BILAG

SPECIFIKATIONER FOR ALFA-CYCLODEXTRIN

Synonymer

α-cyclodextrin, α-dextrin, cyclohexaamylose, cyclomaltohexaose, α-cycloamylose

Definition

Alfa-cyclodextrin er et ikke-reducerende cyklisk saccharid, der består af seks α-1,4-forbundne D-glucopyranosylenheder fremstillet ved cyclodextringlucosyltransferase (CGTase, EC 2.4.1.19) af hydrolyseret stivelse. Alfa-cyclodextrin kan genfindes og oprenses ved hjælp af en af følgende procedurer: udfældning af et kompleks af alfa-cyclodextrin med 1-decanol, opløsning i vand ved høj temperatur og genudfældning, dampstripning af kompleksdanneren og udkrystallisering af alfa-cyclodextrin fra opløsningen; eller chromatografi med ionbytning eller gelfiltrering efterfulgt af udkrystallisering af alfa-cyclodextrin fra den oprensede moderlud; eller membranseparationsmetoder, f.eks. ultrafiltrering og omvendt osmose.

Kemisk navn

Cyclohexaamylose

CAS-nr.

10016-20-3

Kemisk formel

(C6H10O5)6

Strukturformel

Molekylmasse

972,85

Indhold

Ikke under 98 % på tørstofbasis.

Beskrivelse

Næsten lugtløst, hvidt eller næsten hvidt krystallinsk fast stof.

Egenskaber

Identifikation

Smeltepunktsinterval	Nedbrydes ved over 278 °C
Opløselighed	Let opløseligt i vand; meget tungt opløseligt i ethanol
Specifik drejning	[α]D 25: Mellem +145° og +151° (1 % opløsning)
Chromatografi	Retentionstiden for den højeste spidsværdi i et væskechromatogram af prøven svarer til retentionstiden for alfa-cyclodextrin i et chromatogram af reference-alfa-cyclodextrin (fås ved henvendelse til Consortium für elektrochemische Industrie GmbH, München, Tyskland eller Wacker Biochem Group, Adrian, MI, USA) efter de betingelser, der er beskrevet under »ANALYSEMETODE«.

Renhed

Vand	Ikke over 11 % (Karl Fischer)
Residual kompleksdanner	Ikke over 20 mg/kg
(1-decanol)
Reducerende stoffer	Ikke over 0,5 % (som glucose)
Sulfataske	Ikke over 0,1 %
Bly	Ikke over 0,5 mg/kg.

Analysemetode

Foretag bestemmelse ved væskechromatografi ved anvendelse af følgende betingelser.

Prøveopløsning: Afvej omhyggeligt 100 mg analyseprøve i en 10-ml-flaske og tilsæt 8 ml deioniseret vand. Opløs prøven helt ved anvendelse af et ultralydsbad (10-15 min.), og fortynd indtil mærket med renset, deioniseret vand. Filtrer gennem et 0,45 mikrometer filter.

Referenceopløsning: Afvej omhyggeligt 100 mg alfa-cyclodextrin i en 10-ml-flaske og tilsæt 8 ml deioniseret vand. Opløs prøven helt ved anvendelse af et ultralydsbad, og fortynd indtil mærket med renset, deioniseret vand.

Chromatografi: Væskechromatograf udstyret med en RI-detektor og en integrationsskriver.

Kolonne og pakning: Nucleosil-100-NH2 (10 μm) (Macherey & Nagel Co. Düren, Tyskland) eller lignende.

Længde: 250 mm

Diameter: 4 mm

Temperatur: 40 °C

Mobil fase: acetonitril/vand (67/33, v/v)

Flow: 2,0 ml/min

Injektionsvolumen: 10 μl

Procedure: Injicer prøveopløsningen i chromatografen, registrer chromatogrammerne, og mål alfa-cyclodextrintoppens areal. Beregn alfa-cyclodextrins procentandel af analyseprøven således:

% α-cyclodextrin (tørstofbasis) = 100 × (AS/AR) (WR/WS)

hvor:

As og AR er arealerne af alfa-cyclodextrintoppene for henholdsvis prøveopløsningen og referenceopløsningen.

Ws og WR er vægten (mg) af henholdsvis analyseprøvens og referenceprøvens indhold af alfa-cyclodextrin efter korrektion for vandindholdet.