Απόφαση της Επιτροπής

της 2ας Ιουνίου 1992

σχετικά με τον έλεγχο των πουλερικών για ψευδοπανώλη πριν από τη μεταφορά τους, σε εφαρμογή του άρθρου 12 της οδηγίας 90/539/ΕΟΚ του Συμβουλίου

(92/340/ΕΟΚ)

Η ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ,

Έχοντας υπόψη:

τη συνθήκη για την ίδρυση της Ευρωπαϊκής Οικονομικής Κοινότητας,

την οδηγία 90/539/ΕΟΚ του Συμβουλίου της 15ης Οκτωβρίου 1990 σχετικά με τους όρους υγειονομικού ελέγχου που διέπουν τις ενδοκοινοτικές συναλλαγές και τις εισαγωγές πουλερικών και αυγών για επώαση από τρίτες χώρες [1], όπως τροποποιήθηκε τελευταία από την οδηγία 91/496/ΕΟΚ [2], και ιδίως το άρθρο 12 παράγραφος 1,

Εκτιμώντας:

ότι στη μεθοδολογία εκτέλεσης ορρολογικών δοκιμασιών για ψευδοπανώλη των ορνίθων και για απομόνωση του ιού της νόσου πρέπει να περιληφθούν και οι λεπτομέρειες της δειγματοληπτικής διαδικασίας η διαδικασία διεξαγωγής των δοκιμασιών και η ερμηνεία των αποτελεσμάτων τους ·

ότι τα μέτρα που προβλέπονται στην παρούσα απόφαση είναι σύμφωνα με τη γνώμη της Μόνιμης Κτηνιατρικής Επιτροπής,

ΕΞΕΔΩΣΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΑΠΟΦΑΣΗ:

Άρθρο 1

Η τυπική ορρολογική δοκιμασία ανίχνευσης αντισωμάτων της ψευδοπανώλης για την οποία ο λόγος στο άρθρο 12 παράγραφος 1 στοιχείο γ) τρίτη περίπτωση της οδηγίας 90/539/ΕΟΚ, πρέπει να πληροί τους όρους του παραρτήματος Ι.

Άρθρο 2

Η δοκιμασία απομόνωσης του ιού της ψευδοπανώλης για την οποία ο λόγος στο άρθρο 12 παράγραφος 1 στοιχείο δ) δεύτερη περίπτωση της οδηγίας 90/539/ΕΟΚ, πρέπει να πληροί τους όρους του παραρτήματος II.

Άρθρο 3

Η παρούσα απόφαση απευθύνεται προς τα κράτη μέλη.

Βρυξέλλες, 2 Ιουνίου 1992.

Για την Επιτροπή

Ray Mac Sharry

Μέλος της Επιτροπής

[1] ΕΕ αριθ. L 303 της 31. 10. 1990, σ. 6.

[2] ΕΕ αριθ. L 268 της 24. 9. 1991, σ. 56.

--------------------------------------------------

ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Ι

Ορρολογική δοκιμασία ανίχνευσης αντισωμάτων της ψευδοπανώλης στα πουλερικά

1. Δεγματοληψία αίματος

Τα πουλερικά για τα οποία ο λόγος σ' αυτό το παράρτημα, πρέπει να προέρχονται από αγέλες από τις οποίες έχουν ληφθεί δείγματα αίματος 60 τουλάχιστον πτηνών τυχαίως επιλεγέντων και υποβληθέντων στη δοκιμασία αναστολής αιμοσυγκόλλησης (HI) όπως περιγράφεται στη συνέχεια στο σημείο 2.

2. Διαδικασία

α) Τοποθετούνται 0,025 ml PBS σε όλα τα βοθρία πλαστικού τρυβλίου μικροτηλοδότησης (βοθρία με πυθμένα σε σχήμα V) ·

β) τοποθετούνται 0,025 ml ορρού στο πρώτο βοθρίο του τρυβλίου

γ) χρησιμοποιείται αραιωτικό μικροτηλοδότησης για διπλές αραιώσεις του ορρού κατά πλάτος του τρυβλίου

δ) προστίθενται 0,025 ml αραιωμένου αλλαντοϊκού υγρού που περιέχει τέσσερις ή οκτώ HAU

ε) γίνεται ανάμειξη με ελαφρό κτύπημα και τοποθετείται το τρυβλίο σε θερμοκρασία 4 o C επι 60 τουλάχιστον λεπτά ή σε θερμοκρασία δωματίου επί 30 τουλάχιστον λεπτά ·

στ) προστίθεται 0,025 ml ερυθροκυττάρων 1 % σε όλα τα βοθρία ·

ζ) γίνεται ανάμειξη με πολύ κτύπημα και το όλο τοποθετείται σε θερμοκρασία 4 o C ·

η) τα τρυβία "αναγιγνώσκονται" 30 έως 40 λεπτά αργότερα όταν τα ερυθροκύτταρα ελέγχου έχουν κατασταλάξει. Προς τούτο, φέρεται η πλάκα σε κεκλιμένη θέση και παρατηρείται εάν υπάρχει ή όχι δακρυόσχημη ροή με τον ίδιο ρυθμό όπως στα βοθρία ελέγχου που περιέχουν ερυθροκύτταρα (0,025 ml) και PBS (0,05 ml)·

θ) τίτλος HI είναι η υψηλότερη αραίωση αντιορρού που προκαλεί πλήρη αναστολή τεσσάρων ή οκτώ μονάδων ιού [κάθε δοκιμασία πρέπει να περιλαμβάνει μία τιτλοδότηση αιμοσυγκολλητίνης (ΗΑ) για την επιβεβαίωση της παρουσίας των απαιτούμενων μονάδων HA (HAU)] ·

ι) η εγκυρότητα των αποτελεσμάτων εξαρτάται από τη λήψη τίτλου κατώτερου από 23 για τέσσερις HAU ή 22 για οκτώ HAU με τον αρνητικό ορρό μάρτυρα και τίτλου που να απέχει λιγότερο από μία αραίωση από το γνωστό τίτλο του θετικού ορρού μάρτυρος.

3. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Το χρησιμοποιούμενο αντιγόνο επηρεάζει τη στάθμη στην οποία θεωρείται θετικός ένας ορρός:

- για τέσσερις HAU, θετικός ορρός θεωρείται εκείνος που παρουσιάζει τίτλο 24 ή μεγαλύτερο,

- για οκτώ HAU, θετικός ορρός θεωρείται εκείνος που παρουσιάζει τίτλο 23 ή μεγαλύτερο.

--------------------------------------------------

ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ ΙI

Απομόνωση του ιού της ψευδοπανώλης από πουλερικά σφαγής

Τα πουλερικά για τα οποία γίνεται λόγος σ' αυτό το παράρτημα, πρέπει να προέρχονται από αγέλες για τις οποίες έχει γίνει η δοκιμασία απομόνωσης του ιού της ψευδοπανώλης και έχει δώσει αρνητικά αποτελέσματα. Η διαδικασία που ακολουθείται έχει ως εξής:

1. Δειγματοληψία

Από κάθε αγέλη λαμβάνονται 60 τουλάχιστον δείγματα πρωκτικών επιχρισμάτων ή περιττωμάτων.

2. Επεξεργασία των δειγμάτων

Συσσωρεύονται όχι περισσότερα από πέντε δείγματα. Τα επιχρίσματα τοποθετούνται εντός αντιβιοτικού μέσου επαρκούς για να γίνει πλήρης απορρόφηση. Τα δείγματα περιττωμάτων ομογενοποιούνται (μέσα σε κλειστό αναμεικτήρα ή μέσα σε γουδί με αποστειρωμένη άμμο) εντός αντιβιοτικού μέσου μέχρις ότου η περιεκτικότητα σε αιωρήματα γίνει 10 έως 20 % κατά βάρος. Τα αιωρήματα αφήνονται επί δύο ώρες σε θερμοκρασία περιβάλλοντος (ή επί περισσότερο χρόνο στους 4 o C) και εν συνεχεία διαυγάζονται με φυγοκέντρηση (π.χ. 800 έως 1000 στροφές επί δέκα λεπτά).

Για τα δείγματα περιττωμάτων απαιτούνται υψηλές συγκεντρώσεις αντιβιοτικών το τυπικό μείγμα είναι: 10000 μονάδες/ml πενικιλίνης, 10 mg/ml στρεπτομυκίνης, 0,25 mg/ml gentamycin και 5 μονάδες/ml mycostatin εντός ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών αλάτων (PBS). Για τον έλεγχο μικροοργανισμών chlamydia, μπορούν να προστεθούν 50/ml οξυτετρακυκλίνης κατά την παρασκευή του αντιβιοτικού μέσου, πρέπει οπωσδήποτε να ελεγχθεί το ρΗ μετά στην περιοχή τιμών pΗ από 7,0 έως 7,4.

3. Απομόνωση του ιού σε αβγά πουλερικών που ενέχουν έμβρυο

Το διαυγασθέν επιπολάζον υγρό πρέπει να ενοφθαλμίζεται σε ποσότητες 0,1 έως 0,2 ml στον αλλαντοειδή θύλακα τεσσάρων τουλάχιστον αβγών τα οποία ενέχουν έμβρυο και τα οποία έχουν επωασθεί επί οκτώ έως δέκα ημέρες. Στην ιδανική περίπτωση, τα αβγά αυτά πρέπει να λαμβάνονται από αγέλη απαλλαγμένη παθογόνων μικροοργανισμών· όταν όμως αυτό είναι αδύνατον, αποδεκτό είναι να χρησιμοποιούνται αβγά που λαμβάνονται από αγέλη η οποία αποδειγμένα είναι ελεύθερη αντισωμάτων του ιού της ψευδοπανώλους. Τα ενοφθαλ-μισμένα αβγά διατηρούνται σε θερμοκρασία 37 o C και ωοσκοπούνται καθημερινώς. Αβγά με νεκρά ή θνησιγενή έμβρυα και όλα τα αβγά που παραμένουν έξι ημέρες μετά τον ενοφθαλμισμό πρέπει να ψύχονται στους 4 o C και τα αλλαντοϊκού-μνιοτικου υγρά να ελέγχονται για αιμοσυγκολλητική δράση. Αν δεν εντοπισθεί αιμοσυ-γκόλληση, η παραπάνω διαδικασία επαναλαμβάνεται με χρήση μη αραιωμένου αλλαντοϊκού-αμνιοτικού υγρού για τον ενοφθαλμισμό.

Αν εντοπισθεί αιμοσυγκόλληση, η παρουσία βακτηριδίων πρέπει να αποκλείεται με καλλιέργεια. Αν υπάρχουν βακτηρίδια, τα υγρά μπορούν να διαβιβάζονται μέσω μεμβρανώδους φίλτρου 450 nm, περαιτέρω αντιβιοτικά μπορούν να προστίθενται και να ενοφθαλμίζονται σε αβγά που ενέχουν έμβρυο, σύμφωνα με τα προηγούμενα.

--------------------------------------------------