povezanimi beta herpesvirusi (HHV-6, HHV-7).

(XXVIII)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(XXIX)

Vključno s testiranjem drugih parametrov in označevalcev okužbe s CMV (npr. VCA-IgM, EBNA-1 IgG, imunoblot) ali predhodnih/nadaljnjih vzorcev za ocenitev resničnega statusa vzorca.

(XXX)

Dodatno testiranje za potrditev nedavne okužbe z EBV: npr. VCA-IgM, avidnost protiteles IgG, imunoblot.

(XXXI)

Pri domnevni 80-odstotni razširjenosti EBV, ki ustreza začetnemu številu 1 000 darovalcev.

(XXXII)

Vključno s prejemniki pred presaditvijo.

(XXXIII)

Sklic: Evropska farmakopeja 9.0, 2.6.21 Tehnika pomnoževanja nukleinskih kislin, potrditev.

(XXXIV)

Krvodajalske populacije se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(XXXV)

Krvodajalske populacije se preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih, pri čemer gre za zaporedna darovanja krvi, izbira pa ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

(XXXVI)

Trditev glede učinkovitosti kombiniranega skupnega rezultata; za pripomočke z ločenimi trditvami za IgM in/ali IgA glej preglednico 2.

(XXXVII)

Navedejo se podrobnosti o časovnem intervalu od odvzema vzorca do pojava simptomov (ali času okužbe, če je znan).

(XXXVIII)

Proizvajalec navede utemeljitev primernosti in časovnega okvira za oceno občutljivosti ustreznih protiteles pri cepljenih posameznikih.

(XXXIX)

Na podlagi potrjenega pozitivnega rezultata testa NAT na SARS-CoV-2.

(XL)

Trditve glede občutljivosti se navedejo glede na čas od odvzema vzorca po pojavu simptomov ali prvotne diagnoze z metodo PCR do testa.

(XLI)

V skladu z Uredbo (EU) 2017/746 je označen z oznako CE, razred D, če je na voljo.

(XLII)

To velja za kvantitativne teste, če so ti tudi testi prve izbire.

(XLIII)

Negativni vzorci so bili zbrani pri posameznikih brez pretekle okužbe s SARS-CoV-2 (če so na voljo podatki pred pandemijo).

(XLIV)

Po potrebi se lahko vključijo posamezniki, cepljeni proti antigenu, ki se razlikuje od tistega, uporabljenega v pripomočku.

(XLV)

(XLVI)

V primeru pripomočkov za detekcijo IgM in IgA, 200 na označevalca IgM in IgA.

(XLVII)

Navedejo se podrobnosti o časovnem intervalu od odvzema vzorca do pojava simptomov (ali času okužbe, če je znan).

(XLVIII)

Proizvajalec navede utemeljitev primernosti in časovnega okvira za oceno občutljivosti protiteles IgM in IgA pri cepljenih posameznikih.

(XLIX)

Diagnoza na podlagi potrjenega pozitivnega rezultata testa NAT na SARS-CoV-2.

(L)

Trditve glede občutljivosti se navedejo glede na čas od odvzema vzorca po pojavu simptomov ali prvotne diagnoze z metodo PCR do testa.

(LI)

V skladu z Uredbo (EU) 2017/746 je označen z oznako CE, razred D, če je na voljo.

(LII)

Negativni vzorci so bili zbrani pri posameznikih brez pretekle okužbe s SARS-CoV-2 (če so na voljo podatki pred pandemijo).

(LIII)

Po potrebi se lahko vključijo posamezniki, cepljeni proti antigenu, ki se razlikuje od tistega, uporabljenega v pripomočku.

(LIV)

Lažno pozitivni rezultati se pojasnijo s ponovnim testiranjem pri drugih seroloških testih na SARS-CoV-2, če je potrebno z drugo zasnovo testa in prekrivanjem antigena v primerjavi s prvotnim testom, in/ali s potrditvenim testiranjem. Pojasnitev lažno pozitivnih rezultatov lahko vključuje tudi testiranje na prisotnost drugih vrst protiteles proti SARS-CoV-2 (IgA, IgG, skupna protitelesa).

(LV)

Npr. imunoblot z antigeni, ki se razlikujejo od tistih, uporabljenih v prvotnem testu na protitelesa.

(LVI)

Negativni vzorci so bili zbrani pri posameznikih brez pretekle okužbe s SARS-CoV-2 (če so na voljo podatki pred pandemijo).

(LVII)

Če je pripomoček namenjen uporabi za več kot eno vrsto vzorca, je za vsako vrsto vzorca potrebnih 100 vzorcev. Če to v izjemnih okoliščinah ni mogoče (npr. če je odvzem vzorcev zelo invaziven), proizvajalec navede utemeljitev in predloži dokaze o enakovrednosti matriksa.

(LVIII)

Število odvzetih vzorcev za antigenske teste je enako številu vzorcev za teste NAT, npr. dva hkrati odvzeta vzorca pri vsakem posamezniku ali optimalno test NAT in antigenski test iz istega vzorca (npr. iz izlužka enega brisa); pufer/transportno gojišče mora biti primerno za antigensko testiranje; jasno je treba sporočiti vsako spremembo prostornine pufra/gojišča za odvzet vzorec med antigenskim testom in pripomočkom NAT.

(LIX)

Ali čas okužbe, če je znan, ob upoštevanju inkubacijske dobe.

(LX)

Tj. brez predhodne izbire; virusna obremenitev in njena porazdelitev se prikažeta, npr. z vrednostmi Ct (cycle treshold – prag cikla) RT-PCR; ali se po potrebi pretvorita v virusno obremenitev na ml vzorca.

(LXI)

Odvisno od zasnove pripomočka in narave genske različice. Za namene vrednotenja so za vsako zadevno gensko različico predstavljeni vsaj trije vzorci.

(LXII)

Odvzem vzorcev in izdelki za odvzem, kot so paličice, ekstrakcijski pufri itd., so del vrednotenja. Če lastniško zaščiteno jemanje vzorcev/priprava vzorca ni vključeno v pripomoček, se učinkovitost pripomočka preuči za ustrezen razpon pripomočkov za jemanje vzorcev. Če se vzorec ne testira takoj, npr. po določenem času prevoza, se preveri stabilnost antigena.

(LXIII)

Razen hitrih testov, tj. uradni laboratorijski pripomočki, npr. encimski imunski testi, avtomatizirani testi itd.

(LXIV)

Občutljivost ≥ 80 % oz. ≥ 85 % za vse navedene vrste vzorcev. Vse navedene vrste vzorcev se primerjajo z rezultati parnih testov NAT iz nazofaringealnih vzorcev.

(LXV)

Prikaže se razmerje med občutljivostjo antigenskega testa in občutljivostjo testa NAT; pokaže se lahko tudi občutljivost v zvezi z različnimi razponi virusne obremenitve in pragom infektivnosti. Opišeta se NAT in uporabljena metoda ekstrakcije.

(LXVI)

Če ni na voljo mednarodnega standarda, se lahko analizna občutljivost testira z redčitvenimi vrstami internih virusnih pripravkov, sorazmerno z drugimi antigenskimi testi in testi NAT; če se uporabi inaktivirani virus, se preuči učinek inaktivacije in zamrzovanja/odtajanja na antigen.

(LXVII)

Npr. stafilokoki in streptokoki, ki izražajo protein A ali G.

(LXVIII)

(LXIX)

Proizvajalec v poročilu o nadaljnjem spremljanju učinkovitosti po dajanju na trg dokumentira dokaze o proaktivnih rednih nadzornih pregledih glede na posodobljene vnose v zbirki podatkov.

(LXX)

Predpostavlja se, da je bila osnovna učinkovitost samotesta že dokazana z vrednotenjem/oceno testa za strokovno uporabo iste zasnove kot zadevni test za samotestiranje, ki se ocenjuje. Če za zadevne vzorce za samouporabo ni ustrezne različice testa za strokovno uporabo, se opravi primerjava s standardno vrsto vzorca (npr. nazofaringealni bris za antigenski test, serum ali plazma za test na protitelesa) ustreznega testa za strokovno uporabo.

(LXXI)

Za vsako vrsto vzorca za samouporabo, ki je navedena za uporabo s pripomočkom (npr. vzorec iz nosu, izmeček, slina, polna kri itd).

(LXXII)

(LXXIII)

(LXXIV)

Višji delež vzorcev je v območju nizke pozitivnosti blizu razmejitvene vrednosti ali meje detekcije testa.

(LXXV)

V primerjavi z RT-PCR. Proizvajalec določi skladnost med odčitavanjem nestrokovnjakov in poklicnih uporabnikov.

(LXXVI)

Posamezniki, ki pred samotestiranjem ne poznajo strokovnega diagnostičnega rezultata in opravijo celoten postopek testiranja, od odvzema in predhodne obdelave vzorca (bris, ekstrakt pufra itd.) do odčitavanja.

(LXXVII)

Udeleženci do približno 7 dni po pojavu simptomov.

(LXXVIII)

Proizvajalec določi skladnost med odčitavanjem nestrokovnjakov in poklicnih uporabnikov.

(LXXIX)

(LXXX)

Za vsako vrsto vzorca za samouporabo, ki je navedena za uporabo s pripomočkom (npr. vzorec iz nosu, izmeček, slina, polna kri itd).

(LXXXI)

(LXXXII)

(LXXXIII)

Višji delež vzorcev je v območju nizke pozitivnosti blizu razmejitvene vrednosti ali meje detekcije testa.

(LXXXIV)

S preteklo primarno okužbo s SARS-CoV-2, potrjeno z RT-PCR; v primerjavi s predhodno potrjenim rezultatom testa na protitelesa; Proizvajalec določi skladnost med odčitavanjem nestrokovnjakov in poklicnih uporabnikov.

(LXXXV)

(LXXXVI)

Proizvajalec določi skladnost med odčitavanjem nestrokovnjakov in poklicnih uporabnikov.

Značilnosti učinkovitosti	Zahteva
Vse zahteve glede značilnosti učinkovitosti, določene v oddelku 9.1, točki (a) in (b), oddelku 9.3 in oddelku 9.4, točka (a), Priloge I k Uredbi (EU) 2017/746	1.Določanje značilnosti učinkovitosti se izvede v neposredni primerjavi z najsodobnejšim pripomočkom. Pripomoček, ki se uporablja za primerjavo, ima oznako CE, če je ob času ocene učinkovitosti ta pripomoček na trgu. 2.Pripomočki, ki se uporabljajo za določanje statusa vzorcev, ki se uporabljajo pri določanju značilnosti učinkovitosti, so najsodobnejši pripomočki z oznako CE. 3.Če se med seboj različni rezultati prepoznajo kot del določanja značilnosti učinkovitosti, se ti rezultati, kolikor je to mogoče, pojasnijo, na primer z: –vrednotenjem neskladnega vzorca v nadaljnjih pripomočkih, –uporabo alternativne metode ali označevalca, –ponovnim pregledom pacientovega kliničnega stanja in diagnoze ter –testiranjem nadaljnjih vzorcev. 4.Določanje značilnosti učinkovitosti se izvede na populaciji, enakovredni evropski populaciji.
Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema	5.Kot del predpisane analize tveganja se stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema, ki povzroča lažno negativne rezultate, določi s ponovljenimi testi na nizko pozitivnih vzorcih.
Analizna občutljivost in analizna specifičnost, motnje	6.Za pripomočke, ki so namenjeni uporabi s plazmo, proizvajalec preveri učinkovitost pripomočka z vsemi antikoagulanti, ki jih proizvajalec navede za uporabo s pripomočkom, in sicer za vsaj 50 vzorcev plazme (za pripomočke, namenjene detekciji in/ali kvantifikaciji povzročiteljev okužb, 25 pozitivnih in 25 negativnih).
Analizna in diagnostična specifičnost, motnje in navzkrižna reaktivnost	7.Proizvajalec izbere morebitne moteče snovi, ki se ovrednotijo ob upoštevanju sestave reagentov in konfiguracije pripomočka.
Konsistentnost med serijami	8.Za pripomočke, namenjene detekciji antigenov in protiteles, proizvajalčeva merila za preskušanje serij zagotavljajo, da se v vsaki seriji dosledno opredelijo ustrezni antigeni, epitopi in protitelesa ter je primerna za navedene vrste vzorcev. 9.Proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi serij za teste prve izbire zajema vsaj 100 vzorcev, negativnih na zadevni analit 1 .

Reagenti za določanje krvnih skupin	Najmanjše število testiranih kontrolnih celic kot del testiranja specifičnosti							Merila sprejemljivosti
	Pozitivne reakcije				Negativne reakcije			Vsaka serija reagenta izkazuje nedvoumne pozitivne ali negativne rezultate z vsemi tehnikami, ki jih navede proizvajalec v skladu z rezultati, pridobljenimi iz podatkov o oceni učinkovitosti.
	A1	A2B	Ax		B	O
Anti-ABO1 (anti-A)	2	2	2 I		2	2
	B	A1B			A1	O
Anti-ABO2 (anti-B)	2	2			2	2
	A1	A2	Ax	B	O
Anti-ABO3 (anti-A,B)	2	2	21	2	4
	R1r	R2r	šibek D		r’r	r”r	rr
Anti-RH1 (anti-D)	2	2	21		1	1	1
	R1R2	R1r	r’r		R2R2	r”r	rr
Anti-RH2 (anti-C)	2	1	1		1	1	1
	R1R2	R1r	r’r		R1R1
Anti-RH4 (anti-c)	1	2	1		3
	R1R2	R2r	r”r		R1R1	r’r	rr
Anti-RH3 (anti-E)	2	1	1		1	1	1
	R1R2	R2r	r”r		R2R2
Anti-RH5 (anti-e)	2	1	1		3
	Kk				kk
Anti KEL1 (anti-K)	4				3
	Jk (a+b+)				Jk (a−b+)
Anti-JK1 (anti-Jka)	4				3
	Jk (a+b+)				Jk (a+b−)
Anti-JK2 (anti-Jkb)	4				3
	Fy (a+b+)				Fy (a−b+)
Anti-FY1 (anti-Fya)	4				3
	Fy (a+b+)				Fy (a+b−)
Anti-FY2 (anti-Fyb)	4				3