2002D0364 — CS — 01.12.2009 — 001.002


Tento dokument je třeba brát jako dokumentační nástroj a instituce nenesou jakoukoli odpovědnost za jeho obsah

►B

ROZHODNUTÍ KOMISE

ze dne 7. května 2002

o společných technických specifikacích pro diagnostické zdravotnické prostředky in vitro

(oznámeno pod číslem K(2002) 1344)

(Text s významem pro EHP)

(2002/364/ES)

(Úř. věst. L 131, 16.5.2002, p.17)

Ve znění:

 

 

Úřední věstník

  No

page

date

 M1

ROZHODNUTÍ KOMISE ze dne 3. února 2009,

  L 39

34

10.2.2009

►M2

ROZHODNUTÍ KOMISE ze dne 27. listopadu 2009,

  L 318

25

4.12.2009




▼B

ROZHODNUTÍ KOMISE

ze dne 7. května 2002

o společných technických specifikacích pro diagnostické zdravotnické prostředky in vitro

(oznámeno pod číslem K(2002) 1344)

(Text s významem pro EHP)

(2002/364/ES)



KOMISE EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,

s ohledem na Smlouvu o založení Evropského společenství,

s ohledem na směrnici Evropského parlamentu a Rady 98/79/ES o diagnostických zdravotnických prostředcích in vitro ( 1 ), a zejména na čl. 5 odst. 3 druhý pododstavecuvedené směrnice,

vzhledem k těmto důvodům:

(1)

Směrnice 98/79/ES stanoví základní požadavky, které musí při uvedení na trh splňovat diagnostické zdravotnické prostředky in vitro a stanoví, že shoda s harmonizovanými normami umožňuje předpokládat, že tyto prostředky splňují příslušné základní požadavky.

(2)

Odchylně od těchto obecných zásad se při vypracovávání společných technických specifikací přihlíží k současné praxi v některých členských státech, kde u vybraných prostředků určených zejména k posouzení bezpečnosti při zásobování krví a darování orgánů schvalují tyto specifikace veřejné orgány. Tyto společné technické specifikace lze používat pro hodnocení a přehodnocení funkční způsobilosti.

(3)

Přípravy společných technických specifikací se zúčastnili vědečtí odborníci různých zúčastněných stran.

(4)

Směrnice 98/79/ES stanoví, že členské státy předpokládají shodu se základními požadavky u prostředků navržených a vyrobených ve shodě se společnými technickými specifikacemi vypracovanými pro některé prostředky v kategorii nejvyššího rizika. Tyto specifikace stanoví odpovídající kritéria hodnocení a přehodnocení funkční způsobilosti, podmínky pro uvolňování výrobních šarží, referenční metodiky a referenční materiály.

(5)

Výrobci jsou zpravidla povinni dodržovat společné technické specifikace. Pokud výrobci vzhledem k řádně odůvodněným okolnostem tyto specifikace nedodrží, musí přijmout řešení přinejmenším na stejné úrovni.

(6)

Opatření tohoto rozhodnutí jsou v souladu se stanoviskem výboru zřízeného podle čl. 6 odst. 2 směrnice Rady 90/385/EHS ( 2 ),

PŘIJALA TOTO ROZHODNUTÍ:



Článek 1

Technické specifikace stanovené v příloze tohoto rozhodnutí se přijímají jako společné technické specifikace pro diagnostické zdravotnické prostředky in vitro uvedené v seznamu A v příloze II směrnice 98/79/ES.

Článek 2

Toto rozhodnutí je určeno členským státům.

▼M2




PŘÍLOHA

SPOLEČNÉ TECHNICKÉ SPECIFIKACE (STS) PRO DIAGNOSTICKÉ ZDRAVOTNICKÉ PROSTŘEDKY IN VITRO

1.   OBLAST PŮSOBNOSTI

Společné technické specifikace stanovené v této příloze se použijí pro účely seznamu A přílohy II směrnice 98/79/ES.

2.   DEFINICE A TERMÍNY

(Diagnostická) citlivost

Pravděpodobnost, že prostředek vykazuje v přítomnosti cílového markeru pozitivní výsledek.

Pravdivě pozitivní

Vzorek, o němž je známo, že je pro cílový marker pozitivní a že je prostředkem správně klasifikovaný.

Falešně negativní

Vzorek, o němž je známo, že je pro cílový marker pozitivní a že je prostředkem nesprávně klasifikovaný.

(Diagnostická) specificita

Pravděpodobnost, že prostředek vykazuje v nepřítomnosti cílového markeru negativní výsledek.

Falešně pozitivní

Vzorek, o němž je známo, že je pro cílový marker negativní a že je prostředkem nesprávně klasifikovaný.

Pravdivě negativní

Vzorek, o němž je známo, že je pro cílový marker negativní a že je prostředkem správně klasifikovaný.

Analytická citlivost

Analytickou citlivostí se rozumí mez detekce, tj. nejmenší množství cílového markeru, které může být přesně zjištěno.

Analytická specificita

Analytickou specificitou se rozumí schopnost metody stanovit výhradně cílový marker.

Techniky amplifikace nukleových kyselin (NAT)

Termínem „NAT“ se rozumí testy detekce a/nebo kvantifikace nukleových kyselin buď amplifikací cílové sekvence, amplifikací signálu nebo hybridizací.

Rychlý test

„Rychlým testem“ se rozumí kvalitativní nebo polokvantitativní diagnostické zdravotnické prostředky in vitro používané jednorázově nebo v malé sérii, které zahrnují neautomatizované postupy navržené za účelem získání okamžitého výsledku.

Robustnost

Robustností analytického postupu se rozumí schopnost analytického postupu nenechat se ovlivnit malými, avšak záměrnými odchylkami parametrů metody a je známkou spolehlivosti postupu při normálním používání.

Četnost selhání celého systému

Četností selhání celého systému se rozumí frekvence selhání v případě, kdy celý proces probíhá podle pokynů výrobce.

Konfirmační test

Konfirmačním testem se rozumí test používaný pro potvrzení reaktivního výsledku screeningového testu.

Test pro typizaci viru

Testem pro typizaci viru se rozumí test pro charakterizaci s již známými pozitivními vzorky nepoužívaný pro primární diagnózu infekce nebo pro screening.

Sérokonverzní vzorky HIV

Sérokonverzními vzorky HIV se rozumí:

 pozitivní antigen p24 a/nebo RNA HIV a

 zjištěné všemi screeningovými testy na protilátky a

 pozitivní nebo neurčité konfirmační testy.

Vzorky HIV z časné sérokonverze

Vzorky HIV z časné sérokonverze se rozumí:

 pozitivní antigen p24 a/nebo RNA HIV a

 nezjištěné screeningovými testy na protilátky a

 neurčité nebo negativní konfirmační testy.

3.   SPOLEČNÉ TECHNICKÉ SPECIFIKACE (STS) PRO PRODUKTY UVEDENÉ V SEZNAMU A PŘÍLOHY II SMĚRNICE 98/79/ES

3.1    STS pro hodnocení funkční způsobilosti činidel a výsledků reakcí činidel pro detekci, potvrzení a kvantifikaci ukazatelů HIV infekce (HIV 1 a 2), HTLV I a II a hepatitidy B, C a D v lidských vzorcích

Obecné zásady

3.1.1

Prostředky pro detekci virových infekcí uváděné na trh k použití jako screeningové a/nebo diagnostické testy musí splňovat tytéž požadavky na citlivost a specificitu stanovené v tabulce 1. Viz také bod 3.1.11, pokud jde o screeningové testy.

3.1.2

Prostředky určené výrobcem k testování tělních tekutin jiných než sérum nebo plazma, např. moči, slin atd., musí splňovat tytéž požadavky STS na citlivost a specificitu jako testy pro sérum nebo plazmu. Při hodnocení funkční způsobilosti se analyzují vzorky od stejných pacientů jak v testech, které mají být schváleny, tak v příslušných testech pro sérum nebo plazmu.

3.1.3

Prostředky určené výrobcem k sebetestování, tj. k domácímu použití, musí splňovat tytéž požadavky STS na citlivost a specificitu jako příslušné prostředky pro profesionální použití. Příslušné části hodnocení funkční způsobilosti musí být prováděny (nebo opakovány) vhodnými laickými uživateli, aby byla validována funkčnost prostředku a pokyny pro použití.

3.1.4

Veškerá hodnocení funkční způsobilosti musí být založena na přímém srovnání se zavedeným prostředkem odpovídajícím současnému stavu vědeckých poznatků. Prostředek použitý pro srovnání musí být opatřen označením CE, pokud je v době hodnocení funkční způsobilosti na trhu.

3.1.5

Pokud se v hodnocení vyskytnou rozporné výsledky, je nutné tyto rozpory pokud možno odstranit například tím, že se

 rozporný vzorek zhodnotí dalšími testy,

 použijí alternativní metody nebo alternativní markery,

 přezkoumá klinický stav a diagnóza pacienta a

 provede test vzorků pocházejících z následných odběrů.

3.1.6

Hodnocení funkční způsobilosti se provádějí na populaci ekvivalentní evropské populaci.

3.1.7

Pozitivní vzorky použité při hodnocení funkční způsobilosti se vybírají tak, aby odrážely různá stádia příslušného onemocnění (příslušných onemocnění), různé druhy protilátek, různé genotypy, různé subtypy, mutanty atd.

3.1.8

Citlivost s pravdivě pozitivními vzorky a sérokonverzními vzorky se hodnotí následovně:

3.1.8.1 Citlivost diagnostického testu během sérokonverze musí odpovídat současnému stavu vědeckých poznatků. Doplňkové testování týchž panelů nebo jiných sérokonverzních panelů, které provádí notifikovaný subjekt nebo výrobce, musí potvrdit původní výsledky hodnocení funkční způsobilosti (viz tabulka 1). Sérokonverzní panely by měly začít negativním odběrem (odběry) a intervaly mezi odběry by měly být krátké.

3.1.8.2 U prostředků k vyšetření krve (s výjimkou testů HBsAg a anti-HBc) musí prostředek, který má být opatřen označením CE (tabulka 1), identifikovat všechny pravdivě pozitivní vzorky jako pozitivní. U testů HBsAg a anti-HBc musí být celková funkční způsobilost nového prostředku minimálně rovnocenná funkční způsobilosti zavedeného prostředku (viz 3.1.4).

3.1.8.3 Pokud jde o testy na HIV:

 všechny sérokonverzní vzorky HIV se musí identifikovat jako pozitivní a

 přinejmenším 40 časných sérokonverzních vzorků HIV se testuje. Výsledky by měly odpovídat nejnovějšímu stavu vědy a techniky.

3.1.9

Hodnocení funkční způsobilosti screeningových testů musí zahrnovat 25 pozitivních (jsou-li v případě vzácných infekcí dostupné) vzorků čerstvého séra a/nebo plazmy „z téhož dne“ (≤ 1 den po odběru vzorků).

3.1.10

Negativní vzorky použité při hodnocení funkční způsobilosti musí být reprezentativní z hlediska cílové populace, pro kterou je test určen, např. dárců krve, hospitalizovaných pacientů, těhotných žen atd.

3.1.11

Při hodnocení funkční způsobilosti screeningových testů (tabulka 1) musí být zkoumána populace dárců krve nejméně ze dvou transfuzních stanic a musí se jednat o odběry krve těsně po sobě následující, aniž by ze zkoumání byli vyloučeni prvodárci.

3.1.12

Prostředky musí mít při použití darované krve specificitu nejméně 99,5 %, pokud není v připojených tabulkách uvedeno jinak. Specificita se vypočte na základě frekvence opakovaně pozitivních (falešně pozitivních) výsledků u dárců krve negativních pro cílový marker.

3.1.13

V rámci hodnocení funkční způsobilosti se prostředky hodnotí tak, aby byl zjištěn účinek potenciálních rušivých látek, které do určité míry závisí na složení činidla a konfiguraci testu. Identifikace potenciálních rušivých látek je součástí analýzy rizik, která musí být provedena v rámci základních požadavků na každý nový prostředek, ale může zahrnovat například:

 vzorky představující „příbuzné“ infekce,

 vzorky pocházející od multipar, tj. žen, které byly těhotné více než jednou, nebo od pacientů s pozitivním revmatoidním faktorem,

 u rekombinantních antigenů lidské protilátky vůči komponentům expresního systému, např. proti E-coli nebo proti kvasinkovým antigenům.

3.1.14

Pokud jde o prostředky určené výrobcem k použití se sérem nebo plazmou, musí hodnocení funkční způsobilosti prokázat ekvivalenci séra a plazmy. Musí být prokázána minimálně u 50 odběrů od dárců krve (25 pozitivních a 25 negativních).

3.1.15

Pokud jde o prostředky určené výrobcem k použití s plazmou, musí hodnocení funkční způsobilosti prokázat funkční způsobilost prostředku při použití všech antikoagulantních látek, které výrobce stanoví pro použití s prostředkem. Musí být prokázána minimálně u 50 odběrů od dárců krve (25 pozitivních a 25 negativních).

3.1.16

V rámci požadované analýzy rizik musí být četnost selhání celého systému, které vede k falešně negativním výsledkům, stanovena v opakovaných testech na slabě pozitivních vzorcích.

3.1.17

Nevztahují-li se na nové diagnostické zdravotnické prostředky in vitro na seznamu A přílohy II konkrétní společné technické specifikace, měly by se zohlednit společné technické specifikace pro příbuzný prostředek. Příbuzné prostředky lze identifikovat na různém základě, např. podle stejného nebo podobného určeného použití nebo podle podobných rizik.

3.2    Doplňkové požadavky na kombinované zkoušky na protilátky/antigen HIV

3.2.1

Kombinované zkoušky na protilátky/antigen HIV určené pro detekci anti-HIV a antigenu p24, které jsou rovněž určené pro detekci samostatného antigenu p24, musí odpovídat tabulkám 1 a 5, včetně kritérií pro analytickou citlivost, pokud jde o antigen p24.

3.2.2

Kombinované zkoušky na protilátky/antigen HIV určené pro detekci anti-HIV a antigenu p24, které nejsou určené pro detekci samostatného antigenu p24, musí odpovídat tabulkám 1 a 5, vyjma kritérií pro analytickou citlivost, pokud jde o antigen p24.

3.3    Doplňkové požadavky na techniky amplifikace nukleových kyselin (NAT)

Kritéria hodnocení funkční způsobilosti pro testy NAT jsou uvedena v tabulce 2.

3.3.1

Pokud jde o testy amplifikace cílové sekvence, musí kontrola funkčnosti každého zkušebního vzorku (vnitřní kontrola) odrážet současný stav vědeckých poznatků. Taková kontrola musí být pokud možno prováděna během celého procesu, tj. při extrakci, amplifikaci/hybridizaci, detekci.

3.3.2

Analytická citlivost nebo mez detekce pro testy NAT musí být vyjádřeny 95 % hraniční pozitivní hodnotou cut-off. Tato hodnota odpovídá koncentraci analytu v případě, že 95 % testů po sériových ředěních mezinárodního referenčního materiálu, např. standardu Světové zdravotnické organizace (SZO), nebo kalibrovaných referenčních materiálů, vykazuje pozitivní výsledky.

3.3.3

Detekce genotypu musí být prokázána vhodnou validací primeru nebo sondy a musí být rovněž validována testováním vzorků se stanoveným genotypem.

3.3.4

Kvantitativní zkoušky NAT musí být prováděny na základě mezinárodních standardů nebo kalibrovaných referenčních materiálů, pokud jsou k dispozici, a jejich výsledky musí být vyjádřeny v mezinárodních jednotkách užívaných v dané oblasti použití.

3.3.5

Testy NAT mohou být použity k detekci virů ve vzorcích negativních na protilátky, tj. sérokonverzních vzorcích. Viry v imunokomplexech se mohou chovat ve srovnání s volnými viry odlišně, např. v průběhu centrifugace. Proto je důležité, aby byly do zkoušek robustnosti zařazeny vzorky negativní na protilátky (sérokonverzní vzorky).

3.3.6

Pro zjištění potenciálního přenosu se musí během zkoušek robustnosti provést minimálně pět řad testů střídavě s vysoce pozitivními a negativními vzorky. Vysoce pozitivní vzorky musí obsahovat vzorky s přirozeně se vyskytujícími vysokými titry viru.

3.3.7

Četnost selhání celého systému, která vede k falešně negativním výsledkům, musí být stanovena testováním slabě pozitivních vzorků. Slabě pozitivní vzorky musí obsahovat viry v koncentraci ekvivalentní trojnásobku hodnoty 95 % hraniční pozitivní koncentrace virů.

3.4    STS pro výstupní kontrolu u výrobce týkající se činidel a výsledků reakcí činidel pro detekci, potvrzení a kvantifikaci ukazatelů HIV infekce (HIV 1 a 2), HTLV I a II a hepatitidy B, C a D v lidských vzorcích (pouze imunologické testy)

3.4.1

Kritéria výstupní kontroly u výrobce musí zajistit, aby každá šarže důsledně identifikovala příslušné antigeny, epitopy a protilátky.

3.4.2

Výstupní kontrola šarží pro screeningové testy se u výrobce musí týkat nejméně 100 vzorků negativních na příslušný analyt.

3.5    STS pro hodnocení funkční způsobilosti činidel a výsledků reakcí činidel pro stanovení antigenů krevních skupin: systém krevní skupiny ABO ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B); systém krevní skupiny Rh RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); systém krevní skupiny Kell KEL1 (K)

Kritéria pro hodnocení funkční způsobilosti činidel a výsledků reakcí činidel pro stanovení antigenů krevních skupin systému ABO ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B); systému Rh RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); systému Kell KEL1 (K) jsou uvedena v tabulce 9.

3.5.1

Veškerá hodnocení funkční způsobilosti musí být založena na přímém srovnání se zavedeným prostředkem v souladu se současným stavem techniky. Prostředek použitý pro srovnání musí být opatřen označením CE, pokud je v době hodnocení funkční způsobilosti na trhu.

3.5.2

Pokud se v hodnocení vyskytnou rozporné výsledky, je nutné tyto rozpory pokud možno odstranit například tím, že se

 rozporný vzorek zhodnotí dodatečnými testy,

 použije jiné metody.

3.5.3

Hodnocení funkční způsobilosti se provádějí na populaci ekvivalentní evropské populaci.

3.5.4

Pozitivní vzorky použité při hodnocení funkční způsobilosti se vybírají tak, aby odrážely proměnlivou a slabou expresi antigenu.

3.5.5

V rámci hodnocení funkční způsobilosti se prostředky hodnotí tak, aby byl zjištěn účinek potenciálních rušivých látek, které do určité míry závisí na složení činidla a konfiguraci testu. Identifikace potenciálních rušivých látek je součástí analýzy rizik, která musí být provedena v rámci základních požadavků na každý nový prostředek.

3.5.6

Pokud jde o prostředky určené výrobcem k použití s plazmou, musí hodnocení funkční způsobilosti prokázat funkční způsobilost prostředku při použití všech antikoagulantních látek, které výrobce stanoví pro použití s prostředkem. Musí být prokázána minimálně u 50 odběrů od dárců krve.

3.6    STS pro výstupní kontrolu u výrobce týkající se činidel a výsledků reakcí činidel pro stanovení antigenů krevních skupin: systém krevní skupiny ABO ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B); systém krevní skupiny Rh RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); systém krevní skupiny Kell KEL1 (K)

3.6.1

Kritéria výstupní kontroly u výrobce musí zajistit, aby každá šarže důsledně identifikovala příslušné antigeny, epitopy a protilátky.

3.6.2

Požadavky na výstupní kontrolu šarží u výrobce jsou uvedeny v tabulce 10.



Tabulka 1

„Screeningové“ testy: anti-HIV 1 a 2, anti HTLV I a II, anti-HCV, HBsAg, anti-HBc

 
 

anti-HIV-1/2

anti-HTLV-I/II

anti-HCV

HBsAg

anti-HBc

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

400 HIV-1

100 HIV-2

včetně 40 non-B subtypů, všechny subtypy HIV 1 by měly být reprezentovány nejméně 3 vzorky

300 HTLV-I

100 HTLV-II

400 (pozitivní vzorky)

včetně vzorků z různých stádií infekce a odrážejících různé druhy protilátek.

Genotyp 1-4: > 20 vzorků na genotyp (včetně subtypů non-a genotypu 4);

5: > 5 vzorků;

6: je-li k dispozici

400

včetně přihlédnutí k subtypům

400

včetně hodnocení dalších markerů HBV

Sérokonverzní panely

20 panelů

10 dalších panelů (u notifikovaného subjektu nebo výrobce)

Nutno stanovit, jakmile budou k dispozici

20 panelů

10 dalších panelů (u notifikovaného subjektu nebo výrobce)

20 panelů

10 dalších panelů (u notifikovaného subjektu nebo výrobce)

Nutno stanovit, jakmile budou k dispozici

Analytická citlivost

Normy

 
 
 

0,130 MJ/ml (druhá mezinárodní norma pro HBsAg, podtyp adw2, genotyp A, kód NIBSC: 00/588)

 

Specificita

Náhodně vybraní dárci (včetně „prvodárců“)

5 000

5 000

5 000

5 000

5 000

Hospitalizovaní pacienti

200

200

200

200

200

Vzorky krve s potenciální zkříženou reaktivitou (RF+, příbuzné viry, těhotné ženy atd.)

100

100

100

100

100



Tabulka 2

Testy NAT na HIV1, HCV, HBV, HTLV I/II (kvalitativní a kvantitativní; nikoliv pro molekulární typizaci)

HIV1

HCV

HBV

HTLV I/II

Kritéria přijatelnosti

NAT

Kvalitativní

Kvantitativní

Kvalitativní

Kvantitativní

Kvalitativní

Kvantitativní

Kvalitativní

Kvantitativní

Jako u kvantitativních testů na HIV

Jako u kvantitativních testů na HIV

Jako u kvantitativních testů na HIV

Citlivost

Mez detekce

Detekce analytické citlivosti (MJ/ml; definovaná na základě standardů SZO nebo kalibrovaných referenčních materiálů)

Podle Pokynů pro validaci EP (1): několik sériových ředění až po hraniční koncentraci; statistická analýza (např. probitová analýza) na základě nejméně 24 replikátů; výpočet 95 % hraniční hodnoty cut-off

Mez detekce: stejně jako u kvalitativních testů; Mez kvantifikace: ředění (polovina log 10 nebo méně) kalibrovaných referenčních preparátů, definice dolní a horní meze kvantifikace, přesnost, správnost „lineární“ rozsah měření, „dynamický rozsah“. Musí být prokázána opakovatelnost při různých stupních koncentrace

Podle Pokynů pro validaci EP (1): několik sériových ředění až po hraniční koncentraci; statistická analýza (např. probitová analýza) na základě nejméně 24 replikátů; výpočet 95 % hraniční hodnoty cut-off

 

Podle Pokynů pro validaci EP (1): několik sériových ředění až po hraniční koncentraci; statistická analýza (např. probitová analýza) na základě nejméně 24 replikátů; výpočet 95 % hraniční hodnoty cut-off

 

Podle Pokynů pro validaci EP (1): několik sériových ředění až po hraniční koncentraci; statistická analýza (např. probitová analýza) na základě nejméně 24 replikátů; výpočet 95 % hraniční hodnoty cut-off

 
 

Účinnost detekce/kvantifikace genotypu/subtypu

Pokud možno nejméně 10 vzorků na každý subtyp

Sériová ředění všech příslušných genotypů/subtypů, pokud možno referenčních materiálů, jsou-li k dispozici

Pokud možno nejméně 10 vzorků na každý subtyp

 

Pokud jsou k dispozici kalibrované genotypové referenční materiály

 

Pokud jsou k dispozici kalibrované genotypové referenční materiály

 
 

Supernatanty buněčné kultury (mohou nahradit vzácné subtypy HIV-1)

Mohou bát použity transkripty nebo plasmidy kvantifikované vhodnými metodami.

 
 
 
 
 
 
 

Podle Pokynů pro validaci EP (1), pokud jsou k dispozici kalibrované subtypové referenční materiály; alternativně lze použít transkripty in vitro

 

Podle Pokynů pro validaci EP (1), pokud jsou k dispozici kalibrované subtypové referenční materiály; alternativně lze použít transkripty in vitro

 

Podle Pokynů pro validaci EP (1), pokud jsou k dispozici kalibrované subtypové referenční materiály; alternativně lze použít transkripty in vitro

 

Podle Pokynů pro validaci EP (1), pokud jsou k dispozici kalibrované subtypové referenční materiály; alternativně lze použít transkripty in vitro

 
 

Diagnostická specificita negativních vzorků

500 dárců krve

100 dárců krve

500 dárců krve

 

500 dárců krve

 

500 jednotlivých odběrů od dárců krve

 
 

Markery s potenciální zkříženou reaktivitou

Prokázáním vhodnosti navrženého testu (např. srovnáním sekvencí) a/nebo testováním nejméně 10 vzorků pozitivních na lidský retrovirus (např. HTLV)

Stejně jako u kvalitativních testů

Prokázáním vhodnosti navrženého testu a/nebo testováním nejméně 10 vzorků pozitivních na lidský flavivirus (např. HGV, YFV)

 

Prokázáním vhodnosti navrženého testu a/nebo testováním nejméně 10 dalších vzorků pozitivních na DNA virus

 

Prokázáním hodnosti navrženého testu a/nebo testováním nejméně 10 vzorků pozitivních na lidský retrovirus (např. HIV)

 
 

Robustnost

 

Stejně jako u kvalitativních testů

 
 
 
 
 
 
 

Zkřížená kontaminace

Nejméně 5 řad testů při použití vysoce pozitivních (s prokázaným přirozeným výskytem) a negativních vzorků

 

Nejméně 5 řad testů při použití vysoce pozitivních (s prokázaným přirozeným výskytem) a negativních vzorků

 

Nejméně 5 řad testů při použití vysoce pozitivních (s prokázaným přirozeným výskytem) a negativních vzorků

 

Nejméně 5 řad testů při použití vysoce pozitivních (s prokázaným přirozeným výskytem) a negativních vzorků

 
 

Inhibice

Vnitřní kontrola pokud možno v průběhu celého procesu NAT

 

Vnitřní kontrola pokud možno v průběhu celého procesu NAT

 

Vnitřní kontrola pokud možno v průběhu celého procesu NAT

 

Vnitřní kontrola pokud možno v průběhu celého procesu NAT

 
 

Četnost selhání celého systému vedoucí k falešně negativním výsledkům

Nejméně 100 vzorků infikovaných virem s trojnásobnou 95 % pozitivní hraniční koncentrací

 

Nejméně 100 vzorků infikovaných virem s trojnásobnou 95 % pozitivní hraniční koncentrací

 

Nejméně 100 vzorků infikovaných virem s trojnásobnou 95 % pozitivní hraniční koncentrací

 

Nejméně 100 vzorků infikovaných virem s trojnásobnou 95 % pozitivní hraniční koncentrací

 

99 % pozitivních testů

(1)   Pokyny Evropského lékopisu.

Poznámka: Kritérium přijatelnosti pro „četnost selhání celého systému vedoucích k falešně negativním výsledkům“ je 99 % pozitivních testů.

V případě kvantitativních testů NAT se provede studie s využitím alespoň 100 pozitivních vzorků odrážející běžné podmínky uživatelů (např. bez předběžného výběru vzorků). Souběžně se stanoví výsledky srovnatelné s jiným testem NAT.

V případě kvalitativních testů NAT se provede studie diagnostické citlivosti s využitím alespoň 10 sérokonverzních panelů. Souběžně se stanoví výsledky srovnatelné s jiným systémem testů NAT.



Tabulka 3

Rychlé testy: anti-HIV 1 a 2, anti-HCV, HBsAg, anti-HBc, anti-HTLV I a I

 
 

anti-HIV1/2

anti-HCV

HBsAg

anti-HBc

anti-HTLV I/II

Kritéria přijatelnosti

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Sérokonverzní panely

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Stejná kritéria jako u screeningových testů

Diagnostická specificita

Negativní vzorky

1 000 odběrů od dárců

1 000 odběrů od dárců

1 000 odběrů od dárců

1 000 odběrů od dárců

1 000 odběrů od dárců

≥ 99 % (anti-HBc: ≥ 96 %)

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 vzorků od těhotných žen

200 vzorků od těhotných žen

200 vzorků od těhotných žen

 

200 vzorků od těhotných žen

100 potenciálně rušivých vzorků

100 potenciálně rušivých vzorků

100 potenciálně rušivých vzorků

100 potenciálně rušivých vzorků

100 potenciálně rušivých vzorků



Tabulka 4

Konfirmační/doplňkové testy na anti-HIV 1 a 2, anti-HTLV I a II, anti-HCV, HBsAg

 
 

Konfirmační test anti-HIV

Konfirmační test anti-HTLV

Doplňkový test HCV

Konfirmační test HBsAg

Kritéria přijetí

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

200 HIV-1 a 100 HIV-2

200 HTLV-I a 100 HTLV-II

300 HCV (pozitivní vzorky)

300 HBsAg

Správná identifikace jako pozitivní (nebo neurčitý), ne negativní

Včetně vzorků z různých stádií infekce a odrážejících různé druhy protilátek.

 

Včetně vzorků z různých stádií infekce a odrážejících různé druhy protilátek.

Genotypy 1–4: > 20 vzorků na genotyp (včetně subtypů non-a genotypu 4);

5: > 5 vzorků;

6: je-li k dispozici

Včetně vzorků z různých stádií infekce

20 vysoce pozitivních vzorků (> 26 MJ/ml); 20 vzorků v rozmezí hraničního limitu cut-off

 

Sérokonverzní panely

15 sérokonverzních panelů/panelů s nízkým titrem

 

15 sérokonverzních panelů/panelů s nízkým titrem

15 sérokonverzních panelů/panelů s nízkým titrem

 

Analytická citlivost

Normy

 
 
 

Druhá mezinárodní norma pro HBsAg, podtyp adw2, genotyp A, kód NIBSC kód: 00/588

 

Diagnostická specificita

Negativní vzorky

200 odběrů od dárců

200 odběrů od dárců

200 odběrů od dárců

10 falešně pozitivních v odpovídajících screeningových testech (1)

Žádné falešně pozitivní výsledky/ (1) žádná neutralizace

200 klinických vzorků, včetně těhotných žen

200 klinických vzorků, včetně těhotných žen

200 klinických vzorků, včetně těhotných žen

 
 

50 potenciálně rušivých vzorků, včetně vzorků s neurčitými výsledky v dalších konfirmačních testech

50 potenciálně rušivých vzorků, včetně vzorků s neurčitými výsledky v dalších konfirmačních testech

50 potenciálně rušivých vzorků, včetně vzorků s neurčitými výsledky v dalších doplňkových testech

50 potenciálně rušivých vzorků

 

(1)   Kritéria přijatelnosti pro konfirmační test HBsAg: žádná neutralizace.



Tabulka 5

Antigen HIV 1

 

Test na antigen HIV 1

Kritéria přijatelnosti

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

50 vzorků pozitivních na antigen HIV 1

50 supernatantů buněčné kultury, včetně různých subtypů HIV 1 a HIV 2

Správná identifikace (po neutralizaci)

Sérokonverzní panely

20 sérokonverzních panelů/panelů s nízkým titrem

 

Analytická citlivost

Normy

HIV-1 p24 Antigen, 1. mezinárodní referenční činidlo, kód NIBSC: 90/636

≤ 2 MJ/ml

Diagnostická specificita

 

200 odběrů od dárců

200 klinických vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

≥ 99,5 % po neutralizaci



Tabulka 6

Test sérologické typizace a genotypizace: HCV

 

Test sérologické typizace a genotypizace HCV

Kritéria přijatelnosti

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

200 (pozitivní vzorky)

včetně vzorků z různých stádií infekce a odrážejících různé druhy protilátek.

Genotypy 1–4: > 20 vzorků na genotyp (včetně subtypů non-a genotypu 4);

5: > 5 vzorků;

6: je-li k dispozici

≥ 95 % shoda mezi sérologickou typizací a genotypizací

> 95 % shoda mezi genotypizací a sekvencováním

Diagnostická specificita

Negativní vzorky

100

 



Tabulka 7

Markery HBV: anti-HBs, anti HBc IgM, anti-HBe, HBeAg

 

anti-HBs

anti-HBc IgM

anti-HBe

HBeAg

Kritéria přijatelnosti

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

100 očkovanců

200

200

200

≥ 98 %

100 přirozeně infikovaných osob

Včetně vzorků z různých stadií infekce (akutní/chronické atd.)

Kritéria přijatelnosti by měla být použita pouze u vzorků ze stádia akutní infekce.

Včetně vzorků z různých stadií infekce (akutní/chronické atd.)

Včetně vzorků z různých stadií infekce (akutní/chronické atd.)

Sérokonverzní panely

10 panelů následných vzorků nebo sérokonverzí anti-HBs

Pokud jsou k dispozici

 
 
 

Analytická citlivost

Normy

SZO 1. mezinárodní referenční preparát 1977; NIBSC, Spojené království

 
 

HBe - Referenzantigen 82; PEI Německo

Anti-HBs: < 10 mMJ/ml

Diagnostická specificita

Negativní vzorky

500 odběrů od dárců

200 odběrů od dárců

200 odběrů od dárců

200 odběrů od dárců

≥ 98 %

Včetně klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

200 klinických vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků



Tabulka 8

Markery HDV: anti-HDV, anti-HDV IgM, Delta antigen

 

anti-HDV

anti-HDV IgM

Delta antigen

Kritéria přijatelnosti

Diagnostická citlivost

Pozitivní vzorky

100

50

10

≥ 98 %

Se specifickými markery HBV

Se specifickými markery HBV

Se specifickými markery HBV

Diagnostická specificita

Negativní vzorky

200

200

200

≥ 98 %

Včetně klinických vzorků

Včetně klinických vzorků

Včetně klinických vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků

50 potenciálně rušivých vzorků



Tabulka 9

Antigeny krevních skupin: systém krevních skupin ABO, Rh a Kell

 

1

2

3

Specificita

Počet testů na doporučenou metodu

Celkový počet vzorků, které mají být testovány před uvedením nového výrobku na trh

Celkový počet vzorků, které mají být testovány v případě nového složení nebo v případě použití dobře charakterizovaného činidla

Anti-ABO1 (anti-A), anti-ABO2 (anti-B), anti-ABO3 (anti-A,B)

500

3 000

1 000

Anti-RH1 (anti-D)

500

3 000

1 000

Anti-RH2 (anti-C), anti-RH4 (anti-c), anti-RH3 (anti-E)

100

1 000

200

Anti-RH5 (anti-e)

100

500

200

Anti-KEL1 (anti-K)

100

500

200

Kritéria přijatelnosti:

Všechna výše uvedená činidla musí při testování vykazovat výsledky srovnatelné s výsledky zavedených činidel s přijatelnou funkční způsobilostí s ohledem na udávanou reaktivitu prostředku. Pokud se u zavedených činidel mění nebo rozšiřuje oblast jejich použití, je nutné provést další testování v souladu s požadavky uvedenými ve sloupci 1 (výše).

Hodnocení funkční způsobilosti činidel anti-D musí zahrnovat testy na řadě vzorků slabého RH1 (D) a částečných vzorků RH1 (D), které závisí na předpokládaném použití výrobku.

Kvalifikace:

Klinické vzorky

:

10 % testované populace

Novorozenecké vzorky

:

> 2 % testované populace

Vzorky ABO

:

> 40 % A, B pozitivních

„Slabé D“

:

> 2 % Rh pozitivních

Tabulka 10

Kritéria propouštění šarží pro činidla a výsledky reakcí činidel pro stanovení antigenů krevních skupin pro krevní skupiny ABO, Rh a Kell

Požadavky na kontrolu specificity každého činidla

1.    Testovací činidla



Činidla krevních skupin

Minimální počet kontrolních buněk, které mají být testovány

 

Pozitivní reakce

 

Negativní reakce

 

A1

A2B

Ax

 
 

B

0

 

Anti-ABO1 (anti-A)

2

2

(1)

 

2

2

 
 

B

A1B

 
 

A1

0

 

Anti-ABO2 (anti-B)

2

2

 
 

2

2

 
 

A1

A2

Ax

B

0

 
 

Anti-ABO3 (anti-A,B)

2

2

2

2

4

 
 
 

R1r

R2r

Slabé D

 

r’r

r’r

rr

Anti-RH1 (anti-D)

2

2

(1)

 

1

1

1

 

R1R2

R1r

r’r

 

R2R2

r’r

rr

Anti-RH2 (anti-C)

2

1

1

 

1

1

1

 

R1R2

R1r

r’r

 

R1R1

 
 

Anti-RH4 (anti-c)

1

2

1

 

3

 
 
 

R1R2

R2r

r’r

 

R1R1

r’r

rr

Anti-RH 3 (anti-E)

2

1

1

 

1

1

1

 

R1R2

R2r

r’r

 

R2R2

 
 

Anti-RH5 (anti-e)

2

1

1

 

3

 
 
 

Kk

 
 
 

kk

 
 

Anti-KEL1 (anti-K)

4

 
 
 

3

 
 

(1)   Pouze s použitím doporučených technik, pokud je udávána reaktivita vůči těmto antigenům.

Poznámka: Polyklonální činidla musí být testována na širším panelu buněk, aby se potvrdila specificita a vyloučila přítomnost nežádoucích znečišťujících protilátek.

souladu s výsledky získanými z údajů hodnocení funkční způsobilosti musí každá šarže činidla vykazovat u všech doporučených technik jednoznačně pozitivní nebo negativní výsledky.

2.    Kontrolní materiály (červené krvinky)

Fenotyp červených krvinek použitých při kontrole výše uvedených činidel pro stanovení krevních skupin musí být potvrzen s použitím zavedeného prostředku.



( 1 ) Úř. věst. L 331, 7.12.1998, s. 1.

( 2 ) Úř. věst. L 189, 20.7.1990, s. 17.