ANHANG I

ALLGEMEINE GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN

Teil I – Anforderungen hinsichtlich der Leistungsmerkmale von Produkten, die unter die Anhänge II bis XIII fallen

Leistungsmerkmale

Anforderung

Alle in Anhang I Abschnitt 9.1 Buchstaben a und b, Abschnitt 9.3 und Abschnitt 9.4 Buchstabe a der Verordnung (EU) 2017/746 aufgeführten Leistungsmerkmale

1.Die Bestimmung der Leistungsmerkmale muss in direktem Vergleich mit einem Produkt erfolgen, das dem Stand der Technik entspricht. Für den Vergleich muss ein CE-gekennzeichnetes Produkt verwendet werden, sofern ein solches zum Zeitpunkt der Leistungsbewertung am Markt verfügbar ist

2.Bei Produkten zur Ermittlung des Status von Proben, die zur Bestimmung der Leistungsmerkmale verwendet werden, muss es sich um dem Stand der Technik entsprechende Produkte mit CE-Kennzeichnung handeln.

3.Treten bei der Bestimmung der Leistungsmerkmale abweichende Ergebnisse auf, so sind sie möglichst weitgehend durch eine oder mehrere der folgenden Maßnahmen aufzuklären:

–durch eine Bewertung der abweichenden Probe in weiteren Produkten,

–durch die Verwendung eines alternativen Verfahrens oder Markers,

–durch die Überprüfung des Patienten im Hinblick auf seinen klinischen Status und seine Diagnose,

–durch das Testen von Folgeproben.

4.Die Bestimmung der Leistungsmerkmale muss an einer Population erfolgen, die der europäischen Bevölkerung entspricht.

Fehlerrate des Gesamtsystems

5.Als Bestandteil der erforderlichen Risikoanalyse ist die zu falsch negativen Befunden führende Fehlerrate des Gesamtsystems in wiederholten Tests an schwach positiven Proben zu ermitteln.

Analytische Sensitivität, analytische Spezifität, Interferenz

6.Bei Produkten, die zur Verwendung mit Plasma bestimmt sind, hat der Hersteller die Leistung des Produkts unter Verwendung aller Antikoagulanzien nachzuweisen, die der Hersteller für die Verwendung mit diesem Produkt angibt; der Nachweis ist an mindestens 50 Plasmaproben (bei Produkten zum Nachweis und/oder zur Quantifizierung von Infektionserregern 25 positiven und 25 negativen) zu führen.

Analytische und diagnostische Spezifität, Interferenz und Kreuzreaktivität

7.Der Hersteller hat die potenziell störenden Substanzen, die bewertet werden sollen, unter Berücksichtigung der Zusammensetzung der Reagenzien und des Aufbaus des Produkts auszuwählen.

Gleichbleibende Qualität der Chargen

8.Bei Produkten zum Nachweis von Antigenen und Antikörpern muss durch die Chargenprüfkriterien des Herstellers sichergestellt werden, dass für jede Charge die relevanten Antigene, Epitope und Antikörper einheitlich und durchgängig erkennbar sind und dass jede Charge für die angegebenen Probentypen geeignet ist.

9.Die Chargenfreigabetests des Herstellers für erstmalige Tests müssen mindestens 100 Proben mit negativem Befund für den relevanten Analyten umfassen. 1

Teil II – Anforderungen hinsichtlich der Leistungsmerkmale von Produkten, die in den Anhängen III bis XIII aufgeführt sind

Leistungsmerkmal	Anforderung
Analytische und diagnostische Sensitivität	10.Produkte, die vom Hersteller für den Test von anderen Körperflüssigkeiten als Serum oder Plasma bestimmt sind, z. B. Urin, Speichel usw., müssen den gleichen Anforderungen genügen wie Serum- oder Plasmaprodukte. Der Hersteller hat Proben derselben Individuen sowohl mittels der zuzulassenden Produkte als auch mittels eines Serum- bzw. Plasmaprodukts zu untersuchen. 2 11.Produkte, die für die Eigenanwendung bestimmt sind, müssen den gleichen Anforderungen genügen wie entsprechende Produkte für die Anwendung in einem professionellen Umfeld. 12.In einer Leistungsbewertung verwendete positive Proben sind so auszuwählen, dass sie verschiedene Stadien der betreffenden Krankheit(en), unterschiedliche Antikörpermuster, unterschiedliche Genotypen, Subtypen, Mutanten usw. widerspiegeln. 13.Serokonversionspanels müssen mit (einer) negativen Blutprobe(n) beginnen und die Intervalle zwischen den Blutabnahmen sind möglichst kurz zu halten. Ist dies nicht möglich, müssen die Hersteller im Bericht über die Leistungsbewertung eine entsprechende Begründung anführen. 14.Bei Produkten, die vom Hersteller zur Untersuchung von Serum und Plasma bestimmt sind, ist bei der Leistungsbewertung die Serum-Plasma-Entsprechung nachzuweisen. Der Nachweis ist an mindestens 25 positiven Spenden zu führen. 15.Bei Produkten zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Antigenen oder Nukleinsäuren ist (sind) das (die) Zielantigen(e) bzw. die Zielnukleinsäureregion(en) in der Gebrauchsanweisung anzugeben. 16.Bei Produkten zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Antikörpern gegen einen Infektionserreger ist (sind) das (die) Zielantigen(e) dieser Antikörper in der Gebrauchsanweisung anzugeben.
Analytische und diagnostische Spezifität	17.Produkte, die vom Hersteller für den Test von anderen Körperflüssigkeiten als Serum oder Plasma bestimmt sind, z. B. Urin, Speichel usw., müssen den gleichen Anforderungen genügen wie Serum- oder Plasmaprodukte. Bei der Leistungsbewertung sind Proben derselben Individuen sowohl mittels der zuzulassenden Produkte als auch mittels eines Serum- bzw. Plasmaprodukts zu untersuchen.1 18.Produkte, die für die Eigenanwendung bestimmt sind, müssen den gleichen Anforderungen genügen wie entsprechende Produkte für die Anwendung in einem professionellen Umfeld. 19.In einer Leistungsbewertung verwendete negative Proben sind so auszuwählen, dass sie die Zielpopulation widerspiegeln, für die das Produkt bestimmt ist, beispielsweise Blutspender, Krankenhauspatienten, Schwangere usw. 20.Die Spezifität beruht auf einem reaktivem Ergebnis (d. h. einem falsch positiven Befund) bei wiederholter Testung von Proben, die hinsichtlich des Zielmarkers negativ sind. 21.Bei Produkten, die vom Hersteller zur Untersuchung von Serum und Plasma bestimmt sind, ist bei der Leistungsbewertung die Serum-Plasma-Entsprechung nachzuweisen. Der Nachweis ist an mindestens 25 negativen Spenden zu führen.
Analytische und diagnostische Spezifität, Interferenz und Kreuzreaktivität	22.Der Hersteller muss unter anderem folgende Proben, soweit zutreffend, einbeziehen: –Proben, die verwandte Infektionen darstellen, –Multigravida-Proben, d. h. Proben von Frauen, die mehrmals schwanger waren; weiterhin Proben von Patienten, die einen positiven Befund in Bezug auf den Rheumafaktor (RF) aufweisen, –Proben, die menschliche Antikörper gegen Komponenten des Expressionssystems, wie beispielsweise Anti-E.-coli oder Anti-Hefe aufweisen.
Von Laien durchgeführte Leistungsbewertung	23.Die betreffenden Teile der Leistungsbewertung sind von geeigneten Laien durchzuführen (oder zu wiederholen), um die Funktionsweise des Produkts und seine Gebrauchsanweisung zu validieren. Die für die Leistungsbewertung ausgewählten Laien müssen für die vorgesehenen Anwendergruppen repräsentativ sein.

ANHANG II

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS VON BLUTGRUPPEN-ANTIGENEN IN DEN BLUTGRUPPENSYSTEMEN AB0, RH, KELL, DUFFY UND KIDD

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis von Blutgruppen-Antigenen in den Blutgruppensystemen AB0, Rh, Kell, Duffy und Kidd.

Tabelle 1 gilt für die Leistungsbewertung von Produkten zum Nachweis von Blutgruppen-Antigenen in den Blutgruppensystemen AB0, Rh, Kell, Duffy und Kidd.
Tabelle 2 gilt für die vom Hersteller durchzuführende Prüfung der gleichbleibenden Qualität der Chargen für Reagenzien und Reagenzprodukte zur Bestimmung von Blutgruppenantigenen in den Blutgruppensystemen AB0, Rh, Kell, Duffy und Kidd (Testreagenzien, Kontrollmaterialien).

Tabelle 1. Leistungsbewertung von Produkten zum Nachweis von Blutgruppen-Antigenen in den Blutgruppensystemen AB0, Rh, Kell, Duffy und Kidd

Spezifität des Reagenz	Anzahl der vom Hersteller angegebenen Tests je Methode	Für ein neues Produkt zu testende Gesamtprobenzahl	Für eine neue Formulierung zu testende Gesamtprobenzahl oder Verwendung klar charakterisierter Reagenzien	Allgemeine Qualifikationskriterien	Spezifische Qualifikationskriterien	Akzeptanzkriterien
Anti-AB01 (Anti-A), Anti-AB02 (Anti-B), Anti-AB03 (Anti-A,B)	≥ 500	≥ 3 000	≥ 1 000	Klinische Proben: 10 % der Testpopulation Proben von Neugeborenen: > 2 % der Testpopulation	AB0-Proben müssen > 40 % für Anti-A und Anti-B positive Proben enthalten, die Proben der Gruppe A, der Gruppe B und der Gruppe AB enthalten können.	Alle Reagenzien müssen hinsichtlich der behaupteten Reaktivität des Produkts eine Leistung aufweisen, die mit der von CE-gekennzeichneten Produkten vergleichbar ist, die dem Stand der Technik entsprechen. Bei Produkten, die die CE-Kennzeichnung tragen und deren Anwendungsbereich oder Verwendungsart geändert oder erweitert wurde, sind weitere Tests gemäß den in Spalte 2 („Anzahl der vom Hersteller angegebenen Tests pro Methode“) aufgeführten Anforderungen durchzuführen.
Anti-RH1 (Anti-D)	≥ 500	≥ 3 000	≥ 1 000		Die Leistungsbewertung von Anti-D-Reagenzien muss auch Tests an einer Reihe von schwachen und partiellen RH1-Proben (D) umfassen, je nach Verwendungszweck des Produkts. Schwache und/oder partielle D-Zellen müssen > 2 % der für Anti-RH1 (Anti-D) positiven Proben ausmachen.
Anti-RH2 (Anti-C), Anti-RH4 (Anti-c), Anti-RH3 (Anti-E)	≥ 100	≥ 1 000	≥ 200
Anti-RH5 (Anti-e)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti-KEL1 (Anti-K)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti-JK1 (Jka), Anti-JK2 (Jkb)	≥ 100	≥ 500	≥ 200
Anti-FY1 (Fya), Anti-FY2 (Fyb)	≥ 100	≥ 500	≥ 200

Anmerkung: Die für die Leistungsbewertung verwendeten positiven Proben sind so auszuwählen, dass sie auch eine abweichende und schwache Antigen-Expression widerspiegeln.

Tabelle 2. Vom Hersteller durchzuführende Prüfung der gleichbleibenden Qualität der Chargen für Reagenzien und Reagenzprodukte zur Bestimmung von Blutgruppenantigenen in den Blutgruppensystemen AB0, Rh, Kell, Duffy und Kidd

1.Testreagenzien

Blutgruppenreagenzien

Mindestanzahl der im Rahmen von Spezifitätstests zu testenden Kontrollzellen

Akzeptanzkriterien

Positive Reaktionen

Negative Reaktionen

Jede Charge eines Reagenzes muss im Einklang mit den Ergebnissen aus den Leistungsbewertungsdaten eindeutig positive oder negative Ergebnisse in allen vom Hersteller angegebenen Verfahren aufweisen.

A1

A2B

Ax

B

O

Anti-ABO1 (Anti-A)

2

2

2 I

2

2

B

A1B

A1

O

Anti-ABO2 (Anti-B)

2

2

2

2

A1

A2

Ax

B

O

Anti-ABO3 (Anti-A,B)

2

2

21

2

4

R1r

R2r

D schwach

r’r

r”r

rr

Anti-RH1 (Anti-D)

2

2

21

1

1

1

R1R2

R1r

r’r

R2R2

r”r

rr

Anti-RH2 (Anti-C)

2

1

1

1

1

1

R1R2

R1r

r’r

R1R1

Anti-RH4 (Anti-c)

1

2

1

3

R1R2

R2r

r”r

R1R1

r’r

rr

Anti-RH3 (Anti-E)

2

1

1

1

1

1

R1R2

R2r

r”r

R2R2

Anti-RH5 (Anti-e)

2

1

1

3

Kk

kk

Anti-KEL1 (Anti-K)

4

3

Jk(a+b+)

Jk(a−b+)

Anti-JK1 (Anti-Jka)

4

3

Jk(a+b+)

Jk(a+b−)

Anti-JK2 (Anti-Jkb)

4

3

Fy(a+b+)

Fy(a−b+)

Anti-FY1 (Anti-Fya)

4

3

Fy(a+b+)

Fy(a+b−)

Anti-FY2 (Anti-Fyb)

4

3

Anmerkung: Polyklonale Reagenzien sind an einem breiteren Zellpanel zu testen, um die Spezifität zu bestätigen und das Vorliegen einer unerwünschten Antikörperkontamination auszuschließen.

2.Kontrollmaterialien (Erythrozyten)

Der Phänotyp der Erythrozyten, die für die Kontrolle der vorstehenden Blutgruppenreagenzien verwendet werden, ist unter Verwendung eines etablierten Produkts (mehrerer etablierter Produkte) zu bestätigen.

ANHANG III

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM HUMANEN IMMUNSCHWÄCHEVIRUS (HIV)

Geltungsbereich

1. Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem humanen Immunschwächevirus (HIV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für HIV-1/2-Antikörper (Anti-HIV 1/2) sowie für erstmalige kombinierte Antigen-/Antikörpertests für HIV 1/2 (HIV 1/2 Ag/Ak), bei denen es sich nicht um Schnelltests handelt.
Tabelle 2 gilt für erstmalige Tests für Anti-HIV 1/2 und HIV 1/2 Ag/Ak, bei denen es sich um Schnelltests handelt.
Tabelle 3 gilt für Bestätigungstests für Anti-HIV 1/2.
Tabelle 4 gilt für Antigentests für HIV-1 sowie für HIV-Ag/Ak-Tests.

Tabelle 5 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für HIV-Ribonukleinsäure (ribonucleic acid, RNA).
Tabelle 6 gilt für HIV-1/2-Selbsttests.

Begriffsbestimmungen

2. Für die Zwecke dieses Anhangs gelten folgende Begriffsbestimmungen:

(1)„Probe der HIV-Serokonversion“ ist wie folgt definiert:

–p24-Antigen- und/oder HIV-RNA-positiv,

–von den erstmaligen Antikörper-Tests erkannt und

–Bestätigungstests mit positivem oder unbestimmtem Befund.

(2)„Probe der frühen HIV-Serokonversion“ ist wie folgt definiert:

–p24-Antigen- und/oder HIV-RNA-positiv,

–nicht von den erstmaligen Antikörper-Tests erkannt und

–Bestätigungstests mit negativem oder unbestimmtem Befund.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-HIV 1/2, HIV 1/2 Ag/Ak (Anforderungen an den Antikörpernachweis)

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 HIV-1 ≥ 100 HIV-2 darunter 40 Nicht-B-Subtypen darunter 25 positive frische Serumproben vom gleichen Tag (≤ 1 Tag nach Probenahme) Alle verfügbaren HIV/1-Subtypen müssen mit mindestens 3 Proben je Subtyp vertreten sein.	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	≥30 Panels Es müssen mindestens 40 Proben der frühen HIV-Serokonversion getestet werden.	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. Für alle Proben der HIV-Serokonversion muss ein positiver Befund angezeigt werden.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender) II	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, von verwandten Virusinfektionen, von Schwangeren, von Personen, die kürzlich gegen einen Infektionserreger geimpft wurden)

Tabelle 2. Schnelltests: Anti-HIV 1/2, HIV 1/2 Ag/Ak (Anforderungen an den Antikörpernachweis)

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 HIV-1 ≥ 100 HIV-2 darunter 40 Nicht-B-Subtypen Alle verfügbaren HIV/1-Subtypen müssen mit mindestens 3 Proben je Subtyp vertreten sein.	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	≥30 Panels Es müssen mindestens 40 Proben der frühen HIV-Serokonversion getestet werden.	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. Für alle Proben der HIV-Serokonversion muss ein positiver Befund angezeigt werden.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender)	≥ 1 000	≥ 99 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 200 Proben von Schwangeren ≥ insgesamt 100 weitere Proben mit möglicher Kreuzreaktion (z. B. RF+, von verwandten Infektionen)

Tabelle 3. Bestätigungstests: Anti-HIV 1/2

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 200 HIV-1 ≥ 100 HIV-2 darunter Proben aus verschiedenen Infektionsstadien und Proben, die verschiedene Antikörpermuster widerspiegeln	Bestimmung als „bestätigt positiv” oder „unbestimmt”, nicht als „negativ”
	Serokonversionspanels	≥ 15 Serokonversionspanels/Niedrigtiterpanels ≥ 40 Proben der frühen HIV-Serokonversion	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. Für alle Proben der HIV-Serokonversion muss ein positiver Befund angezeigt werden.
Diagnostische Spezifität	Blutspender	≥ 200	Keine falsch positiven Befunde/keine Neutralisierung
	Krankenhauspatienten	≥ 200
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 50 (darunter Proben von Schwangeren, Proben mit unbestimmten Befunden aus anderen Bestätigungstests)

Tabelle 4. Antigentests: HIV-1, HIV Ag/Ak (Anforderungen an den Antigennachweis

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 50 HIV-1-Antigen-positive Proben ≥ 50 Zellkulturüberstände, darunter auch verschiedene HIV-1-Subtypen und HIV-2	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden (gegebenenfalls nach Neutralisierung).
	Serokonversionspanels	≥ 20 Serokonversionspanels/Niedrigtiterpanels ≥ 40 Proben der frühen HIV-Serokonversion	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. Für alle Proben der HIV-Serokonversion muss ein positiver Befund angezeigt werden.
Analytische Sensitivität	Erstes Internationales Referenzreagenz HIV-1-p24-Antigen, NIBSC-Code: 90/636		≤ 2 IE/ml
Diagnostische Spezifität	Blutspender	≥ 200	≥ 99,5 % nach Neutralisierung oder, wenn kein Neutralisationstest vorliegt, nach Klärung des Probenstatus
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 50

Tabelle 5. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für HIV-RNA

1.Bei Produkten zur Amplifikation von Zielsequenzen entspricht eine Funktionskontrolle für jede Probe (interne Kontrolle) dem Stand der Technik. Bei dieser Kontrolle soll möglichst das ganze Verfahren, d. h. die Extraktion, Amplifikation/Hybridisierung und der Nachweis, überprüft werden.

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

4.Die Ergebnisse quantitativer NAT-Produkte müssen sich auf internationale Standards oder an ihnen kalibrierte Referenzmaterialien, sofern vorhanden, zurückführen lassen und in internationalen Einheiten ausgedrückt werden, die in dem speziellen Anwendungsbereich verwendet werden.

5.Qualitative HIV-NAT-Produkte zum Nachweis von HIV in Blut, Blutbestandteilen, Zellen, Geweben oder Organen oder in einem ihrer Derivate, um ihre Eignung für die Transfusion, Transplantation oder Zellgabe zu bewerten, sind für den Nachweis sowohl von HIV-1 als auch von HIV-2 auszulegen.

6.Qualitative HIV-NAT-Produkte, bei denen es sich nicht um Virustypisierungsprodukte handelt, sind so auszulegen, dass der potenzielle Ausfall einer HIV-1-NAT-Zielregion durch die Verwendung zweier unabhängiger Zielregionen kompensiert werden kann.

Leistungsmerkmal

Probe

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Internationaler Standard der WHO für HIV-1-RNA, Internationaler Standard der WHO für HIV-2-RNA oder daran kalibrierten Referenzmaterialien

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. III

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“.

Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

HIV-Geno-/Subtyp-Sensitivität

Alle relevanten Genotypen/Subtypen, vorzugsweise von internationalen Referenzmaterialien

Potenzieller Ersatz für seltene HIV-Subtypen (mit geeigneten Verfahren zu quantifizieren): Zellkulturüberstände, In-vitro-Transkripte, Plasmide

Qualitative NAT: mindestens 10 Proben/Genotyp oder Subtyp

Quantitative NAT: Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Sensitivität

Positive Proben, die die Routinebedingungen der Anwender widerspiegeln (z. B. keine Vorauswahl von Exemplaren)

Quantitative NAT: ≥ 100

Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen

Dem Stand der Technik entsprechend

Serokonversionspanels

Qualitative NAT: ≥10 Panels

Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Blutspenderproben

Qualitative NAT: ≥ 500

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ 10 Proben, die für humane Retroviren (z. B. HTLV) positiv sind

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch HIV-RNA-positiv;

HIV-RNA-negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Nachweis in Abhängigkeit vom Antikörperstatus

HIV-RNA-positive Proben: Anti-HIV-negativ, Anti-HIV-positiv

Proben vor der Serokonversion (Anti-HIV-negativ) und nach der Serokonversion (Anti-HIV-positiv)

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

Schwach HIV-RNA-positiv

≥ 100 schwach HIV-RNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

Tabelle 6. Zusätzliche Anforderungen an HIV-1/2-Selbsttests

Leistungsmerkmal	Proben IV	Zahl der Laien
Ergebnisauswertung V	Auswertung der Ergebnisse VI durch Laien unter Berücksichtigung folgender Reaktivitätswerte: ·nicht reaktiv ·reaktiv ·schwach reaktiv VII ·ungültig	≥ 100
Diagnostische Sensitivität	Bekannt positiv getestete Laien	≥ 200
Diagnostische Spezifität	Laien, die ihren Status nicht kennen	≥ 400
	Laien, die einem hohen Infektionsrisiko ausgesetzt sind	≥ 200

ANHANG IV

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM HUMANEN T-ZELL-LEUKÄMIE-VIRUS (HTLV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem humanen T-Zell-Leukämie-Virus (HTLV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für Antikörper gegen HTLV I oder II (Anti-HTLV I/II), bei denen es sich nicht um Schnelltests handelt.

Tabelle 2 gilt für erstmalige Tests für Anti-HTLV I/II, bei denen es sich um Schnelltests handelt.

Tabelle 3 gilt für Bestätigungstests für Anti-HTLV I/II.

Tabelle 4 gilt für NAT-Produkte für Anti-HTLV I/II.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-HTLV I/II

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien

Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 300 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II darunter 25 positive frische Serumproben vom gleichen Tag (≤ 1 Tag nach Probenahme)	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	Festzulegen, wenn verfügbar	Gegebenenfalls muss die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion dem Stand der Technik entsprechen.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender) VIII	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, von verwandten Virusinfektionen, von Schwangeren)

Tabelle 2. Schnelltests: Anti-HTLV I/II

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 300 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	Festzulegen, wenn verfügbar	Gegebenenfalls muss die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion dem Stand der Technik entsprechen.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender)	≥ 1 000	≥ 99 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 200 Proben von Schwangeren ≥ insgesamt 100 weitere Proben mit möglicher Kreuzreaktion (z. B. RF+, von verwandten Infektionen)

Tabelle 3. Bestätigungstests: Anti-HTLV I/II

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 200 HTLV-I ≥ 100 HTLV-II	Bestimmung als „bestätigt positiv” oder „unbestimmt”, nicht als „negativ”
	Serokonversionspanels	Festzulegen, wenn verfügbar	Gegebenenfalls muss die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion dem Stand der Technik entsprechen.
Diagnostische Spezifität	Blutspender	≥ 200	Keine falsch positiven Befunde
	Krankenhauspatienten	≥ 200
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 50 (darunter Proben von Schwangeren, Proben mit unbestimmten Befunden aus anderen Bestätigungstests)

Tabelle 4. NAT-Produkte für HTLV I/II

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Probe

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Internationale Referenzpräparate

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. IX

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“.

Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

HTLV-I- und HTLV-II-Genotyp-Sensitivität

Alle relevanten Genotypen, vorzugsweise von internationalen Referenzmaterialien

Potenzieller Ersatz für seltene HTLV-Genotypen (mit geeigneten Verfahren zu quantifizieren): Zellkulturüberstände, In-vitro-Transkripte, Plasmide

Qualitative NAT: mindestens 10 Proben/Genotyp oder Subtyp

Quantitative NAT: Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Blutspenderproben

Qualitative NAT: ≥ 500

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ 10 Proben, die für humane Retroviren (z. B. HIV-1, HIV-2) positiv sind

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch HTLV-RNA-positiv;

HTLV-RNA-negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Nachweis in Abhängigkeit vom Antikörperstatus

HTLV-RNA-positive Proben: Anti-HTLV-negativ, Anti-HTLV-positiv

Proben vor der Serokonversion (Anti-HTLV-negativ) und nach der Serokonversion (Anti-HTLV-positiv)

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

Schwach HTLV-RNA-positiv

≥ 100 schwach HTLV-RNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

ANHANG V

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM HEPATITIS-C-VIRUS (HCV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem Hepatitis-C-Virus (HCV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für HCV-Antikörper (Anti-HCV) sowie für kombinierte Antigen-/Antikörpertests für HCV (HCV Ag/Ak), bei denen es sich nicht um Schnelltests handelt.
Tabelle 2 gilt für erstmalige Tests für Anti-HCV und HCV Ag/Ak, bei denen es sich um Schnelltests handelt.
Tabelle 3 gilt für Bestätigungs- und Ergänzungstests für Anti-HCV.
Tabelle 4 gilt für Antigentests für HCV sowie für HCV-Ag/Ak-Tests.

Tabelle 5 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für HCV-RNA.
Tabelle 6 gilt für HCV-Selbsttests.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-HCV, HCV Ag/Ak (Anforderungen an den Antikörpernachweis)

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 darunter Proben aus verschiedenen Infektionsstadien und Proben, die verschiedene Antikörpermuster widerspiegeln HCV-Genotypen 1–4: > 20 Proben je Genotyp (einschließlich nicht-A-Subtypen von Genotyp 4); HCV-Genotypen 5 und 6: jeweils > 5 Proben; darunter 25 positive frische Serumproben vom gleichen Tag (≤ 1 Tag nach Probenahme)	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	≥30 Panels Die HCV-Serokonversionspanels zur Erprobung von kombinierten HCV-Antigen/Antikörper-Tests (HCV Ag/Ak) müssen mit einer oder mehreren negativen Blutproben beginnen und Proben der frühen HCV-Infektion umfassen (HCV-Kernantigen und/oder HCV-RNA-positiv, aber Anti-HCV-negativ).	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. HCV-Ag/Ak-Tests müssen gegenüber „reinen“ HCV-Antikörper-Tests eine erhöhte Sensitivität im Frühstadium der HCV-Infektion aufweisen.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender) X	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, von verwandten Virusinfektionen, von Schwangeren)

Tabelle 2. Schnelltests: Anti-HCV, HCV Ag/Ak (Anforderungen an den Antikörpernachweis)

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 darunter Proben aus verschiedenen Infektionsstadien und Proben, die verschiedene Antikörpermuster widerspiegeln HCV-Genotypen 1–4: > 20 Proben je Genotyp (einschließlich nicht-A-Subtypen von Genotyp 4); HCV-Genotypen 5 und 6: jeweils > 5 Proben;	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	≥30 Panels Die HCV-Serokonversionspanels zur Erprobung von kombinierten HCV-Antigen/Antikörper-Tests (HCV Ag/Ak) müssen mit einer oder mehreren negativen Blutproben beginnen und Proben der frühen HCV-Infektion umfassen (HCV-Kernantigen und/oder HCV-RNA-positiv, aber Anti-HCV-negativ).	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. HCV-Ag/Ak-Tests müssen gegenüber „reinen“ HCV-Antikörper-Tests eine erhöhte Sensitivität im Frühstadium der HCV-Infektion aufweisen.
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender)1	≥ 1 000	≥ 99 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 200 Proben von Schwangeren ≥ insgesamt 100 weitere Proben mit möglicher Kreuzreaktion (z. B. RF+, von verwandten Infektionen)

Tabelle 3. Bestätigungs- und Ergänzungstests: Anti-HCVAnti-HCV

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 300 darunter Proben aus verschiedenen Infektionsstadien und Proben, die verschiedene Antikörpermuster widerspiegeln HCV-Genotypen 1–4: > 20 Proben (einschließlich Nicht-A-Subtypen von Genotyp 4); HCV-Genotyp 5: > 5 Proben; HCV-Genotyp 5: Sofern vorhanden	Bestimmung als „bestätigt positiv” oder „unbestimmt”, nicht als „negativ”
	Serokonversionspanels	≥ 15 Serokonversionspanels/Niedrigtiterpanels	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.
Diagnostische Spezifität	Blutspender	≥ 200	Keine falsch positiven Befunde/keine Neutralisierung
	Krankenhauspatienten	≥ 200
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 50 (darunter Proben von Schwangeren, Proben mit unbestimmten Befunden aus anderen Bestätigungstests)

Tabelle 4. Antigentests: HCV-Antigen, HCV Ag/Ak (Anforderung an den Antigennachweis)

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 25 HCV-Kernantigen- und/oder HCV-RNA-positive aber Anti-HCV-negative Proben, einschließlich HCV-Genotypen 1–6 (sofern ein Genotyp nicht verfügbar ist, ist eine Begründung zu liefern)	Für alle echt positiven Proben muss ein positiver Befund angezeigt werden.
	Serokonversionspanels	≥ 20 Serokonversionspanels/Niedrigtiterpanels Die HCV-Serokonversionspanels zur Erprobung von kombinierten HCV-Antigen/Antikörper-Tests müssen mit einer oder mehreren negativen Blutproben beginnen und Proben der frühen HCV-Infektion umfassen (HCV-Kernantigen und/oder HCV-RNA-positiv, aber Anti-HCV-negativ).	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen. Kombinierte HCV-Antigen/Antikörper-Tests müssen gegenüber „reinen“ HCV-Antikörper-Tests eine erhöhte Sensitivität im Frühstadium der HCV-Infektion aufweisen.
Analytische Sensitivität	Internationaler HCV-Kernantigen-Standard der WHO (PEI 129096/12)	Verdünnungsreihen
Diagnostische Spezifität	Blutspender	≥ 200	≥ 99,5 % nach Neutralisierung oder, wenn kein Neutralisationstest vorliegt, nach Klärung des Probenstatus
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 50

Tabelle 5. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für HCV-RNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Analytische Sensitivität	Internationaler Standard der WHO für HCV-RNA (oder daran kalibrierte Referenzmaterialien)	Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt. Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. XI Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit, „linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“. Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen	Dem Stand der Technik entsprechend
HCV-Genotyp-Sensitivität	Alle relevanten Genotypen/Subtypen, vorzugsweise von internationalen Referenzmaterialien Potenzieller Ersatz für seltene HCV-Genotypen (mit geeigneten Verfahren zu quantifizieren): In-vitro-Transkripte, Plasmide	Qualitative NAT: ≥ 10 Proben/Genotyp oder Subtyp Quantitative NAT: Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung	Dem Stand der Technik entsprechend
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben, die die Routinebedingungen der Anwender widerspiegeln (z. B. keine Vorauswahl von Exemplaren)	Quantitative NAT: ≥ 100 Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen	Dem Stand der Technik entsprechend
	Serokonversionspanels	Qualitative NAT: ≥10 Panels Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen	Dem Stand der Technik entsprechend
Diagnostische Spezifität	Blutspenderproben	Qualitative NAT: ≥ 500 Quantitative NAT: ≥ 100	Dem Stand der Technik entsprechend
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	> 10 Proben, die für humane Flaviviren (z. B. HGV, YFV) positiv sind	Dem Stand der Technik entsprechend
Verschleppungen	Hoch HCV-RNA-positiv; HCV-RNA-negativ	Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.	Dem Stand der Technik entsprechend
Nachweis in Abhängigkeit vom Antikörperstatus	HCV-RNA-positive Proben: Anti-HCV-negativ, Anti-HCV-positiv	Proben vor der Serokonversion (Anti-HCV-negativ) und nach der Serokonversion (Anti-HCV-positiv)	Dem Stand der Technik entsprechend
Fehlerrate des Gesamtsystems	HCV-RNA schwach positiv	≥ 100 schwach HCV-RNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.	≥ 99 % positiv

Tabelle 6. Zusätzliche Anforderungen an HCV-Selbsttests

Leistungsmerkmal	Proben XII	Zahl der Laien
Ergebnisauswertung XIII	Auswertung der Ergebnisse XIV durch Laien unter Berücksichtigung folgender Reaktivitätswerte: ·nicht reaktiv ·reaktiv ·schwach reaktiv XV ·ungültig	≥ 100
Diagnostische Sensitivität	Bekannt positiv getestete Laien	≥ 200
Diagnostische Spezifität	Laien, die ihren Status nicht kennen	≥ 400
	Laien, die einem hohen Infektionsrisiko ausgesetzt sind	≥ 200

ANHANG VI

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM HEPATITIS-B-VIRUS (HBV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem Hepatitis-B-Virus (HBV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für das Hepatitis-B-Oberflächenantigen (HBsAg) und für Antikörper gegen das Hepatitis-B-Kernantigen (Anti-HBc), bei denen es sich nicht um Schnelltests handelt.
Tabelle 2 gilt für erstmalige Tests für HBsAg und Anti-HBc, bei denen es sich um Schnelltests handelt.
Tabelle 3 gilt für Bestätigungstests für HBsAg.
Tabelle 4 gilt für Tests für Hepatitis-B-Virusmarker: Hepatitis-B-Oberflächen-Antikörper (Anti-HBs), IgM-Antikörper gegen das Hepatitis-B-Kernantigen (Anti-HBc IgM), Antikörper gegen das Hepatitis-Be-Antigen (Anti-HBe) und Hepatitis-Be-Antigen (HBeAg).

Tabelle 5 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für HBV-Desoxyribonukleinsäure (deoxyribonucleic acid, DNA).

Tabelle 6 gilt für HBV-Selbsttests.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: HBsAg, Anti-HBc

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 Anti-HBc-Tests: einschließlich Bewertung anderer HBV-Marker HBsAg-Tests: einschließlich unterschiedlicher HBV-Genotypen/-Subtypen/-Mutanten Anti-HBc oder HBsAg: darunter 25 positive frische Serumproben vom gleichen Tag (≤ 1 Tag nach Probenahme)	Die Gesamtleistung muss der des Vergleichsprodukts zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	HBsAg-Tests: ≥30 Panels Anti-HBc-Tests: festzulegen, wenn verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen (dies ist gegebenenfalls bei Anti-HBc der Fall).
Analytische Sensitivität	Dritter internationaler Standard der WHO für HBsAg (Subtypen ayw1/adw2, HBV-Genotyp B4, NIBSC-Code: 12/226)		Für HBsAg-Tests: < 0,130 IE/ml
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender) XVI	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, von verwandten Virusinfektionen, von Schwangeren)

Tabelle 2. Schnelltests: HBsAg, Anti-HBc

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 einschließlich Bewertung anderer HBV-Marker einschließlich unterschiedlicher HBV-Genotypen/-Subtypen/-Mutanten	Die Gesamtleistung muss der des Vergleichsprodukts zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	HBsAg-Tests: ≥30 Panels Anti-HBc-Tests: festzulegen, wenn verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen (dies ist gegebenenfalls bei Anti-HBc der Fall).
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender)	≥ 1 000	HBsAg-Tests: ≥ 99 % Anti-HBc-Tests: ≥ 99 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 200 Proben von Schwangeren ≥ insgesamt 100 weitere Proben mit möglicher Kreuzreaktion (z. B. RF+, von verwandten Infektionen)

Tabelle 3. Bestätigungstests: HBsAg

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 300 darunter Proben aus verschiedenen Infektionsstadien darunter 20 „hoch positive“ Proben (> 26 IE/ml) 20 Proben im Cut-Off-Bereich	Korrekte Bestimmung als positiv (oder unbestimmt), nicht negativ
	Serokonversionspanels	≥ 15 Serokonversionspanels/Niedrigtiterpanels	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.
Analytische Sensitivität	Dritter internationaler Standard der WHO für HBsAg, Subtypen ayw1/adw2, HBV-Genotyp B4, NIBSC-Code: 12/226
Diagnostische Spezifität	Negative Proben	≥ 10 falsch positive Befunde aus der Leistungsbewertung des erstmaligen Tests	Keine falsch positiven Befunde/keine Neutralisierung
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 50

Tabelle 4. Tests für HBV-Marker: Anti-HBs, Anti-HBc IgM, Anti-HBe, HBeAg

Leistungsmerkmal		Anti-HBs	Anti-HBc IgM	Anti-HBe	HBeAg	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 100 Impflinge ≥ 100 natürlich infizierte Personen	≥ 200 darunter auch Proben aus verschiedenen Infektionsstadien (akut/chronisch usw.)	≥ 200 darunter auch Proben aus verschiedenen Infektionsstadien (akut/chronisch usw.)	≥ 200 darunter auch Proben aus verschiedenen Infektionsstadien (akut/chronisch usw.)	≥ 98 % (für Anti-HBc IgM: anwendbar nur auf Proben aus dem akuten Infektionsstadium)
	Serokonversionspanels	10 Anti-HBs-Serokonversionspanels oder Folgereihen	Sofern verfügbar	Sofern verfügbar	Sofern verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen (dies ist gegebenenfalls bei Anti-HBc IgM, Anti-HBe und HBeAg der Fall).
Analytische Sensitivität	Standards	Zweiter internationaler Standard der WHO für Anti-Hepatitis-B-Oberflächen-antigenes (Anti-HBs) humanes Immunglobulin, NIBSC-Code: 07/164		Erster internationaler Standard der WHO für Anti‑Hepatitis-B-Virus-e-Antigen (Anti‑HBe), PEI-Code 129095/12	Erster internationaler Standard der WHO für Hepatitis-B-Virus-e-Antigen (HBeAg), PEI-Code 129097/12 HBe	Anti-HBs: < 10 mIE/ml
Diagnostische Spezifität	Negative Proben	≥ 500 darunter auch klinische Proben ≥ 50 potenziell störende Proben	≥ 200 Blutspenden ≥ 200 klinische Proben ≥ 50 potenziell störende Proben	≥ 200 Blutspenden ≥ 200 klinische Proben ≥ 50 potenziell störende Proben	≥ 200 Blutspenden ≥ 200 klinische Proben ≥ 50 potenziell störende Proben	≥ 98 %

Tabelle 5. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für HBV-DNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Probe

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Internationaler Standard der WHO für HBV-DNA (oder daran kalibrierte Referenzmaterialien)

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. XVII

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“. Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

HBV-Genotyp-Sensitivität

Internationales Referenzpanel der WHO für HBV-DNA (HBV-Genotypen)

Alle relevanten Genotypen/Subtypen, vorzugsweise von internationalen Referenzmaterialien

Potenzieller Ersatz für seltene HBV-Genotypen (mit geeigneten Verfahren zu quantifizieren): Plasmide, synthetische DNA

Qualitative NAT: mindestens 10 Proben/Genotyp oder Subtyp

Quantitative NAT: Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Sensitivität

Positive Proben, die die Routinebedingungen der Anwender widerspiegeln (keine Vorauswahl von Exemplaren)

Quantitative NAT: ≥ 100

Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen

Dem Stand der Technik entsprechend

Serokonversionspanels

Qualitative NAT: ≥10 Panels

Parallel sind Vergleichsdaten von anderen NAT-Systemen zu erzeugen

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Blutspenderproben

Qualitative NAT: ≥ 500

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch HBV-DNA-positiv;

HBV-DNA-negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Nachweis in Abhängigkeit vom Antikörperstatus

HBV-DNA-positive Proben: Anti-HBV-negativ, Anti-HBV-positiv

Proben vor der Serokonversion (Anti-HBV-negativ) und nach der Serokonversion (Anti-HBV-positiv)

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

HBV-DNA schwach positiv

≥ 100 schwach HBV-DNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

Tabelle 6. Zusätzliche Anforderungen an HBV-Selbsttests

Leistungsmerkmal	Proben XVIII	Zahl der Laien
Ergebnisauswertung XIX	Auswertung der Ergebnisse XX durch Laien unter Berücksichtigung folgender Reaktivitätswerte: ·nicht reaktiv ·reaktiv ·schwach reaktiv XXI ·ungültig	≥ 100
Diagnostische Sensitivität	Bekannt positiv getestete Laien	≥ 200
Diagnostische Spezifität	Laien, die ihren Status nicht kennen	≥ 400
	Laien, die einem hohen Infektionsrisiko ausgesetzt sind	≥ 200

ANHANG VII

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM HEPATITIS-D-VIRUS (HDV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem Hepatitis-D-Virus (HDV).

Tabelle 1 gilt für Produkte zum Nachweis (und zur Bestätigung) oder zur Quantifizierung der folgenden Marker für das Hepatitis-D-Virus: Antikörper gegen das Hepatitis-D-Virus (Anti-HDV), IgM-Antikörper gegen das Hepatitis-D-Virus (Anti-HDV IgM), das Delta-Antigen.

Tabelle 2 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für HDV-RNA.

Tabelle 1. Tests für HDV-Marker: Anti-HDV, Anti-HDV IgM, Delta-Antigen

Leistungsmerkmal

Anti-HDV

Anti-HDV IgM

Delta-Antigen

Akzeptanzkriterien

Diagnostische Sensitivität

Positive Proben

≥ 100

Spezifizierung der Marker für eine HBV-Koinfektion

≥ 50

Spezifizierung der Marker für eine HBV-Koinfektion

≥ 10

Spezifizierung der Marker für eine HBV-Koinfektion

≥ 98 %

Diagnostische Spezifität

Negative Proben

≥ 200

darunter auch klinische Proben

≥ 50 potenziell störende Proben

≥ 200

darunter auch klinische Proben

≥ 50 potenziell störende Proben

≥ 200

darunter auch klinische Proben

≥ 50 potenziell störende Proben

≥ 98 %

Tabelle 2. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für HDV-RNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Probe

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Erster internationaler Standard der WHO für HDV-RNA, PEI-Code 7657/12

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. XXII

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“. Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

HDV-Genotyp-Sensitivität

Alle relevanten Genotypen/Subtypen, vorzugsweise von internationalen Referenzmaterialien

Potenzieller Ersatz für seltene HDV-Genotypen (mit geeigneten Verfahren zu quantifizieren): Plasmide, synthetische RNA

Quantitative NAT: Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Blutspenderproben

Qualitative NAT: ≥ 100

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch HDV-RNA-positiv;

HDV-RNA-negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

HDV-RNA schwach positiv

≥ 100 schwach HDV-RNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

ANHANG VIII

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS VON MARKERN FÜR DIE VARIANTE DER CREUTZFELDT-JACOB-KRANKHEIT (vCJK)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis von Markern für die Variante der Creutzfeldt-Jakob-Krankheit (vCJK).

Tabelle 1 gilt für Produkte zum Nachweis von Markern für vCJK.

Tabelle 1. Produkte zum Nachweis von Markern für vCJK

Leistungsmerkmal	Material	Zahl der Proben	Akzeptanzkriterien
Analytische Sensitivität	Verdünnungen von vCJK-positivem Gehirnmaterial in Humanplasma (WHO-Bezugsnr. NHBY0/0003)	≥ 24 Replikate von je drei Verdünnungen des Materials mit der WHO-Nr. NHBY0/0003 (1×104, 1×105, 1×106)	Nachweis in 23 der 24 Replikate mit der Verdünnung 1×104
	Verdünnungen von vCJK-positivem Milzmaterial in Humanplasma (10 % Milzhomogenat – NIBSC-Bezugsnr. NHSY0/0009)	≥ 24 Replikate von je drei Verdünnungen des Materials mit der NIBSC-Nr. NHSY0/0009 (1×10, 1×102, 1×103)	Nachweis in 23 der 24 Replikate mit der Verdünnung 1×10
Diagnostische Sensitivität	Proben aus geeigneten Tiermodellen	Höchstmögliche verfügbare Probenzahl, ≥ 10 Proben	90 %
	Proben von Menschen mit bekannter klinischer vCJK	Höchstmögliche verfügbare Probenzahl, ≥ 10 Proben	90 %
		Nur falls keine 10 Proben verfügbar sind: – 6–9 getestete Proben – Test aller verfügbaren Proben	max. ein falsch negatives Ergebnis
Analytische Spezifität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ 100
Diagnostische Spezifität	Normale Humanplasmaproben aus einem Gebiet mit geringer Exposition gegenüber der bovinen spongiformen Enzephalopathie (BSE)	≥ 5 000	≥ 99,5 %

ANHANG IX

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM ZYTOMEGALOVIRUS (CMV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem Zytomegalovirus (CMV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für Gesamtantikörper gegen CMV (Gesamt-Anti-CMV) und IgG-Antikörper gegen CMV (Anti-CMV IgG).

Tabelle 2 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für CMV-DNA.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Gesamt-Anti-CMV und Anti-CMV IgG

Leistungsmerkmal	Proben	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 darunter Proben von aktuellen und früheren CMV-Infektionen, Proben mit niedrigem und hoch positivem Titer	≥ 99 % Sensitivität für nachweisbare frühere Infektionen; XXIII die Gesamtsensitivität einschließlich der aktuellen Infektion XXIV muss der des Vergleichsprodukts zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	Zu testen, wenn verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.
Analytische Sensitivität	Standards	Internationaler Standard der WHO für Anti-CMV IgG (PEI-Code 136616/17) Bei Titer-Bestimmungen und quantitativen Angaben
Diagnostische Spezifität	Negative Proben	≥ 400 XXV CMV-negative Proben von nicht selektierten Spendern im Vergleich zu einem anderen CMV-Test.	≥ 99 %
	Krankenhauspatienten XXVI	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion XXVII	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, verwandte Viren oder sonstige Infektionserreger, Schwangere usw.)

Tabelle 2. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für CMV-DNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Erster internationaler Standard der WHO für humane CMV-DNA (NIBSC-Code: 09/162; 5 000 000 IE/Ampulle) (oder daran kalibrierte Referenzmaterialien)

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. XXVIII

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“.

Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Sensitivität

CMV-Stamm-Sensitivität

Patientenproben, die mit dem Vergleichsprodukt als CMV-DNA-positiv bestimmt wurden

Verdünnungsreihen von CMV-positiven Zellkulturen können als möglicher Ersatz dienen

Qualitative NAT: ≥ 100

Quantitative NAT: ≥ 100

Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Blutspenderproben

Qualitative NAT: ≥ 500

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ insgesamt 20

Darunter Proben menschlichen Ursprungs, die für verwandte humane Herpesviren, z. B. EBV, HHV6, VZV, positiv sind

Zellkulturen, die für das Herpesvirus positiv sind, können als möglicher Ersatz dienen

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch CMV-DNA-positiv;

CMV-DNA-negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

CMV-DNA schwach positiv

≥ 100 schwach CMV-DNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

ANHANG X

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM EPSTEIN-BARR VIRUS (EBV)

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für IgG-Antikörper gegen das EBV-Virus-Capsid-Antigen (Anti-EBV VCA IgG).

Tabelle 2 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für EBV-DNA.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-EBV VCA IgG

Leistungsmerkmal	Proben	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 darunter Proben von aktuellen und früheren EBV-Infektionen, Proben mit niedrigem und hoch positivem Titer	≥ 99 % für nachweisbare frühere Infektionen; XXIX die Gesamtsensitivität einschließlich der aktuellen Infektion XXX muss der des Vergleichsprodukts zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	Zu testen, wenn verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.
Analytische Sensitivität	Standards	Internationale Referenzreagenzien, sofern verfügbar
Diagnostische Spezifität	Negative Proben	≥ 200 XXXI EBV-negative Proben von nicht selektierten Spendern im Vergleich zu einem anderen EBV-Produkt.	≥ 99 %
	Krankenhauspatienten XXXII	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 (z. B. RF+, verwandte Viren oder sonstige Infektionserreger, Schwangere usw.)

Tabelle 2. Qualitative und quantitative NAT-Produkte für EBV-DNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Erster internationaler Standard der WHO für humane EBV-DNA (09/260; 5 000 000 IE/Ampulle) (oder daran kalibrierte Referenzmaterialien)

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. XXXIII

Quantitative NAT: Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Präzision, Genauigkeit,

„linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“.

Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Sensitivität

EBV-Stamm-Sensitivität

Patientenproben, die mit dem Vergleichsprodukt als EBV-DNA-positiv bestimmt wurden

Verdünnungsreihen von EBV-positiven Zellkulturen können als möglicher Ersatz dienen

Qualitative NAT: ≥ 100

Quantitative NAT: ≥ 100

Verdünnungsreihen zum Nachweis der Effizienz der quantitativen Bestimmung

Diagnostische Spezifität

Negative Proben

Qualitative NAT: ≥ 500

Quantitative NAT: ≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ insgesamt 20

Darunter Proben menschlichen Ursprungs, die für verwandte humane Herpesviren, z. B. CMV, HHV6, VZV, positiv sind

Zellkulturen, die für das Herpesvirus positiv sind, können als möglicher Ersatz dienen

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Hoch EBV-DNA-positiv;

EBV-DNA negativ

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

EBV-DNA schwach positiv

≥ 100 schwach EBV-DNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine Viruskonzentration enthalten, die dem Dreifachen der Viruskonzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

ANHANG XI

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT TREPONEMA PALLIDUM

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis von Markern für Treponema pallidum (T. pallidum).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für Antikörper gegen T. pallidum (Anti-T.-pallidum).

Tabelle 2 gilt für Bestätigungs- und Ergänzungstests für Anti-T.-pallidum.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-T.-pallidum

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Diagnostische

Sensitivität

Positive Proben

≥ insgesamt 200 positive Proben,

in verschiedenen Infektionsstadien, sofern verfügbar,

einschließlich hoch positive und schwach positive Proben,

durch mindestens zwei verschiedene serologische Tests (von denen einer ein Enzym-Immuntest ist) für verschiedene Antikörper gegen T. pallidum als positiv bestimmt

≥ 99,5 % Gesamtsensitivität

Serokonversionspanels

Mindestens 1 Serokonversionspanel, wenn möglich ≥ 1, einschließlich einzelner Proben aus der frühen Infektionsphase

Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.

Analytische

Sensitivität

Standards

Internationale Standards der WHO

NIBSC-Code 05/132, soweit verfügbar

Diagnostische Spezifität

Nicht selektierte Blutspender (einschließlich Erstspender) XXXIV

≥ 5 000

≥ 99,5 %

Krankenhauspatienten

≥ 200

Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ insgesamt 100

darunter die folgenden Proben: positiv für Borrelia burgdorferi sensu lato, bestätigt durch IgG-Immunoblot; Anti-HIV-positiv RF+; andere verwandte mikrobielle/infektiöse Erreger; Patienten mit systemischem Lupus erythematodes (SLE); Antiphospholipid-Antikörper-positiv; Schwangere usw.

Tabelle 2. Bestätigungs- und Ergänzungstests: Anti-T.-pallidum

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Diagnostische

Sensitivität

Positive Proben

≥ 300 positive Proben in verschiedenen Infektionsstadien (primäre Syphilis, sekundäre Syphilis Spätsyphilis), darunter hoch positive Proben, 50 schwach positive Proben,

durch mindestens zwei verschiedene serologische Tests (von denen einer ein Enzym-Immuntest ist) für verschiedene Antikörper gegen T. pallidum

99 % Bestimmung als „bestätigt positiv“ oder „unbestimmt“

Serokonversionspanels

Mindestens 1 Serokonversionspanel, wenn möglich ≥ 1, einschließlich einzelner Proben aus der frühen Infektionsphase

Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.

Analytische

Sensitivität

Standards

Internationale Standards der WHO

NIBSC-Code 05/132

Diagnostische

Spezifizität

Blutspender

≥ 200

≥ 99 %;

Klinische Proben:

≥ 200

Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ insgesamt 50 (darunter Proben von Schwangeren, Proben mit unbestimmten Befunden aus anderen Bestätigungstests)

ANHANG XII

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT TRYPANOSOMA CRUZI

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit Trypanosoma Cruzi (T. cruzi).

Tabelle 1 gilt für erstmalige Tests für Antikörper gegen T. cruzi (Anti-T.-cruzi).

Tabelle 2 gilt für Bestätigungs- und Ergänzungstests für Anti-T.-cruzi.

Tabelle 3 gilt für qualitative und quantitative NAT-Produkte für T.-cruzi-DNA.

Tabelle 1. Erstmalige Tests: Anti-T.-cruzi

Leistungsmerkmal	Proben	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 positive Proben, darunter hoch positive Proben, die durch mindestens zwei verschiedene serologische Tests für verschiedene Antikörper gegen T. cruzi bestätigt wurden. Davon ≥ 25 Proben, die für Parasiten positiv sind, wie durch direkten Nachweis bestätigt.	99,5 % Gesamtsensitivität
	Serokonversionspanels	Festzulegen, wenn verfügbar	Die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion muss dem Stand der Technik entsprechen.
Analytische Sensitivität	Standards	Internationale Standards der WHO NIBSC-Code: 09/186 NIBSC-Code: 09/188
Diagnostische Spezifität	Nicht selektierte Spender (einschließlich Erstspender) XXXV	≥ 5 000	≥ 99,5 %
	Krankenhauspatienten	≥ 200	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 darunter die folgenden Proben: positiv für Anti-Toxoplasma-gondii, mindestens 5 Proben positiv für Anti-Leishmania; RF+; verwandte mikrobielle oder andere infektiöse Erreger; SLE-Patienten; Antiphospholipid-Antikörper-positive Patienten; Schwangere usw.

Tabelle 2. Bestätigungs- und Ergänzungstests: Anti-T.-cruzi

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Diagnostische

Sensitivität

Positive Proben

≥ 300 positive Proben, darunter hoch positive Proben, die durch mindestens zwei verschiedene serologische Tests für verschiedene Antikörper gegen T. cruzi bestätigt wurden.

Davon ≥ 25 Proben, die für Parasiten positiv sind, wie durch direkten Nachweis bestätigt.

≥ 99 % Bestimmung als „bestätigt positiv“ oder „unbestimmt“

Serokonversionspanels

Je nach Verfügbarkeit

Gegebenenfalls muss die diagnostische Sensitivität während der Serokonversion dem Stand der Technik entsprechen.

Analytische

Sensitivität

Standards

Internationale Standards der WHO

NIBSC-Code: 09/186

NIBSC-Code: 09/188

Diagnostische

Spezifizität

Negative Proben

≥ 200

≥ 99 %

Klinische Proben:

≥ 200

Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ insgesamt 50 (darunter Proben von Schwangeren, Proben mit unbestimmten Befunden aus anderen Bestätigungstests)

Tabelle 3. NAT-Produkte für T.-cruzi-DNA

2.Die Genotyp- und/oder Subtyperkennung ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung nachzuweisen und durch Testen genotypisierter Bezugsproben zu validieren.

3.Die potenzielle Kreuzreaktivität von Nicht-Ziel-Nukleinsäuresequenzen ist durch geeignete Primer- oder Sondenauslegung zu analysieren und durch Testen ausgewählter Proben zu validieren.

Leistungsmerkmal

Proben

Probenzahl, Merkmale, Verwendung

Akzeptanzkriterien

Analytische Sensitivität

Charakterisiertes hausinternes Referenzpräparat (sofern keine internationalen Referenzmaterialien verfügbar sind)

Die NAT-Sensitivität und die NAT-Nachweisgrenze sind durch Verdünnungsreihen von Referenzmaterialien zu validieren, wobei Replikate (mindestens 24) bei unterschiedlichen Analytenkonzentrationen zu testen sind, einschließlich derjenigen mit einem Übergang von positiven zu negativen Ergebnissen im jeweiligen NAT-Produkt.

Die Nachweisgrenze wird als 95 % positiver Cut-off-Wert (IE/ml) nach statistischer Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgedrückt. 3

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Sensitivität: verschiedene T.-cruzi-Stämme/Isolate

Patientenproben aus verschiedenen Regionen, die mit dem Vergleichsprodukt als T.-cruzi-DNA-positiv bestimmt wurden; Sequenzvarianten

≥ 100

Verdünnungsreihen von T.-cruzi-positiven Zellkulturen (Isolaten) oder T.-cruzi-positiven Materialien aus Tiermodellen können als möglicher Ersatz dienen

Dem Stand der Technik entsprechend

Diagnostische Spezifität

Negative Proben

≥ 100

Dem Stand der Technik entsprechend

Kreuzreaktivität

Proben mit möglicher Kreuzreaktion

≥ 10 Proben menschlichen Ursprungs, die für andere Parasiten, z. B. Plasmodium-Arten, Trypanosoma brucei, positiv sind. Positive Zellkulturen können als möglicher Ersatz dienen

Dem Stand der Technik entsprechend

Verschleppungen

Es sind mindestens fünf Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben während der Robustheitsprüfung durchzuführen. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe T.-cruzi-Titer sein.

Dem Stand der Technik entsprechend

Fehlerrate des Gesamtsystems

≥ 100 schwach T.-cruzi-DNA-positive Proben sind zu testen. Diese Proben müssen eine T.-cruzi-Konzentration enthalten, die dem Dreifachen der T.-cruzi-Konzentration des 95 % positiven Cut-Off-Wertes entspricht.

≥ 99 % positiv

ANHANG XIII

GEMEINSAME SPEZIFIKATIONEN FÜR PRODUKTE ZUM NACHWEIS ODER ZUR QUANTIFIZIERUNG VON MARKERN FÜR EINE INFEKTION MIT DEM SCHWEREN AKUTEN ATEMWEGSSYNDROM CORONAVIRUS 2

Geltungsbereich

Dieser Anhang gilt für Produkte zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Markern für eine Infektion mit dem schweren akuten Atemwegssyndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2).

Tabelle 1 gilt für die folgenden erstmaligen Tests (einschließlich Schnelltests) für Antikörper gegen SARS-CoV-2 (Anti-SARS-CoV-2): Gesamtantikörper, nur IgG, IgG kombiniert mit IgM und/oder IgA.

Tabelle 2 gilt für erstmalige Tests (einschließlich Schnelltests) zum Nachweis von Anti-SARS-CoV-2 IgM und/oder IgA.

Tabelle 3 gilt für Bestätigungs- oder Ergänzungstests für Anti-SARS-CoV-2.

Tabelle 4 gilt für SARS-CoV-2-Antigentests, einschließlich Antigen-Schnelltests.

Tabelle 5 gilt für NAT-Tests für SARS-CoV-2-RNA.

Tabelle 6 gilt für SARS-CoV-2-Antigen-Selbsttests, die bereits einer Leistungsbewertung für die Anwendung in einem professionellen Umfeld unterzogen wurden.

Tabelle 7 gilt für SARS-CoV-2-Antikörper-Selbsttests, die bereits einer Leistungsbewertung für die Anwendung in einem professionellen Umfeld unterzogen wurden.

Tabelle 1. Erstmalige Tests (einschließlich Schnelltests) für Anti-SARS-CoV-2: Gesamtantikörper, nur IgG, IgG kombiniert XXXVI mit IgM und/oder IgA.

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 400 darunter Proben aus einer frühen Infektion und nach der Serokonversion XXXVII (innerhalb der ersten 21 Tage und 21 Tage nach Auftreten der Symptome); darunter Proben von asymptomatischen oder subklinischen und leicht symptomatischen Personen (ambulante Behandlung); darunter Proben mit niedrigen und hohen Titern; darunter gegebenenfalls Proben von geimpften Personen; XXXVIII Berücksichtigung genetischer Varianten	≥ 90 % Sensitivität XXXIX für Proben, die > 21 Tage nach Auftreten der Symptome entnommen wurden; XL die Gesamtsensitivität einschließlich der frühen Infektionsphase muss der des Vergleichsprodukts XLI zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	Sofern vorhanden	Serokonversions-Sensitivität vergleichbar mit der anderer CE-gekennzeichneter Tests
Analytische Sensitivität	Referenzpräparate	Internationaler Standard (IS) der WHO für Anti-SARS-CoV-2 (NIBSC-Code 20/136); Internationales Referenzpanel (RP) der WHO für Anti-SARS-CoV-2-Antikörper (NIBSC-Codes 20/140, 20/142, 20/144, 20/148, 20/150)	IS: für Titerbestimmungen/quantitative XLII Ergebnisausgabe; RP: alle Antikörpertests
Diagnostische Spezifität	Negative Proben XLIII	≥ 400 Proben von nicht infizierten und nicht geimpften Personen XLIV	> 99 % Spezifität XLV
		≥ 200 Krankenhauspatienten (ohne SARS-CoV-2-Infektion)	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 einschließlich RF+, Schwangere, Proben mit Antikörpern gegen die endemischen humanen Coronaviren 229E, OC43, NL63, HKU1 und andere Erreger von Atemwegserkrankungen wie Influenza A, B, RSV usw.

Tabelle 2. Erstmalige Tests (einschließlich Schnelltests) für Anti-SARS-CoV-2: IgM- und/oder IgA-Nachweis

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 200 XLVI Proben XLVII mit einem erheblichen Anteil aus der frühen Infektionsphase (innerhalb von 21 Tagen nach Auftreten der Symptome) im Vergleich zu Proben nach der Serokonversion (> 21 Tage nach Auftreten der Symptome); darunter Proben von asymptomatischen, subklinischen, leicht symptomatischen Personen (ambulante Behandlung); darunter gegebenenfalls frisch XLVIII geimpfte Personen; Berücksichtigung genetischer Varianten	≥ 80 % Sensitivität XLIX für Proben, die in den ersten 21 Tagen nach Auftreten der Symptome entnommen wurden; L die Gesamtsensitivität muss der des Vergleichsprodukts LI des gleichen Typs (d. h. IgM und/oder IgA) zumindest gleichwertig sein.
	Serokonversionspanels	Sofern vorhanden	Serokonversions-Sensitivität vergleichbar mit der anderer CE-gekennzeichneter Tests
Analytische Sensitivität	Standards	k. A.	k. A.
Diagnostische Spezifität	Negative Proben LII	≥ 200 Proben von nicht infizierten und nicht geimpften Personen LIII	≥ 98 % Spezifität LIV
		≥ 100 von Krankenhauspatienten (ohne SARS-CoV-2-Infektion)	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 100 einschließlich RF+, Schwangere, Proben mit Antikörpern gegen die endemischen humanen Coronaviren 229E, OC43, NL63, HKU1 und andere Erreger von Atemwegserkrankungen wie Influenza A, B, RSV usw.

Tabelle 3. Bestätigungs- oder Ergänzungstests LV für Anti-SARS-CoV-2

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥200 darunter Proben vor und nach der Serokonversion (innerhalb der ersten 21 Tage und 21 Tage nach Auftreten der Symptome)	Korrekte Bestimmung als „positiv“ (oder „unbestimmt“)
	Serokonversionspanels/ Niedrigtiterpanels	sofern vorhanden
Analytische Sensitivität	Standards	k. A.	k. A.
Diagnostische Spezifität	Negative Proben LVI	≥ 200 der nicht infizierten/nicht geimpften Population	Keine falsch positiven Befunde; korrekte Bestimmung als „negativ“ (oder „unbestimmt“)
		≥ 200 von Krankenhauspatienten (ohne SARS-CoV-2-Infektion)
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 50 einschließlich Proben mit Antikörpern gegen die endemischen humanen Coronaviren 229E, OC43, NL63, HKU1 und andere Erreger von Atemwegserkrankungen wie Influenza A, B, RSV usw. darunter Proben mit unbestimmten oder falsch positiven Befunden aus anderen Anti-SARS-CoV-2-Tests

Tabelle 4. Antigentests (einschließlich Schnelltests): SARS-CoV-2

Leistungsmerkmal	Probe	Probenzahl, Merkmale, Verwendung	Akzeptanzkriterien
Diagnostische Sensitivität	Positive Proben	≥ 100 LVII NAT-positive Proben LVIII aus einer frühen Infektion innerhalb der ersten 7 Tage nach Auftreten der Symptome; LIX die Proben müssen natürlich vorkommende Viruslasten darstellen; LX Berücksichtigung genetischer Varianten LXI ; Berücksichtigung von Abweichungen bei der Entnahme und/oder Handhabung der Proben LXII	Nachweis von > 80 % (Schnelltests); Nachweis von > 85 % (Labortests LXIII ); im Vergleich zu SARS-CoV-2-NAT LXIV , LXV
Analytische Sensitivität	Standards	Sobald verfügbar	Festlegung einer Nachweisgrenze LXVI
Diagnostische Spezifität	Negative Proben	≥ 300 von nicht infizierten Personen	Spezifität > 98 % (Schnelltests) Spezifität > 99 % (Labortests7)
		≥ 100 von Krankenhauspatienten	Etwaige Einschränkungen der Spezifität sind anzugeben.
Kreuzreaktivität	Proben mit möglicher Kreuzreaktion	≥ insgesamt 50 darunter Proben, die für die endemischen humanen Coronaviren 229E, OC43, NL63, HKU1, Influenza A, B, RSV und andere Erreger von Atemwegserkrankungen, die für eine Differentialdiagnose infrage kommen, positiv sind; einschließlich der im Probenahmebereich vorhandenen Bakterien LXVII

Tabelle 5. NAT-Produkte für SARS-CoV-2-RNA

Leistungsmerkmal	Probe	SARS-CoV-2-RNA qualitativ	SARS-CoV-2-RNA quantitativ
Sensitivität
Analytische Sensitivität: Nachweisgrenze	Erster internationaler Standard der WHO für SARS-CoV-2-RNA (NIBSC-Code 20/146; 7,70 log. 10 IE/ml) Sekundäre Standards, kalibriert am IS der WHO	Gemäß der NAT-Validierungsleitlinie im Europäischen Arzneibuch: mehrere Verdünnungsreihen bis zur Grenzkonzentration, statistische Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgehend von mindestens 24 Replikaten, Berechnung des Cut-Off-Wertes (95 %)	Gemäß der NAT-Validierungsleitlinie im Europäischen Arzneibuch: mehrere Verdünnungsreihen kalibrierter Referenzpräparate bis zur Grenzkonzentration; statistische Analyse (z. B. Probitanalyse) ausgehend von mindestens 24 Replikaten, Berechnung des Cut-Off-Wertes (95 %) als Nachweisgrenze
Quantifizierungsgrenze; Quantifizierungsmerkmale	Erster internationaler Standard der WHO für SARS-CoV-2-RNA (NIBSC-Code 20/146; 7,70 log. 10 IE/ml) Sekundäre Standards, kalibriert am IS der WHO		Verdünnungen (halb-log. 10 oder weniger) kalibrierter Referenzpräparate; Festlegung der unteren/oberen Quantifizierungsgrenze, Nachweisgrenze, Präzision, Genauigkeit, „linearer“ Messbereich, „dynamischer Bereich“. Die synthetische Zielnukleinsäure kann als sekundärer Standard verwendet werden, um höhere Konzentrationen zu erreichen. Die Reproduzierbarkeit bei verschiedenen Konzentrationsstufen ist nachzuweisen.
Diagnostische Sensitivität: verschiedene SARS-CoV-2-RNA-Stämme	Patientenproben aus verschiedenen Regionen und Ausbruchsclustern, die mit einem Vergleichsprodukt als SARS-CoV-2-RNA-positiv bestimmt wurden; Sequenzvarianten Verdünnungsreihen von SARS-CoV-2-positiven Zellkulturen (Isolate) können als möglicher Ersatz dienen	≥ 100 LXVIII
Effizienz der quantitativen Bestimmung	SARS-CoV-2-RNA-positive Patientenproben aus verschiedenen Regionen und Ausbruchsclustern; Sequenzvarianten mit quantitativen Werten, die mit dem Vergleichsprodukt ermittelt wurden Verdünnungsreihen von SARS-CoV-2 RNA-positiven Zellkulturen können als möglicher Ersatz dienen		≥ 100
Inklusivität	In-silico-Analyse LXIX ; mindestens zwei unabhängige Ziel-Gen-Regionen in einem Testlauf (Doppelzieldesign)	Nachweis eines geeigneten Testdesigns: Primer-/Sondensequenzabgleiche mit veröffentlichten SARS-CoV-2-Sequenzen	Nachweis eines geeigneten Testdesigns: Primer-/Sondensequenzabgleiche mit veröffentlichten SARS-CoV-2-Sequenzen
Spezifität
Diagnostische Spezifität	SARS-CoV-2-RNA-negative Proben menschlichen Ursprungs	≥ 500	≥ 100
In-silico-Analyse2		Nachweis eines geeigneten Testdesigns (Sequenzabgleich); regelmäßige Überprüfung der Primer-/Sondensequenzen anhand der Einträge in der Sequenzdatenbank	Nachweis eines geeigneten Testdesigns (Sequenzabgleich); regelmäßige Überprüfung der Primer-/Sondensequenzen anhand der Einträge in der Sequenzdatenbank
Kreuzreaktivität	Proben, die (in verschiedenen Konzentrationen) für die verwandten humanen Coronaviren 229E, HKU1, OC43, NL63, MERS-CoV, gegebenenfalls SARS CoV-1, Influenzavirus A, B, RSV und Legionella pneumophila positiv sind; positive Zellkulturen können als möglicher Ersatz dienen	≥ insgesamt 20	≥ insgesamt 20
Robustheit
Verschleppungen		Mindestens 5 Testreihen mit abwechselnd hoch positiven und negativen Proben. Die Virustiter der hoch positiven Proben müssen repräsentativ für natürlich vorkommende hohe Virustiter sein.	Mindestens 5 Testreihen mit abwechselnd hoch positiven (bekanntlich natürlich vorkommenden) und negativen Proben
Inhibition		Interne Kontrolle, vorzugsweise während des gesamten NAT-Verfahrens	Interne Kontrolle, vorzugsweise während des gesamten NAT-Verfahrens
Zu falsch negativen Befunden führende Fehlerrate des Gesamtsystems: 99/100 Tests sind positiv		≥ 100 mit der dreifachen Virenkonzentration des positiven Cut-Off-Wertes (95 %) angereicherte Proben (3 x Nachweisgrenze)	≥ 100 mit der dreifachen Virenkonzentration des positiven Cut-Off-Wertes (95 %) angereicherte Proben (3 x Nachweisgrenze)

Tabelle 6. Zusätzliche Anforderungen an SARS-CoV-2-Antigen-Selbsttests LXX

Leistungsmerkmal	Proben LXXI	Zahl der Laien
Ergebnisauswertung LXXII	Auswertung der Ergebnisse LXXIII durch Laien unter Berücksichtigung folgender Reaktivitätswerte: ·nicht reaktiv ·reaktiv ·schwach reaktiv LXXIV ·ungültig	≥ 100
Diagnostische Sensitivität LXXV	Bekannt positiv auf Antigene getestete Laien LXXVI , LXXVII	≥ 30
Diagnostische Spezifität LXXVIII	Laien, die ihren Status nicht kennen5	≥ 60

Tabelle 7. Zusätzliche Anforderungen an SARS-CoV-2-Antikörper-Selbsttests LXXIX

Leistungsmerkmal	Proben LXXX	Zahl der Laien
Ergebnisauswertung LXXXI	Auswertung der Ergebnisse LXXXII durch Laien unter Berücksichtigung folgender Reaktivitätswerte: ·nicht reaktiv ·reaktiv ·schwach reaktiv LXXXIII ·ungültig	≥ 100
Diagnostische Sensitivität LXXXIV	Bekannt positiv auf Antikörper getestete Laien LXXXV	≥ 100
Diagnostische Spezifität LXXXVI	Laien, die ihren Status nicht kennen5	≥ 100

(1)

Diese Anforderung gilt nicht für Produkte, die unter die Tabellen 1 und 2 des Anhangs XIII fallen.

(2)

Diese Anforderung gilt nicht für Produkte, die unter die Tabellen 4, 5 und 6 des Anhangs XIII fallen.

(3)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(I)

Nur, wenn Reaktivität auf diese Antigene angegeben ist.

(II)

Es sind Blutspenderpopulationen von mindestens zwei Blutspendezentren zu untersuchen, wobei es sich um aufeinanderfolgende Blutspenden handeln muss, die nicht zwecks Ausschluss von Erstspendern selektiert wurden.

(III)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(IV)

Für jede zur Verwendung mit dem Produkt angegebene Körperflüssigkeit wie Vollblut, Urin und Speichel usw.; die Sensitivität und Spezifität des Produkts zur Eigenanwendung bei einem Einsatz durch Laien ist anhand des bestätigten Infektionsstatus des Patienten zu definieren.

(V)

Die Studie zur Ergebnisauswertung muss das Ablesen und die Auswertung der Testergebnisse durch wenigstens 100 Laien umfassen, wobei jeder Laie Testergebnisse aus dem festgelegten Bereich der Ergebnisreaktivität ablesen muss. Der Hersteller muss die Übereinstimmung zwischen der Ablesung durch einen Laien und der Ablesung durch einen professionellen Anwender bestimmen.

(VI)

Die Tests sind vor der Studie zur Ergebnisauswertung durchzuführen, wobei nach Möglichkeit der vom Hersteller vorgesehene Probentyp zu verwenden ist. Die Tests können an fingierten Proben auf der Grundlage der natürlichen Matrix des jeweiligen Probentyps durchgeführt werden.

(VII)

Ein größerer Anteil der Proben muss im schwach positiven Bereich nahe dem Cut-off-Wert oder der Nachweisgrenze des Tests liegen.

(VIII)

(IX)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(X)

(XI)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(XII)

(XIII)

(XIV)

(XV)

Ein größerer Anteil der Proben muss im schwach positiven Bereich nahe dem Cut-off-Wert oder der Nachweisgrenze des Tests liegen.

(XVI)

(XVII)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(XVIII)

(XIX)

(XX)

(XXI)

Ein größerer Anteil der Proben muss im schwach positiven Bereich nahe dem Cut-off-Wert oder der Nachweisgrenze des Tests liegen.

(XXII)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(XXIII)

Einschließlich der Prüfung anderer CMV-Parameter (z. B. CMV-IgM, Avidität, Immunblot) oder früherer/nachfolgender Proben zur Feststellung des tatsächlichen Probenstatus.

(XXIV)

Ergänzungstests zur Bestätigung der aktuellen CMV-Infektion (erstmalige oder erneute Infektion): z. B. CMV-IgM, IgG-Avidität, Immunoblot-Analyse.

(XXV)

Dies entspricht einer Ausgangszahl von 1000 Spendern bei einer angenommenen CMV-Prävalenz von 60 %.

(XXVI)

Darunter Empfänger vor der Transplantation.

(XXVII)

Einschließlich verwandter β-Herpes-Viren (HHV-6, HHV-7).

(XXVIII)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(XXIX)

Einschließlich der Prüfung anderer EBV-Marker und -Parameter (z. B. VCA-IgM, EBNA-1 IgG, Immunblot) oder früherer/nachfolgender Proben zur Feststellung des tatsächlichen Probenstatus.

(XXX)

Ergänzungstests zur Bestätigung der aktuellen EBV-Infektion (erstmalige oder erneute Infektion): z. B. VCA-IgM, IgG-Avidität, Immunoblot-Analyse.

(XXXI)

Bei einer angenommenen EBV-Prävalenz von 80 %, was einer Ausgangszahl von 1000 Spendern entspricht.

(XXXII)

Darunter Empfänger vor der Transplantation.

(XXXIII)

Referenz: Europäisches Arzneibuch, 9. Ausgabe, Abschnitt 2.6.21 über Nukleinsäuren-Amplifikationstechniken, Validierung.

(XXXIV)

(XXXV)

(XXXVI)

Angegebene Leistung für das kombinierte Gesamtergebnis; für Produkte mit gesonderten Angaben für IgM und/oder IgA siehe Tabelle 2.

(XXXVII)

Es sind genaue Angaben zum zeitlichen Abstand zwischen der Probenahme und dem Auftreten der Symptome (oder, falls verfügbar, dem Zeitpunkt der Infektion) zu machen.

(XXXVIII)

Der Hersteller muss eine Begründung für die Eignung und den Zeitpunkt für die Sensitivitätsbewertung der relevanten Antikörper bei geimpften Personen vorlegen.

(XXXIX)

Auf der Grundlage eines bestätigten positiven SARS-CoV-2-NAT-Ergebnisses.

(XL)

Angaben zur Sensitivität sind in Bezug auf die Zeit zwischen der Probenahme nach Auftreten der Symptome oder der ersten PCR-Diagnose und dem Test zu machen.

(XLI)

CE-Kennzeichnung gemäß der Verordnung (EU) 2017/746 als Klasse D, sofern vorhanden.

(XLII)

Dies gilt für quantitative Tests, auch wenn es sich bei diesen um erstmalige Tests handelt.

(XLIII)

Negative Proben müssen von Personen stammen, die sich noch nicht mit SARS-CoV-2 infiziert haben (von vor der Pandemie, sofern verfügbar).

(XLIV)

Gegebenenfalls können auch Personen einbezogen werden, die mit einem anderen als dem im Produkt verwendeten Antigen geimpft wurden.

(XLV)

(XLVI)

Bei Produkten zum Nachweis von sowohl IgM als auch IgA 200 je Marker IgM und IgA.

(XLVII)

Es sind genaue Angaben zum zeitlichen Abstand zwischen der Probenahme und dem Auftreten der Symptome (oder, falls verfügbar, dem Zeitpunkt der Infektion) zu machen.

(XLVIII)

Der Hersteller muss eine Begründung für die Eignung und den Zeitpunkt für die Sensitivitätsbewertung für IgM und IgA bei geimpften Personen vorlegen.

(XLIX)

Auf der Grundlage eines bestätigten positiven SARS-CoV-2-NAT-Ergebnisses.

(L)

Angaben zur Sensitivität sind in Bezug auf die Zeit zwischen der Probenahme nach Auftreten der Symptome oder der ersten PCR-Diagnose und dem Test zu machen.

(LI)

CE-Kennzeichnung gemäß der Verordnung (EU) 2017/746 als Klasse D, sofern vorhanden.

(LII)

Negative Proben müssen von Personen stammen, die sich noch nicht mit SARS-CoV-2 infiziert haben (von vor der Pandemie, sofern verfügbar).

(LIII)

Gegebenenfalls können auch Personen einbezogen werden, die mit einem anderen als dem im Produkt verwendeten Antigen geimpft wurden.

(LIV)

Falsch positive Ergebnisse sind durch erneute Testung mit anderen serologischen SARS-CoV-2-Tests, erforderlichenfalls mit einem anderen Testdesign und einer anderen Antigenbeschichtung als beim ersten Test, und/oder durch Bestätigungstests zu beheben. Zur Klärung falsch positiver Ergebnisse kann zusätzlich auf das Vorhandensein anderer Anti-SARS-CoV-2-Antikörpertypen (IgA, IgG, Gesamtantikörper) getestet werden.

(LV)

Z. B. Immunoblot mit anderen Antigenen als denen, die im ursprünglichen Antikörpertest verwendet wurden.

(LVI)

Negative Proben müssen von Personen stammen, die sich noch nicht mit SARS-CoV-2 infiziert haben (von vor der Pandemie, sofern verfügbar).

(LVII)

Ist das Produkt für mehr als einen Probentyp bestimmt, so sind für jeden Probentyp 100 Proben erforderlich. Ist dies in Ausnahmefällen nicht möglich (z. B. wenn die Probenentnahme sehr invasiv ist), muss der Hersteller eine Begründung und einen Nachweis der Matrixäquivalenz vorlegen.

(LVIII)

Die Probenahme muss für Antigentests und NAT-Tests aufeinander abgestimmt sein, z. B. zwei gleichzeitige Proben von jeder Einzelprobe oder optimalerweise NAT-Tests und Antigentests anhand derselben Probe (z. B. anhand des Eluat eines Abstrichs); der Puffer/das Transportmedium muss für Antigentests geeignet sein; jede Volumenänderung des Puffers/Mediums für die Probenaufnahme zwischen Antigen- und NAT-Produkt ist eindeutig mitzuteilen.

(LIX)

Oder Zeitpunkt der Infektion, sofern bekannt, unter Berücksichtigung der Inkubationszeit.

(LX)

D. h. ohne Vorauswahl; die Viruslasten und ihre Verteilung sind darzustellen, z. B. charakterisiert durch Ct-Werte der RT-PCR oder gegebenenfalls umgewandelt in Viruslast je ml oder Probe.

(LXI)

Abhängig vom Design des Produkts und der Art der genetischen Variante. Für die Zwecke der Bewertung muss jede relevante genetische Variante mit mindestens drei Proben vertreten sein.

(LXII)

Probenentnahme- und Extraktionsartikel wie Abstrichtupfer/Abstrichstäbchen, Extraktionspuffer usw. müssen Teil der Bewertung sein. Ist eine herstellereigene Probenahme/Probenvorbereitung nicht im Produkt enthalten, so ist die Produktleistung für eine verfügbare Palette von Produkten zur Probenahme zu untersuchen. Wird die Probe nicht sofort getestet, z. B. nach einer bestimmten Transportzeit, ist die Stabilität des Antigens zu untersuchen.

(LXIII)

Andere als Schnelltests, d. h. formale laborbasierte Produkte, z. B. Enzym-Immuntests, automatisierte Tests usw.

(LXIV)

Die Sensitivität von ≥ 80 % bzw. ≥ 85 % muss für alle angegebenen Probentypen gelten. Alle angegebenen Probentypen sind mit gepaarten NAT-Ergebnissen aus Nasopharyngealabstrichen zu vergleichen.

(LXV)

Der Zusammenhang zwischen der Sensitivität des Antigentests und der NAT ist nachzuweisen; die Sensitivität kann in Bezug auf verschiedene Viruslastbereiche und die Infektiositätsschwelle nachgewiesen werden. Die verwendete NAT- und Extraktionsmethode sind zu beschreiben.

(LXVI)

Sofern kein internationaler Standard verfügbar ist, kann die analytische Sensitivität durch Verdünnungsreihen von herstellereigenen Viruspräparaten, die mit anderen Antigentests und NAT vergleichbar sind, getestet werden; wird ein inaktiviertes Virus verwendet, so sind die Auswirkungen der Inaktivierung und des Einfrierens/Auftauens auf das Antigen zu untersuchen.

(LXVII)

Z. B. Staphylokokken und Streptokokken, die Protein A oder G exprimieren.

(LXVIII)

(LXIX)

Der Hersteller muss den Nachweis regelmäßiger proaktiver Überwachungskontrollen anhand aktualisierter Datenbankeinträge in dem Bericht zur Überwachung der Leistung nach dem Inverkehrbringen festlegen.

(LXX)

Es wird davon ausgegangen, dass die zugrunde liegende Leistung des Selbsttests bereits zuvor durch die Bewertung/Beurteilung eines professionellen Tests mit demselben Design wie der zu bewertende Selbsttest nachgewiesen worden ist. Gibt es für die betreffenden Proben aus der Eigenanwendung keine entsprechende professionelle Testvariante, so ist ein Vergleich mit dem Standardprobentyp (z. B. Nasopharyngealabstriche für Antigentests, Serum oder Plasma für Antikörpertests) des entsprechenden professionellen Tests vorzunehmen.

(LXXI)

Für jeden für das Produkt angegebenen Probentyp für die Eigenanwendung (z. B. Nasalprobe, Sputum, Speichel, Vollblut usw.).

(LXXII)

(LXXIII)

Die Tests sind vor der Studie zur Ergebnisauswertung durchzuführen, wobei nach Möglichkeit der vom Hersteller vorgesehene Probentyp zu verwenden ist. Tests können an fingierten Proben auf der Grundlage der natürlichen Matrix des jeweiligen Probentyps durchgeführt werden.

(LXXIV)

Ein größerer Anteil der Proben muss im schwach positiven Bereich nahe dem Cut-off-Wert oder der Nachweisgrenze des Tests liegen.

(LXXV)

Im Vergleich zur RT-PCR. Der Hersteller muss die Übereinstimmung zwischen der Ablesung durch einen Laien und der Ablesung durch einen professionellen Anwender bestimmen.

(LXXVI)

Personen, die vor dem Selbsttest das professionelle Diagnoseergebnis nicht kennen und das gesamte Testverfahren von der Probenentnahme über die Probenvorbehandlung (Abstrich, Pufferextraktion usw.) bis zum Ablesen durchführen.

(LXXVII)

Probanden bis zu etwa 7 Tage nach Auftreten der Symptome.

(LXXVIII)

Der Hersteller muss die Übereinstimmung zwischen der Ablesung durch einen Laien und der Ablesung durch einen professionellen Anwender bestimmen.

(LXXIX)

(LXXX)

Für jeden für das Produkt angegebenen Probentyp für die Eigenanwendung (z. B. Nasalprobe, Sputum, Speichel, Vollblut usw.).

(LXXXI)

(LXXXII)

(LXXXIII)

Ein größerer Anteil der Proben muss im schwach positiven Bereich nahe dem Cut-off-Wert oder der Nachweisgrenze des Tests liegen.

(LXXXIV)

Mit einer Vorgeschichte einer Erstinfektion mit SARS-CoV-2, bestätigt anhand eines RT-PCR-Tests; im Vergleich zu einem früheren bestätigten Antikörperergebnis; Der Hersteller muss die Übereinstimmung zwischen der Ablesung durch einen Laien und der Ablesung durch einen professionellen Anwender bestimmen.

(LXXXV)

(LXXXVI)

Der Hersteller muss die Übereinstimmung zwischen der Ablesung durch einen Laien und der Ablesung durch einen professionellen Anwender bestimmen.

Leistungsmerkmale	Anforderung
Alle in Anhang I Abschnitt 9.1 Buchstaben a und b, Abschnitt 9.3 und Abschnitt 9.4 Buchstabe a der Verordnung (EU) 2017/746 aufgeführten Leistungsmerkmale	1.Die Bestimmung der Leistungsmerkmale muss in direktem Vergleich mit einem Produkt erfolgen, das dem Stand der Technik entspricht. Für den Vergleich muss ein CE-gekennzeichnetes Produkt verwendet werden, sofern ein solches zum Zeitpunkt der Leistungsbewertung am Markt verfügbar ist 2.Bei Produkten zur Ermittlung des Status von Proben, die zur Bestimmung der Leistungsmerkmale verwendet werden, muss es sich um dem Stand der Technik entsprechende Produkte mit CE-Kennzeichnung handeln. 3.Treten bei der Bestimmung der Leistungsmerkmale abweichende Ergebnisse auf, so sind sie möglichst weitgehend durch eine oder mehrere der folgenden Maßnahmen aufzuklären: –durch eine Bewertung der abweichenden Probe in weiteren Produkten, –durch die Verwendung eines alternativen Verfahrens oder Markers, –durch die Überprüfung des Patienten im Hinblick auf seinen klinischen Status und seine Diagnose, –durch das Testen von Folgeproben. 4.Die Bestimmung der Leistungsmerkmale muss an einer Population erfolgen, die der europäischen Bevölkerung entspricht.
Fehlerrate des Gesamtsystems	5.Als Bestandteil der erforderlichen Risikoanalyse ist die zu falsch negativen Befunden führende Fehlerrate des Gesamtsystems in wiederholten Tests an schwach positiven Proben zu ermitteln.
Analytische Sensitivität, analytische Spezifität, Interferenz	6.Bei Produkten, die zur Verwendung mit Plasma bestimmt sind, hat der Hersteller die Leistung des Produkts unter Verwendung aller Antikoagulanzien nachzuweisen, die der Hersteller für die Verwendung mit diesem Produkt angibt; der Nachweis ist an mindestens 50 Plasmaproben (bei Produkten zum Nachweis und/oder zur Quantifizierung von Infektionserregern 25 positiven und 25 negativen) zu führen.
Analytische und diagnostische Spezifität, Interferenz und Kreuzreaktivität	7.Der Hersteller hat die potenziell störenden Substanzen, die bewertet werden sollen, unter Berücksichtigung der Zusammensetzung der Reagenzien und des Aufbaus des Produkts auszuwählen.
Gleichbleibende Qualität der Chargen	8.Bei Produkten zum Nachweis von Antigenen und Antikörpern muss durch die Chargenprüfkriterien des Herstellers sichergestellt werden, dass für jede Charge die relevanten Antigene, Epitope und Antikörper einheitlich und durchgängig erkennbar sind und dass jede Charge für die angegebenen Probentypen geeignet ist. 9.Die Chargenfreigabetests des Herstellers für erstmalige Tests müssen mindestens 100 Proben mit negativem Befund für den relevanten Analyten umfassen. 1

Blutgruppenreagenzien	Mindestanzahl der im Rahmen von Spezifitätstests zu testenden Kontrollzellen							Akzeptanzkriterien
	Positive Reaktionen				Negative Reaktionen			Jede Charge eines Reagenzes muss im Einklang mit den Ergebnissen aus den Leistungsbewertungsdaten eindeutig positive oder negative Ergebnisse in allen vom Hersteller angegebenen Verfahren aufweisen.
	A1	A2B	Ax		B	O
Anti-ABO1 (Anti-A)	2	2	2 I		2	2
	B	A1B			A1	O
Anti-ABO2 (Anti-B)	2	2			2	2
	A1	A2	Ax	B	O
Anti-ABO3 (Anti-A,B)	2	2	21	2	4
	R1r	R2r	D schwach		r’r	r”r	rr
Anti-RH1 (Anti-D)	2	2	21		1	1	1
	R1R2	R1r	r’r		R2R2	r”r	rr
Anti-RH2 (Anti-C)	2	1	1		1	1	1
	R1R2	R1r	r’r		R1R1
Anti-RH4 (Anti-c)	1	2	1		3
	R1R2	R2r	r”r		R1R1	r’r	rr
Anti-RH3 (Anti-E)	2	1	1		1	1	1
	R1R2	R2r	r”r		R2R2
Anti-RH5 (Anti-e)	2	1	1		3
	Kk				kk
Anti-KEL1 (Anti-K)	4				3
	Jk(a+b+)				Jk(a−b+)
Anti-JK1 (Anti-Jka)	4				3
	Jk(a+b+)				Jk(a+b−)
Anti-JK2 (Anti-Jkb)	4				3
	Fy(a+b+)				Fy(a−b+)
Anti-FY1 (Anti-Fya)	4				3
	Fy(a+b+)				Fy(a+b−)
Anti-FY2 (Anti-Fyb)	4				3