PRILOG
POSEBNE METODE ANALIZE UNIJE
ALIL IZOTIOCIJANAT
1. Načelo metode
Ako je alil izotiocijanat prisutan u vinu, sakuplja ga se destilacijom i identificira plinskom kromatografijom.
2. Reagensi
2.1. Apsolutni etanol.
2.2. Standardna otopina: otopina alil izotiocijanata u apsolutnom alkoholu, koja sadržava 15 mg alil izotiocijanata po litri.
2.3. Mješavina za zamrzavanje koju čine etanol i suhi led (temperatura – 60 °C).
3. Aparatura
3.1. Aparatura za destilaciju, kako je prikazana na slici. Aparaturom neprekidno struji dušik.
3.2. Grijaći plašt s termostatom.
3.3. Mjerač protoka.
3.4. Plinski kromatograf s detektorom plamenog spektrofotometra, opremljen selektivnim filterom za spojeve sumpora (valna duljina = 394 nm) ili bilo kojim drugim prikladnim detektorom.
3.5. Kromatografska kolona od nehrđajućeg čelika unutarnjeg promjera 3 mm i duljine 3 m, ispunjena Carbowaxom 20M pri 10 % na Chromosorbu WHP, 80 do 100 mesh.
3.6. Mikroštrcaljka, 10 μl.
4. Postupak
Staviti dvije litre vina u destilacijsku tikvicu, dodati nekoliko mililitara etanola (točka 2.1.) u dvije epruvete za prikupljanje kako bi porozni dijelovi štapićâ za raspršivanje plina bili potpuno uronjeni. Ohladiti izvana dvije epruvete s pomoću mješavine za zamrzavanje. Spojiti tikvicu s epruvetama za prikupljanje i započeti s ispiranjem aparature dušikom uz protok od tri litre na sat. Zagrijati vino na 80 °C s pomoću grijaćeg plašta, destilirati i prikupiti 45 do 50 ml destilata.
Stabilizirati kromatograf. Preporučuje se uspostavljanje sljedećih uvjeta:
|
— |
temperatura injektora: 200 °C, |
|
— |
temperatura kolone: 130 °C, |
|
— |
brzina protoka plina nositelja helija: 20 ml u minuti. |
Mikroštrcaljkom ubrizgati onu količinu standardne otopine koja je dovoljna da se na plinskom kromatografu može jasno identificirati pik koji odgovara alil izotiocijanatu.
Na sličan način ubrizgati alikvot destilata u kromatograf. Provjeriti odgovara li vrijeme zadržavanja dobivenog pika piku alil izotiocijanata.
U prethodno opisanim uvjetima, spojevi koji su prirodno prisutni u vinu ne stvaraju interferirajuće pikove na kromatogramu otopine uzorka.
Aparatura za destilaciju s protokom dušika
