„IX. MELLÉKLET

SPEKTROFOTOMETRIÁS VIZSGÁLAT ULTRAIBOLYA FÉNYBEN

ELŐSZÓ

Az ultraibolya fényben végzett spektrofotometriás vizsgálat segítségével a zsír minőségével, tartósítási állapotával és technológiai folyamatok által benne okozott változásokkal kapcsolatos információk állapíthatók meg.

A módszerben meghatározott hullámhosszokon az abszorpció a konjugált dién- és triénrendszerek jelenlétének köszönhető. Ezeket az abszorpciókat E 1 % 1 cm fajlagos kioltásban (azaz a zsír meghatározott oldószerrel készült, 1 %-os oldatában, 1 cm-es vastagságban mért kioltásban) fejezik ki, amelyet egyezményesen K-val (más néven »kioltási tényező«) jelölnek.

1.   HATÓKÖR

A módszer (a függelékben leírt) olívaolajok ultraibolya fényben történő spektrofotometriás vizsgálatának eljárását ismerteti.

2.   A MÓDSZER ALAPELVE

A vizsgálat tárgyát képező zsírt az előírt oldószerben feloldják, majd az adott hullámhosszokon meghatározzák az oldat kioltását a tiszta oldószer kioltásához viszonyítva. A fajlagos kioltásokat a spektrofotométer által mutatott értékből számítják ki. A fajlagos abszorbancia kiszámítása 232 nm-en és 268 nm-en izooktánban vagy 232 nm-en és 270 nm-en ciklohexánban, 1 g/100 ml koncentrációnál, 10 mm-es küvettában történik.

3.   BERENDEZÉS

3.1.   Olyan spektrofotométer, amely a kioltás mérését 220–360 nm közötti ultraibolya fényben végzi, és amely lehetővé teszi a nanométeregységek egyenkénti leolvasását. Használat előtt javasolt a spektrofotométer hullámhossz- és abszorbanciaskáláit az alábbiak szerint ellenőrizni.

3.1.1.

Hullámhosszskála: Ellenőrzése holmium-oxid-tartalmú optikaiüveg-szűrőből álló referenciaanyag segítségével történhet, melynek jól elkülönülő abszorpciós sávjai vannak. A referenciaanyag alkalmas a látható és ultraibolya tartományokban mérő, legfeljebb 5 nm névleges spektrális sávszélességgel rendelkező spektrofotométerek hullámhosszskáláinak ellenőrzésére és kalibrálására. A holmium-üvegszűrőt abszorbanciamódban, 640–240 nm hullámhossztartományban, levegős vakmintával szemben mérik. Minden egyes spektrális sávszélességre (0,10 – 0,25 – 0,50 – 1,00 – 1,50 – 2,00 és 3,00) üres küvettatartóval alapkorrekciót végeznek. A spektrális sávszélesség hullámhosszait a referenciaanyagnak az ISO 3656 szabványban szereplő tanúsítványa adja meg.

3.1.2.

Abszorbanciaskála: Ellenőrzése kálium-dikromát négyféle, perklórsavas, négy UV-kvarcküvettába zárt oldatának segítségével történhet. A négy oldat a linearitás és fotometrikus pontosság UV-fényben történő mérésére szolgál. A (40 mg/ml, 60 mg/ml, 80 mg/ml és 100 mg/ml koncentrációjú) kálium-dikromáttal töltött küvettákat perklórsavból álló vakmintával szemben mérik. A nettó abszorbanciaértékeket a referenciaanyagnak az ISO 3656 szabványban szereplő tanúsítványa adja meg.

3.2.   Négyszögletes kvarcküvetták, kupakkal, 1 cm-es optikai hosszal. Vízzel vagy más megfelelő oldószerrel töltve a küvetták nem mutathatnak egymáshoz képest 0,01 kioltási egységnél nagyobb különbséget.

3.3.   25 ml-es mérőlombikok.

3.4.   0,0001 g pontossággal mérő analitikai mérleg.

4.   REAGENSEK

Ellenkező utasítás hiányában elismert analitikai minőségű reagensek használandók.

Oldószer: Izooktán (2,2,4-trimetil-pentán) a 232 nm-en és 268 nm-en történő méréshez vagy ciklohexán a 232 nm-en és 270 nm-en történő méréshez, 232 nm-en legfeljebb 0,12, 250 nm-en pedig legfeljebb 0,05 abszorbanciával, 10 mm-es küvettában mérve.

5.   ELJÁRÁS

5.1.   A vizsgálati mintának teljesen homogénnek kell lennie, és nem lehetnek benne lebegő szennyeződések. A szobahőmérsékleten folyékony olajokat megközelítőleg 30 °C hőmérsékleten át kell szűrni papíron, a kemény zsírokat homogenizálni kell, és át kell szűrni az olvadáspontjukat legfeljebb 10 °C-kal meghaladó hőmérsékleten.

5.2.   A fentiek szerint előkészített minta megközelítőleg 0,25 g-ját pontosan (1 mg pontossággal) be kell mérni egy 25 ml-es mérőlombikba, az előírt oldószerrel a jelig fel kell tölteni, majd homogenizálni kell. A kapott oldatnak teljesen átlátszónak kell lennie. Amennyiben opálosság vagy zavarosság lép fel, papíron gyorsan át kell szűrni.

5.3.   Egy kvarcküvettát a kapott oldattal fel kell tölteni, majd a használt oldószert referenciaként használva, 232 és 276 nm közötti megfelelő hullámhosszon meg kell mérni a kioltásokat.

A kapott kioltási értékeknek a 0,1–0,8 tartományba kell esniük. Amennyiben ezen kívül esnek, a mérést meg kell ismételni töményebb, illetve hígabb oldatokkal.

Megjegyzés: Előfordulhat, hogy nem szükséges az abszorbanciát a teljes hullámhossztartományban mérni.

6.   AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA

6.1.   Fel kell jegyezni a különböző hullámhosszokon a következő módon kiszámított fajlagos kioltásokat (kioltási tényezőket):

ahol:

Κλ	=	fajlagos kioltás λ hullámhosszon;
Ελ	=	a mért kioltás λ hullámhosszon;
c	=	az oldat koncentrációja g/100 ml-ben;
s	=	a kvarcküvetták hossza cm-ben.

Az eredményeket két tizedesjegy pontossággal kell megadni.

6.2.   A fajlagos kioltás változása (ΔΚ)

Az uniós jog által előírt hivatalos módszerrel összhangban az olívaolaj spektrofotometriás elemzése során meg kell határozni a fajlagos kioltás abszolút értékének változását (ΔΚ) is, az alábbi képlettel:

ahol Km az m hullámhosszon mért fajlagos kioltás. A felhasznált oldószertől függ, milyen hullámhosszon következik be a maximális abszorpció: ciklohexánnál 270 nm-en, izooktánnál 268 nm-en.

„Függelék

AZ OLÍVAOLAJ JELLEMZŐI

Típus

Zsírsav-metilészterek (FAME) és zsírsav-etilészterek (FAEE)

Savasság (%) (*)

Peroxidszám mEq 02/kg (*)

Viasztartalom mg/kg (**)

2-gliceril-monopalmitát (%)

Sztigmasztadién mg/kg (1)

ECN-42 (HPLC) és ECN - 42 (elméleti számítás) különbsége

K232 (*)

K270 (*) K 270 vagy K 268 (5)

Delta-K (*) (5)

Organoleptikus értékelés Hibamedián (Hm) (*)

Organoleptikus értékelés Gyümölcsösségi medián (Gym) (*)

1.

Extra szűz olívaolaj

Σ FAME + FAEE ≤75 mg/kg vagy 75 mg/kg <Σ FAME + FAEE ≤150 mg/kg és (FAEE/FAME) ≤1,5

≤ 0,8

≤ 20

≤ 250

≤ 0,9, ha a palmitinsav összaránya % ≤ 14 %

≤ 0,10

≤ 0,2

≤ 2,50

≤ 0,22

≤ 0,01

Hm = 0

Gym > 0

≤ 1,0, ha a palmitinsav összaránya % > 14%

2.

Szűz olívaolaj

—

≤ 2,0

≤ 20

≤ 250

≤ 0,9, ha a palmitinsav összaránya % ≤ 14%

≤ 0,10

≤ 0,2

≤ 2,60

≤ 0,25

≤ 0,01

Hm ≤ 3,5

Gym > 0

≤ 1,0, ha a palmitinsav összaránya % > 14%

3.

Lampante olívaolaj

—

> 2,0

—

≤ 300 (3)

≤ 0,9, ha a palmitinsav összaránya % ≤ 14 %

≤ 0,50

≤ 0,3

—

—

—

Hm > 3,5 (2)

—

≤ 1,1, ha a palmitinsav összaránya % > 14%

4.

Finomított olívaolaj

—

≤ 0,3

≤ 5

≤ 350

≤ 0,9, ha a palmitinsav összaránya % ≤ 14 %

—

≤ 0,3

—

≤ 1,10

≤ 0,16

—

—

≤ 1,1, ha a palmitinsav összaránya % > 14%

5.

Finomított és szűz olívaolajokból álló olívaolaj

—

≤ 1,0

≤ 15

≤ 350

≤ 0,9, ha a palmitinsav összaránya % ≤ 14 %

—

≤ 0,3

—

≤ 0,90

≤ 0,15

—

—

≤ 1,0, ha a palmitinsav összaránya % > 14%

6.

Nyers olívapogácsa - olaj

—

—

—

> 350 (4)

≤ 1,4

—

≤ 0,6

—

—

—

—

—

7.

Finomított olívapogácsa - olaj

—

≤ 0,3

≤ 5

> 350

≤ 1,4

—

≤ 0,5

—

≤ 2,00

≤ 0,20

—

—

8.

Olívapogácsa - olaj

≤ 1,0

≤ 15

> 350

≤ 1,2

—

≤ 0,5

—

≤ 1,70

≤ 0,18

—

—

„XVIII. MELLÉKLET

AZ ECN-42-ES TRIACIL-GLICERINEK TÉNYLEGES ÉS ELMÉLETI MENNYISÉGE KÖZÖTTI KÜLÖNBSÉG MEGHATÁROZÁSA

1.   HATÁSKÖR

A módszer a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) elemzés révén az olajban mért, 42-es ekvivalens szénszámú triacil-glicerinek kísérleti értékeinek (ECN-42HPLC) és a zsírsavösszetételből kiszámított, 42 ekvivalens szénszámú triacil-glicerinek elméleti értékének (ECN-42elméleti) abszolút különbségét határozza meg.

2.   ALKALMAZÁSI KÖR

A módszer olívaolajokra alkalmazandó. A módszer a (linolsavban gazdag) magolajok kis mennyiségeinek jelenlétét hivatott kimutatni bármilyen kategóriájú olívaolajban.

3.   A MÓDSZER ALAPELVE

Az ECN-42-es triacil-glicerinek nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás elemzés révén meghatározott mennyisége és az ECN-42-es triacil-glicerinek (a zsírsavösszetétel gáz-folyadék-kromatográfiás módszer [GLC] szerint meghatározott] elméleti mennyisége a valódi olívaolajok esetében bizonyos határértéken belül megegyezik. Amennyiben a különbség meghaladja az egyes olajtípusokra elfogadott értékeket, megállapítható, hogy az olaj magolajokat tartalmaz.

4.   MÓDSZER

Az ECN-42-es triacil-glicerinek elméleti mennyiségének megállapítására és a HPLC-adattal összevetve kapott különbség kiszámítására szolgáló módszer végrehajtása alapvetően más módszerek révén nyert analitikai adatok koordinációjával történik. A módszeren belül három fázis különíthető el: a zsírsavösszetétel meghatározása kapilláris gázkromatográfiával, az ECN-42-es triacil-glicerinek összetételének elméleti kiszámítása és az ECN-42-es triacil-glicerinek HPLC-vel történő meghatározása.

4.1.   Eszközök

4.1.1.   250 és 500 ml-es gömblombikok.

4.1.2.   100 ml-es főzőpoharak.

4.1.3.   Üveg kromatográfiás kolonna, 21 mm belső átmérővel, 450 mm hosszúsággal, csappal és felül normalizált kúpos furattal.

4.1.4.   250 ml-es elválasztó tölcsér, alul normalizált kúpos dugóval a kolonna tetejéhez való csatlakoztatás biztosítására.

4.1.5.   600 mm hosszú üvegpálca.

4.1.6.   80 mm átmérőjű üvegtölcsér.

4.1.7.   50 ml-es mérőlombikok.

4.1.8.   20 ml-es mérőlombikok.

4.1.9.   Rotációs bepárló.

4.1.10.   Nagy teljesítményű folyadékkromatográf, amely lehetővé teszi a kolonna hőmérsékletének termosztatikus szabályozását.

4.1.11.   10 μl befecskendezők.

4.1.12.   Detektor: differenciál-refraktométer. A teljes skálán mért érzékenység legalább a refraktív index 10–4 egysége.

4.1.13.   Kolonna: 250 mm hosszú és 4,5 mm belső átmérőjű rozsdamentes acél cső, megtöltve 5 μm átmérőjű, 22–23 %-ban oktadecil-szilán alakban lévő szenet tartalmazó szilikarészecskékkel.

4.1.14.   Adatfeldolgozó szoftver.

4.1.15.   Kb. 2 ml térfogatú ampullák, teflonbevonatú szeptummal és csavaros kupakkal.

4.2.   Reagensek

A reagenseknek analitikai tisztaságúnak kell lenniük. Az eluáló oldószerek, melyeket gáztalanítani kell, többször újra felhasználhatók anélkül, hogy ez hatással lenne a szétválasztásra.

4.2.1.   Kromatográfiai minőségű petróleum-éter (40–60 °C) vagy hexán.

4.2.2.   Frissen desztillált, peroxidmentes etil-éter.

4.2.3.   Eluáló oldószer az olaj oszlopkromatográfiával történő tisztítására: petróleum-éter és etil-éter 87:13 térfogatarányú elegye.

4.2.4.   Szilikagél, 70–230 mesh, »Merck 7734« típus, 5 tömegszázalékon standardizált víztartalommal.

4.2.5.   Üveggyapot.

4.2.6.   Aceton HPLC-hez.

4.2.7.   Acetonitril vagy propionitril HPLC-hez.

4.2.8.   Eluáló oldószer HPLC-hez: acetonitril + aceton (az arányokat a kívánt elválasztásnak megfelelően kell beállítani, 50:50 arányú keverékkel kezdve) vagy propionitril.

4.2.9.   Oldáskönnyítő oldószer: aceton.

4.2.10.   Referenciatrigliceridek: használhatók a kereskedelmi forgalomban kapható trigliceridek (tripalmitin, triolein stb.), ekkor a retenciós időket az ekvivalens szénszám függvényében kell ábrázolni, vagy használhatók szójaolajról (szójaolaj, valamint olívaolaj és tiszta olívaolaj 30:70 arányú keverékével) készült referenciakromatogrammok (lásd az 1. és 2. megjegyzést, illetve az 1–4. ábrát).

4.2.11.   Szilárd fázisú extrakciós oszlop szilikafázissal, 1 g, 6 ml.

4.3.   A minták előkészítése

Mivel több interferáló anyag hamis pozitív eredményekhez vezethet, a mintát mindig tisztítani kell, a sütőolajokban található poláris vegyületek meghatározásához használt 2507-es IUPAC-módszernek megfelelően.

4.3.1.   A kromatográfiás kolonna előkészítése

Töltse meg a kolonnát (4.1.3.) körülbelül 30 ml eluláló oldószerrel (4.2.3.), majd a kolonna belsejébe helyezzen üveggyapotot (4.2.5.), amelyet az üvegpálca segítségével (4.1.5.) nyomjon a kolonna aljára.

Egy 100 ml-es főzőpohárban szuszpendáljon 25 g szilikagélt (4.2.4.) 80 ml eluáló keverékben (4.2.3.), majd üvegtölcsér (4.1.6.) segítségével öntse a kolonnába.

Annak biztosításához, hogy a szilikagél teljes mennyisége átjusson a kolonnába, mossa ki a főzőpoharat az eluáló keverékkel, és a mosásra használt mennyiségeket is juttassa a kolonnába.

Nyissa ki a csapot, és annyi oldószert engedjen a kolonnából eluálni, hogy annak szintje kb. 1 cm-rel lépje túl a szilikagél szintjét.

4.3.2.   Oszlopkromatográfia

Mérjen be 0,001 g pontossággal 2,5 ± 0,1 g, előzőleg szűrt, homogenizált és szükség esetén vízmentesített olajat egy 50 ml-es mérőlombikba (4.1.7).

Oldja fel körülbelül 20 ml eluáló oldószerben (4.2.3.). Az oldódás elősegítéséhez szükség esetén enyhén hevítse. Hűtse szobahőmérsékleten, és az eluáló oldószerrel állítsa be a volument.

Mérőpipetta segítségével tegyen 20 ml oldatot a 4.3.1. pont szerint előkészített kolonnába, nyissa meg a csapot, és engedje az oldószert a szilikagélréteg szintjéig eluálni.

Ezután eluáljon 150 ml eluáló oldószerrel (4.2.3.), az oldószer sebességét kb. 2 ml/percre beállítva (így kb. 60–70 percig tart, amíg 150 ml átmegy a kolonnán).

Az eluátumot egy előzőleg sütőben kitárált, 250 ml-es gömblombikban (4.1.1.) fogja fel, és tömegét pontosan mérje meg. Rotációs bepárló (4.1.9.) segítségével, csökkentett nyomáson távolítsa el az oldószert, és mérje meg a HPLC-elemzéshez és metil-észter készítéséhez használatos oldat elkészítéséhez szükséges maradékanyag tömegét.

A kolonnából az extra szűz, a szűz, a közönséges, a finomított és az olívaolaj kategóriák esetében legalább a minta 90 %-át, lampante és olívapogácsa-olajok esetében legalább 80 %-át kell visszanyerni.

4.3.3.   Szilárd fázisú extrakcióval történő (SPE) tisztítás

A szilikatöltetű SPE-kolonnát 6 ml hexán (4.2.3) vákuumban – a kiszárítás elkerülése mellett – történő áteresztésével kell aktiválni.

Mérjen ki 0,001 g pontossággal 0,12 g-ot 2 ml-es ampullába (4.1.15), és oldja fel 0,5 ml hexánnal (4.2.3.).

Töltse meg az SPE-kolonnát az oldattal, és vákumban eluálja 10 ml (87:13 térfogatarányú) hexán-dietil-éterrel (4.2.3.).

Az összegyűjtött frakciót a rotációs bepárlóval (4.1.9.) csökkentett nyomás mellett, szobahőmérsékleten, szárazságig kell bepárolni. A maradékanyagot 2 ml, triacilglicerol elemzéséhez szolgáló acetonban (4.2.6.) fel kell oldani.

4.4.   HPLC-elemzés

4.4.1.   Minták előkészítése kromatográfiás elemzéshez

A vizsgálati mintából készítsen 5 %-os oldatot, úgy, hogy egy 10 ml-es mérőlombikba mérje ki a minta 0,5 ± 0,001 g-ját, és az oldáskönnyítő oldószerrel (4.2.9.) 10 ml-ig töltse fel.

4.4.2.   Eljárás

Állítsa össze a kromatográfiás rendszert. A teljes rendszer kitisztításához szivattyúzza 1,5 ml/perc sebességgel az eluáló oldószert (4.2.8.). Várjon, ameddig kialakul egy stabil alapvonal.

Fecskendezzen be 10 μl mennyiségű, a 4.3. pont szerint előkészített mintát.

4.4.3.   Az eredmények kiszámítása és kifejezése

Használja a területnormálási módszert, azaz tételezze fel, hogy az ECN-42–ECN-52-es triacil-glicerinekhez tartozó csúcsok alatti területek összege 100 %.

Számítsa ki az egyes trigliceridek relatív százalékát a következő képlet segítségével:

.

Az eredményeket legalább két tizedesjegyig kell megadni.

Lásd az 1–4. megjegyzést.

4.5.   Triacil-glicerinek összetételének (mólszázalék) kiszámítása zsírsav-összetételi adatokból (területszázalék)

4.5.1.   A zsírsavösszetétel meghatározása

A zsírsavösszetételt az ISO 5508 segítségével, kapilláris kolonna felhasználásával kell meghatározni. A metil-észtereket a COI/T.20/Doc. No 24 szerint kell elkészíteni.

4.5.2.   A számításhoz szükséges zsírsavak

A glicerideket ekvivalens szénszámuk (ECN) alapján kell csoportosítani, figyelembe véve az ECN és a zsírsavak közötti alábbi ekvivalenciákat. Csak a 16 és 18 szénatomszámú zsírsavakat kellett figyelembe venni, az olívaolaj tekintetében ugyanis kizárólag ezek fontosak. A zsírsavakat 100 %-ra kell normálni.

Zsírsav	Rövidítés	Molekulatömeg (MW)	ECN
Palmitinsav	P	256,4	16
Palmitoleinsav	Po	254,4	14
Sztearinsav	S	284,5	18
Olajsav	O	282,5	16
Linolsav	L	280,4	14
Linolénsav	Ln	278,4	12

4.5.3.   A területszázalék mólra való átszámítása valamennyi zsírsav esetében (1)

4.5.4.   Zsírsavak 100 %-ra történő normálása (2)

Az eredmény azt adja meg, hogy a triacil-glicerinekben az összes (1, 2, 3-) pozícióban egyes zsírsavak milyen mólszázalékos arányban vannak jelen.

Ezután a P és S telített zsírsavak (SFA) és a Po, O, L és Ln telítetlen zsírsavak (UFA) összegét kell kiszámítani, az alábbiak szerint (3):

4.5.5.   A zsírsavösszetétel kiszámítása a triacil-glicerinek 2- és 1,3- pozícióiban

A zsírsavakat az alábbiak szerint három csoportra osztják: az egyik csoport a 2- pozícióban, két másik, azonos csoport pedig az 1- és a 3- pozícióban lévő zsírsavakra vonatkozik, ahol a telített (P és S) és telítetlen zsírsavakra (Po, O, L és Ln) különböző tényezőket alkalmaznak.

4.5.5.1.   Telített zsírsavak a 2- pozícióban [P(2) és S(2)] (4)

4.5.5.2.   Telítetlen zsírsavak a 2- pozícióban [Po(2), O(2), L(2) és Ln(2)] (5):

4.5.5.3.   1,3- pozícióban lévő zsírsavak [P(1,3), S(1,3), Po(1,3), O(1,3), L(1,3) és Ln(1,3)] (6):

4.5.6.   Triacil-glicerinek kiszámítása

4.5.6.1.   Egy zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (AAA, itt LLL, PoPoPo) (7)

4.5.6.2.   Két zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (AAB, itt PoPoL, PoLL) (8)

4.5.6.3.   Három különböző zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (ABC, itt OLLn, PLLn, PoOLn, PPoLn) (9)

4.5.6.4.   ECN-42-es triacil-glicerinek

Az ECN-42-es triacil-glicerineket a (7), (8) és (9) egyenleteknek megfelelően kell kiszámítani, és a HPLC-nél a várt elúció sorrendjében (általában csak három csúcs) megadni.

LLL

PoLL és LPoL pozíciós izomer

OLLn, valamint OLnL és LnOL pozíciós izomerek

PoPoL és PoLPo pozíciós izomer

PoOLn, valamint OPoLn and OLnPo pozíciós izomerek

PLLn, valamint LLnP és LnPL pozíciós izomerek

PoPoPo

SLnLn és LnSLn pozíciós izomer

PPoLn, valamint PLnPo és PoPLn pozíciós izomerek

Az ECN-42-es triacil-glicerineket a kilenc triacilglicerol – pozíciós izomerjeikkel együtt vett – összege révén, legalább két tizedesjegyig kell megadni.

5.   AZ EREDMÉNYEK ÉRTÉKELÉSE

Össze kell hasonlítani a kiszámított elméleti tartalmat és a HPLC-elemzéssel meghatározott tartalmat. Ha a HPLC-adatból kivont elméleti adat különbsége abszolút értékben nagyobb, mint a megfelelő olajkategóriára a szabványban meghatározott értékek, a minta magolajat tartalmaz.

Az eredményeket két tizedesjegyig kell megadni.

6.   PÉLDA (A SZÁMOK A MÓDSZERLEÍRÁSBAN SZEREPLŐ PONTOKRA UTALNAK)

— 4.5.1.   Zsírsavak mólszázalékának kiszámítása GLC-adatokból (normált területszázalék)

A GLC-módszerrel a zsírsavösszetételre az alábbi adatokat kaptuk:

Zsírsav	P	S	Po	O	L	Ln
MW	256,4	284,5	254,4	282,5	280,4	278,4
Terület %	10,0	3,0	1,0	75,0	10,0	1,0

— 4.5.3.   A területszázalék mólra való átszámítása valamennyi zsírsav esetében (lásd az (1) képletet)

mol P	=
mol S	=
mol Po	=
mol O	=
mol L	=
mol Ln	=
Összesen	=	0,35821 mol triacilglicerol

— 4.5.4.   Zsírsavak 100 %-ra történő normálása (lásd a (2) képletet)

mol % P(1,2,3)	=
mol % S(1,2,3)	=
mol % Po(1,2,3)	=
mol % O(1,2,3)	=
mol % L(1,2,3)	=
mol % Ln(1,2,3)	=
Összes mol %	=	100 %

Triacilglicerolok 1,2,3- pozíciójában lévő telített és telítetlen zsírsavak összege (lásd a (3) képletet):

— 4.5.5   A zsírsavösszetétel kiszámítása a triacil-glicerinek 2- és 1,3- pozícióiban

— 4.5.5.1.   Telített zsírsavak a 2- pozícióban [P(2) és S(2)] (lásd a (4) képletet)

— 4.5.5.2.   Telítetlen zsírsavak a 2- pozícióban [Po(1,3), O(1,3), L(1,3) és Ln(1,3)] (lásd az (5) képletet)

— 4.5.5.3   1,3-pozícióban lévő zsírsavak [P(1,3), S(1,3), Po(1,3), O(1,3), L(1,3) és Ln(1,3)] (lásd a (6) képletet)

— 4.5.6.   Triacil-glicerinek kiszámítása

Az sn-2- és sn-3- pozíciókban kiszámított zsírsavösszetételből:

Zsírsav	1,3- poz.	2- poz.
P	16,004  %	0,653  %
S	4,325  %	0,177  %
Po	1,015  %	1,262  %
O	68,526  %	85,296  %
L	9,204  %	11,457  %
Ln	0,927  %	1,153  %
Össz	100,0  %	100,0  %

az alábbi triacil-glicerinek kiszámítására kerül sor:

LLL

PoPoPo

PoLL 1 pozíciós izomerrel

SLnLn 1 pozíciós izomerrel

PoPoL 1 pozíciós izomerrel

PPoLn 2 pozíciós izomerrel

OLLn 2 pozíciós izomerrel

PLLn 2 pozíciós izomerrel

PoOLn 2 pozíciós izomerrel

— 4.5.6.1.   Egy zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (LLL, PoPoPo) (lásd a (7) képletet)

= 0,09706 mol LLL

— 4.5.6.2.   Két zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (PoLL, SLnLn, PoPoL) (lásd a (8) képletet)

0,03210 mol PoLL

0,00094 mol SLnLn

0,00354 mol PoPoL

— 4.5.6.3.   Három különböző zsírsavval rendelkező triacil-glicerinek (PoPLn, OLLn, PLLn, PoOLn) (lásd a (9) képletet)

0,00761 mol PPoLn

0,43655 mol OLLn

0,06907 mol PLLn

0,04812 mol PoOLn

ECN42=0,69512 mol triacil-glicerinek

1. megjegyzés: Az eluálási sorrend meghatározható az ekvivalens szénszámok kiszámításával, amelyet gyakran az

összefüggéssel adnak meg (ahol a CN a szénatomszám, az n pedig a kettős kötések száma), de a kettős kötések eredetének figyelembevételével sokkal pontosabban számítható. Amennyiben no, nl, illetve nln az olajsavra, linolsavra, illetve linolénsavra jellemző kettős kötések számát jelenti, az ekvivalens szénszám a következő képlettel számítható ki:

ahol a do, dl és dln együtthatókat a referenciatrigliceridek alapján lehet kiszámolni. Az e módszerben meghatározott feltételek mellett a kapott összefüggés megközelítőleg a következő:

2. megjegyzés: Több referenciatriglicerid segítségével ki lehet számítani a felbontást a triolein tekintetében is:

triolein

a redukált retenciós idő felhasználásával:

A log α és az f (a kettős kötések száma) függvénye lehetővé teszi a retenciós értékek kiszámítását a referenciatrigliceridekben található zsírsavak minden trigliceridjére (lásd az 1. ábrát).

3. megjegyzés: Az oszlop hatásfoka tegye lehetővé a trilinolein csúcsának a szomszédos retenciós idejű trigliceridektől történő egyértelmű elkülönülését. Az elúciót az ECN-52-es csúcsig kell végezni.

4. megjegyzés: Ezen meghatározás szempontjából valamennyi fontos csúcs területének pontos mérése akkor biztosított, ha az ECN-50-hez tartozó második csúcs az adatrögzítő készülék teljes skálájának 50 %-ánál van.

1.   ábra

A log α és f (kettős kötések száma) grafikonja

Kettős kötések száma

La: laurinsav My: mirisztinsav; P: palmitinsav; S: sztearinsav; O: olajsav; L: linolsav; Ln: linolénsav

2.   ábra

Alacsony linolsavtartalmú olívaolaj

a)

Oldószer: aceton/acetonitril.

a) profil: A kromatográfiás csúcsok fő összetevői: ECN-42: (1) LLL + PoLL; (2) OLLn + PoOLn; (3) PLLn; ECN-44: (4) OLL + PoOL; (5) OOLn + PLL; (6) POLn + PPoPo; (7) OOL + PoOO; ECN-46: (8) OOL + LnPP; (9) PoOO; (10) SLL + PLO; (11) PoOP + SPoL + SOLn + SPoPo; (12) PLP; ECN-48: (13) OOO + PoPP; (14 + 15) SOL + POO; (16) POP; ECN-50: (17) SOO; (18) POS + SLS.

b)

Oldószer: propionitril.

b) profil: A kromatográfiás csúcsok fő összetevői: ECN-42: (1) LLL; (2) OLLn + PoLL; (3) PLLn; ECN-44: (4) OLL; (5) OOLn + PoOL; (6) PLL + PoPoO; (7) POLn + PPoPo + PPoL; ECN-46: (8) OOL + LnPP; (9) PoOO; (10) SLL + PLO; (11) PoOP + SPoL + SOLn + SPoPo; (12) PLP; ECN-48: (13) OOO + PoPP; (14) SOL; (15) POO; (16) POP; ECN-50: (17) SOO; (18) POS + SLS

3.   ábra

Magas linolsavtartalmú olívaolaj

a)

Oldószer: aceton/acetonitril (50:50).

a) profil: A kromatográfiás csúcsok fő összetevői: ECN-42: (1’) LLL + PoLL; (2’) OLLn + PoOLn; (3’) PLLn; ECN-44: (4’) OLL + PoOL; (5’) OOLn + PLL; (6’) POLn + PPoPo; ECN46: (7’) OOL + PoOO; (8’) PLO + SLL + PoOP; (9’) PLP + PoPP; ECN48: (10’) OOO; (11’) POO + SLL + PPoO; (12’) POP + PLS; ECN-50: (13’) SOO; (14’) POS + SLS

b)

Oldószer: propionitril.

b) profil: A kromatográfiás csúcsok fő összetevői: ECN-42: (1) LLL; (2 + 2’) OLLn + PoLL; (3) PLLn; ECN-44: (4) OLL; (5) OOLn + PoOL; (6) PLL + PoPoO; (7) POLn + PPoPo + PPoL; ECN-46: (8) OOL + LnPP; (9) PoOO; (10) SLL + PLO; (11) PoOP + SPoL + SOLn + SPoPo; ECN-48: (12) PLP; (13) OOO + PoPP; (14) SOL; (15) POO; (16) POP; ECN-50: (17) SOO; (18) POS + SLS; ECN-52: (19) AOO.”

„XXI. MELLÉKLET

A 8. cikk (2) bekezdésében említett, olívaolajokon végzett megfelelőségi ellenőrzések eredményei

Címkézés

Kémiai paraméterek

Érzékszervekkel meghatározható jellemzők (4)

Végkövetkeztetések

Minta

Kategória

Származási ország

Az ellenőrzés helyszíne (1)

Hivatalos név

Eredetmegjelölés

Tárolási feltételek

Hibás információ

Olvashatóság

M/NM (3)

Határértékeken kívül eső paraméterek I/N

Ha igen, melyek ezek? (2)

M/NM (3)

Hibamedián

Gyümölcsösségi medián

M/NM (3)

Szükséges intézkedés

Szankció