31984L0319

Οδηγία 84/319/ΕΟΚ της Επιτροπής της 7ης Ιουνίου 1984 για την τροποποίηση των παραρτημάτων της οδηγίας 77/96/ΕΟΚ του Συμβουλίου περί της αναζήτησης τριχινών κατά τις εισαγωγές από τρίτες χώρες νωπών κρεάτων που προέρχονται από χοιροειδή κατοικίδια

Επίσημη Εφημερίδα αριθ. L 167 της 27/06/1984 σ. 0034 - 0043
Φινλανδική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 3 τόμος 17 σ. 0185
Ισπανική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 03 τόμος 31 σ. 0083
Σουηδική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 3 τόμος 17 σ. 0185
Πορτογαλική ειδική έκδοση : Κεφάλαιο 03 τόμος 31 σ. 0083


*****

ΟΔΗΓΙΑ ΤΗΣ ΕΠΙΤΡΟΠΗΣ

της 7ης Ιουνίου 1984

για την τροποποίηση των παραρτημάτων της οδηγίας 77/96/ΕΟΚ του Συμβουλίου περί αναζητήσεως τριχινών κατά τις εισαγωγές από τρίτες χώρες νωπών κρεάτων που προέρχονται από χοιροειδή κατοικίδια

(84/319/ΕΟΚ)

Η ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ,

Έχοντας υπόψη:

τη συνθήκη για την ίδρυση της Ευρωπαϊκής Οικονομικής Κοινότητας,

την οδηγία 77/96/ΕΟΚ του Συμβουλίου της 21ης Δεκεμβρίου 1976 περί αναζητήσεως τριχινών κατά τις εισαγωγές από τρίτες χώρες νωπών κρεάτων που προέρχονται από χοιροειδή κατοικίδια (1), όπως τροποποιήθηκε τελευταία από την οδηγία 83/91/ΕΟΚ (2), και ιδίως το άρ- θρο 8,

Εκτιμώντας:

ότι πρόσφατες μελέτες επέτρεψαν την επεξεργασία ορισμένων μεθόδων για την αναζήτηση τριχινών στα χοίρεια κρέατα· ότι η αξιοπιστία των μεθόδων από πλευράς προστασίας της υγείας είναι ανάλογη με την αξιοπιστία των υφισταμένων μεθόδων· ότι, κατά συνέπεια, πρέπει να γίνουν οι κατάλληλες προσθήκες στο παράρτημα Ι της οδηγίας 77/96/ΕΟΚ·

ότι πρέπει να παρασχεθεί στις τρίτες χώρες και στα κράτη μέλη η δυνατότητα επιλογής μεταξύ των προβλεπόμενων μεθόδων αναζήτησης, προκειμένου να διευκολυνθεί το έργο της αναζήτησης τριχινών·

ότι πρέπει να γίνουν ορισμένες τεχνικές προσαρμογές στις μεθόδους αναζήτησης τριχινών που εφαρμόζονται σήμερα, καθώς και στους όρους στους οποίους πρέπει να ανταποκρίνονται τα εργαστήρια στα οποία διενεργείται η αναζήτηση τριχινών·

ότι τα μέτρα που προβλέπονται στην παρούσα οδηγία είναι σύμφωνα με τη γμώνη της Μόνιμης Κτηνιατρικής Επιτροπής,

ΕΞΕΔΩΣΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΑΠΟΦΑΣΗ:

Άρθρο 1

Η οδηγία 77/96/ΕΟΚ τροποποιείται σύμφωνα με το παράρτημα.

Άρθρο 2

Τα κράτη μέλη θέτουν σε ισχύ τις αναγκαίες νομοθετικές, κανονιστικές και διοικητικές διατάξεις για να συμμορφωθούν με την παρούσα οδηγία το αργότερο την 1η Ιανουαρίου 1985. Ενημερώνουν αμέσως την Επιτροπή σχετικά.

Άρθρο 3

Η παρούσα οδηγία απευθύνεται στα κράτη μέλη.

Βρυξέλλες, 7 Ιουνίου 1984.

Για την Επιτροπή

Poul DALSAGER

Μέλος της Επιτροπής

(1) ΕΕ αριθ L 26 της 31. 1. 1977, σ. 67.

(2) ΕΕ αριθ. L 59 της 5. 3. 1983, σ. 34.

ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ

Α. Το παράρτημα Ι τροποποιείται ως εξής:

1. Στο σημείο ΙΙ α):

- η δέκατη περίπτωση αντικαθίσταται από τα εξής:

«- στερεοσκοπικό μικροσκόπιο (μεγέθυνση 15 έως 40 φορές) με κατάλληλη πηγή φωτισμού,»

- η τελευταία περίπτωση αντικαθίσταται από τα εξής:

«- υγρό πέψεως με την εξής σύνθεση:

10 g πεψίνης (80 u/g FIP: Federation Internationale de Pharmacie), 5 ml HCl (τουλάχιστον 37 %) το οποίο συμπληρώνεται με τρεχούμενο ύδωρ μέχρις ενός λίτρου.»

2. Το σημείο ΙΙΙ αντικαθίσταται από τα εξής:

«ΙΙΙ. ΜΕΘΟΔΟΣ ΤΕΧΝΗΤΗΣ ΠΕΨΕΩΣ ΣΥΛΛΟΓΙΚΩΝ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ

α) Συσκευές και αντιδραστήρια

- μαχαίρι και λαβίδες για τη λήψη των δειγμάτων,

- μηχανή κοπής κρέατος της οποίας οι οπές θα πρέπει να έχουν διάμετρο μεταξύ 2 και 3 mm,

- φιάλη Erlenmeywer των 3 λίτρων, εφοδιασμένη με πώμα από ελαστικό ή από βάτα (νήματα βάμβακος),

- κωνικό χωνίο διαχωρισμού περιεκτικότητας 2 000 ml,

- κοινό στήριγμα με πόδι σχήματος Α, μήκους 28 cm, εφοδιασμένο με στέλεχος 80 cm,

- δακτύλιος διαμέτρου 10 έως 11 cm, που δύναται να τοποθετείται επάνω στο στήριγμα,

- λαβίδα που φέρει πλατεία σιαγόνα (23 x 40 mm) η οποία δύναται να συνδέεται με το στήριγμα με τη βοήθεια διπλού καλύμματος (Manchon),

- κόσκινο (λεπτότης ανοιγμάτων δικτυωτού: 177 μικρά), εξωτερικής διαμέτρου 11 cm , εφοδιασμένο με δικτυωτό από ορείχαλκο ή ανοξείδωτο χάλυβα,

- χωνίο εσωτερικής διαμέτρου τουλάχιστον 12 cm,

- υάλινοι ογκομετρικοί κύλινδροι των 100 ml,

- στερεοσκοπικό μικροσκόπιο (μεγέθυνση 15 έως 40 φορές) με κατάλληλη πηγή φωτισμού ή τριχινοσκόπιο εφοδιασμένο με οριζόντια τράπεζα για τον συμπιεστή, με κατάλληλη πηγή φωτισμού,

- σε περίπτωση χρησιμοποιήσεως του τριχινοσκοπίου: χρησιμοποιείται λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών, με την ακόλουθη περιγραφή:

η λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών αποτελείται από ακρυλικές πλάκες πάχους 3 mm, ως εξής:

i) ο πυθμένας της λεκάνης πρέπει να έχει διαστάσεις 180 x 40 mm και να είναι χαραγμένος σε τετράγωνα,

ii) οι πλευρές πρέπει να έχουν διαστάσεις 230 x 20 mm,

iii) το άκρο πρέπει να έχει διαστάσεις 40 x 20 mm. Ο πυθμένας και οι μετωπικές πλάκες πρέπει να παρεντίθενται μεταξύ των πλευρών, σχηματίζοντας έτσι μία λεκάνη με δύο μικρές χειρολαβές και στις δύο μετωπικές πλάκες. Η άνω πλευρά του πυθμένα πρέπει να ανυψωθεί κατά 7 έως 9 mm από τη βάση του πλαισίου που σχηματίζεται από τις πλευρές και τις μετωπικές πλάκες. Τα μέρη πρέπει να στερεώνονται με κατάλληλη κόλλα,

- αριθμός τρυβλίων Petri διαμέτρου 9 cm (όταν χρησιμοποιείται στερεοσκοπικό μικροσκόπιο), στην κάτω πλευρά των οποίων έχουν χαραχθεί με αιχμηρό όργανο τετράγωνες ζώνες εξετάσεως διαστάσεων 10 x 10 mm,

- αριμός δοχείων απορριμμάτων των 10 λίτρων για να χρησιμοποιούνται κατά την απολύμανση, όπως ο καθαρισμός με φορμόλη των συσκευών, και για το υγρό πέψεως που εναπομένει σε περίπτωση θετικού αποτελέσματος,

- συμπυκνωμένο (37 %) υδροχλωρικό οξύ,

- ισχύς πεψίνης: 1 : 10 000 NF (US National Formulary)

η οποία αντιστοιχεί με 1 : 12 500 BP (British Pharmacopoea)

η οποία αντιστοιχεί με 2 000 FIP (Federation Internationale de Pharmacie),

- αριθμός δίσκων που μπορούν να περιλαμβάνουν 50 δείγματα των 2 g,

- ζυγός ακριβείας 0,1 g. β) Λήψη δειγμάτων

1. Όταν τα σφάγια είναι ολόκληρα, λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από έναν από τους στύλους του διαφράγματος στη ζώνη που ευρίσκεται μεταξύ μυώδους και τενοντώδους μοίρας· εάν δεν υπάρχουν στύλοι του διαφράγματος, λαμβάνεται η αυτή ποσότητα από το τμήμα του διαφράγματος που ευρίσκεται κοντά στα πλευρά ή το στέρνο ή από τον μυ της γλώσσας ή τους μασητήρες μυς ή ακόμη από τους κοιλιακούς μυς.

2. Για τα τεμάχια του κρέατος λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από τους σκελετικούς μυς, που περιέχουν ελάχιστο λίπος, και όσον το δυνατόν κοντά στα οστά ή τους τένοντες.

γ) Μέθοδος

1. i) Πλήρη μείγματα (100 δείγματα τη φορά)

Δείγμα κατά προσέγγιση 1 g λαμβάνεται από κάθε ένα από τα 100 ατομικά δείγματα που προέρχονται από τους χοίρους. Το ομαδικό δείγμα περνά μία φορά από τη μηχανή κοπής κρέατος. Το κρέας με μορφή μιττωτού, τοποθετείται μέσα στη φιάλη του Erlenmeyer των 3 λίτρων ταυτόχρονα με 7 g πεψίνης και καλύπτεται με 2 λίτρα ύδατος (υδραγωγείου) που έχει θερμανθεί σε θερμοκρασία κατά προσέγγιση 40 έως 41 °C και 25 ml συμπεπυκνωμένου χλωρικού οξέος. Αναταράσσεται το μείγμα για να διαλυθεί η πεψίνη.

Το pH του διαλύματος είναι τότε περίπου 1,5 έως 2.

- Για την πέψη, η φιάλη Erlenmeyer τοποθετείται σε κλίβανο σε 40 έως 41 °C για τέσσερις ώρες περίπου. Κατά τη διάρκεια του χρονικού αυτού διαστήματος αναταράσσεται τακτικά, τουλάχιστον δύο φορές την ώρα.

- Η διάλυση η οποία έχει υποστεί την πέψη διηθείται με τη βοήθεια του κοσκίνου μέσω του κωνικού χωνίου διαχωρισμού των 2 λίτρων και αφήνεται σε ηρεμία επί του στηρίγματος για μία ώρα τουλάχιστον.

- Συνολικός όγκος κατά προσέγγιση 45 ml μεταγγίζεται σε ογκομετρικό κύλινδρο και κατανέμεται σε τρία τρυβλία Petri, που ο πυθμένας τους διαιρείται σε τετράγωνα, με 15 ml ανά τρυβλίο.

- Κάθε τρυβλίο Petri εξετάζεται λεπτομερειακά στο στερεοσκοπικό μικροσκόπιο για τον εντοπισμό προνυμφών.

- Σε περίπτωση χρησιμοποιήσεως λεκανών για την καταμέτρηση των προνυμφών, τα 45 ml κατανέμονται σε δύο λεκάνες και εξετάζονται στο τριχινοσκόπιο.

Οι προνύμφες εμφανίζονται στο ίζημα ως οργανισμοί που δύναται να εξακριβώνεται η ταυτότητα τους και εάν το ύδωρ είναι χλιαρό, παρατηρούνται συχνά οι αναδιπλώσεις και ευθυγραμμίσεις του « σπειροειδούς».

- Τα προϊόντα της πέψεως πρέπει να εξετάζονται μόλις είναι έτοιμα. Σε καμία περίπτωση δεν πρέπει η εξέταση να αναβάλλεται για την επόμενη ημέρα.

Στην περίπτωση που τα προϊόντα της πέψεως είναι θολά ή δεν έχουν εξεταστεί εντός 30 λεπτών από την ώρα της παρασκευής τους, πρέπει να υποστούν διαυγασμό με τον ακόλουθο τρόπο. Το τελικό δείγμα των 45 ml χύνεται σε ογκομετρικό κύλινδρο και ηρεμεί επί 10 λεπτά. Αφού παρέλθει το χρονικό αυτό διάστημα, αφαιρούνται με αναρρόφηση 30 ml από το επιπλέον υγρό, και τα εναπομένοντα 15 ml συμπληρώνονται με τρεχούμενο ύδωρ μέχρι τελικού όγκου 45 ml. Μετά από μία δεύτερη περίοδο ηρεμίας 10 λεπτών, αφαιρείται με αναρρόφηση ποσότητα 30 ml του επιπλέοντος υγρού, και τα εναπομένοντα 15 ml χύνονται για εξέταση σε ένα τρυβλίο Petri ή σε λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών. Ο ογκομετρικός κύλινδρος εκπλύνεται με 10 ml τρεχούμενου ύδατος, και τα υγρά εκπλύσεως προστίθενται στο δείγμα, στο τρυβλίο Petri ή στη λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών, για να εξεταστούν.

ii) Μείγμα λιγότερων των εκατό δειγμάτων

Εφόσον πρόκειται για μεμονωμένα δείγματα που δεν υπερβαίνουν τα δεκαπέντε, αυτά μπορούν να προστεθούν σε μείγμα που περιλαμβάνει συνολικά εκατό δείγματα, και να εξεταστούν μαζί με τα εν λόγω δείγματα. Εάν πρόκειται για αριθμό μικρότερο των δεκαπέντε δειγμάτων και εξετάζονται λιγότερα των εκατό δειγμάτων, το υγρό πέψεως πρέπει να μειωθεί αναλογικά. 2. Σε περίπτωση που η ανάλυση ομαδικού μείγματος είναι θετική, ή αφήνει περιθώρια για αμφιβολίες, πρέπει να ληφθεί από κάθε χοίρο πρόσθετο δείγμα 20 g, όπως περιγράφεται στο στοιχείο β). Τα δείγματα 20 g από πέντε χοίρους πρέπει να συγκεντρώνονται και να εξετάζονται με τη μέθοδο που περιγράφεται ανωτέρω. Κατ' αυτό τον τρόπο εξετάζονται δείγματα από είκοσι ομάδες των πέντε χοίρων. Όταν εντοπίζονται τριχινέλλες σε μείγμα δειγμάτων από πέντε χοίρους, πρέπει να συλλέγονται περαιτέρω δείγματα των 20 g από μεμονωμένους χοίρους στην ομάδα, και καθένα πρέπει να εξετάζεται χωριστά, με τη μέθοδο που περιγράφεται ανωτερω.»

3. Προστίθενται τα ακόλουθα σημεία IV, V και VI:

«IV. Η ΜΕΘΟΔΟΣ ΤΗΣ ΜΗΧΑΝΙΚΑ ΥΠΟΒΟΗΘΟΥΜΕΝΗΣ ΠΕΨΕΩΣ ΜΕΙΓΜΑΤΟΣ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ/ΤΕΧΝΙΚΗ ΤΗΣ ΑΠΟΜΟΝΩΣΕΩΣ ΜΕ ΚΑΘΙΖΗΣΗ

α) Όργανα και αντιδραστήρια

- μαχαίρι ή ψαλίδια για την απόσπαση δειγμάτων,

- δίσκοι στον καθένα εκ των οποίων έχουν χαραχθεί 50 τετράγωνα, που το καθένα μπορεί να φέρει δείγματα 2 g κρέατος περίπου,

- ένα Stomacher Lab-blender του τύπου 3 500 Thermo,

- πλαστικές σακούλες κατάλληλες για το Stomacher Lab-blender,

- κωνικά χωνία διαχωρισμού, χωρητικότητας 2 λίτρων, κατά προτίμηση εφοδιασμένα με πώματα ασφαλείας teflon,

- στηρίγματα, δακτύλιοι, λαβίδες,

- κόσκινα, μεγέθους βροχίδων 177 μικρών, εξωτερικής διαμέτρου 11 cm με βροχίδα από ανοξείδωτο χάλυβα,

- χωνία εσωτερικής διαμέτρου όχι κατώτερης των 12 cm, προκειμένου να στηρίζουν τα κόσκινα,

- υάλινοι ογκομετρικοί κύλινδροι των 100 ml,

- διανομέας δόσεων των 25 ml,

- ποτήρια ζέσεως χωρητικότητας 3 λίτρων,

- κοχλιάριο ή υάλινη ράβδος για την ανάδευση του υγρού πέψεως στο ποτήριο,

- πλαστική σύριγγα και σωλήνας αναρροφήσεως,

- βαθμονομούμενο κοχλιάριο 6 g,

- θερμόμετρο ακριβείας ± 0,5 °C στην περιοχή θερμοκρασίας 1 έως 100 °C,

- δονητής, π.χ. ηλεκτρική ξυριστική μηχανή της οποίας έχει αφαιρεθεί η κεφαλή,

- ηλεκτρονόμος που ανοίγει και κλείνει ανά διαστήματα ενός λεπτού,

- τριχινοσκόπιο με οριζόντια τράπεζα ή στερεοσκοπικό μικροσκόπιο, με κατάλληλη πηγή φωτισμού,

- λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών (όταν χρησιμοποείται τριχινοσκόπιο): η λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών αποτελείται από ακρυλικές πλάκες πάχους 3 mm, με τα εξής χαρακτηριστικά:

i) ο πυθμένας της λεκάνης έχει διαστάσεις 180 x 40 mm, και είναι χαραγμένος σε τετράγωνα,

ii) οι πλευρές πρέπει να έχουν διαστάσεις 230 x 20 mm,

iii) η μετωπική πλάκα πρέπει να έχει διαστάσεις 40 x 20 mm. Ο πυθμένας και οι μετωπικές πλάκες πρέπει να παρεντίθενται μεταξύ των πλευρών, σχηματίζοντας έτσι δύο μικρές χειρολαβές και στις δύο μετωπικές πλάκες. Η άνω πλευρά του πυθμένα πρέπει να ανυψωθεί κατά 7 έως 9 mm από τη βάση του πλαισίου που σχηματίζεται από τις πλευρές και τις μετωπικές πλάκες. Τα μέρη πρέπει να στερεώνονται με κατάλληλη κόλλα,

- αριθμός τρυβλίων Petri διαμέτρου 9 cm (όταν χρησιμοποιείται στερεοσκοπικό μικροσκόπιο), στην κάτω πλευρά των οποίων έχουν χαραχθεί με αιχμηρό όργανο τετράγωνες ζώνες εξετάσεως διαστάσεων 10 x 10 mm,

- διάλυμα υδροχλωρικού οξέος 17,5 %,

- ισχύς πεψίνης: 1 : 10 000 NF (US National Formulary)

η οποία αντιστοιχεί με 1 : 12 500 BP (British Pharmacopoea)

η οποία αντιστοιχεί με 2 000 (Federation Internationale de Pharmacie),

- αριθμός δοχείων απορριμάτων των 10 λίτρων για να χρησιμοποιούνται κατά την απολύμανση, όπως ο καθαρισμός με φορμόλη των συσκευών, και για το υγρό πέψεως που εναπομένει σε περίπτωση θετικών αποτελεσμάτων,

- ζυγός ακριβείας του 0,1 g.

β) Λήψη δειγμάτων

1. Όταν τα σφάγια είναι ολόκληρα, λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από έναν από τους στύλους του διαφράγματος στη ζώνη που ευρίσκεται μεταξύ μυώδους και τενοντώ δους μοίρας· εάν δεν υπάρχουν στύλοι του διαφράγματος, λαμβάνεται η αυτή ποσότητα από το τμήμα του διαφράγματος που ευρίσκεται κοντά στα πλευρά ή το στέρνο ή από τους μασητήρες μυς ή ακόμη από τους κοιλιακούς μυς.

2. Για τα τεμάχια του κρέατος, λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από τους σκελετικούς μυς, που περιέχουν ελάχιστο λίπος, και όσο το δυνατόν κοντά στα οστά ή τους τένοντες

γ) Μέθοδος

1. Διαδικασία πέψεως

i) Π λ ή ρ ε ς μ ε ί γ μ α δ ε ι γ μ ά τ ω ν (εκατό δείγματα συγχρόνως)

- Στον Stomacher Lab-blender 3 500 τοποθετείται διπλή πλαστική σακούλα και η θερμοκρασία ρυθμίζεται στους 40 έως 41 °C .

- 1,5 λίτρα νερού, το οποίο έχει προθερμανθεί στους 32 έως 35 °C, χύνεται στην εσωτερική πλαστική σακούλα και το νερό θερμαίνεται στους 40 έως 41 °C.

- 25 ml υδροχλωρικού οξέως 17,5 % προστίθενται στο νερό του Stomacher.

- Ακολούθως προστίθενται εκατό δείγματα 1 g περίπου το καθένα (στους 25 έως 30 °C), τα οποία έχουν ληφθεί από καθένα από τα ατομικά δείγματα, σύμφωνα με το σημείο β).

- Τέλος, προστίθενται 6 g πεψίνης. Αυτή η σειρά προσθήκης πρέπει να τηρηθεί αυστηρά προκειμένου να αποφεχθεί η αποσύνθεση της πεψίνης.

- Ο Stomacher τίθεται σε λειτουργία επί 25 λεπτά προκειμένου να συνθλίψει το περιεχόμενο της σακούλας.

- Κατόπιν, η πλαστική σακούλα απομακρύνεται από τον Stomacher , το υγρό πέψεως διηθείται με τη βοήθεια κοσκίνου και το διήθημα λαμβάνεται σε ποτήρι 3 λίτρων.

- Η πλαστική σακούλα με 100 ml περίπου νερού, το οποίο στη συνέχεια χρησιμοποιείται για την έκπλυση του κοσκίνου και τελικά προστίθεται στο διήθημα του ποτηριού.

Σε σύνολο εκατό δειγμάτων μπορούν να προστεθούν μέχρι δεκαπέντε μεμονωμένα δείγματα και να εξεταστούν μαζί.

ii) Μ ι κ ρ ό τ ε ρ α μ ε ί γ μ α τ α μ ε λ ι γ ό τ ε ρ α α π ό ε κ α τ ό δ ε ί γ μ α τ α

- Στον Stomacher Lab-blender 3 500 τοποθετείται διπλή πλαστική σακούλα και η θερμοκρασία ρυθμίζεται στους 40 έως 41 °C .

- Παρασκευάζεται υγρό πέψεως αναμειγνύοντας 1,5 λίτρα περίπου νερού με 25 ml υδροχλωρικού οξέος 17,5 %. Προστίθενται 6 g πεψίνης και το μείγμα αναδεύεται σε θερμοκρασία 40 έως 41 °C. Αυτή η σειρά προσθήκης πρέπει να τηρηθεί αυστηρά προκειμένου να αποφευχθεί η αποσύνθεση της πεψίνης.

- Από το υγρό πέψεως λαμβάνεται ποσότητα που αντιστοιχεί σε 15 ml ανά γραμμάριο δείγματος (π.χ. για τριάντα δείγματα η απαιτούμενη ποσότητα είναι 30 x 15 = 450 ml) και μεταφέρεται στην εσωτερική σακούλα όπου προστίθενται και τα δείγματα κρέατος του 1 g περίπου (στους 25 έως 30 °C), τα οποία έχουν ληφθεί από καθένα από τα ατομικά δείγματα σύμφωνα με το σημείο β).

- Στην εξωτερική σακούλα προστίθεται νερό θερμοκρασίας 41 °C μέχρις ότου ο συνολικός όγκος στις δύο σακούλες ανέλθει σε 1,5 λίτρα.

- Ο Stomacher τίθεται σε λειτουργία επί 25 λεπτά προκειμένου να συνθλίψει το περιεχόμενο της σακούλας.

- Η πλαστική σακούλα αφαιρείται από τον Sotmacher, το υγρό πέψεως διηθείται μέσω κόσκινου και το διήθημα λαμβάνεται σε ποτήρι 3 λίτρων.

- Η πλαστική σακούλα πλένεται με 100 ml περίπου νερού το οποίο στη συνέχεια χρησιμοποιείται για την έκπλυση του κόσκινου κα τελικά προστίθεται στο διήθημα του ποτηριού.

2. Ανεύρεση των προνυμφών με απομόνωση δια καθιζήσεως

- Στο υγρό πέψεως προστίθεται πάγος (300 έως 400 g λεπτοθρυμματισμένου πάγου) έως ότου ληφθεί συνολικός όγκος 2 λίτρων. Το υγρό πέψεως αναδεύεται μέχρις ότου επιτευχθεί τήξη του πάγου.

Αν τα μείγματα είναι μικρότερα (βλέπε ii)), η ποσότητα του πάγου μειώνεται αντίστοιχα.

- Το υγρό πέψεως που έχει ψυχθεί κατά τον τρόπο αυτό μεταφέρεται σε χωνί διαχωρισμού χωρητικότητας 2 λίτρων, το οποίο είναι εφοδιασμένο με δονητή στερεωμένο με ξεχωριστή λαβίδα. Π Το υγρό αφήνεται να κατακαθίσει επί 30 λεπτά, κατά τη διάρκεια των οποίων το χωνί υποβάλλεται σε διακοπτόμενες δονήσεις, π.χ. δόνηση διαρκείας ενός λεπτού συνοδεύεται από παύση ενός λεπτού.

- Μετά την πάροδο 30 λεπτών, 60 ml ιζήματος μεταγγίζονται ταχύτατα σε ογκομετρικό κύλινδρο των 100 ml. (Το χωνί εκπλύνεται με απορρυπαντικό διάλυμα μετά τη χρήση).

- Τα 60 ml του δείγματος αφήνονται σε ηρεμία επί 10 λεπτά τουλάχιστον και στη συνέχεια η υπερκείμενη στιβάδα απομακρύνεται με αναρρόφηση αφήνοντας όγκο 15 ml μόνο για την αναζήτηση των προνυμφών.

- Για την αναρρόφηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί σύριγγα μιας χρήσης με πλαστικό σωλήνα.

Το μήκος του σωλήνα πρέπει να είναι τέτοιο ώστε στον ογκομετρικό κύλινδρο να παραμένουν 15 ml υγρού, όταν η στεφάνη της σύριγγας στηρίζεται στο χείλος του κυλίνδρου.

- Τα εναπομένοντα 15 ml χύνονται στη λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών ή σε δύο τρυβλία Petri και εξετάζονται με τη βοήθεια του τριχινοσκοπίου ή του στεροσκοπικού μικροσκοπίου, ανάλογα με την περίπτωση.

- Τα προϊόντα της πέψεως πρέπει να εξετάζονται μόλις είναι έτοιμα. Σε καμία περίπτωση δεν πρέπει να αναβάλλεται η εξέτασή τους για την επόμενη ημέρα.

Αν τα προϊόντα της πέψεως δεν είναι διαυγή ή αν δεν εξετάζονται μέσα σε 30 λεπτά μετά την παρασκευή τους, τότε πρέπει να διαυγάζονται ως ακολούθως: Το τελικό δείγμα των 60 ml χύνεται σε έναν ογκομετρικό κύλινδρο και αφήνεται σε ηρεμία για 10 λεπτά. Μετά το πέρας του χρόνου αυτού, 45 ml του επιπλέοντος υγρού αναρροφούνται και στα υπόλοιπα 15 ml προστίθεται νερό της βρύσης μέχρι του όγκου των 45 ml. Μετά από μια περαιτέρω περίοδο καθίζησης 10 λεπτών, 30 ml του επιπλέοντος υγρού απομακρύνονται με αναρρόφηση και τα υπόλοιπα 15 ml χύνονται σε ένα τρυβλίο Petri για εξέταση. Ο ογκομετρικός κύλινδρος πρέπει να πλύνεται με 10 ml νερού της βρύσης, το δε έκπλυμα αυτό προστίθεται και εξετάζεται στο προηγούμενο τρυβλίο Petri ή στη λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών.

3. Σε περίπτωση θετικού ή αμφίβολου αποτελέσματος της εξέτασης ενός συλλογικού δείγματος, πρέπει να λαμβάνονται από κάθε χοίρο 20 g επιπλέον δείγματος σύμφωνα με το παραπάνω σημείο β). Τα 20 g δείγματος που λαμβάνονται από πέντε χοίρους πρέπει να αναμειγνύονται και να εξετάζονται όπως περιγράφεται προηγουμένως. Κατά τον τρόπο αυτό θα εξετασθούν δείγματα από είκοσι ομάδες, κάθε μία από τις οποίες θα αποτελείται από πέντε χοίρους. Σε περίπτωση που ανευρίσκονται τριχινέλλες σε ένα μείγμα δείγματος προερχόμενο από πέντε χοίρους, πρέπει να συλλέγονται δείγματα 20 g από κάθε χοίρο της ομάδας και κάθε δείγμα να εξετάζεται χωριστά, με τη μέθοδο που περιγράφτηκε παραπάνω.

V. ΜΕΘΟΔΟΣ ΤΗΣ ΜΗΧΑΝΙΚΑ ΥΠΟΒΟΗΘΟΥΜΕΝΗΣ ΠΕΨΕΩΣ ΜΕΙΓΜΑΤΟΣ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ/«ΤΕΧΝΙΚΗ ΤΗΣ ΑΠΟΜΟΝΩΣΕΩΣ ΕΠΙ ΤΟΥ ΗΘΜΟΥ»

α) Συσκευές και αντιδραστήρια

Οι συσκευές και τα αντιδραστήρια που αναφέρονται στο σημείο α) της μεθόδου IV.

Εκτός αυτών απαιτείται επιπλέον ο ακόλουθος εξοπλισμός:

- χωνία Gelman του 1 λίτρου με υποδοχή ηθμού (διάμετρος 45 mm ),

- διηθητικοί δίσκοι, με τα εξής χαρακτηριστικά:

κυκλικό δικτυωτό πλέγμα από ανοξείδωτο χάλυβα ανοίγματος 35 μικρών (διάμετρος του δίσκου 45 mm),

δύο ελαστικοί δακτύλιοι από ελαστικό πάχους 1 mm (εξωτερική διάμετρος 45 mm, εσωτερική διάμετρος 38 mm),

το κυκλικό δικτυωτό τοποθετείται μεταξύ των δύο ελαστικών δακτυλίων και συγκολλάται με κόλλα δύο συστατικών κατάλληλων και για τα δύο υλικά,

- φιάλη Erlenmeyer των 3 λίτρων με προσαρμοσμένο πλάγιο σωλήνα για αναρρόφηση,

- υδραντλία κενού,

- πλαστικές σακούλες χωρητικότητας 80 ml τουλάχιστον,

- κατάλληλος εξοπλισμός για τη σφράγιση των πλαστικών σάκων,

- rennilase 1 : 150 000 μονάδες soxhlet ανά γραμμάριο.

β) Συλλογή δειγμάτων

Βλέπε σημείο β) της μεθόδου IV. γ) Μέθοδος

1. Διαδικασία πέψεως

i) Π λ ή ρ η μ ε ί γ μ α τ α δ ε ι γ μ ά τ ω ν (εκατό δείγματα συγχρόνως)

Βλέπε σημείο γ) 1 i) της μεθόδου IV.

ii) Μ ι κ ρ ό τ ε ρ α μ ε ί γ μ α τ α μ ε λ ι γ ό τ ε ρ α α π ό ε κ α τ ό δ ε ί γ μ α τ α

Βλέπε σημείο γ) 1 ii) της μεθόδου IV.

2. Ανεύρεση των προνυμφών με διήθηση

- Στο υγρό πέψεως προστίθεται πάγος (300 έως 400 g λεπτοθρυμματισμένου πάγου) μέχρι συνολικού όγκου 2 λίτρων περίπου.

Αν τα μείγματα είναι μικρότερα, η ποσότητα του πάγου μειώνεται αντίστοιχα.

- Το υγρό πέψεως αναδεύεται μέχρις ότου επιτευχθεί τήξη του πάγου. Κατόπιν αφήνεται σε ηρεμία επί 3 τουλάχιστον λεπτά, μέχρις ότου συσπειρωθούν οι προνύμφες.

- Το χωνί Gelman, το οποίο φέρει την υποδοχή ηθμού και τον διηθητικό δίσκο, προσαρμόζεται στη φιάλη Erlenmeyer η οποία είναι συνδεμένη με υδραντλία κενού.

- Το υγρό πέψεως χύνεται στο χωνί Gelman και διηθείται. Προς το τέλος της διήθησης η διέλευση του υγρού πέψεως από τον ηθμό είναι δυνατόν να υποβοηθεί θέτοντας σε λειτουργία την υδραντλία κενού. Η αναρρόφηση πρέπει να σταματήσει προτού ξηρανθεί ο ηθμός, δηλαδή όταν απομένουν ακόμη 2 έως 5 ml υγρού στο χωνί.

- Μετά τη διήθηση ολοκλήρου του υγρού πέψεως, ο διηθητικός δίσκος αφαιρείται από το χωνί και τοποθετείται μέσα σε πλαστική σακούλα χωρητικότητας 80 ml μαζί με 15 έως 20 ml διαλύματος rennilase.

Το διάλυμα της rennilase παρασκευάζεται διαλύοντας 2 g rennilase σε 100 ml νερού της βρύσης.

- Η πλαστική σακούλα σφραγίζεται δύο φορές και τοποθετείται στον Stomacher μεταξύ της εσωτερικής και της εξωτερικής σακούλας.

- Ο Stomacher τίθεται σε λειτουργία επί 3 λεπτά, π.χ. όταν η συσκευή χρησιμοποιείται για ένα πλήρες μείγμα δειγμάτων.

- Μετά την πάροδο των 3 λεπτών, η πλαστική σακούλα που φέρει τον διηθητικό δίσκο και το διάλυμα της rennilase αφαιρείται από τον Stomacher και ανοίγεται με ψαλίδι. Το υγρό περιεχόμενο χύνεται σε λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών ή σε τρυβλίο Petri. Η σακκούλα εκπλύνεται με 5 έως 10 ml νερού και το υγρό εκπλύσεως προστίθεται στη λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών για την εξέταση με το τριχινοσκόπιο ή σε τρυβλίο Petri για την εξέταση με το στερεοσκοπικό μικροσκόπιο.

- Τα προϊόντα της πέψεως πρέπει να εξετάζονται μόλις είναι έτοιμα. Σε καμία περίπτωση δεν πρέπει να αναβάλλεται η εξέτασή τους για την επόμενη ημέρα.

Σημείωση

Οι διηθητικοί δίσκοι δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται όταν δεν είναι τελείως καθαροί.

Οι ακάθαρτοι δίσκοι δεν πρέπει να αφήνονται να ξηρανθούν. Μπορούν να καθαριστούν αν αφεθούν επί μία νύκτα μέσα σε διάλυμα rennilase. Προτού χρησιμοποιηθούν πρέπει να πλυθούν με νέο διάλυμα rennilase μέσα στον Stomacher.

3. Σε περίπτωση θετικού ή αμφίβολου αποτελέσματος της εξέτασης ενός συλλογικού δείγματος, πρέπει να λαμβάνονται από κάθε χοίρο 20 g επιπλέον δείγματος σύμφωνα με το παραπάνω σημείο β). Τα 20 g δείγματος που λαμβάνονται από πέντε χοίρους πρέπει να αναμειγνύονται και να εξετάζονται όπως περιγράφεται προηγουμένως. Κατά τον τρόπο αυτό θα εξετασθούν δείγματα από είκοσι ομάδες, κάθε μία από τις οποίες θα αποτελείται από πέντε χοίρους. Σε περίπτωση που ανευρίσκονται τριχινέλλες σε ένα μείγμα δείγματος προερχόμενο από πέντε χοίρους, πρέπει να συλλέγονται ατομικά δείγματα 20 g από κάθε χοίρο της ομάδας και κάθε δείγμα να εξετάζεται χωριστά, με τη μέθοδο που περιγράφτηκε παραπάνω.

VI. ΜΕΘΟΔΟΣ ΠΕΨΕΩΣ ΟΜΑΔΩΝ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ ΜΕ ΤΗ ΒΟΗΘΕΙΑ ΜΑΓΝΗΤΙΚΟΥ ΑΝΑΔΕΥΤΗΡΑ

α) Συσκευές και αντιδραστήρια

- μαχαίρι και λαβίδες για τη λήψη των δειγμάτων,

- δίσκοι με 50 τετραγωνικά χωρίσματα, καθένα από τα οποία μπορεί να περιλάβει περίπου 2 g κρέατος,

- μηχανή κοπής κρέατος (Moulinette blender),

- μαγνητικοί αναδευτήρες, με θερμαντική πλάκα ελεγχόμενη από θερμοστάτη, και ράβδοι αναδεύσεως επενδεδυμένες με τεφλόν, μήκους 5 cm περίπου, Π χωνιά διαχωρισμού χωρητικότητας 2 λίτρων,

- στηρίγματα, δακτύλιοι και λαβίδες,

- κόσκινα μεγέθους βροχίδων 177 μικρών, εξωτερική διάμετρος 11 cm, με δικτυωτό από ανοξείδωτο χάλυβα,

- χωνιά εσωτερικής διαμέτρου τουλάχιστον 12 cm, πάνω στα οποία θα τοποθετηθούν τα κόσκινα,

- ποτήρι ζέσεως χωρητικότητας 3 λίτρων,

- ογκομετρικοί κύλινδροι χωρητικότητας 50 ml περίπου ή φυγοκεντρικοί σωλήνες,

- τριχινοσκόπιο με οριζόντια τράπεζα ή στερεοσκοπικό μικροσκόπιο με κατάλληλη πηγή φωτισμού,

- λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών (στην περίπτωση που χρησιμοποιείται το τριχινοσκόπιο)· η λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών αποτελείται από ακρυλικές πλάκες πάχους 3 mm και έχει τα εξής χαρακτηριστικά:

i) πυθμένας της λεκάνης: 180 x 40 mm, χωρισμένος σε τετραγωνίδια,

ii) πλευρικές πλάκες: 230 x 20 mm,

iii) μετωπικές πλάκες: 40 x 20 mm. Οι πυθμένες και οι μετωπικές πλάκες πρέπει να στερεώνονται μεταξύ των πλευρικών πλακών έτσι ώστε να σχηματίζουν δύο μικρές λαβές στα δύο άκρα. Η άνω πλευρά του πυθμένα πρέπει να είναι υπερυψωμένη κατά 7 έως 9 mm ως προς τη βάση του πλαισίου που σχηματίζουν οι πλευρικές και οι μετωπικές πλάκες. Οι πλάκες στερεώνονται με κόλλα κατάλληλη για το χρησιμοποιούμενο υλικό,

- μία σειρά τρυβλίων Petri διαμέτρου 9 cm (στην περίπτωση που χρησιμοποιείται το στερεοσκοπικό μικροσκόπιο), στον πυθμένα των οποίων έχουν χαραχτεί με αιχμηρό εργαλείο τετράγωνες ζώνες διαστάσεων 10 x 10 mm,

- φύλλο αλουμινίου,

- υδροχλωρικό οξύ 25 %,

- πεψίνη ισχύος: 1 : 10 000 NF (US National Formulary)

η οποία αντιστοιχεί με 1 : 12 500 BP (British Pharmacopoea)

η οποία αντιστοιχεί με 2 000 FIP (Federation Internationale de Pharmacie),

- νερό της βρύσης το οποίο έχει θερμανθεί στους 46 έως 48 °C,

- δοχεία απορριμμάτων των 10 λίτρων για να χρησιμοποιηθούν κατά την απολύμανση των συσκευών με φορμόλη και για το υγρό πέψεως που εναπομένει σε περίπτωση θετικού αποτελέσματος,

- ζυγός ακριβείας 0,1 g.

β) Συλλογή των δειγμάτων

1. Όταν τα σφάγια είναι ολόκληρα, λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από έναν από τους στύλους του διαφράγματος στη ζώνη που ευρίσκεται μεταξύ μυώδους και τενοντώδους μοίρας· εάν δεν υπάρχουν στύλοι του διαφράγματος, λαμβάνεται η αυτή ποσότητα από το τμήμα του διαφράγματος που ευρίσκεται κοντά στα πλευρά ή το στέρνο ή από τους μασητήρες μυς ή ακόμη τους κοιλιακούς μυς.

2. Για τα τεμάχια του κρέατος, λαμβάνεται δείγμα κατά προσέγγιση 2 g από τους σκελετικούς μυς, που περιέχουν ελάχιστο λίπος, και όσο το δυνατόν κοντά στα οστά ή τους τένοντες.

γ) Μέθοδος

1. i) Πλήρη μείγματα δειγμάτων (εκατό δείγματα συγχρόνως)

- Εκατό δείγματα του 1 g περίπου, τα οποία έχουν ληφθεί από καθένα από τα ατομικά δείγματα σύμφωνα με τις οδηγίες του σημείου β), αλέθονται στη μηχανή κοπής κρέατος η οποία τίθεται σε λειτουργία τρεις ή τέσσερις φορές για ένα δευτερόλεπτο κάθε φορά.

- Το αλεσμένο κρέας μεταφέρεται σε ποτήρι ζέσεως των 3 λίτρων και πασπαλίζεται με 10 g πεψίνης. Στο ίδιο ποτήρι ζέσεως προστίθενται δύο λίτρα νερού της βρύσης που έχει προθερμανθεί στους 46 έως 48 ° C, και 16 ml υδροχλωρικού οξέος.

- Το εξάρτημα της μηχανής για το άλεσμα του κρέατος ( Moulinette blender) εμβαπτίζεται πολλές φορές μέσα στο ποτήρι ζέσεως με το υγρό πέψεως προκειμένου να απομακρυνθούν όλα τα επικολλημένα σ' αυτό τεμαχίδια κρέατος.

Π Η ράβδος αναδεύσεως τοποθετείται στο ποτήρι, το οποίο καλύπτεται ακολούθως με φύλλο αλουμινίου. Π Το ποτήρι φέρεται πάνω στην πλάκα του μαγνητικού αναδευτήρα η οποία έχει προθερμανθεί και η διαδικασία αναδεύσεως αρχίζει. Προτού αρχίσει η ανάδευση, ο μαγνητικός αναδευτήρας πρέπει να έχει ρυθμιστεί έτσι, ώστε, καθ' όλη τη διάρκεια της λειτουργίας του, η θερμοκρασία να διατηρείται σταθερή στους 44 έως 46 °C. Κατά τη διάρκεια της αναδεύσεως η ταχύτητα περιστροφής του υγρού πέψεως πρέπει να είναι αρκετά υψηλή ώστε να σχηματίζεται περιδίνηση σε βάθος χωρίς να εκφεύγει νερό έξω από το ποτήρι.

- Το υγρό πέψεως αναδεύεται επί 30 λεπτά. Κατόπιν η λειτουργία του αναδευτήρα διακόπτεται και το υγρό πέψεως μεταφέρεται στο χωνί καθιζήσεως δια μέσου του κοσκίνου.

- Το υγρό πέψεως αφήνεται σε ηρεμία στο χωνί επί 30 λεπτά.

- Μετά την πάροδο των 30 λεπτών, δείγμα 40 ml υγρού πέψεως μεταφέρεται ταχύτατα στον ογκομετρικό κύλινδρο ή στον φυγοκεντρικό σωλήνα.

- Το δείγμα των 40 ml αφήνεται να κατακαθίσει επί 10 λεπτά και, στη συνέχεια, από την υπερκείμενη στιβάδα αναρροφώνται 30 ml ενώ απομένουν 10 ml.

- Το εναπομείναν δείγμα ιζήματος 10 ml χύνεται σε λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών ή σε τρυβλίο Petri.

- Ο ογκομετρικός κύλινδρος ή ο φυγοκεντρικός σωλήνας εκπλύνεται με 10 ml νερού της βρύσης τα οποία προστίθενται στη λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών ή στο τρυβλίο Petri. Ακολουθεί η εξέταση του δείγματος με το τριχινοσκόπιο ή το στερεοσκοπικό μικροσπόπιο, αντίστοιχα.

- Τα προϊόντα της πέψεως πρέπει να εξετάζονται μόλις είναι έτοιμα. Σε καμία περίπτωση δεν πρέπει να αναβάλλεται η εξέτασή τους για την επόμενη ημέρα.

Αν τα προϊόντα της πέψεως δεν εξεταστούν εντός 30 λεπτών από την παρασκευή τους, τότε πρέπει να διαυγάζονται ως ακολούθως:

Το τελικό δείγμα των 40 ml περίπου χύνεται σε ογκομετρικό κύλινδρο και αφήνεται σε ηρεμία για 10 λεπτά. Μετά το πέρας του χρόνου αυτού, 30 ml του επιπλέοντος υγρού αφαιρούνται και στα υπόλοιπα 10 ml προστίθεται νερό της βρύσης μέχρι όγκου 40 ml. Μετά από μία περαιτέρω περίοδο καθίζησης 10 λεπτών, 30 ml του επιπλέοντος υγρού απομακρύνονται με αναρρόφηση και τα υπόλοιπα 10 ml χύνονται για εξέταση σε ένα τρυβλίο Petri ή σε λεκάνη καταμετρήσεως των προνυμφών. Ο ογκομετρικός κύλινδρος εκπλύνεται με 10 ml νερού της βρύσης, τα δε εκπλύματα αυτά προστίθενται για εξέταση στο δείγμα του τρυβλίου Petri ή στη λεκάνη για την καταμέτρηση των προνυμφών.

Αν το ίζημα δεν είναι διαυγές κατά την εξέταση, το δείγμα μεταγγίζεται σε ογκομετρικό κύλινδρο στον οποίο προστίθεται νερό βρύσης μέχρις όγκου 40 ml. Στην συνέχεια επαναλαμβάνεται η ίδια διαδικασία.

ii) Ομάδες μικρότερες των εκατό δειγμάτων

Όταν χρειάζεται, μπορούν να προστεθούν μέχρι δεκαπέντε δείγματα του 1 g το καθένα σε μία ομάδα που περιλαμβάνει συνολικά εκατό δείγματα, και να εξεταστούν μαζί με τα εν λόγω δείγματα σύμφωνα με τα οριζόμενα στο σημείο γ) 1 i). Εφόσον πρόκειται για αριθμό μεγαλύτερο των δεκαπέντε δειγμάτων, αυτά εξετάζονται ως πλήρης ομάδα. Για ομάδες μέχρι πενήντα δειγμάτων, το υγρό πέψεως μπορεί να μειωθεί σε 1 λίτρο.

2. Σε περίπτωση που η ανάλυση ομαδικού δείγματος είναι θετική ή αφήνει περιθώρια για αμφιβολίες, πρέπει να ληφθεί από κάθε χοίρο πρόσθετο δείγμα 20 g, όπως περιγράφεται στο σημείο β). Τα δείγματα των 20 g από πέντε χοίρους πρέπει να συγκεντρώνονται και να εξετάζονται με τη μέθοδο που περιγράφεται ανωτέρω. Κατ' αυτό τον τρόπο εξετάζονται δείγματα από είκοσι ομάδες των πέντε χοίρων. Όταν εντοπίζονται τριχινέλλες σε ομάδα δειγμάτων από πέντε χοίρους, πρέπει να συλλέγονται περαιτέρω δείγματα των 20 g από μεμονωμένους χοίρους στην ομάδα, και καθένα πρέπει να εξετάζεται χωριστά, με τη μέθοδο που περιγράφεται ανωτέρω.»

Β. Το παράρτημα ΙΙ κεφάλαιο 1 τροποποιείται ως εξής:

1. Το κείμενο του σημείου β) αντικαθίσταται από το εξής:

«β) επαρκώς εξοπλισμένο χώρο που κλειδώνει, για τη διεξαγωγή των εξετάσεων, ο οποίος μπορεί να συσκοτίζεται όταν διεξάγεται εξέταση με το τριχινοσκόπιο·»

2. Το σημείο στ) διαγράφεται. Τα σημεία ζ), η), θ), ι), κ), λ), μ) και ν) γίνονται αντίστοιχα στ), ζ), η), θ), ι), κ), λ) και μ). 3. Το κείμενο του νέου σημείου ζ) αντικαθίσταται από το ακόλουθο:

«ζ) αίθουσα με ύδωρ για τον καθαρισμό και την απολύμανση του υλικού εξετάσεως (π.χ. δοχεία για δειγματοληψία, συμπιεστές, μαχαίρια και ψαλίδια), εφοδιασμένη:

- με επένδυση δαπέδου από αδιάβροχα και άσηπτα υλικά, η οποία να μπορεί να καθαρίζεται και να απολυμαίνεται εύκολα,

- με λείους τοίχους ύψους τουλάχιστον 2 m, με επένδυση ή βαφή ανοιχτού χρώματος η οποία επιδέχεται πλύσιμο.

Η διάταξη αυτή δεν εφαρμόζεται όταν χρησιμοποιούνται οι μέθοδοι που ορίζονται στα σημεία ΙΙ, ΙΙΙ, IV, V, VI του παραρτήματος Ι, εφόσον τα εργαστήρια είναι εφοδιασμένα με νεροχύτη με κατάλληλη αποχέτευση.»