ANEXO
El anexo del Reglamento (CE) n.o 2870/2000 se modifica como sigue:
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En el índice, se añade el punto siguiente:
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En el punto 5 (Reactivos y materiales) de la parte III.2 (Determinación por cromatografía de gases de los congéneres volátiles de las bebidas espirituosas) del capítulo III, se insertan los puntos siguientes:
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Se añade el capítulo XI siguiente: «XI. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE 14C EN EL ETANOL 1. Introducción La determinación del contenido de 14C en el etanol permite diferenciar el alcohol de materias primas fósiles (el llamado alcohol de síntesis) y el alcohol de materias primas recientes (el llamado alcohol de fermentación). 2. Definición Se entenderá por contenido de 14C en el etanol el contenido de 14C determinado con arreglo al procedimiento aquí descrito o el método descrito en el método C de la norma EN 16640. El contenido en 14C natural de la atmósfera (valor de referencia), que es captado por la asimilación de las plantas vivas, no es un valor constante. Por tanto, el valor de referencia se determina a partir de etanol procedente de materias primas del último período de crecimiento. Este valor de referencia anual se determina con arreglo a la norma EN 16640. No obstante, puede aceptarse otro valor de referencia cuando esté certificado por un organismo acreditado. 3. Principio En las muestras alcohólicas con un mínimo del 85 % en peso de etanol, el contenido de 14C se determinará directamente mediante el recuento de centelleo de líquidos. 4. Reactivos 4.1. Solución de centelleo. 5,0 g de 2,5-difeniloxazol (PPO). 0,5 g de p-bis-[4-metil-5-feniloxazolil(2)]-benzol (dimetil-POPOP) en 1 litro de tolueno de calidad analítica. También podrán emplearse soluciones de centelleo de tolueno de esta composición comercializados y ya listos para su empleo. 4.2. Patrón de 14C 14C n-Hexadecano con una actividad de aproximadamente 1 × 106 dpm/g (alrededor de 1,67 × 106 cBq/g) y una exactitud relativa garantizada de la actividad determinada de ± 2 %. 4.3. Etanol libre de 14C. Alcohol de síntesis de materias primas de origen fósil con un mínimo de 85 % en peso de etanol para determinar el efecto nulo.
5. Instrumental
6. Procedimiento 6.1. Ajuste de los aparatos. Los aparatos se ajustarán con arreglo a las instrucciones del fabricante. Se considera que las condiciones de medida son óptimas cuando el valor E2/B (denominada cifra de mérito) presenta un máximo. E = efficiency (rendimiento). B = background (ruido de fondo). Solo se optimizan dos canales de medición. El tercer canal de medición se mantiene totalmente abierto para fines de control. 6.2. Selección de los viales de contaje. Se llena un número de viales de contaje superior al número que será necesario posteriormente; en cada uno se introducen 10 ml de etanol de síntesis libre de 14C y 10 ml de solución de centello de tolueno, y se mide cada uno durante, al menos, 4 ciclos × 100 minutos. Se rechazan los viales cuyo ruido de fondo se separe más de ± 1 % rel. del valor medio. Solo pueden utilizarse viales de contaje nuevos procedentes de un solo lote. 6.3. Determinación de la relación canal-patrón externo (ESKV). Al ajustar el canal con arreglo a lo recogido en el punto 6.1, se determina simultáneamente la relación canal-patrón externo (ESKV) al realizar la evaluación del coeficiente de eficacia numérica con ayuda del programa de cálculo correspondiente. Como patrón externo se utiliza el cesio137, ya incorporado por el fabricante. 6.4. Preparación de la muestra. Para la medición se emplean muestras con un contenido mínimo de etanol del 85 % en masa que no tengan impurezas y tengan una absorbencia de longitud de ondas inferior a 450 nm. El bajo contenido residual de aldehídos y esteres no tiene ningún efecto perturbador. El contenido alcohólico de la muestra se determina previamente con una aproximación del 0,1 %. 7. Medición de las muestras con patrón externo
7.2. Realización de la medición Se introducen con ayuda de una pipeta 10 ml de cada una de las muestras preparadas con arreglo al punto 6.4 en el vial de contaje seleccionado, cuyo ruido de fondo se habrá controlado, y se añaden 10 ml de solución de centelleo de tolueno mediante un dosificador automático. Las muestras se homogeneizan en los viales de contaje mediante un movimiento de rotación adecuado; el líquido no debe mojar la pieza de polietileno insertada en el cierre de rosca. Para la evaluación del ruido de fondo, se prepara de la misma manera un vial de contaje que contenga etanol fósil libre de 14C. Para comprobar el valor 14C del año, se prepara un duplicado de etanol reciente del último período de crecimiento mezclando un vial de contaje con patrón interno tal y como se describe en el punto 8. Las muestras de control y las del ruido de fondo se colocan al principio de la serie de mediciones, que no constará de más de 10 muestras de análisis. El tiempo de medición total por muestra deberá ser de un mínimo de 2 × 100 minutos, y la medida de las muestras individuales deberá realizarse en etapas parciales de 100 minutos para poder detectar posibles derivas o defectos. (Así, un ciclo comprende por muestra cada vez un intervalo de medición de 100 minutos). Las muestras para el ruido de fondo y las muestras de control deben renovarse cada cuatro semanas. Para las muestras de baja extinción (valor ESKV de aproximadamente 1,8), el rendimiento solo se ve ligeramente influido por la modificación de este valor. Si esta modificación se sitúa por debajo de ± 5 % rel., cabe esperar el mismo rendimiento. Para las muestras con una absorbencia más fuerte, como las presentadas por los alcoholes desnaturalizados, el rendimiento se puede determinar mediante la curva de corrección de absorbencia. Si no se dispone de ningún programa informático adecuado, se efectuará la medición con el patrón interno, lo que permitirá determinar el rendimiento de forma unívoca. 8. Medición de las muestras con hexadecano 14C como patrón interno 8.1. Procedimiento La muestra de control y la muestra para ruido de fondo (etanol reciente y etanol fósil), así como la sustancia desconocida se miden cada una por duplicado. Una de las muestras del par duplicado se introduce en un vial no seleccionado y se añade una cantidad medida con precisión (30 μl) de hexadecano 14C en calidad de patrón interno (actividad adicional de aproximadamente 26 269 dpm/gC, unos 43 782 cBq/gC). Con respecto a la preparación y al tiempo de medición de las demás muestras, véase el punto 7.2, teniendo en cuenta que el tiempo de medición de las muestras con el patrón interno puede reducirse a unos cinco minutos mediante un preajuste de 105 impulsos. Por cada serie de medición, se utilizará un duplicado de la muestra de ruido de fondo y otro de la muestra de control que se situarán al comienzo de la serie de mediciones. 8.2. Manipulación del patrón interno y de los viales de contaje Para las mediciones efectuadas con patrón interno, a fin de evitar que se produzca alguna contaminación, se colocarán y manipularán en un lugar alejado de donde se efectúen la preparación y medida de las muestras que vayan a analizarse. Después de la medición, se pueden reutilizar los viales utilizados para controlar el ruido de fondo. Las tapas de rosca y los viales que contengan el patrón interno deberán ser eliminados. 9. Expresión de los resultados 9.1. La unidad de actividad de una sustancia radiactiva es el bequerelio, 1 Bq = 1 desintegración nuclear/segundo. La actividad radiactiva específica se expresa en bequerelios por gramo de carbono = Bq/gC. Con objeto de obtener resultados más prácticos, estos se expresarán en centibequerelios = cBq/gC. También podrán utilizarse las designaciones y fórmulas de cálculo usadas en la bibliografía que se basan en datos en dpm. Para obtener el valor correspondiente en centibequerelios, basta con multiplicar el resultado en dpm por 100/60. 9.2. Expresión de los resultados con patrón externo.
9.3. Expresión de los resultados con patrón interno.
9.4. Abreviaturas
10. Fiabilidad del método 10.1. Repetibilidad (r) r = 0,632 cBq/g C; S(r) = ± 0,223 cBq/g C 10.2. Reproducibilidad (R) R = 0,821 cBq/g C; S(R) = ± 0,290 cBq/g C.». |
