First Commission Directive

ENSIMMÄINEN KOMISSION DIREKTIIVI,

of 13 November 1979

annettu 13 päivänä marraskuuta 1979,

laying down Community methods of analysis for testing certain partly or wholly dehydrated preserved milk for human consumption

yhteisön analyysimenetelmistä tiettyjen osittain tai kokonaan kuivattujen elintarvikkeeksi tarkoitettujen maitosäilykkeiden tarkastamiseksi (79/1067/ETY)

(79/1067/EEC)

THE COMMISSION OF THE EUROPEAN COMMUNITIES,

EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO, joka

Having regard to the Treaty establishing the European Economic Community,

ottaa huomioon Euroopan talousyhteisön perustamissopimuksen,

Having regard to Council Directive 76/118/EEC of 18 December 1975 on the approximation of the laws of the Member States relating to certain partly or wholly dehydrated preserved milk for human consumption [1], and in particular Article 11 thereof,

ottaa huomioon tiettyjä osittain tai kokonaan kuivattuja elintarvikkeena käytettäviä säilöttyjä maitoja koskevan jäsenvaltioiden lainsäädännön lähentämisestä 18 päivänä joulukuuta 1975 annetun neuvoston direktiivin 76/118/ETY(1) ja erityisesti sen 11 artiklan,

Whereas under Article 11 of Directive 76/118/EEC, the composition of certain partly or wholly dehydrated preserved milk is required to be verified by Community methods of analysis;

sekä katsoo, että

Whereas it is desirable to adopt an initial series of methods in respect of which studies have been completed;

direktiivin 76/118/ETY 11 artiklan mukaan on tiettyjen osittain tai kokonaan kuivattujen maitosäilykkeiden koostumus tarkastettava yhteisön analyysimenetelmiä käyttäen,

Whereas the measures provided for in this Directive are in accordance with the opinion of the Standing Committee of Foodstuffs,

on suotavaa antaa ensimmäinen sarja menetelmiä, joiden osalta tutkimukset on saatu päätökseen, ja

HAS ADOPTED THIS DIRECTIVE:

tässä direktiivissä säädetyt toimenpiteet ovat pysyvän elintarvikekomitean lausunnon mukaiset,

Article 1

ON ANTANUT TÄMÄN DIREKTIIVIN:

Member States shall take all measures necessary to ensure that the analyses necessary for verification of the criteria set out in Annex I are carried out in accordance with the methods described in Annex II.

Article 2

1 artikla

Where alternative methods for a single determination are specified, the sample may be analysed by either method. The test report referred to in Annex II must state the method which has been employed.

Jäsenvaltioiden on toteutettava kaikki tarvittavat toimenpiteet sen varmistamiseksi, että liitteessä I säädettyjen ominaisuuksien tarkastamiseksi tarvittavat analyysit suoritetaan liitteessä II esitettyjen menetelmien mukaisesti.

Article 3

Member States shall bring into force the laws, regulations and administrative provisions necessary to comply with this Directive within 18 months of its notification. They shall forthwith inform the Commission thereof.

2 artikla

Article 4

Jos yksittäistä määritystä varten annetaan vaihtoehtoisia menetelmiä, voidaan näyte analysoida kummalla menetelmällä tahansa. Liitteessä II tarkoitetussa testausselosteessa on mainittava käytetty menetelmä.

This Directive is addressed to the Member States.

3 artikla

Done at Brussels, 13 November 1979.

Jäsenvaltioiden on saatettava tämän direktiivin noudattamisen edellyttämät lait, asetukset ja hallinnolliset määräykset voimaan 18 kuukauden kuluessa sen tiedoksi antamisesta. Niiden on ilmoitettava tästä komissiolle viipymättä.

For the Commission

Étienne Davignon

4 artikla

Member of the Commission

Tämä direktiivi on osoitettu kaikille jäsenvaltioille.

[1] OJ No L 24, 30. 1. 1976, p. 49.

Tehty Brysselissä 13 päivänä marraskuuta 1979.

--------------------------------------------------

Komission puolesta

ANNEX I

Étienne DAVIGNON

SCOPE OF THE FIRST COMMUNITY METHODS OF ANALYSIS FOR CERTAIN PARTLY OR . WHOLLY DEHYDRATED PRESERVED MILK DIRECTIVE

Komission jäsen

I. General provisions

(1) EYVL N:o L 24, 30.1.1976, s. 49

II. Determination of dry matter in:

- unsweetened condensed high fat milk (using method 1, Annex II),

- unsweetened condensed milk (using method 1, Annex II),

- unsweetened condensed partly skimmed milk (using method 1, Annex II),

- unsweetened condensed skimmed milk (using method 1, Annex II),

LIITE I

- sweetened condensed milk (using method 1, Annex II),

- sweetened condensed partly skimmed milk (using method 1, Annex II),

TIETTYJEN OSITTAIN TAI KOKONAAN KUIVATTUJEN MAITOSÄILYKKEIDEN ANALYYSIMENETELMIÄ KOSKEVAN ENSIMMÄISEN YHTEISÖN DIREKTIIVIN SOVELTAMISALA

- sweetened condensed skimmed milk (using method 1, Annex II).

I. Yleiset säännökset

III. Determination of moisture in:

II. Kuiva-aineen määritys seuraavista valmisteista:

- dried high fat milk or high fat milk powder (using method 2, Annex II), — dried whole milk or whole milk powder (using method 2, Annex II),

- sokeroimaton, runsasrasvainen tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder (using method 2, Annex II),

- sokeroimaton tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder (using method 2, Annex II).

- sokeroimaton, vähärasvainen tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

IV. Determination of fat in:

- sokeroimaton, rasvaton tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

- unsweetened condensed high fat milk (using method 3, Annex II),

- sokeroitu tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

- unsweetened condensed milk (using method 3, Annex II),

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito (menetelmä 1, liite II);

- unsweetened condensed partly skimmed milk (using method 3, Annex II),

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito (menetelmä 1, liite II).

- unsweetened condensed skimmed milk (using method 3, Annex II),

III. Kosteuspitoisuuden määritys seuraavista valmisteista:

- sweetened condensed milk (using method 3, Annex II),

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe (menetelmä 2, liite II);

- sweetened condensed partly skimmed milk (using method 3, Annex II),

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe (menetelmä 2, liite II);

- sweetened condensed skimmed milk (using method 3, Annex II),

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe (menetelmä 2, liite II);

- dried high fat milk or high fat milk powder (using method 4, Annex II),

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe (menetelmä 2, liite II).

- dried whole milk or whole milk powder (using method 4, Annex II),

IV. Rasvapitoisuuden määritys seuraavista valmisteista:

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder (using method 4, Annex II),

- sokeroimaton, runsasrasvainen tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder (using method 4, Annex II).

- sokeroimaton tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

V. Determination of sucrose in:

- sokeroimaton, vähärasvainen tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

- sweetened condensed milk (using method 5, Annex II),

- sokeroimaton, rasvaton tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

- sweetened condensed partly skimmed milk (using method 5, Annex II),

- sokeroitu tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

- sweetened condensed skimmed milk (using method 5, Annex II).

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito (menetelmä 3, liite II);

VI. Determination of lactic acid and lactates in:

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito (menetelmä 3, liite II):

- dried high fat milk or high fat milk powder (using method 6, Annex II),

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe (menetelmä 4, liite II);

- dried whole milk or whole milk powder (using method 6, Annex II),

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe (menetelmä 4, liite II);

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder (using method 6, Annex II),

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe (menetelmä 4, liite II);

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder (using method 6, Annex II).

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe (menetelmä 4, liite II).

VII. Determination of phosphatase activity in:

V. Sakkaroosipitoisuuden määritys seuraavista valmisteista:

- dried high fat milk or high fat milk powder (using method 7 or 8, Annex II),

- sokeroitu tiivistemaito (menetelmä 5, liite II);

- dried whole milk or whole milk powder (using method 7 or 8, Annex II),

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito (menetelmä 5, liite II);

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder (using method 7 or 8, Annex II),

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito (menetelmä 5, liite II).

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder (using method 7 or 8, Annex II).

VI. Maitohapon ja laktaattien määritys seuraavista valmisteista:

--------------------------------------------------

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe (menetelmä 6, liite II);

ANNEX II

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe (menetelmä 6, liite II);

METHODS OF ANALYSIS RELATING TO THE COMPOSITION OF CERTAIN PARTLY OR WHOLLY DEHYDRATED PRESERVED MILK PRODUCTS INTENDED FOR HUMAN CONSUMPTION

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe (menetelmä 6, liite II);

GENERAL PROVISIONS

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe (menetelmä 6, liite II).

1. PREPARATION OF THE SAMPLE FOR CHEMICAL ANALYSIS

VII. Fosfataasin aktiivisuuden määritys seuraavista valmisteista:

1.1. Unsweetened condensed high fat milk

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe (menetelmä 7 tai 8, liite II);

Unsweetened condensed milk

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe (menetelmä 7 tai 8, liite II);

Unsweetened condensed partly skimmed milk

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe (menetelmä 7 tai 8, liite II);

Unsweetened condensed skimmed milk

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe (menetelmä 7 tai 8, liite II).

Shake and invert the closed can. Open the can and slowly pour the milk into a second container which can be closed hermetically, mixing by repeated transfer. Ensure that all remaining fat and milk adhering to the wall and the ends of the can are mixed in with the sample. Close the container. If the contents are not homogeneous warm the container in a waterbath at 40 oC. Shake vigorously every 15 minutes. After two hours, remove the container from the water-bath and let it cool to room temperature. Remove the lid and thoroughly mix the contents of the container with a spoon or spatula (if the fat has separated the sample should not be tested). Store in a cool place.

1.2. Sweetened condensed milk

Sweetened condensed partly skimmed milk

Sweetened condensed skimmed milk

LIITE II

Cans: Warm the closed can in a waterbath at 30 to 40 oC for about 30 minutes. Open the can and thoroughly mix the contents with a spatula or a spoon by making upward, downward, and circular movements in order to obtain an intimate mixture of the top and bottom layers with all the contents. Ensure that the remaining milk adhering to the wall and end of the can is incorporated in the sample. As far as possible, pour the contents into a second container provided with an air-tight lid. Close the container and store in a cool place.

Tubes: Cut the end and pour the contents into a container provided with an air-tight lid. Next, cut the tube lengthwise. Scrape out all material adhering to the interior and mix it carefully with the rest of the contents. Store the container in a cool place.

TIETTYJEN ELINTARVIKKEEKSI TARKOITETTUJEN, OSITTAIN TAI KOKONAAN KUIVATTUJEN MAITOSÄILYKKEIDEN KOOSTUMUSTA KOSKEVAT ANALYYSIMENETELMÄT

1.3. Dried high fat milk or high fat milk powder

Dried whole milk or whole milk powder

YLEISET SÄÄNNÖKSET

Dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder

1. NÄYTTEEN VALMISTELU KEMIALLISTA ANALYYSIÄ VARTEN

Dried skimmed milk or skimmed-milk powder

1.1 Sokeroimaton, runsasrasvainen tiivistemaito

Transfer the milk powder to a clean, dry container (with air-tight lid) of a capacity of twice the volume of the powder. Close the container immediately and thoroughly mix the milk powder by repeatedly shaking and inverting the container. During the preparation of the sample exposure of the milk powder to the atmosphere should be avoided as far as possible to minimize absorption of moisture.

Sokeroimaton tiivistemaito

2. REAGENTS

Sokeroimaton, vähärasvainen tiivistemaito

2.1. Water

Sokeroimaton, rasvaton tiivistemaito

2.1.1. Wherever mention is made of water for dissolution, dilution or washing purposes, distilled water, or demineralized water of at least equivalent purity shall be used.

Avaamatonta tölkkiä ravistellaan ja käännetään ylösalaisin. Tölkki avataan, ja maito kaadetaan hitaasti useita kertoja edestakaisin toiseen astiaan, joka voidaan sulkea ilmatiiviisti. Varmistetaan, että kaikki tölkin seinämille ja pohjiin tarttunut rasva ja maito sekoittuvat näytteeseen. Suljetaan astia. Ellei sen sisältö ole homogeenista, astiaa lämmitetään 40 °C:ssa vesihauteessa. Ravistellaan voimakkaasti 15 minuutin välein. Astia poistetaan kahden tunnin kuluttua vesihauteesta, ja sen annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan. Kansi avataan, ja koko astian sisältöä sekoitetaan lusikalla tai lastalla (jos rasva on erottunut, ei näytettä pidä tutkia). Säilytetään viileässä paikassa.

2.1.2. Wherever reference is made to "dissolution", "solution" or "dilution" without further indication, "dissolution in water", "solution in water" and "dilution in water" is meant.

1.2 Sokeroitu tiivistemaito

2.2. Chemicals

Sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito

All chemicals used shall be of recognized analytical reagent quality except where otherwise specified.

Sokeroitu, rasvaton tiivistemaito

3. EQUIPMENT

Tölkit: Avaamatonta tölkkiä lämmitetään 30-40 °C:ssa vesihauteessa noin 30 minuuttia. Tölkki avataan, ja koko sen sisältöä sekoitetaan lastalla tai lusikalla ylös- ja alaspäin suuntautuvin sekä pyörivin liikkein niin, että pinta- ja pohjakerrokset sekoittuvat hyvin koko sisältöön. Varmistetaan, että tölkin seinämille ja pohjalle tarttunut maito tulee mukaan näytteeseen. Tölkin sisältö kaadetaan mahdollisimman nopeasti toiseen ilmatiiviillä kannella varustettuun astiaan. Astia suljetaan ja säilytetään viileässä paikassa.

3.1. Lists of equipment

Putkilot: Putkilonpää katkaistaan, ja sisältö kaadetaan ilmatiiviillä kannella varustettuun astiaan. Leikataan sitten putkilo pituussuuntaan auki. Kaikki sisäpuolelle tarttunut aine kaavitaan irti ja sekoitetaan huolellisesti muuhun sisältöön. Astiaa säilytetään viileässä paikassa.

The lists of equipment contain only those items with a specialized use and items with a particular specification.

1.3 Kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe

3.2. Analytical balance

Kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe

Analytical balance means a balance capable of weighing to at least 0,1 mg.

Kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe

4. EXPRESSION OF RESULTS

Kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe

4.1. Calculation of percentage

Maitojauhe siirretään puhtaaseen ja kuivaan astiaan (jossa on ilmatiivis kansi), jonka tilavuus on kaksi kertaa jauheen tilavuus. Astia suljetaan heti, ja maitojauhe sekoitetaan ravistellen ja käännellen astiaa ylösalaisin useita kertoja. Näytteen valmistelun aikana pitäisi kaikin tavoin välttää maitojauheen kosketusta ilman kanssa, jotta kosteuden imeytyminen olisi mahdollisimman vähäistä.

Except where otherwise specified, the results shall be calculated as a percentage by mass of the sample as received by the laboratory.

2. REAGENSSIT

4.2. Number of significant figures

2.1 Vesi

The result shall not contain more significant figures than are justified by the precision of the method of analysis used.

2.1.1 Aina kun ohjeessa tarvitaan vettä liuottamiseen, laimentamiseen tai pesuun, on käytettävä tislattua vettä tai vähintään yhtä puhdasta, suoloista puhdistettua vettä.

5. TEST REPORT

2.1.2 Aina kun ohjeessa mainitaan "liuos" tai "laimennus" ilman muuta tarkennusta, tarkoitetaan "vesiliuosta" ja "laimennusta veteen".

The test report shall identify the method of analysis used as well as the results obtained. In addition, it shall mention all details of procedure not specified in the method of analysis, or which are optional, as well as any circumstances that may have influenced the results obtained.

2.2 Kemikaalit

The test report shall give all the information necessary for the complete identification of the sample.

Kaikkien käytettävien kemikaalien tulee olla tunnettua analyysireagenssilaatua, jollei toisin ilmoiteta.

METHOD 1: DETERMINATION OF DRY MATTER CONTENT

3. LAITTEET

(oven 99 oC)

3.1 Laiteluettelot

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

Laiteluettelo käsittää vain erikoiskäyttöön tarkoitetut ja erityisvaatimuksia tarvitsevat laitteet.

This method determines the dry matter content of:

3.2 Analyysivaaka

- unsweetened condensed high fat milk,

Analyysivaaka tarkoittaa vaakaa, jonka punnitustarkkuus on vähintään 0,1 mg.

- unsweetened condensed milk,

4. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

- unsweetened condensed partly skimmed milk,

4.1 Prosenttimäärien laskeminen

- unsweetened condensed skimmed milk,

Ellei toisin määritellä, lasketaan tulokset painoprosentteina laboratorioon saapuneesta näytteestä.

- sweetened condensed milk,

4.2 Merkitsevien numeroiden lukumäärä

- sweetened condensed partly skimmed milk,

Tuloksissa ei saa olla enemmän merkitseviä numeroita kuin käytetyn analyysimenetelmän tarkkuus edellyttää.

- sweetened condensed skimmed milk.

5. KOESELOSTE

2. DEFINITION

Koeselosteesta pitää ilmetä saatujen tuloksien ohella käytössä ollut analyysimenetelmä. Lisäksi siinä on mainittava kaikki suoritustavat, joita ei ole eritelty analyysimenetelmässä tai jotka ovat vaihtoehtoisia, samoin kuin tuloksiin mahdollisesti vaikuttaneet olosuhteet.

The dry matter content of condensed milks: dry matter content as determined by the method specified.

Koeselosteessa on esitettävä kaikki tarpeellinen tieto, jonka perusteella näyte varmasti tunnistetaan.

3. PRINCIPLE

A known amount of the sample is diluted with water, mixed with sand and dried at a temperature of 99 oC ± 1 oC. The mass after drying is the mass of dry matter and is calculated as a percentage by mass of the sample.

MENETELMÄ 1: KUIVA-AINEPITOISUUDEN MÄÄRITYS (kuivauskaappi 99 °C)

4. REAGENTS

1. SOVELTAMISALA

Quartz sand or sea sand, treated with hydrochloric acid (size of the grains: 0,18 to 0,5 mm, that is passing through a 500 micron sieve and retained by a 180 micron sieve). It should meet the following control test:

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden kuiva-ainepitoisuus:

Heat about 25 g of sand for two hours in the drying oven (5.3) as described in 6.1. to 6.3. Add 5 ml of water, heat again in the oven for two hours, cool and reweigh. The difference between the two masses should not exceed 0,5 mg.

- sokeroimaton, runsasrasvainen tiivistemaito,

If necessary treat the sand with a 25 % hydrochloric acid solution for three days, mixing occasionally. Wash with water until the acid reaction disappears or the wash water is chloride free. Dry at 160 oC and re-test as above.

- sokeroimaton tiivistemaito,

5. APPARATUS

- sokeroimaton, vähärasvainen tiivistemaito,

5.1. Analytical balance.

- sokeroimaton, rasvaton tiivistemaito,

5.2. Metal dishes, preferably of nickel, aluminium or stainless steel. The dishes must have lids which fit very well but which are readily removed. Suitable dimensions are: diameter 60 to 80 mm and depth about 25 mm.

- sokeroitu tiivistemaito,

5.3. Atmospheric-pressure drying oven, well ventilated, thermostatically controlled with temperature regulated at 99 oC ± 1 oC. The temperature should be uniform throughout the oven.

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito,

5.4. Desiccator, containing freshly activated silica gel with a water content indicator or an equivalent desiccant.

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito.

5.5. Glass rods, flattened at one end of such a length that they can fit inside the metal dishes (5.2).

2. MÄÄRITELMÄ

5.6. Waterbath, boiling.

Tiivistemaitojen kuiva-ainepitoisuus: annetun menetelmän mukaan määritetty kuiva-ainepitoisuus.

6. PROCEDURE

3. PERIAATE

6.1. Place about 25 g sand (4) and a short glass rod (5.5) in the dish (5.2).

Punnittu näytemäärä laimennetaan vedellä, sekoitetaan hiekan kanssa ja kuivataan lämpötilassa 99 °C ± 1 °C. Kuivauksen jälkeen punnittu ainemäärä on kuiva-aineen määrä, ja se lasketaan painoprosentteina näytteen painosta.

6.2. Without covering the dish and contents with the lid, place the dish, contents and lid in the oven (5.3) and heat for two hours.

4. REAGENSSIT

6.3. Replace lid and transfer the dish to the desiccator (5.4). Allow to cool to room temperature and accurately weigh to the nearest 0,1 mg (M0).

Suolahapolla käsitelty kvartsihiekka tai merihiekka (raekoko: 0,18-0,5 mm, joka läpäisee 500 mikronin seulan ja jää 180 mikronin seulalle). Sen pitää täyttää seuraava tarkastusmittaus:

6.4. Tilt the sand to one side of the dish. Introduce into the clear space about 1,5 g of the sample of sweetened condensed milk and 3,0 g of unsweetened condensed milk. Replace the lid and accurately weigh to the nearest 0,1 mg (M1).

Kuumennetaan noin 25 g hiekkaa kahden tunnin ajan kuivauskaapissa (5.3) kohtien 6.1-6.3 mukaisesti. Lisätään 5 ml vettä, kuumennetaan vielä kaksi tuntia kuivauskaapissa, jäähdytetään ja punnitaan uudelleen. Kahden punnituskerran välinen ero ei saa olla enemmän kuin 0,5 mg.

6.5. Remove the lid, add 5 ml of water and, with the aid of the glass rod, mix the liquids and then the sand and the liquid portion. Leave the rod in the mixture.

Tarvittaessa hiekkaa käsitellään 25-prosenttisella suolahapolla kolmen päivän ajan, välillä sekoittaen. Hiekka pestään vedessä, kunnes pesuvedessä ei ole enää happoa tai klorideja. Hiekka kuivataan 160 °C:ssa, ja äskeinen mittaus toistetaan.

6.6. Place the dish on a boiling waterbath (5.6) until the water has evaporated; this usually takes 20 minutes. Stir the mixture from time to time with the rod to keep the mass well aerated so that the mass when dry does not form a cake. Lay the rod inside the dish.

5. LAITTEET

6.7. Place the dish and lid in the oven for one and a half hours.

5.1 Analyysivaaka

6.8. Replace the lid, transfer the dish to the desiccator (5.4), allow to cool to room temperature and accurately weigh to the nearest 0,1 mg.

5.2 Metalliastioita, mieluiten nikkeliä, alumiinia tai ruostumatonta terästä. Astioissa pitää olla tiiviit mutta helposti avattavat kannet. Tarkoitukseen sopivat mitat ovat: halkaisija 60-80 mm ja korkeus noin 25 mm.

6.9. Replace the dish and lid in the oven, uncover the dish and heat it with its lid for a further hour.

5.3 Kuivauskaappi, joka on hyvin tuulettuva ja termostaatilla säädettävissä lämpötilaan 99 °C ± 1 °C. Kaapin lämpötilan on oltava tasainen.

6.10. Repeat process 6.8.

5.4 Eksikkaattori, jossa on vasta aktivoitua, vesipitoisuutta osoittavaa silikageeliä tai vastaavaa kuivausainetta.

6.11. Repeat the described processes 6.9 and 6.10 until the difference in mass of two successive weighings is less than 0.5 mg or until the mass increases. If an increase in mass occurs use the lowest mass obtained in the calculation (7.1). Let the final weight recorded be M2 g.

5.5 Lasisauvoja, joiden toinen pää on muotoiltu metalliastioiden (5.2) sisään sopivaksi.

7. EXPRESSION OF RESULTS

5.6 Kiehuva vesihaude.

7.1. Method of calculation

6. MENETTELY

The content of dry matter, calculated as a percentage by mass of the sample, is given by:

6.1 Laitetaan noin 25 g hiekkaa (4) ja lyhyt lasisauva (5.5) astiaan (5.2).

×100

6.2 Astia laitetaan sisältöineen kansi irrallisena kuivauskaappiin (5.3) ja kuumennetaan kahden tunnin ajan.

where:

6.3 Kansi laitetaan paikoilleen, ja astia siirretään eksikkaattoriin (5.4). Sen annetaan jäähtyä huoneen lämpötilaan ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella (M0).

M0 = mass, in g of the dish, lid and sand after process 6.3;

6.4 Hiekka kallistetaan astian toiselle reunalle. Laitetaan tyhjään tilaan noin 1,5 g:n näyte sokeroitua tiivistemaitoa ja 3 g sokeroimatonta tiivistemaitoa. Kansi laitetaan paikoilleen ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella (M1).

M1 = mass, in g of the dish, lid, sand and sample after process 6.4;

6.5 Kansi avataan, lisätään 5 ml vettä ja sekoitetaan lasisauvalla (5.5) ensin nesteet ja sitten hiekka nesteosaan. Lasisauva jätetään seokseen.

M2 = mass, in g of the dish, lid, sand and dried sample after process 6.11.

6.6 Astiaa pidetään kiehuvassa vesihauteessa (5.6), kunnes vesi on haihtunut; yleensä se kestää 20 minuuttia. Seosta ilmastetaan aika ajoin lasisauvalla sekoittaen niin, ettei massa paakkuunnu kuivuessaan. Sauva jätetään maljaan.

7.2. Repeatability

6.7 Astia laitetaan kansi erillisenä kuivauskaappiin puolentoista tunnin ajaksi.

6.8 Kansi laitetaan paikoilleen, astia siirretään eksikkaattoriin (5.4), sen annetaan jäähtyä huoneen lämpötilaan ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella.

8. CALCULATION OF TOTAL MILK SOLIDS AND MILK SOLIDS NOT FAT

6.9 Astia laitetaan kansi avoimena uudelleen kuivauskaappiin, ja sitä ja kantta kuumennetaan vielä tunnin ajan.

8.1. The total milk solids content of the sweetened condensed milk is given by:

6.10 Toistetaan 6.8 kohta.

Total dry matter (obtained by method 1, Annex II) — sucrose (obtained by method 5, Annex II).

6.11 Toistetaan 6.9 ja 6.10 kohta, kunnes kahden perättäisen punnituksen välinen ero on alle 0,5 mg, tai kunnes paino lisääntyy. Jos paino lisääntyy, käytetään laskennassa (7.1) pienintä punnitustulosta. Lopullinen punnitustulos ilmaistaan M2 g:na.

8.2. The milk solids not fat content of the sweetened condensed milks is given by:

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

Total dry matter (obtained by method 1, Annex II) — (sucrose content obtained by method 5, Annex II) and fat content (obtained by method 3, Annex II).

7.1 Laskeminen

8.3. The milk solids not fat content of unsweetened condensed milks is given by:

Kuiva-ainepitoisuus lasketaan painoprosentteina näytteen painosta seuraavasta kaavasta:

Total dry matter (obtained by method 1, Annex II) — fat content (obtained by method 3, Annex II).

>NUM>M2 - M0

METHOD 2: DETERMINATION OF MOISTURE

>DEN>M1 - M0

(oven 102 oC) .

× 100

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

jossa

This method determines the loss of mass on drying of:

M0 = astian, kannen ja hiekan paino (g) 6.3 kohdan mukaan;

- dried high fat milk or high fat milk powder,

M1 = astian, kannen, hiekan ja näytteen paino (g) 6.4 kohdan mukaan;

- dried whole milk or whole milk powder,

M2 = astian, kannen, hiekan ja kuivatun näytteen paino (g) 6.11 kohdan mukaan.

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder,

7.2 Toistettavuus

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder.

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 0,2 g kuiva-ainetta tuotteen 100 grammaa kohti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

2. DEFINITION

8. MAIDON KOKONAISKUIVA-AINEEN JA RASVATTOMAN KUIVA-AINEEN LASKENTA

Moisture content: the loss of mass on drying as determined by the method specified.

8.1 Sokeroidun tiivistemaidon kokonaiskuiva-ainepitoisuus lasketaan seuraavasti:

3. PRINCIPLE

Kokonaiskuiva-aine (menetelmä 1, liite II) - sakkaroosi (menetelmällä 5, liite II).

The residual mass of a test portion is determined after drying at atmospheric pressure in an oven at 102 oC ± 1 oC to constant mass. The loss of mass is calculated as a percentage by mass of the sample.

8.2 Sokeroidun tiivistemaidon rasvaton kuiva-ainepitoisuus lasketaan seuraavasti:

4. APPARATUS

Kokonaiskuiva-aine (menetelmä 1, liite II) - sakkaroosipitoisuus (menetelmällä 5, liite II) ja rasvapitoisuus (menetelmä 3, liite II).

4.1. Analytical balance.

8.3 Sokeroimattoman tiivistemaidon rasvaton kuiva-ainepitoisuus lasketaan seuraavasti:

4.2. Dishes, preferably of nickel, aluminium, stainless steel or glass. The dishes must have lids which fit very well but which can readily be removed. Suitable dimensions are: diameter 60 to 80 mm and depth about 25 mm.

Kokonaiskuiva-aine (menetelmä 1, liite II) - rasvapitoisuus (menetelmä 3, liite II).

4.3. Atmospheric-pressure drying oven, well ventilated, thermostatically controlled with temperature regulation (at 102 oC ± 1 oC). The temperature should be uniform throughout the oven.

4.4. Desiccator, containing freshly activated silica gel with a water content indicator or an equivalent desiccant.

5. PROCEDURE

MENETELMÄ 2: KOSTEUDEN MÄÄRITYS (kuivauskaappi 102 °C)

5.1. Uncover the dish (4.2) and place it and its lid in the oven (4.3) and heat for about one hour.

1. SOVELTAMISALA

5.2. Place the lid on the dish and transfer the covered dish to the desiccator (4.4). Allow it to cool to room temperature and accurately weigh to the nearest 0,1 mg (Mo).

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden painohäviö kuivauksessa:

5.3. Introduce approximately 2 g of dried milk sample into the dish, cover the dish with the lid and accurately weigh to the nearest 0,1 mg the covered dish as quickly as possible (M1).

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe;

5.4. Uncover the dish and put it with its lid in the oven for two hours.

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe;

5.5. Replace the lid, transfer the covered dish to the desiccator, allow it to cool to room temperature and accurately weigh to the nearest 0,1 mg as quickly as possible.

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe;

5.6. Uncover the dish and heat it and its lid for one hour in the oven.

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe.

5.7. Repeat process 5.5.

2. MÄÄRITELMÄ

5.8. Repeat processes 5.6 and 5.5 until the decrease in mass between the successive weighings does not exceed 0,5 mg or until the mass increases. If an increase in mass occurs use the lowest mass obtained in the calculation (6.1). Let the final weight recorded be M2 g.

Kosteuspitoisuus: annetun menetelmän mukaan määritetty painohäviö kuivauksessa.

6. EXPRESSION OF RESULTS

3. PERIAATE

6.1. Method of calculation

Tutkittavan näytteen jäännöspaino määritetään ilmakehän paineessa 102 °C ± 1 °C:n lämpötilassa vakiopainoon suoritetun kuivauksen jälkeen. Painohäviö lasketaan painoprosentteina näytteen painosta.

Calculate the loss of mass on drying of the sample, expressed as a percentage by mass, by the formula:

4. LAITTEET

×100

4.1 Analyysivaaka

where:

4.2 Metalliastioita, mieluiten nikkeliä, alumiinia, ruostumatonta terästä tai lasia. Astioissa pitää olla tiiviit mutta helposti avattavat kannet. Tarkoitukseen sopivat mitat ovat: halkaisija 60-80 mm ja korkeus noin 25 mm.

M0 = mass, in g of the dish and its lid after process 5.2;

4.3 Kuivauskaappi, joka on hyvin tuulettuva ja termostaatilla säädettävissä lämpötilaan 102 °C ± 1 °C. Kaapin lämpötilan on oltava tasainen.

M1 = mass, in g of the dish, its lid and sample after process 5.3;

4.4 Eksikkaattori, jossa on vasta aktivoitua, vesipitoisuutta osoittavaa silikageeliä tai vastaavaa kuivausainetta.

M2 = mass, in g of the dish, its lid and final sample after process 5.5.

5. MENETTELY

6.2. Repeatability

5.1 Astian kansi (4.2) avataan, astia ja kansi asetetaan kuivauskaappiin (4.3) ja kuumennetaan noin tunnin ajan.

The difference in results between two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 0,1 g of moisture per 100 g of product.

5.2 Kansi laitetaan astiaan, ja suljettu astia siirretään eksikkaattoriin (4.4). Sen annetaan jäähtyä huoneen lämpötilaan, ja se punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella (M0).

METHOD 3: DETERMINATION OF FAT CONTENT IN CONDENSED MILKS (RÖSE-GOTTLIEB METHOD)

5.3 Noin 2 g kuivattua maitonäytettä laitetaan astiaan, kansi suljetaan ja suljettu astia punnitaan mahdollisimman nopeasti 0,1 mg:n tarkkuudella (M1).

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

5.4 Astia avataan, ja se asetetaan kannen kanssa kuivauskaappiin kahdeksi tunniksi.

This method determines the fat content of:

5.5 Kansi laitetaan takaisin paikoilleen, suljettu astia siirretään eksikkaattoriin, sen annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan, ja se punnitaan mahdollisimman pian 0,1 mg:n tarkkuudella.

- unsweetened condensed high fat milk,

5.6 Astia avataan, ja sitä ja kantta kuumennetaan yhden tunnin ajan kuivauskaapissa.

- unsweetened condensed milk,

5.7 Toistetaan 5.5 kohta.

- unsweetened condensed partly skimmed milk,

5.8 Toistetaan 5.6 ja 5.5 kohta, kunnes kahden perättäisen punnituksen välinen ero on vähemmän kuin 0,5 mg, tai kunnes paino lisääntyy. Jos paino lisääntyy, laskennassa (6.1) käytetään pienintä punnitustulosta. Lopullinen punnitustulos ilmoitetaan M2 g:na.

- unsweetened condensed skimmed milk,

6. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

- sweetened condensed milk,

6.1 Laskeminen

- sweetened condensed partly skimmed milk,

Näytteen painohäviö kuivauksessa lasketaan painoprosentteina näytteen painosta seuraavasta kaavasta:

- sweetened condensed skimmed milk.

>NUM>M2 - M0

2. DEFINITION

>DEN>M1 - M0

The fat content of condensed milks: fat content as determined by the method specified.

× 100

3. PRINCIPLE

jossa

The fat content is determined by extraction of the fat from an ammoniacal alcoholic solution of the sample with diethyl ether and light petroleum followed by evaporation of the solvents and weighing of the residue and calculation as a percentage by mass of the sample, according to the principle of Rose-Gottlieb.

M0 = astian ja sen kannen paino (g) 5.2 kohdan mukaan;

4. REAGENTS

M1 = astian, kannen ja näytteen paino (g) 5.3 kohdan mukaan;

All reagents should conform to the requirements specified in the blank test (6.1). If necessary, reagents may be redistilled in the presence of about 1 g of butterfat for 100 ml of solvent.

M2 = astian, kannen ja lopullisen näytteen paino (g) 5.5 kohdan mukaan.

4.1. Ammonia solution, approximately 25 % (m/m) NH3 (density at 20 oC approximately 0.91 g/ml), or a stronger solution of known concentration.

6.2 Toistettavuus

4.2. Ethanol, 96 ± 2 % (v/v) or, if not available, ethanol denatured with methanol, ethyl methyl ketone or light petroleum.

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 0,1 g kosteutta tuotteen 100 grammaa kohti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

4.3. Diethyl ether, peroxide-free.

Note 1:

To test for peroxides, add to 10 ml of the ether in a small glass stoppered cylinder, previously rinsed with the ether, 1 ml freshly prepared 10 % potassium iodide solution. Shake and let stand for one minute. No yellow colour should be observed in either layer.

MENETELMÄ 3: RASVAPITOISUUDEN MÄÄRITYS (RÖSE-GOTTLIEB-MENETELMÄ)

Note 2:

1. SOVELTAMISALA

Diethyl ether may be maintained free from peroxides by adding wet zinc foil that has been completely immersed in dilute acidified copper sulphate solution for one minute and subsequently washed with water. Use per litre approximately 8000 mm2 zinc foil; cut in strips long enough to reach at least halfway up the container.

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden rasvapitoisuus:

4.4. Light petroleum (petroleum ether), with any boiling range between 30 and 60 oC.

- sokeroimaton, runsasrasvainen tiivistemaito;

4.5. Mixed solvent, prepared shortly before use by mixing equal volume of diethyl ether (4.3) and light petroleum (4.4) (where the use of mixed solvent is indicated, it may be replaced by either diethyl ether or light petroleum alone).

- sokeroimaton tiivistemaito;

5. APPARATUS

- sokeroimaton, vähärasvainen tiivistemaito;

5.1. Analytical balance.

- sokeroimaton, rasvaton tiivistemaito;

5.2. Suitable extraction tubes or flasks, provided with ground glass stoppers or other closures un-. affected by the solvents used.

- sokeroitu tiivistemaito;

5.3. Flasks, thin-walled and flat-bottomed, 150 to 250 ml capacity.

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito;

5.4. Atmospheric pressure drying oven, well ventilated and thermostatically controlled (adjusted to operate at 102 oC ± 1 oC.

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito.

5.5. Anti-bumping granules, fat-free, non porous, non friable in use, e.g. glass beads or pieces of silicon carbide (the use of this material is optional; see clause 6.2.1.

2. MÄÄRITELMÄ

5.6. Siphon, to fit extraction tubes.

Tiivistemaitojen rasvapitoisuus: annetun menetelmän mukaan määritetty rasvapitoisuus.

5.7. Centrifuge (optional).

3. PERIAATE

6. PROCEDURE

Rasvapitoisuus määritetään siten, että rasva uutetaan näytteen ammoniakkipitoisesta alkoholiliuoksesta dietyylieetterillä ja petroolieetterillä, sen jälkeen liuottimet haihdutetaan, jäännös punnitaan ja lasketaan prosentteina näytteen painosta Röse-Gottlieb menetelmän mukaan.

6.1. Blank test

4. REAGENSSIT

At the same time as the determination of the fat content of the sample, carry out a blank determination on 10 ml of water using the same type of extraction apparatus, the same reagents in the same amounts and the same procedure as described hereafter, excluding clause 6.2.2. If the blank exceeds 0.5 mg, the reagents should be checked and the impure reagent or reagents should be purified or replaced.

Kaikkien reagenssien pitää täyttää sokeakokeessa (6.1) esitetyt vaatimukset. Reagenssit voidaan tarvittaessa tislata uudelleen lisäämällä noin 1 g voirasvaa 100 ml:an liuotinta.

6.2. Determination

4.1 Ammoniakkiliuos, jossa on noin 25-prosenttinen (m/m) NH3 (tiheys 20 °C:ssa noin 0,91 g/ml) tai väkevämpi tunnettu liuos.

6.2.1. Dry a flask (5.3) (together with, if required, some anti-bumping granules (5.5) to promote gentle boiling during the subsequent removal of the solvents) in the oven (5.4) for half to one hour. Allow the flask to cool to the temperature of the balance room and accurately weigh the cooled flask to the nearest 0,1 mg.

4.2 Etanoli, 96 ± 2 % (v/v), tai sen puuttuessa metanolilla denaturoitua etanolia, etyylimetyyliketonia tai petroolieetteriä.

6.2.2. Stir the prepared sample and immediately weigh, to the nearest 1 mg, 2 to 2,5 g of the sample if sweetened or 4 to 5 g of the sample if unsweetened directly in, or by difference into, the extraction apparatus (5.2). Add water to 10,5 ml and shake gently with slight warming (40 to 50 oC) until the product is completely dispersed. The sample must be dispersed completely otherwise the determination should be repeated.

4.3 Dietyylieetteri, peroksiditon

6.2.3. Add 1,5 ml ammonia (25 %) (4.1) or a corresponding volume of a stronger solution, and mix well.

Huomautus 1:

6.2.4. Add 10 ml ethanol (4.2) and mix the liquids gently but thoroughly in the unclosed apparatus.

Peroksidien toteamista varten laitetaan eetterillä huuhdeltuun lasitulppaiseen koeputkeen 10 ml eetteriä, ja siihen lisätään 1 ml vastavalmistettua 10-prosenttista kaliumjodidiliuosta. Ravistetaan ja jätetään seisomaan yhdeksi minuutiksi. Minkäänlaista keltaista väriä ei saisi näkyä kummassakaan nestekerroksessa.

6.2.5. Add 25 ml diethyl ether (4.3). Cool under running water. Close the apparatus and shake vigorously and invert repeatedly for one minute.

Huomautus 2:

6.2.6. Remove the stopper carefully and add 25 ml light petroleum (4.4) using the first few millilitres to rinse the stopper and inside of the neck of the apparatus, allowing the rinsings to run into the apparatus. Close by replacing the stopper and shake and invert repeatedly for 30 seconds. Do not shake too vigorously if centrifuging is not to be used in 6.2.7.

Peroksidit voidaan poistaa dietyylieetteristä lisäämällä siihen märkää sinkkifoliota, joka on kokonaan kastettu laimeaan happamaan kuparisulfaattiliuokseen yhdeksi minuutiksi ja sen jälkeen pesty vedellä. Litraa kohti käytetään noin 8 000 mm² sinkkifoliota; se leikataan niin pitkiksi suikaleiksi, että ne ulottuvat vähintään puoleen väliin astian pohjasta.

6.2.7. Allow the apparatus to stand until the upper liquid layer has become clear and has distinctly separated from the lower aqueous layer. Alternatively carry out the separation using a suitable centrifuge (5.7).

4.4 Petroolieetteri, jonka kiehumispisteväli on 30-60 °C.

Note:

4.5 Liuotinseos, jossa on yhtä suuri tilavuus dietyylieetteriä (4.3) ja petroolieetteriä (4.4) ja joka on valmistettu juuri ennen käyttöä (kun liuotinseoksen käyttö mainitaan, voidaan se korvata pelkästään joko dietyylieetterillä tai petroolieetterillä).

When a centrifuge which is not driven by a three-phase motor, is used, sparks may occur and care must therefore be taken to avoid an explosion or fire from any ether vapours, coming, for example, from a broken tube.

5. LAITTEET

6.2.8. Remove the stopper, rinse it and the inside of the neck of the apparatus with a few millilitres of mixed solvent (4.5) and allow the rinsings to run into the apparatus. Carefully transfer as much as possible of the supernatant layer by decantation or by means of a siphon (5.6) into the pre pared flask (6.2.1).

5.1 Analyysivaaka

Note:

5.2 Sopivia uuttoputkia tai -astioita, joissa on hioslasitulpat tai muunlaiset käytettyjä liuottimia kestävät sulkimet.

If the transfer is not made using a siphon, it may be necessary to add a little water in order to raise the interface between the two layers thus aiding decantation.

5.3 Ohutseinäisiä ja tasapohjaisia pulloja, tilavuus 150-250 ml.

6.2.9. Rinse the outside and the inside of the neck of the apparatus or the tip and the lower part of the siphon with a few millilitres of mixed solvent (4.5). Allow the rinsings from the outside of the apparatus to run into the flask and the rinsings from the inside of the neck and from the siphon to run into the extraction apparatus.

5.4 Kuivauskaappi, hyvin tuulettuva ja termostaattisäätöinen (säädetty toimimaan lämpötilassa 102 °C ± 1 °C).

6.2.10. Make a second extraction by repeating the procedure of 6.2.5 to 6.2.9 inclusive but using only 15 ml diethyl ether and 15 ml light petroleum.

5.5 Ryöpsähtelyä estäviä rakeita, rasvattomia, tiivispintaisia, käytössä murenemattomia, kuten esimerkiksi lasihelmiä tai piikarbidikappaleita (tämän materiaalin käyttö on valinnaista; katso 6.2.1 kohta).

6.2.11. Make a third extraction by repeating the procedure of 6.2.10 but omit the final rinsing (6.2.9).

5.6 Sifoni, uuttoputkiin sopiva.

Note:

5.7 Sentrifugi (valinnainen).

It is not mandatory to carry out this third extraction when analysing skimmed unsweetened condensed milk and skimmed sweetened condensed milk samples.

6. MENETTELY

6.2.12. Carefully evaporate or distil off as much solvent (including the ethanol) as possible. If the flask is of small capacity, it will be necessary to remove some of the solvent as above after each extraction.

6.1 Sokeakoe

6.2.13. When there is no appreciable odour of solvent place the flask on its side in the oven and heat for one hour.

Samanaikaisesti näytteen rasvapitoisuuden määrityksen kanssa suoritetaan sokeamääritys 10 ml:n vesinäytteestä käyttäen samantyyppistä uuttolaitetta, yhtä suuria määriä samoja reagensseja ja samaa jäljempänä esitettyä suoritustapaa, lukuun ottamatta 6.2.2 kohtaa. Jos sokeakokeesta tulee enemmän kuin 0,5 mg, on reagenssit tarkistettava ja epäpuhdas reagenssi tai reagenssit puhdistettava tai vaihdettava.

6.2.14. Remove the flask from the oven, allow to cool to the temperature of the balance room and accurately weigh to the nearest 0,1 mg.

6.2 Määritys

6.2.15. Repeat 6.2.13 and 6.2.14 for heating periods of 30 to 60 minutes until the difference in mass of two successive weighings is less than 0.5 mg or until the mass increases. If an increase in mass occurs use the lowest mass obtained in the calculation (7.1). Let the final weight recorded be M1 g.

6.2.1 Pulloa (5.3) (sekä tarvittaessa tasaista kiehumista edistäviä kiehumiskiviä (5.5)) kuivataan kuivauskaapissa (5.4) puolesta tunnista yhteen tuntiin. Pullon annetaan jäähtyä vaakahuoneen lämpötilaan, ja jäähtynyt pullo punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella.

6.2.16. Add 15 to 25 ml light petroleum in order to confirm that the extracted matter is wholly soluble. Warm gently and swirl the solvent until all the fat is dissolved.

6.2.2 Valmisteltu näyte sekoitetaan, ja punnitaan 1 mg:n tarkkuudella 2-2,5 g sokeroitua näytettä tai 4-5 g sokeroimatonta näytettä uuttolaitteessa tai uuttolaitteeseen (5.2). Siihen lisätään 10,5 ml vettä ja ravistellaan hiljaa kevyesti lämmittäen (40-50 °C), kunnes tuote on täysin dispergoitunut. Näytteen pitää dispergoitua täydellisesti, muutoin määritys on tehtävä uudelleen.

6.2.16.1. If the extracted matter is wholly soluble in the light petroleum, the mass of fat is the difference between the weights determined at stages 6.2.1 and 6.2.15.

6.2.3 Lisätään 1,5 ml ammoniakkia (25 prosenttista) (4.1) tai vastaava määrä väkevämpää liuosta ja sekoitetaan hyvin.

6.2.16.2. If any insoluble matter is present, or in case of doubt, completely extract the fat from the flasks by repeated washing with warm light petroleum, allowing the undissolved material to settle before each decantation. Rinse the outside of the neck of the flask three times. Heat the flask, placed on its side, for one hour in the oven, allow to cool to the temperature of the balance room as before (6.2.1) and weigh to the nearest 0,1 mg. The mass of fat is the difference between the mass obtained at 6.2.15 and this final mass.

6.2.4 Lisätään 10 ml etanolia (4.2), ja sekoitetaan nesteet avoimessa laitteessa varovasti mutta perusteellisesti.

7. EXPRESSION OF RESULTS

6.2.5 Lisätään 25 ml dietyylieetteriä (4.3). Jäähdytetään juoksevalla vedellä. Laite suljetaan, ravistellaan voimakkaasti ja käännellään useita kertoja ylösalaisin yhden minuutin ajan.

7.1. Calculation

6.2.6 Tulppa poistetaan varovasti, ja lisätään 25 ml petroolieetteriä (4.4) käyttäen ensimmäiset millilitrat tulpan ja laitteen kaulan huuhteluun siten, että huuhteluliuos valuu laitteeseen. Tulppa suljetaan, ravistellaan ja käännellään ylösalaisin useita kertoja 30 sekunnin ajan. Ellei näytettä sentrifugoida kohdassa 6.2.7, sitä ei pidä ravistella liian voimakkaasti.

The mass, in g of fat extracted is:

6.2.7 Laitteen annetaan seistä, kunnes ylimmäinen nestekerros on kirkastunut ja selvästi eronnut alimmaisesta vesikerroksesta. Vaihtoehtoisesti erotus voidaan suorittaa sopivalla sentrifugilla (5.7).

(M1 — M2) — (B1 — B2)

Huomautus:

and the fat content of the sample, expressed as a percentage is:

Jos sentrifugin käyttömoottori ei ole kolmivaiheinen, voi se kipinöidä, ja sen vuoksi on varauduttava estämään räjähdystä tai tulipaloa, joka voi aiheutua esimerkiksi rikkoutuneesta putkesta haihtuneesta eetterihöyrystä.

×100

6.2.8 Tulppa irrotetaan, huuhdellaan se ja laitteen kaula sisäpuolelta muutamalla millilitralla liuotinseosta (4.5), ja huuhteluliuoksen annetaan valua laitteeseen. Siirretään varovasti mahdollisimman paljon pintakerrosta dekantoimalla tai sifonilla (5.6) esivalmisteltuun pulloon (6.2.1)

where:

Huomautus:

M1 = mass, in g of flask M with fat after stage 6.2.15;

Jollei siirtoa suoriteta sifonilla, saattaa olla tarpeen lisätä hieman vettä, joka nostaa kahden nestekerroksen välistä rajapintaa ja helpottaa dekantointia.

M2 = mass, in g of flask M after stage 6.2.1 or, in the case of undissolved material or doubt, stage 6.2.16.2;

6.2.9 Laitteen kaula huuhdellaan sisä- ja ulkopuolelta tai sifonin kärki ja alaosa muutamalla millilitralla liuotinseosta (4.5). Annetaan laitteen ulkopuolisen huuhtelulioksen valua pulloon sekä kaulan sisäpuolen ja sifonin huuhteluliuoksien valua uuttolaitteeseen.

B1 = mass, in g of flask B of the blank after stage 6.2.15;

6.2.10 Toinen uutto suoritetaan toistamalla 6.2.5-6.2.9 kohta, mutta käyttäen vain 15 ml dietyylieetteriä ja 15 ml petroolieetteriä.

B2 = mass, in g of flask B after stage 6.2.1 or, in the case of undissolved material or doubt, stage 6.2.16.2;

6.2.11 Kolmas uutto suoritetaan toistamalla 6.2.10 kohta, mutta jättäen pois viimeinen huuhtelu.

S = mass, in g of sample used.

Huomautus:

7.2. Repeatability

Kolmatta uuttoa ei tarvitse suorittaa silloin, kun analysoidaan sokeroimattoman, rasvattoman tiivistemaidon tai sokeroidun, rasvattoman tiivistemaidon näytteitä.

The difference between results of two determinations carried out obtained simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 0,05 g fat per 100 g of the product.

6.2.12 Mahdollisimman paljon liuotinta (myös etanolia) haihdutetaan tai tislataan varovasti pois. Jos pullon tilavuus on pieni, saattaa olla tarpeen poistaa tällä tavoin liuotinta jokaisen uuton jälkeen.

METHOD 4: DETERMINATION OF FAT CONTENT IN DRIED MILKS (RÖSE-GOTTLIEB METHOD)

6.2.13 Kun liuottimen hajua ei enää tunnu, pullo asetetaan kyljelleen kuivauskaappiin ja kuumennetaan yhden tunnin ajan.

1. SCOPE AND FIELD AND APPLICATION

6.2.14 Pullo otetaan kuivauskaapista, sen annetaan jäähtyä vaakahuoneen lämpötilaan ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella.

This method determines the fat content of:

6.2.15 Toistetaan 6.2.13 ja 6.2.14 kohta kuumentaen pulloa 30-60 minuuttia, kunnes kahden peräkkäisen punnituksen välinen painoero on vähemmän kuin 0,5 mg tai kunnes paino lisääntyy. Jos paino lisääntyy, käytetään pienintä punnitustulosta laskennassa (7.1). Lopullinen paino ilmoitetaan M1 g:na.

- dried high fat milk or high fat milk powder,

6.2.16 Pulloon lisätään 15-25 ml petroolieetteriä sen todentamiseksi, että uutettu aine on täysin liukenevaa. Lämmitetään varovasti ja pulloa pyöritetään, kunnes kaikki rasva on liuennut.

- dried whole milk or whole milk powder,

6.2.16.1 Jos uutettu aine liukenee kokonaan petroolieetteriin, on rasvan paino 6.2.1 ja 6.2.15 kohdassa saatujen punnitustuloksien erotus.

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder,

6.2.16.2 Jos mukana on vähänkin liukenematonta ainetta, tai sitä epäillään, rasva uutetaan pulloista pesemällä useita kertoja lämpimällä petroolieetterillä, ja annetaan liukenemattoman aineen laskeutua ennen uutta dekantointia. Pullon kaula huuhdellaan ulkopuolelta kolme kertaa. Pulloa kuumennetaan kyljellään yhden tunnin ajan kuivauskaapissa, sen annetaan jäähtyä vaakahuoneen lämpötilaan kuten 6.2.1 kohdassa ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella. Rasvan paino on 6.2.15 kohdassa saadun painon ja tämän lopullisen painon välinen erotus.

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder.

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

2. DEFINITION

7.1 Laskeminen

The fat content of dried milks: fat content as determined by the method specified.

Uutetun rasvan paino (g) on:

3. PRINCIPLE

(M1 - M2) - (B1 - B2)

The fat content is determined by extraction of the fat from an ammoniacal alcoholic solution of sample with diethyl ether and light petroleum, followed by evaporation of the solvents and weighing of the residue and calculation as a percentage by mass of the sample, according to the principle of Rose-Gottlieb.

ja näytteen rasvapitoisuusprosentti on:

4. REAGENTS

>NUM>(M1 - M2) - (B1 - B2)

All reagents should conform to the requirements specified in the blank test (6.1). If necessary, reagents may be redistilled in the presence of about 1 g of butterfat per 100 ml of solvent.

>DEN>S

4.1. Ammonia solution, approximately 25 % (m/m) NH3 (density at 20 oC approximately 0.91 g/ml), or stronger solution of known concentration.

× 100

4.2. Ethanol, 96 ± 2 % (v/v) or, if not available, ethanol denatured with methanol, ethyl methyl ketone or light petroleum.

jossa

4.3. Diethyl ether, peroxide-free

M1 = pullon M ja rasvan paino (g) 6.2.15 kohdan mukaan;

Note 1:

M2 = pullon M paino (g) 6.2.1 kohdan tai, jos kyseessä on liukenematon aine tai sitä epäillään, 6.2.16.2 kohdan mukaan;

To test for peroxide, add to 10 ml of the ether in a small glass stoppered cylinder, previously rinsed with the ether, 1 ml freshly prepared 10 % potassium iodide solution. Shake and let stand for one minute. No yellow colour should be observed in either layer.

B1 = pullon B paino (g) sokeakokeesta 6.2.15 kohdan mukaan;

Note 2:

B2 = pullon B paino (g) 6.2.1 kohdan tai, jos kyseessä on liukenematon aine tai sitä epäillään, 6.2.16.2 kohdan mukaan;

Diethyl ether may be maintained free from peroxides by adding wet zinc foil that has been completely immersed in dilute acidified copper sulphate solution for one minute and subsequently washed with water. Use per litre approximately 8000 mm2 zinc foil cut in strips long enough to reach at least halfway up the container.

S = tutkittavan näytteen paino g).

4.4. Light petroleum (petroleum ether), with any boiling range between 30 and 60 oC.

7.2 Toistettavuus

4.5. Mixed solvent, prepared shortly before use by mixing equal volumes of diethyl ether (4.3) and light petroleum (4.4) (when the use of mixed solvent is indicated, it may be replaced by either diethyl ether or light petroleum alone).

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 0,05 g rasvaa tuotteen 100 grammaa kohti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

5. APPARATUS

5.1. Analytical balance.

5.2. Suitable extraction tubes or flasks, provided with ground glass stoppers or other closures unaffected by the solvents used.

MENETELMÄ 4: RASVAPITOISUUDEN MÄÄRITYS (RÖSE-GOTTLIEB-MENETELMÄ)

5.3. Flasks, thin-walled, flat-bottomed, of 150 to 250 ml capacity.

1. SOVELTAMISALA

5.4. Atmospheric pressure drying oven, well ventilated and thermostatically controlled (adjusted to operate at 102 oC ± 1 oC).

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden rasvapitoisuus:

5.5. Anti-bumping granules, fat-free, non porous, non friable in use, e.g. glass beads or pieces of silicon carbide (the use of this material is optional: see clause 6.2.1).

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe;

5.6. Waterbath, at 60 to 70 oC.

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe;

5.7. Siphon to fit extraction tubes.

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe;

5.8. Centrifuge (optional).

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe.

6. PROCEDURE

2. MÄÄRITELMÄ

6.1. Blank test

Kuivattujen maitojen rasvapitoisuus: annetun menetelmän mukaan määritetty rasvapitoisuus.

At the same time as the determination of the fat content of the sample, carry out a blank determination on 10 ml of water using the same type of extraction apparatus, the same reagents in the same amounts and the same procedure as described hereafter, excluding clause 6.2.2. If blank exceeds 0.5 mg, the reagents should be checked and the impure reagent or reagents should be purified or replaced.

3. PERIAATE

6.2. Determination

6.2.1. Dry the flask (5.3) together with, if required, some anti-bumping granules (5.5) to promote gentle boiling during the subsequent removal of the solvents) in the oven (5.4) for half to one hour. Allow the flask to cool to the temperature of the balance room and accurately, weigh the cooled flask to the nearest 0,1 mg.

4. REAGENSSIT

6.2.2 Accurately weigh, to the nearest 1 mg, directly in, or by difference into, the extraction apparatus (5.2) about 1 g of whole milk powder or about 1,5 g of partly skimmed or skimmed-milk powder. Add 10 ml water and shake gently until the milk powder is completely dispersed (heat may be necessary for some samples).

Kaikkien reagenssien pitää täyttää sokeakokeessa (6.1) esitetyt vaatimukset. Reagenssit voidaan tarvittaessa tislata uudelleen lisäämällä noin 1 g voirasvaa 100 ml:aan liuotinta.

6.2.3. Add 1.5 ml ammonia (25 %) (4.1) or a corresponding volume of a stronger solution and heat in a waterbath (5.6) for 15 minutes at 60 to 70 oC, shaking occasionally. Cool, for example, in running water.

4.1 Ammoniakkiliuos, jossa on noin 25-prosenttinen (m/m) NH3 (tiheys 20 °C:ssa noin 0,91 g/ml) tai väkevämpi tunnettu liuos.

6.2.4. Add 10 ml ethanol (4.2) and mix the liquids gently but thoroughly in the unclosed apparatus.

4.2 Etanoli, 96 ± 2 % (v/v), tai jos sitä ei ole, metanolilla denaturoitua etanolia, etyylimetyyliketonia tai petroolieetteriä.

6.2.5. Add 25 ml diethyl ether (4.3). Cool in running water. Close the apparatus and shake vigorously and invert repeatedly for one minute.

4.3 Dietyylieetteri, peroksiditon

Huomautus 1:

Peroksidien toteamista varten eetterillä huuhdeltuun lasitulppaiseen koeputkeen laitetaan 10 ml eetteriä ja siihen lisätään 1 ml vastavalmistettua 10-prosenttista kaliumjodidiliuosta. Ravistellaan ja jätetään seisomaan yhdeksi minuutiksi. Minkäänlaista keltaista väriä ei saisi näkyä kummassakaan nestekerroksessa.

Note:

Huomautus 2:

When a centrifuge which is not driven by a three-phase motor is used, sparks may occur and care must therefore be taken to avoid an explosion or fire from any ether vapours coming, for example, from a broken tube.

4.4 Petroolieetteri, jonka kiehumispisteväli on 30-60 °C.

Note:

If the transfer is not made using a siphon, it may be necessary to add a little water in order to raise the interface between the two layers thus aiding decantation.

5. LAITTEET

6.2.9. Rinse the outside and the inside of the neck of the apparatus or the tip and the lower part of the siphon with a few millilitres of mixed solvent. Allow the rinsings from the outside of the appara tus to run into the flask and the rinsings from the inside of the neck and from the siphon to run into the extraction apparatus.

5.1 Analyysivaaka

6.2.10. Make a second extraction by repeating the procedure of 6.2.5 to 6.2.9 inclusive but using only 15 ml diethyl ether and 15 ml light petroleum.

5.2 Sopivia uuttoputkia tai -astioita, joissa on hioslasitulpat tai muunlaiset käytettyjä liuottimia kestävät sulkimet.

6.2.11. Make a third extraction by repeating the procedure of 6.2.10 but omit the final rinsing (6.2.9).

5.3 Ohutseinäisiä ja tasapohjaisia pulloja, tilavuus 150-250 ml

Note:

5.4 Kuivauskaappi, hyvin tuulettuva ja termostaattisäätöinen (säädetty toimimaan lämpötilassa 102 °C ± 1 °C).

It is not mandatory to carry out this third extraction when analysing dried skimmed milk samples.

6.2.12. Carefully evaporate or distil off as much solvent (including the ethanol) as possible. If the flask is of small capacity it will be necessary to remove some of the solvent as above after each extraction.

5.6 Vesihaude, 60-70 °C.

6.2.13. When there is no appreciable odour of solvent, place the flask on its side in the oven and heat for one hour.

5.7 Sifoni, uuttoputkiin sopiva.

6.2.14. Remove the flask from the oven, allow to cool to the temperature of the balance room as previously (6.2.1) and accurately weigh to the nearest 0,1 mg.

5.8 Sentrifugi (valinnainen).

6.2.15. Repeat 6.2.13 and 6.2.14 for heating periods of 30 to 60 minutes until the difference in mass of two successive weights is less than 0,5 mg or until the mass increases. If an increase in mass occurs use the lowest mass obtained in the calculation (7.1). Let the final weight recorded be M1 g.

6. MENETTELY

6.2.16. Add 15 to 25 ml light petroleum in order to confirm that the extracted matter is wholly soluble. Warm gently and swirl the solvent until all the fat is dissolved.

6.1 Sokeakoe

6.2.16.1. If the extracted matter is wholly soluble in the light petroleum, the mass of fat is the difference between the weights determined at stages 6.2.1 and 6.2.15.

6.2.16.2. If any insoluble matter is present, or in case of doubt completely extract the fat from the flask by repeated washing with warm light petroleum, allowing the undissolved material to settle before each decantation. Rinse the outside of the neck of the flask three times.

6.2 Määritys

Heat the flask, placed on its side, for one hour in the oven, allow to cool to the temperature of the balance room, as before (6.2.1) and weigh to the nearest 0,1 mg. The mass of fat is the difference between the mass under 6.2.15 and this final mass.

7. EXPRESSION OF RESULTS

6.2.2 Punnitaan 1 mg:n tarkkuudella 1 g rasvaista maitojauhetta tai noin 1,5 g vähärasvaista tai rasvatonta maitojauhetta uuttolaitteessa tai uuttolaitteeseen (5.2). Siihen lisätään 10 ml vettä ja ravistellaan hiljaa, kunnes maitojauhe on täysin dispergoitunut (jotkut näytteet voivat vaatia lämmittämistä).

7.1. Calculation

6.2.3 Lisätään 1,5 ml ammoniakkia (25-prosenttista) (4.1) tai vastaava määrä väkevämpää liuosta ja kuumennetaan vesihauteessa (5.6) 60-70 °C:ssa 15 minuutin ajan, välillä ravistellen. Jäähdytetään esimerkiksi juoksevalla vedellä.

The mass, in g of fat extracted is:

6.2.4 Lisätään 10 ml etanolia (4.2), ja nesteet sekoitetaan avoimessa laitteessa varovasti mutta perusteellisesti.

(M1 — M2) — (B1 — B2)

6.2.5 Lisätään 25 ml dietyylieetteriä (4.3). Jäähdytetään juoksevalla vedellä. Laite suljetaan, ravistellaan voimakkaasti ja käännellään useita kertoja ylösalaisin yhden minuutin ajan.

and the fat content of the sample, expressed as a percentage, is:

6.2.6 Tulppa poistetaan varovasti ja lisätään 25 ml petroolieetteriä (4.4) käyttäen ensimmäiset millilitrat tulpan ja laitteen kaulan huuhteluun siten, että huuhteluliuos valuu laitteeseen. Tulppa suljetaan, ravistellaan ja käännellään ylösalaisin useita kertoja 30 sekunnin ajan. Ellei näytettä sentrifugoida 6.2.7 kohdassa, sitä ei pidä ravistella liian voimakkaasti.

×100

where:

Huomautus:

M1 = mass, in g of flask M with fat after stage 6.2.15;

M2 = mass, in g of flask M after stage 6.2.1 or, in the case of undissolved material or doubt, stage 6.2.16.2;

6.2.8 Tulppa irrotetaan, se ja laitteen kaula huuhdellaan sisäpuolelta muutamalla millilitralla liotinseosta (4.5) ja huuhteluliuoksen annetaan valua laitteeseen. Mahdollisimman paljon pintakerrosta siirretään varovasti dekantoimalla tai sifonilla (5.7) valmisteltuun pulloon (6.2.1).

B1 = mass, in g of flask B of the blank after stage 6.2.15;

Huomautus:

B2 = mass, in g of flask B after stage 6.2.1 or, in the case of undissolved material or doubt, stage 6.2.16.2;

Jollei siirtoa suoriteta sifonilla, saattaa olla tarpeen lisätä hieman vettä, jolloin kahden nestekerroksen välinen rajapinta nousee ja helpottaa dekantointia.

S = mass, in g of sample used.

6.2.9 Laitteen kaula huuhdellaan sisä- ja ulkopuolelta tai sifonin kärki ja alaosa muutamalla millilitralla liuotinseosta (4.5). Laitteen ulkopuolisen huuhtelulioksen annetaan valua pulloon sekä kaulan sisäpuolen ja sifonin huuhteluliuoksien valua uuttolaitteeseen.

7.2. Repeatability

6.2.10 Toinen uutto suoritetaan toistamalla 6.2.5-6.2.9 kohta, mutta käyttäen vain 15 ml dietyylieetteriä ja 15 ml petroolieetteriä.

The difference between results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 0,2 g fat per 100 g of product with the exception of skimmed-milk powder for which the difference must not exceed 0,1 g fat per 100 g of product.

6.2.11 Kolmas uutto suoritetaan toistamalla 6.2.10 kohta, mutta jättäen pois viimeinen huuhtelu (6.2.9).

METHOD 5: DETERMINATION OF SUCROSE CONTENT (POLARIMETERIC METHOD)

Huomautus:

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

Kolmatta uuttoa ei ole pakko suorittaa silloin, kun analysoidaan kuivattujen, rasvattomien maitojen näytteitä.

This method determines the sucrose content of:

- sweetened condensed milk,

6.2.13 Kun liuottimen hajua ei enää tunnu, pullo asetetaan kyljelleen kuivauskaappiin ja kuumennetaan yhden tunnin ajan.

- sweetened condensed partly skimmed milk,

6.2.14 Otetaan pullo kuivauskaapista, sen annetaan jäähtyä vaakahuoneen lämpötilaan kuten 6.2.1 kohdassa ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella.

- sweetened condensed skimmed milk.

Samples must not contain invert sugar.

6.2.16 Pulloon lisätään 15-25 ml petroolieetteriä sen todentamiseksi, että uutettu aine on täysin liukenevaa. Lämmitetään varovasti ja pulloa pyöritetään, kunnes kaikki rasva on liuennut.

2. DEFINITION

6.2.16.1 Jos uutettu aine liukenee kokonaan petroolieetteriin, on rasvan paino 6.2.1 ja 6.2.15 kohdassa saatujen punnitustuloksien erotus.

The sucrose content of sweetened condensed milks: the sucrose content as determined by the method specified.

6.2.16.2 Jos mukana on vähänkin liukenematonta ainetta tai sitä epäillään, rasva uutetaan pulloista pesemällä useita kertoja lämpimällä petroolieetterillä, ja annetaan liukenemattoman aineen laskeutua ennen uutta dekantointia. Pullon kaula huuhdellaan ulkopuolelta kolme kertaa.

3. PRINCIPLE

Pulloa kuumennetaan kyljellään yhden tunnin ajan kuivauskaapissa, sen annetaan jäähtyä vaakahuoneen lämpötilaan kuten 6.2.1 kohdassa ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella. Rasvan paino on 6.2.15 kohdassa saadun painon ja tämän lopullisen painon välinen erotus.

The method is based on the principle of the Clerget inversion, a mild treatment of the sample with acid which produces complete hydrolysis of sucrose but almost none of lactose or other sugars. The sucrose content is obtained from the change in rotating power of the solution.

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

A clear filtrate of the sample, without mutarotation by lactose, is prepared by treatment of the solution with ammonia followed by neutralization and clearing by the successive addition of zinc acetate and potassium hexacyanoferrate II solutions.

7.1 Laskeminen

In a portion of the filtrate the sucrose is hydrolyzed in a specified manner.

Uutetun rasvan paino (g) on:

From the rotation of the filtrate before and after inversion, the sucrose content is calculated using the appropriate formulae.

(M1 - M2) - (B1 - B2)

4. REAGENTS

ja näytteen rasvapitoisuusprosentti on:

4.1. Zinc acetate solution, 1 M: dissolve 21,9 g crystallized zinc acetate dihydrate Zn(C2H.O2)2.2H2O and 3 ml glacial acetic acid in water and make up to 100 ml with water.

>NUM>(M1 - M2) - (B1 - B2)

4.2. Potassium hexacyanoferrate (II) solution, 0,25 M: dissolve 10,6 g crystallized potassium hexacyanoferrate (II) trihydrate K4[Fe(CN)6]. 3H2O in water and make up to 100 ml with water.

>DEN>S

4.3. Hydrochloric acid solution, 6,35 ± 0,20 M (20 to 22 %) or 5,0 ± 0,2 M (16 to 18 %).

× 100

4.4. Ammonia solution, 2,0 ± 0,2 M (3,5 %).

jossa

4.5. Acetic acid solution, 2,0 ± 0,2 M (12 %).

M1 = pullon M ja rasvan paino (g) 6.2.15 kohdan mukaan;

4.6. Bromothymol blue indicator, 1 % (m/v) solution in ethanol.

M2 = pullon M paino (g) 6.2.1 kohdan, tai jos kyseessä on liukenematon aine tai sitä epäillään, 6.2.16.2 kohdan mukaan;

5. APPARATUS

B1 = pullon B paino (g) sokeakokeesta 6.2.15 kohdan mukaan;

5.1. Balance, sensitivity 10 mg.

B2 = pullon B paino (g) 6.2.1 kohdan, tai jos kyseessä on liukenematon aine tai sitä epäillään, 6.2.16.2 kohdan mukaan;

5.2. Polarimeter tube, 2dm, of exactly calibrated length.

S = tutkittavan näytteen paino(g).

5.3. Polarimeter or saccarimeter:

7.2 Toistettavuus

(a) Polarimeter with sodium light or mercury green light (mercury vapour lamp with prism or the special Wratten Screen No 77 A), to be read with an accuracy of at least 0.05 angular degrees,

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 0,05 g rasvaa tuotteen 100 grammaa kohti, paitsi rasvattoman maitojauheen osalta 0,1 g rasvaa tuotteen 100 grammaa kohti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

(b) Saccarimeter with international sugar scale, using white light passing through a filter of 15 mm of a 6 % solution of potassium bichromate, or sodium light, to be read with an accuracy of at least 0,1o on the international sugar scale.

5.4. Water bath, regulated at 60 oC ± 1 oC.

6. PROCEDURE

MENETELMÄ 5: SAKKAROOSIPITOISUUDEN MÄÄRITYS (POLARIMETRINEN MENETELMÄ)

6.1. Control determination

1. SOVELTAMISALA

In order to standardize the procedure, reagents and apparatus, carry out a control determination in duplicate as described below using a mixture of 100 g of milk and 18 g pure sucrose or a mixture of 110 g of skimmed milk and 18 g pure sucrose, each corresponding to 40 g of condensed milk containing 45 % sucrose. Calculate the sugar content using the formulae under 7, substituting for M, F and P respectively in formula 1 the quantity of milk taken and the fat and protein content of this milk, and in formula 2 for M, the value of 40,00. The mean of the values found shall not differ by more than 0,2 % from 45,0 %.

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden sakkaroosipitoisuus:

6.2. Determination

- sokeroitu tiivistemaito;

6.2.1. Weigh to within 10 mg, approximately 40 g of the well mixed sample into a 100 ml glass beaker. Add 50 ml of hot water (80 to 90 oC) and mix well.

- sokeroitu, vähärasvainen tiivistemaito;

6.2.2. Transfer the mixture quantitatively to a 200 ml measuring flask, rinsing the beaker with successive quantities of water at 60 oC, until the total volume is between 120 and 150 ml. Mix and cool to room temperature.

- sokeroitu, rasvaton tiivistemaito.

6.2.3. Add 5 ml of the dilute ammonia solution (4.4). Mix again and then allow to stand for 15 minutes.

Näytteissä ei saa olla inverttisokeria.

6.2.4. Neutralize the ammonia by adding an equivalent quantity of the diluted solution of acetic acid (4.5). Determine the exact number of ml beforehand by titration of the ammonia solution using bromothymol blue as indicator (4.6). Mix.

2. MÄÄRITELMÄ

6.2.5. Add, with gently mixing by rotating the tilted flask, 12.5 ml of zinc acetate solution (4.1).

Sokeroitujen tiivistemaitojen sakkaroosipitoisuus: annetun menetelmän mukaan määritetty sakkaroosipitoisuus.

6.2.6. Add 12.5 ml of potassium hexacyanoferrate (II) solution (4.2) in the same way as for the acetate solution.

3. PERIAATE

6.2.7. Bring the contents of the flask to 20 oC and make up to the 200 ml mark with water at 20 oC.

Menetelmä perustuu Clerget-inversioon: näytettä käsitellään laimealla hapolla, joka hydrolysoi täydellisesti sakkaroosin mutta tuskin ollenkaan laktoosia tai muita sokereita. Sakkaroosipitoisuus saadaan liuoksen optisen kiertokyvyn muutoksesta.

Note:

Näytteen kirkas suodos, ilman laktoosin mutarotaatiota, valmistetaan käsittelemällä ammoniakilla liuosta, joka sen jälkeen neutraloidaan ja selkeytetään lisäämällä peräkkäin sinkkiasetaatti- ja kaliumheksasyanoferraatti(II) -liuosta.

During any of the stages so far described all additions of water or reagents should have been made in such manner as to avoid the formation of air bubbles, and with the same object in view, all mixing should have been carried out by rotation of the flask rather than by shaking. If air bubbles are found to be present before making up to 200 ml volume, their removal can be assisted by temporarily connecting the flask to a vacuum pump, and rotating the flask.

Osasta suodosta sakkaroosi hydrolysoidaan annetulla tavalla.

6.2.8. Close the flask with a dry stopper and mix thoroughly by vigorous shaking.

Sakkaroosipitoisuus lasketaan sopivalla kaavalla suodoksen polarointitason kiertymisestä ennen inversiota ja sen jälkeen.

6.2.9. Allow to stand for a few minutes and then filter through a dry filter paper, rejecting the first 25 ml of filtrate.

4. REAGENSSIT

6.2.10. Direct polarization: determine the optical rotation of the filtrate at 20 oC ± 1 oC.

4.1 Sinkkiasetaattiliuos, 1 M: liuota 21,9 g kiteistä sinkkiasetaattidihydraattia, Zn(C2H2O2)2 7 2H2O, ja 3 ml jääetikkaa veteen ja täytetään vedellä 100 ml:aan saakka.

6.2.11. Inversion: pipette 40 ml of the filtrate obtained above into a 50 ml volumetric flask. Add 6,0 ml of 6,35 M hydrochloric acid or 7,5 ml of 5,0 M hydrochloric acid (4.3).

4.2 Kaliumheksasyanoferraatti(II) -liuos, 0,25 M: liuotetaan 10,6 g kiteistä kaliumheksasyanoferraatti(II) dihydraattia, K4[Fe(CN)6] 7 3H2O, veteen ja täytetään vedellä 100 ml:aan saakka.

Place the flask in a waterbath of 60 oC for 15 minutes, ensuring that the entire bulb of the flask has been immersed. Mix by a rotatory movement during the first five minutes, in which time the contents of the flask should have attained the temperature of the bath. Cool to 20 oC, and make up to volume with water at 20 oC. Mix and allow to stand for one hour at this temperature.

4.3 Suolahappoliuos, 6,35 ± 0,20 M (20-22 %) tai 5,0 ± 0,2 M (16-18 %).

6.2.12. Invert polarization

4.4 Ammoniakkiliuos, 2,0 ± 0,2 M (3,5 %).

Determine the rotation of the inverted solution at 20 oC ± 0.2 oC. (However, if temperature T of the liquid in the polarization tube differs by more than 0.2 oC during the measurement, the temperature correction referred to under 7.2 must be applied.)

4.5 Etikkahappoliuos, 2,0 ± 0,2 M (12 %).

7. EXPRESSION OF RESULTS

4.6 Bromtymolisininen indikaattori, 1 % (m/v) etanolissa.

7.1. Method of calculation

5. LAITTEET

Calculate the sucrose content by means of the following formulae:

5.1 Vaaka, tarkkuus 10 mg.

(1) v = M1001,08F + 1,55P

5.2 Polarimetriputki 2 dm, tarkasti kalibroitu pituus.

(2) ×

5.3 Polarimetri tai sokerimittari:

a) Polarimetri, jossa on natriumvalo tai vihreä elohopeavalo (elohopealamppu, jossa prisma tai Wratten Screen No 77 A) ja jonka lukematarkkuus on vähintään 0,05°.

b) Sokerimittari, jossa on kansainvälinen sokeripitoisuusasteikko ja joka käyttää 15 mm:n paksuisen 6-prosenttisen kaliumdikromaattiliuoksen läpi suodatettua valkoista valoa tai natriumvaloa ja joiden lukematarkkuus on vähintään 0,1° kansainvälisellä sokeripitoisuusasteikolla.

where:

5.4 Vesihaude, säädetty lämpötilaan 60 °C ± 1 °C.

S = sucrose content;

6. MENETTELY

M = mass of the weighed sample in grams;

6.1 Tarkistusmääritys

F = percentage of fat in the sample;

Suoritustavan, reagenssien ja laitteiden standardisoimiseksi suoritetaan seuraava tarkistusmääritys kahteen kertaan seoksella, jossa on 100 g maitoa ja 18 g puhdasta sakkaroosia tai 110 g rasvatonta maitoa ja 18 g puhdasta sakkaroosia, joista kumpikin vastaa 40 g tiivistemaitoa, joka sisältää 45 prosenttia sakkaroosia. Sokeripitoisuus lasketaan 7 kohdan kaavoista, ja kaavassa 1 vastaavasti kirjaimien M, F ja P tilalle sijoitetaan otettu maitomäärä sekä tämän maidon rasvapitoisuus ja proteiinipitoisuus, sekä kaavassa 2 kirjaimen M tilalle 40,00. Tulosten keskiarvo saa poiketa korkeintaan 0,2 prosenttia 45,0 prosentista.

P = percentage Of protein (N x 6.38) in the sample;

6.2 Määritys

V = volume in ml to which the sample is diluted before filtration;

6.2.1 Punnitaan 10 mg:n rajoissa noin 40 g hyvin sekoitettua näytettä 100 ml:n dekantterilasiin. Lisätään 50 ml kuumaa vettä (80-90 °C) ja sekoitetaan hyvin.

v = correction in ml for the volume of the precipitate formed during clarification;

6.2.2 Seos siirretään kvantitatiivisesti 200 ml:n mittalasiin huuhdellen dekantterilasia useita kertoja pienillä vesimäärillä (60 °C), kunnes kokonaistilavuus on 120-150 ml. Sekoitetaan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan.

D = direct polarimeter reading (polarization before inversion);

6.2.3 Lisätään 5 ml laimennettua ammoniakkiliuosta (4.4). Sekoitetaan uudelleen ja annetaan seistä 15 minuuttia.

I = polarimeter reading after inversion;

6.2.4 Ammoniakki neutraloidaan lisäämällä ekvivalentti määrä laimennettua etikkahappoliuosta (4.5). Tarkka millilitramäärä määritetään etukäteen titraamalla ammoniakkiliuos käyttäen indikaattorina bromtymolisinistä (4.6). Sekoitetaan.

L = length in dm of the polarimeter tube;

6.2.5 Lisätään kallistettua pulloa varovasti pyörittämällä sekoittaen 12,5 ml sinkkiasetaattiliuosta (4.1).

Q = inversion factor, the values of which are given below.

6.2.6 Lisätään 12,5 ml kaliumheksasyanoferraatti(II)-liuosta (4.2) samalla tavoin kuin asetaattiliuosta.

Remarks:

6.2.7 Pullon sisältö jäähdytetään 20 °C:een ja täytetään 20 °C:isella vedellä 200 ml:n merkkiin asti.

(a) When exactly 40,00 g of condensed milk are weighed and a polarimeter with sodium light, angular degrees and a 2dm polarimeter tube at 20,0 oC ± 0,1 oC is used the sucrose content of normal condensed milk (C = 9) can be calculated from the following formula:

Huomautus:

S = (D — 1,25 I) x (2,833 — 0,00612 F — 0,00878 P)

Kaikissa tähän asti selostetuissa työvaiheissa pitäisi jokainen vesi- tai reagenssilisäys tehdä siten, että ilmakuplia ei pääse muodostumaan, ja samassa tarkoituksessa kaikki sekoittamiset pitää suorittaa pulloa pyörittäen eikä ravistellen. Jos ilmakuplia havaitaan, ennen kuin pullo täytetään 200 ml:aan saakka, voidaan niiden poistamiseksi pullo yhdistää hetkellisesti tyhjöpumppuun ja pyöritellä pulloa.

(b) If the invert polarization is measured at a temperature other than 20 oC, the figures should be multiplied by:

6.2.8 Pullo suljetaan kuivalla tulpalla ja sekoitetaan perusteellisesti voimakkaasti ravistellen.

(1 + 0,0037 (T — 20).

6.2.9 Annetaan seistä muutamia minuutteja, sen jälkeen suodatetaan kuivan suodatinpaperin läpi ja heitetään pois ensimmäiset 25 ml suodoksesta.

7.2. Values of the inversion factor Q

6.2.10 Suora polarisaatio: määritetään suodoksen optinen kiertokyky lämpötilassa 20 °C ± 1 °C.

The following formulae give accurate values for Q, for various sources of light with corrections for concentration and temperature:

6.2.11 Invertointi: pipetoidaan 40 ml äsken saatua suodosta 50 ml:n mittapulloon. Lisätään 6,0 ml 6,35 M suolahappoa tai 7,5 ml 5,0 M suolahappoa (4.3).

Sodium light and polarimeter with angular degrees:

Pullo asetetaan 60 °C:iseen vesihauteeseen 15 minuutiksi varmistaen, että pullon kupu on kokonaan vedessä. Sekoitetaan pyörivin liikkein ensimmäiset viisi minuuttia, jonka ajan kuluessa pullon sisällön pitäisi nousta vesihauteen lämpötilaan. Jäähdytetään 20 °C:een ja täytetään merkkiin asti 20 °C:isella vedellä. Sekoitetaan ja annetaan seistä tunnin ajan tässä lämpötilassa.

Q = 0,8825 + 0,0006 (C — 9) — 0,0033 (T — 20).

6.2.12 Käänteispolarisaatio

Mercury green light and polarimeter with angular degrees:

Inversioliuoksen optinen kiertokyky määritetään lämpötilassa 20 °C ± 0,2 °C. (Jos kuitenkin polarisaatioputkessa olevan liuoksen lämpötila muuttuu enemmän kuin 0,2 °C mittauksen aikana, on käytettävä 7.2 kohdassa esitettyä lämpötilakorjausta.)

Q = 1,0392 + 0,0007 (C — 9) — 0,0039 (T — 20).

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

White light with dichromate filter and saccharimeter with international sugar scale degrees:

7.1 Laskeminen

Q = 2,549 + 0,0017 (C — 9) — 0,0095 (T — 20).

Sakkaroosipitoisuus lasketaan seuraavasta kaavasta:

In the above formulae:

1) v:

C = Percentage of total sugars in the inverted solution as polarized,

>NUM>M

T = Temperature of the inverted solution in the polarimetric reading.

>DEN>100

Note 1:

(1,08 F + 1,55 P)

The percentage of total sugars C in the inverted solution may be calculated from the direct reading and the change on inversion in the usual manner, using the usual values for the specific rotations of sucrose, lactose and invert sugar.

2) S = >NUM>D - 1,25 I

The correction 0,0006 (C — 9) etc., is only accurate when C is approximately 9; for normal condensed milk, this correction can be neglected, C being close to 9.

>DEN>Q

Note 2:

× >NUM>V - v

Variation in temperature from 20 oC of 1 oC makes little difference in the direct reading, but variation of over 0,2 oC in the invert reading necessitates a correction. The correction - 0,0033 (T — 20) etc., is only accurate between 18 oC and 22 oC.

>DEN>V

7.3. Repeatability

× >NUM>V

The difference between results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 0,3 g of sucrose per 100 g of condensed milk.

>DEN>L × M

METHOD 6: DETERMINATION OF LACTIC ACID AND LACTATES CONTENT

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

jossa

This method determines the lactic acid and lactates, expressed as lactic acid, contents of:

S = sakkaroosipitoisuus,

- dried high fat milk or high fat milk powder,

M = punnitun näytteen paino grammoina,

- dried whole milk or whole milk powder,

F = näytteen rasvaprosentti,

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder,

P = näytteen proteiiniprosentti (N × 6,38),

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder.

V = näytteen laimennustilavuus (ml) ennen suodatusta,

2. DEFINITION

v = selkeytyksen aikana syntyneen sakan tilavuuskorjaus (ml),

Lactic acid and lactates content of dried milks: the lactic acid and lactates, expressed as lactic acid, contents as determined by the method specified.

D = polarimetrin lukema (polarisaatio ennen inversiota),

3. PRINCIPLE

I = polarimetrin lukema inversion jälkeen,

Fat, protein and lactose are simultaneously removed from a solution of the sample by addition of copper sulphate and calcium hydroxide followed by filtration.

L = polarimetriputken pituus desimetreinä,

The lactic acid and lactates in the filtrate are converted into acetaldehyde by concentrated sulphuric acid in the presence of copper II sulphate.

Q = inversiokerroin, jonka arvo ilmoitetaan alempana.

The lactic acid content is determined colorimetrically using p-hydroxydiphenyl.

Huomautuksia:

The lactic acid and lactates content is expressed as mg of lactic acid per 100 g of solids-non-fat.

a) Kun punnitaan täsmälleen 40,00 g tiivistemaitoa ja käytetään polarimetriä, jossa on natriumlamppu, kulma-asteikko ja 2 dm:n polarimetriputki lämpötilassa 20,0 °C ± 0,1 °C, voidaan normaalin tiivistemaidon (C=9) sakkaroosipitoisuus laskea seuraavasta kaavasta:

4. REAGENTS

S = (D - 1,25 I) × (2,833 - 0,00612 F - 0,00878 P).

4.1. Copper (II) sulphate solution: dissolve 250 g of copper (II) sulphate (CuSO4.5H2O) in water and dilute to 1000 ml with water.

b) Jos käänteispolarisaatio mitataan muussa lämpötilassa kuin 20 °C:ssa, pitää luvut korjata seuraavalla kertoimella:

4.2. Calcium hydroxide suspension.

(I + 0,0037 (T 20))

4.2.1. Grind 300 g of calcium hydroxide (Ca(OH)2) in a mortar with water, using totally 900 ml. The suspension should be freshly prepared before use.

7.2 Inversiokertoimen Q arvot

4.2.2. Calcium hydroxide suspension: grind 300 g of calcium hydroxide (Ca(OH)2) in a mortar with water, using totally 1400 ml. The suspension should be freshly prepared before use.

Seuraavista kaavoista saadaan Q:lle tarkat arvot erilaisia valolähteitä varten pitoisuus- ja lämpötilakorjauksin:

4.3. Sulphuric acid — copper (II) sulphate solution: Add to 300 ml of sulphuric acid, 95,9 to 97,0 % (m/m) of H2SO4, 0,5 ml of the copper (II) sulphate solution (4.1).

Natriumvalo ja kulma-asteita näyttävä polarimetri:

4.4. p-hydroxydiphenyl (C6H5C6H4OH) solution: dissolve, by shaking and by heating slightly 0,75 g of p-hydroxydiphenyl in 5 ml of an aqueous solution of sodium hydroxide, containing 5 g of NaOH per 100 ml. Dilute to 50 ml with water in a volumetric flask. Keep the solution in a brown coloured glass bottle in a dark and cool place. Do not use if the colour changes or tubidity occurs. The maximum shelf life is 72 hours.

Q = 0,8825 + 0,0006 (C - 9) - 0,0033 (T - 20)

4.5. Lactic acid standard solution: dissolve, shortly before use, 0,1067 g of lithium lactate (CH3 CHOHCOOLi) in water and dilute to 1000 ml in a volumetric flask. 1 ml of this solution corresponds to 0,1 mg of lactic acid.

Vihreä elohopeavalo ja kulma-asteita näyttävä polarimetri:

4.6. Standard reconstituted milk: analyse in advance several samples of high quality dried milk. For the preparation of the calibration curve select the sample having the lowest lactic acid content, containing not more than 30 mg of lactic acid per 100 g of solids-non-fat. Follow the operating procedure described under 6.2.1 and 6.2.2 below.

Q = 1,0392 + 0,0007 (C - 9) - 0,0039 (T - 20)

5. APPARATUS

Valkoinen valo dikromaattisuodattimesta ja sokerimittari, jossa on kansainvälinen sokeripitoisuusasteikko:

5.1. Analytical balance.

Q = 2,549 + 0,0017 (C - 9) - 0,0095 (T - 20)

5.2. Spectrophotometer suitable for readings at a wavelength of 570 nm.

Edellisissä kaavoissa:

5.3. Waterbath at 30 oC ± 2 oC.

C = kokonaissokeriprosentti polarisoidussa inversioliuoksessa.

5.4. Mortar and pestle.

T = polarimetrimittauksessa olevan inversioliuoksen lämpötila.

5.5. Filter paper (Schleicher and Schull 595, Whatman 1 or equivalent).

Huomautus 1:

5.6. Test tubes, pyrex or equivalent (dimensions 25 x 150 mm).

Inversioliuoksen kokonaissokeriprosentti C voidaan laskea viimeisestä lukemasta ja inversion muutoksesta normaaliin tapaan käyttäen sakkaroosin, laktoosin ja inverttisokerin normaaleja ominaiskiertokykyarvoja.

Note:

Korjaus 0,0006 (C - 9) jne., on tarkka vain silloin kun C on noin 9; normaalille tiivistemaidolle voidaan korjaus jättää tekemättä, sillä C on melkein 9.

All glassware must be perfectly clean and designated for use solely in this determination. Rinse glassware containing precipitate residues with concentrated hydrochloric acid before washing.

Huomautus 2:

6. PROCEDURE

Yhden asteen poikkeama 20 °C:sta ei vaikuta paljoakaan mittarilukemaan, mutta yli 0,2 °C:n ero inversiolukemassa vaatii korjauksen. Korjaus - 0,0033 (T - 20) jne., on tarkka vain lämpötilojen 18 ja 22 °C välillä.

6.1. Blank test

7.3 Toistettavuus

Carry out a blank test by placing 30 ml of water into a 50 ml graduated tube and treating this tube as described under 6.2.4 to 6.2.11 inclusive. If the blank measured against water exceeds an equivalent of 20 mg of lactic acid per 100 g solids-non-fat, the reagents should be checked and the impure reagents or reagent should be replaced. Carry out the blank test at the same time as the analysis of the sample.

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 0,3 g sakkaroosia tiivistemaidon 100 grammaa kohti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

6.2. Determination

Note: Avoid contamination with impurities especially with saliva and sweat.

6.2.1. Determine the solids-non-fat content (a) g of the sample by subtracting the fat content (obtained by method 4) and the moisture content (obtained by method 2) from 100.

MENETELMÄ 6: MAITOHAPON JA LAKTAATTIEN PITOISUUDEN MÄÄRITYS

6.2.2. Weigh 1000a-10g of the sample to the nearest 0,1 g. Add this quantity of sample to 100 ml of

1. SOVELTAMISALA

6.2.3. Pipette 5 ml of the solution obtained into a 50 ml graduated tube and dilute with water to about 30 ml.

Tällä menetelmällä määritetään seuraavien valmisteiden maitohapon ja maitohappona ilmoitettujen laktaattien pitoisuudet:

6.2.4. Add slowly while shaking, 5 ml of the copper (II) sulphate solution (4.1) and allow to stand for 10 minutes.

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe;

6.2.5. Add slowly while shaking, 5 ml of the calcium hydroxide suspension (4.2.1) or 10 ml of the calcium hydroxide suspension (4.2.2).

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe;

6.2.6. Dilute to 50 ml with water, shake vigorously, allow to stand for 10 minutes then filter. Discard the first runnings.

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe;

6.2.7. Pipette 1 ml of the filtrate into a test tube (5.6).

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe.

6.2.8. Add to the tube by means of a burette or graduated pipette 6.0 ml of the sulphuric acid-copper (II) sulphate solution (4.3). Mix.

2. MÄÄRITELMÄ

6.2.9. Heat in the boiling water bath for five minutes. Cool to ambient temperature under running water.

Kuivattujen maitojen maitohapon ja laktaattien pitoisuudet: tällä menetelmällä määritetyt maitohapon ja maitohappona ilmoitettujen laktaattien pitoisuudet.

6.2.10. Add two drops of p-hydroxydiphenyl reagent (4.4) and shake vigorously to spread the reagent evenly throughout the liquid. Place the tube in the waterbath at 30 oC ± 2 oC; leave for 15 minutes shaking from time to time.

3. PERIAATE

6.2.11. Place the tube in the boiling waterbath for 90 seconds. Cool to ambient temperature under running water.

Rasva, proteiini ja laktoosi poistetaan samanaikaisesti näyteliuoksesta siten, että siihen lisätään kuparisulfaattia ja kalsiumhydroksidia ja sen jälkeen suodatetaan.

6.2.12. Measure the optical density against the blank test (6.1) within three hours at the wavelength specified under 5.2.

Suodoksessa maitohappo ja laktaatit muutetaan asetaldehydiksi väkevällä rikkihapolla kupari(II)sulfaatin läsnäollessa.

6.2.13. If the optical density exceeds that of the highest point of the standard curve, repeat the test using an adequate dilution of the filtrate obtained under 6.2.6.

Maitohappopitoisuus määritetään kolorimetrisesti p-hydroksidifenyylin kanssa.

6.3. Preparation of the standard

Maitohapon ja laktaattien pitoisuus ilmoitetaan milligrammoina maitohappoa 100 grammaa rasvatonta kuiva-ainetta kohti.

6.3.1. Pipette 5 ml of the reconstituted milk (4.6) into five 50 ml graduated tubes. Pipette into these tubes 0, 1, 2, 3 and 4 ml respectively of the standard solution (4.5), so as to obtain a range of standards corresponding to 0, 20, 40, 60 and 80 mg of added lactic acid per 100 g of solids-non-fat, of the dried milk.

4. REAGENSSIT

6.3.2. Dilute with water to about 30 ml and treat as described under 6.2.4 to 6.2.11.

4.1 Kupari(II)sulfaattiliuos: liuotetaan 250 g kupari(II)sulfaattia (CuSO4.5H2O) veteen ja laimennetaan 1 000 ml:ksi vedellä.

6.3.3. Measure the optical densities of the standards (6.3.1) against the blank test (6.1) at the wavelength specified under 5.2. Plot in a diagram the optical densities against the quantities of lactic acid given under 6.3.1, i.e. 0 mg, 20 mg, 40 mg, 60 mg and 80 mg per 100 g of solids-non-fat. Draw the best fitting straight line through the points and prepare the standard curve by moving this line parallel to itself in such a way that it passes through the origin.

4.2 Kalsiumhydroksidisuspensio.

7. EXPRESSION OF RESULTS

4.2.1 Jauhetaan 300 g kalsiumhydroksidia (Ca(OH)2) veden kanssa huhmaressa käyttäen yhteensä 900 ml vettä. Suspensio pitäisi valmistaa juuri ennen käyttöä.

7.1. Method of calculation

4.2.2 Kalsiumhydroksidisuspensio: jauhetaan 300 g kalsiumhydroksidia (Ca(OH)2) veden kanssa huhmaressa käyttäen yhteensä 1 400 ml vettä. Suspensio pitäisi valmistaa juuri ennen käyttöä.

Convert the optical density measured under 6.2.12 or 6.2.13 into mg of lactic acid per 100 g of solids-non-fat in the sample by reference to the standard curve. Multiply this result by the dilution factor where the filtrate has been diluted according to 6.2.13.

4.3 Rikkihappo - kupari(II)sulfaattiliuos: lisätään 300 ml:aan rikkihappoa 95,9-97,0 % (m/m) H2SO4, 0,5 ml kupari(II)sulfaattiliuosta (4.1).

7.2. Repeatability

4.4 p-hydroksidifenyyliliuos (C6H5C6H4OH): liuotetaan ravistellen ja hieman lämmittäen 0,75 g p-hydroksidifenyyliä 5 ml:aan natriumhydroksidin vesiliuosta, joka sisältää 5 g NaOH/100 ml. Laimennetaan vedellä 50 ml:ksi mittapullossa. Liuosta säilytetään ruskeassa lasipullossa pimeässä ja viileässä paikassa. Ei tule käyttää, jos väri muuttuu, tai sameutta ilmenee. Enimmäissäilytysaika on 72 tuntia.

The difference between the results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 8 mg of lactic acid per 100 g of solids-non-fat for contents up to 80 mg. For higher values, this difference may not exceed 10 % of the lowest value.

4.5 Maitohapon standardiliuos: liuotetaan juuri ennen käyttöä 0,1067 g litiumlaktaattia (CH5CHOHCOOLi) veteen ja laimennetaan vedellä 1 000 ml:ksi mittapullossa. 1 ml liuosta vastaa 0,1 mg maitohappoa.

METHOD 7: DETERMINATION OF PHOSPHATASE ACTIVITY (MODIFIED SANDERS AND SAGER PROCEDURE)

4.6 Maitojauhetta veteen sekoittamalla tehty standardimaito: analysoidaan etukäteen useita korkealaatuisia kuivatun maidon näytteitä. Kalibrointikäyrän laatimista varten valitaan näyte, jossa on alhaisin maitohappopitoisuus, ei kuitenkaan enempää kuin 30 mg maitohappoa 100 grammaa rasvatonta kuiva-ainetta kohti. Seurataan suoritusohjetta jäljempänä 6.2.1 ja 6.2.2 kohdassa.

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

5. LAITTEET

This method describes the determination of phosphatase activity in:

5.1 Analyysivaaka

- dried high fat milk or high fat milk powder,

5.2 Spektrofotometri, josta saa lukemat aallonpituudella 570 nm.

- dried whole milk or whole milk powder,

5.3 Vesihaude 30 °C ± 2 °C.

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder,

5.4 Huhmare ja hierrin.

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder.

5.5 Suodatinpaperia (Schleicher & Schull 595, Whatman 1 tai vastaava).

2. DEFINITION

5.6 Koeputkia, pyrex tai vastaava (mitat 25 × 150 mm).

The phosphatase activity of dried milks is a measure of the quantity of active alkaline phosphatase present. It is expressed as the quantity of phenol in μg liberated by 1 ml of reconstituted milk, as determined by the procedure described below.

Huomautus:

3. PRINCIPLE

Kaiken lasitavaran pitää olla ehdottoman puhdasta ja varattu pelkästään tähän määritykseen. Sakkajäännöksiä sisältävä lasitavara huuhdellaan väkevällä suolahapolla ennen pesua.

The phosphatase activity of dried milks is determined by the ability of the phosphatase to liberate the phenol from disodiumphenylphosphate. The quantity of phenol liberated under prescribed conditions is determined by a spectrophotometric measurement of the colour developed with Gibb's reagent.

6. MENETTELY

4. REAGENTS

6.1 Sokeakoe

4.1. Solution A

Sokeakoe suoritetaan laittamalla 30 ml vettä 50 ml:n mittalasiin, ja sitä käsitellään kuten 6.2.4-6.2.11 kohdassa. Jos veteen verrattu sokeakoe vastaa yli 20 mg maitohappoa 100 grammaa rasvatonta kuiva-ainetta kohti, on reagenssit tarkistettava, ja epäpuhtaat reagenssit tai reagenssi on vaihdettava. Sokeakoe suoritetaan samanaikaisesti näytteen analysoinnin kanssa.

Barium borate hydroxide buffer: pH 10,6 ± 0,1 at 20 o C.

6.2 MÄÄRITYS

Dissolve: 25,0 g of barium hydroxide (Ba(OH)2.8H2O) in water and dilute to 500 ml.

Huomautus: Näytteeseen ei pidä päästää epäpuhtauksia, etenkään sylkeä ja hikeä.

Dissolve: 11,0 g of boric acid (H3BO3) in water and dilute to 500 ml.

6.2.1 Näytteen rasvaton kuiva-ainepitoisuus määritetään vähentämällä rasvapitoisuus (saatu menetelmällä 4) ja kosteuspitoisuus (saatu menetelmällä 2) sadasta.

Warm the two solutions to 50 o C and mix.

6.2.2 Punnitse >NUM>1 000

Shake and cool the mixture to room temperature.

>DEN>(a) - 10

Adjust the pH to 10,6 ± 0,1 with the barium hydroxide solution and filter.

g näytettä 0,1 g:n tarkkuudella. Tämä näytemäärä lisätään 100 ml:aan vettä ja sekoitetaan hyvin.

Store the solution in a tightly stoppered container.

6.2.3 Pipetoidaan 5 ml saatua liuosta 50 ml:n mittalasiin ja laimennetaan vedellä noin 30 ml:aan.

Before use, dilute the buffer with an equal quantity of water.

6.2.4 Lisätään hitaasti samalla ravistellen 5 ml kupari(II)sulfaattiliuosta (4.1) ja annetaan seistä 10 minuuttia.

4.2. Solution B:

6.2.5 Lisätään hitaasti samalla ravistellen 5 ml kalsiumhydroksidisuspensiota (4.2.1.) tai 10 ml kalsiumhydroksidisuspensiota (4.2.2).

Colour development buffer.

6.2.6 Laimennetaan vedellä 50 ml:aan, ravistetaan voimakkaasti, annetaan seistä 10 minuuttia ja suodatetaan sen jälkeen. Ensimmäiset suodostipat kaadetaan pois.

Dissolve: 6,0 g of sodium metaborate (NaBO2) (or 12,6 g of NaBO2.4H2O) and 20,0 g of sodium chloride (NaCl) in water and dilute to 1000 ml with water.

6.2.7 Pipetoidaan 1 ml suodosta koeputkeen (5.6).

4.3. Solution C

6.2.8 Lisätään koeputkeen byretillä tai mittapipetillä 6,0 ml rikkihappo-kupari(II)sulfaattiliuosta (4.3). Sekoitetaan.

Buffer substrate solution.

6.2.9 Lämmitetään kiehuvalla vesihauteella viisi minuuttia. Jäähdytetään ympäristön lämpötilaan juoksevalla vedellä.

4.3.1. Dissolve 0,5 g of disodiumphenylphosphate (Na2C6H5PO4.2H2O) in 4,5 ml of Solution B (4.2). Add 2 drops of Solution E (4.5) and allow to stand 30 minutes. Extract the colour with 2,5 ml butanol (4.10). If necessary, repeat the colour extraction. After separation, discard the butanol. This solution can be kept for several days in a refrigerator. Develop and extract the colour once more before use.

6.2.10 Lisätään kaksi tippaa p-hydroksidifenyylireagenssia (4.4) ja ravistetaan voimakkaasti, jotta reagenssi leviää tasaisesti koko nesteeseen. Laitetaan koeputki vesihauteeseen 30 °C ± 2 °C:n lämpötilaan; pidetään siinä 15 minuuttia aika ajoin ravistellen.

4.3.2. Pipette 1 ml of this solution into a 100 ml volumetric flask and make up to volume with Solution A. Prepare the buffer solution immediately before use.

6.2.11 Laitetaan koeputki kiehuvaan vesihauteeseen 90 sekunniksi. Jäähdytetään ympäristön lämpötilaan juoksevalla vedellä.

4.4. Solution D

6.2.12 Absorbanssi mitataan sokeakoenäytteeseen (6.1) verrattuna kolmen tunnin kuluessa kohdassa 5.2 mainitulla aallonpituudella.

Precipitant.

6.2.13 Jos absorbanssi ylittää standardikuvaajan ylimmän pisteen, koe toistetaan käyttäen sopivasti laimennettua suodosta 6.2.6. kohdasta.

Dissolve 3,0 g of zinc sulphate (ZnSO4.7H2O) and 0,6 g of copper (II) sulphate (CUSO4.5H2O) in water and make up to 100 ml with water.

6.3 Standardin valmistaminen

4.5. Solution E

6.3.1 Pipetoidaan 5 ml veteen sekoittamalla tehtyä maitoa (4.6) viiteen 50 ml:n mittalasiin. Näihin laseihin pipetoidaan 0, 1, 2, 3 ja 4 ml standardiliuosta (4.5), jolloin saadaan standardisarja, joka vastaa 0, 20, 40, 60 ja 80 mg lisättyä maitohappoa 100 grammaa kuivatun maidon rasvatonta kuiva-ainetta kohti.

Gibb's reagent.

6.3.2 Laimennetaan vedellä noin 30 ml:aan ja käsitellään kuten kohdissa 6.2.4-6.2.11.

Dissolve 0,040 g of 2,6-dibromoquinone 1,4 — chloroimide (O.C6H2Br2.NCl) in 10 ml of 96 % ethanol. Store the solution in a dark glass bottle kept in a refrigerator. Discard this reagent when it has become discoloured.

6.3.3 Standardien (6.3.1) absorbanssit mitataan sokeakokeeseen (6.1) verrattuna 5.2 kohdassa annetulla aallonpituudella. Piirretään 6.3.1 kohdassa annettuja maitohappopitoisuuksia, eli 0 mg, 20 mg, 40 mg, 60 mg ja 80 mg 100 grammaa rasvatonta kuiva-ainetta kohti, vastaavien absorbanssien kuvaaja. Piirretään pisteiden kautta parhaiten kulkeva suora, ja laaditaan standardikuvaaja siirtämällä tätä suoraa yhdensuuntaisesti itsensä kanssa siten, että se kulkee origon kautta.

4.6. Colour dilution buffer

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

Dilute 10 ml of Solution B (4.2), colour development buffer, to 100 ml with water.

7.1 Laskeminen

4.7. Copper sulphate solution

Muunnetaan 6.2.12 tai 6.2.13 kohdassa mitattu absorbanssi milligrammoiksi maitohappoa 100 grammaa näytteessä olevaa rasvatonta kuiva-ainetta kohti standardikuvaajan avulla. Saatu tulos kerrotaan laimennuskertoimella, jonka mukaan suodos on laimennettu 6.2.13 kohdassa.

Dissolve 0,05 g of copper (II) sulphate (CUSO4.5H2O) in water and make to 100 ml with water.

7.2 Toistettavuus

4.8. Phenol standard solution

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 8 mg maitohappoa rasvattoman kuiva-aineen 100 grammaa kohti 80 mg:n pitoisuuksiin asti, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa. Korkeampien pitoisuuksien osalta ero ei saa olla 10 prosenttia suurempi alimmasta arvosta.

Dissolve 0,200 ± 0,001 g of pure phenol in water and make up to 100 ml in a volumetric flask with water. This solution can be stored for several months in a refrigerator. Dilute 10 ml of this solution to 100 ml with water. This diluted solution contains 200 μg of phenol in 1 ml and can be used for preparing more dilute solutions.

4.9. Boiled distilled water.

4.10. n-Butanol.

MENETELMÄ 7: FOSFATAASIAKTIIVISUUDEN MÄÄRITYS (MODIFIOITU SANDERS & SAGER-MENETELMÄ)

5. APPARATUS

1. SOVELTAMISALA

5.1. Analytical balance.

Tällä menetelmällä määritetään fosfataasiaktiivisuus seuraavissa valmisteissa:

5.2. Waterbath, thermostatically controlled at 37 oC ± 1 oC.

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe;

5.3. Spectrophotometer suitable for readings at a wavelength of 610 nm.

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe;

5.4. Filter paper (Schleicher and Schull 597, Whatman 42 or equivalent filter paper).

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe;

5.5. Waterbath, boiling.

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe.

5.6. Aluminium foil.

2. MÄÄRITELMÄ

6. PROCEDURE

Kuivattujen maitojen fosfataasiaktiivisuus osoittaa niiden sisältämän aktiivisen alkalifosfataasin määrän. Tulos ilmoittaa, kuinka monta mikrogrammaa fenolia vapautuu 1 ml:sta veteen sekoittamalla tehtyä maitoa, kun se määritetään seuraavan suoritusohjeen mukaisesti.

Precautions:

3. PERIAATE

1. Avoid direct exposure to sunlight.

Kuivattujen maitojen fosfataasiaktiivisuuden määritys perustuu fosfataasin kykyyn vapauttaa fenolia dinatriumfenyylifosfaatista. Määrätyissä olosuhteissa vapautuneen fenolin määrä selvitetään mittaamalla spektrofotometrisesti Gibbin reagenssilla syntyvä väri.

2. All the glassware, stoppers and removal material should be perfectly clean. It is recommended that they be rinsed and boiled with water or that they be treated with steam.

4. REAGENSSIT

3. Avoid using plastic materials (stoppers for example) as they may contain phenols.

4.1 Liuos A

4. Saliva contains phosphatase; contamination by traces of saliva must therefore be carefully avoided.

Bariumboraattihydroksidipuskuri: pH 10,6 ± 0,1 lämpötilan ollessa 20 °C.

6.1. Preparation of the sample

Liuotetaan 25,0 g bariumhydroksidia (Ba(OH)2 78H2O) veteen ja laimennetaan 500 ml:ksi.

6.1.1. Weigh, to within 0.1 g, 10 g of the sample and dissolve in 90 ml of water. The temperature for dissolving the powder shall, under no circumstances, exceed 35 oC.

Liuotetaan 11,0 g boorihappoa (H3BO3) veteen ja laimennetaan 500 ml:ksi.

6.2. Determination

Lämmitetään molemmat liuokset 50 °C:een ja sekoitetaan keskenään.

6.2.1. Introduce in each of two test tubes 1 ml of reconstituted milk prepared as described in 6.1.1.

Seosta ravistetaan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan.

6.2.2. Heat one of the tubes in boiling water for two minutes. Cover the tube and the waterbath (5.5) or, for example, a beaker with aluminium foil (5.6) to ensure that the entire tube will be heated. Cool in cold water to room temperature. Use this tube for the blank test. For all subsequent operations treat the two tubes identically.

Säädetään pH arvoon 10,6 ± 0,1 bariumhydroksidiliuoksella ja suodatetaan.

6.2.3. Add 10 ml of Solution C (4.3.2). Mix and place the tube in the waterbath at 37 oC (5.2).

Liuosta säilytetään tiiviisti suljetussa astiassa.

6.2.4. Incubate for 60 minutes in the waterbath shaking periodically.

Laimennetaan puskuri ennen käyttöä yhtä suurella vesimäärällä.

6.2.5. Transfer the tubes immediately to a boiling waterbath (5.5) and heat for two minutes; cool to room temperature in cold water.

4.2 Liuos B:

6.2.6. Add 1 ml of Solution D (4.4), mix and filter through a dry filter paper; discard the first filtrates until a clear liquid is obtained.

Värinmuodostuspuskuri.

6.2.7. Put 5 ml of each filtrate into test tubes, add 5 ml of Solution B (4.2) and 0.1 ml of Solution E (4.5). Mix.

Liuotetaan: 6,0 g natriummetaboraattia (NaBO2) (tai 12,6 g NaBO2 74H2O) ja 20,0 g natriumkloridia (NaCl) veteen ja laimennetaan 1 000 ml:ksi vedellä.

6.2.8. Allow the colour to develop at room temperature for 30 minutes away from direct sunlight.

4.3 Liuos C:

6.2.9. Measure the optical density of the sample solution, against the blank, at the wavelength indicated in 5.3.

Puskurisubstraattiliuos

6.2.10. Repeat the determination if the optical density of the solution is above that of the standard sample with 20 μg of phenol prepared according to 7.

4.3.1 Liuotetaan 0,5 g dinatriumfenyylifosfaattia (Na2C4H3PO4 72H2O) 4,5 ml:aan liuosta B (4.2). Lisätään 2 tippaa liuosta E (4.5) ja annetaan seistä 30 minuuttia. Väri uutetaan 2,5 ml:lla butanolia (4.10). Värin uutto tehdään tarvittaessa toistamiseen. Erottamisen jälkeen butanoli heitetään pois. Tätä liuosta voidaan säilyttää useita päiviä jääkaapissa. Väri muodostetaan ja uutetaan vielä kerran ennen käyttöä.

If this limit is exceeded, dilute a suitable volume of reconstituted milk according to 6.1.1 with a suitable volume of this milk carefully boiled as indicated in 6.2.2 to inactivate the phosphatase present.

4.3.2 Pipetoidaan 1 ml tätä liuosta 100 ml:n mittapulloon, ja täytetään merkkiin asti liuoksella A. Puskuriliuos valmistetaan juuri ennen käyttöä.

7. PREPARATION OF THE STANDARD CURVE

4.4 Liuos D

7.1. Pipette into four 100 ml volumetric flasks, 1, 3, 5 and 10 ml of the standard solution diluted according to 4.8 and make up to volume with water; these dilutions contain respectively 2, 6, 10 and 20 μg of phenol per ml.

Saostusaine

7.2. Pipette 1 ml of water or 1 ml of each standard solution (7.1) into the test tubes in order to obtain a series of samples containing 0 (blank value obtained using the 1 ml of water) — 2 — 6 — 10 and 20 μg of phenol.

Liuotetaan 3,0 g sinkkisulfaattia (ZnSO4 77H2O) ja 0,6 g kupari(II)sulfaattia (CuSO4 75H2O) veteen ja täytetään 100 ml:ksi vedellä.

7.3. Pipette successively into each test tube 1 ml of the solution of copper (II) sulphate (4.7), 5 ml of the colour dilution buffer solution (4.6), 3 ml of water and 0.1 ml of Solution E (4.5). Mix.

4.5 Liuos E

7.4. Leave the test tubes for 30 minutes at room temperature away from direct sunlight.

Gibbin reagenssi

7.5. Measure the absorbance of the solutions in each of the tubes, compared to the blank value, at the wavelength indicated in 5.3.

Liuotetaan 0,040 g 2,6-dibromokinoni 1,4 - kloroimidiä (O 7C6H2Br2 7NCl) 10 ml:aan 96-prosenttista etanolia. Liuosta säilytetään tummassa lasipullossa jääkaapissa. Liuos heitetään pois, kun se on menettänyt värinsä.

7.6. Prepare the standard curve by plotting the absorbance values against the quantities of phenol in μg as indicated in 7.2.

4.6 Värin laimennuspuskuri

8. EXPRESSION OF THE RESULTS

Laimennetaan 10 ml liuosta B (4.2), värinmuodostuspuskuria, 100 ml:aan vettä.

8.1. Calculation

4.7 Kuparisulfaattiliuos

8.1.1. Convert the figures as determined under 6.2.9 to μg of phenol, by reference to the standard curve.

Liuotetaan 0,05 g kupari(II)sulfaattia (CuSO4 75H2O) veteen ja laimennetaan 100 ml:ksi vedellä.

8.1.2. Calculate the phosphatase activity expressed as μg of phenol per ml of reconstituted milk according to the following formula:

4.8 Standardifenoliliuos

Phosphatase activity = 2,4 x P

Liuotetaan 0,200 ± 0,001 g puhdasta fenolia veteen ja laimennetaan vedellä 100 ml:ksi mittapullossa. Tämä liuos säilyy useita kuukausia jääkaapissa. Laimennetaan 10 ml tätä liuosta 100 ml:ksi vedellä. Tämä liuos sisältää 200 mikrogrammaa fenolia 1 ml:ssa, ja siitä voidaan valmistaa vielä laimeampia liuoksia.

where P = the quantity of phenol in μg according to 8.1.1.

4.9 Keitettyä tislattua vettä.

8.1.3. If it was necessary to dilute as indicated under 6.2.10 multiply the result obtained in 8.1.2 by the dilution factor.

4.10 n-butanolia.

8.2. Repeatability

5. LAITTEET

The difference between the results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 2 μg of phenol liberated by 1 ml of reconstituted milk.

5.1 Analyysivaaka.

METHOD 8: DETERMINATION OF PHOSPHATASE ACTIVITY (ASCHAFFENBURG AND MÜLLEN PROCEDURE)

5.2 Vesihaude, termostaattisäädetty 37 °C ± 1 °C.

1. SCOPE AND FIELD OF APPLICATION

5.3 Spektrofotometri, josta saa lukemat aallonpituudella 610 nm.

This method describes the determination of phosphatase activity in:

5.4 Suodatinpaperia (Schleicher & Schüll 597, Whatman 42 tai vastaava suodatinpaperi).

- dried high fat milk or high fat milk powder,

5.5 Vesihaude, kiehuva.

- dried whole milk or whole milk powder,

5.6 Aluminifolio

- dried partly skimmed milk or partly skimmed-milk powder,

6. MENETTELY

- dried skimmed milk or skimmed-milk powder.

Varotoimenpiteet:

2. DEFINITION

1. Vältettävä suoraa auringonvalon vaikutusta.

The phosphatase activity of dried milks is a measure of the quantity of active alkaline phosphatase present in the product. It is expressed as the quantity of p-nitrophenol in micrograms liberated by 1 ml of the reconstituted sample, under the conditions described.

2. Kaiken lasitavaran, tulppien ja työvälineiden pitää olla ehdottoman puhtaita. Ne on suositeltavaa huuhdella ja keittää vedessä tai käsitellä höyryllä.

3. PRINCIPLE

3. Muovimateriaaleja (kuten tulppia) ei pidä käyttää, sillä niissä voi olla fenolia.

The reconstituted sample is diluted with a buffer substrate at pH 10,2 and incubated at a temperature of 37 oC for two hours. Any alkaline phosphatase present in the sample will, under these circumstances, liberate p-nitrophenol from added disodium p-nitrophenyl phosphate. The p-nitrophenol liberated is determined by direct comparison with standard colour glasses in a simple comparator using reflected light.

4. Sylki sisältää fosfataasia; sen tähden pientäkin sylkipisarointia on huolellisesti vältettävä.

4. REAGENTS

6.1 Näytteen valmistelu

4.1. Sodium carbonate-bicarbonate buffer solution.

6.1.1 Punnitaan 0,1 gramman tarkkuudella 10 g näytettä ja liuotetaan 90 ml:aan vettä. Jauheen liuotuslämpötila ei missään olosuhteissa saa olla enempää kuin 35 °C.

Dissolve 3,5 g of anhydrous sodium carbonate and 1,5 g of sodium bicarbonate in water and dilute to 1000 ml in a volumetric flask with water.

6.2 Määritys

4.2. Buffer substate.

6.2.1 Otetaan kaksi koeputkea ja laitetaan kumpaankin 1 ml 6.1.1 kohdan mukaan veteen sekoittamalla tehtyä maitoa.

Dissolve 1,5 g of disodium p-nitrophenylphosphate in sodium carbonate-bicarbonate buffer (4.1) and dilute to 1000 ml in a volumetric flask with buffer (4.1).

6.2.2 Toista koeputkea kuumennetaan kiehuvassa vedessä kaksi minuuttia. Koeputki ja vesihaude (5.5) tai esimerkiksi dekantterilasi peitetään alumiinifoliolla (5.6) sen varmistamiseksi, että koko putki kuumenee. Jäähdytetään kylmällä vedellä huoneen lämpötilaan. Käytetään tätä koeputkea sokeakokeessa. Käsitellään kaikissa seuraavissa kohdissa molempia putkia samalla tavoin.

This solution is stable if stored in a refrigerator (≤ 4 oC) for one month but a colour control test should be carried out on such stored solutions — see 6, precaution number 3.

6.2.3 Lisätään 10 ml liuosta C (4.3.2). Sekoitetaan ja putki asetetaan 37 °C:seen vesihauteeseen (5.2).

4.3. Clarification solutions.

6.2.4 Haudutetaan 60 minuuttia vesihauteessa välillä ravistellen.

4.3.1. Zinc sulphate solution.

6.2.5 Siirretään putket välittömästi kiehuvaan vesihauteeseen (5.5) ja kuumennetaan kaksi minuuttia; jäähdytetään huoneenlämpötilaan kylmässä vedessä.

Dissolve 30,0 g of zinc sulphate (ZnSO4) in water and dilute to 100 ml in a volumetric flask with water.

6.2.6 Lisätään 1 ml liuosta D (4.4), sekoitetaan ja suodatetaan kuivan suodatinpaperin läpi; alkusuodos heitetään pois, kunnes liuos on kirkasta.

4.3.2. Potassium hexacyanoferrate (II) solution.

6.2.7 Laitetaan 5 ml kumpaakin suodosta koeputkiin, lisätään 5 ml suodosta B (4.2) ja 0,1 ml liuosta E (4.5). Sekoitetaan.

Dissolve 17,2 g of potassium hexacyanoferrate (II) trihydrate (K4Fe(CN)6.3H20) and dilute to 100 ml in a volumetric flask with water.

6.2.8 Värin annetaan muodostua 30 minuuttia huoneenlämpötilassa suoralta auringonvalolta suojassa.

5. APPARATUS

6.2.9 Näyteliuoksen absorbanssi mitataan sokeakokeeseen verrattuna 5.3 kohdassa mainitulla aallonpituudella.

5.1. Analytical balance.

6.2.10 Määritys toistetaan, jos liuoksen absorbanssi on suurempi kuin 7 kohdan mukaan valmistetun standardinäytteen, jossa on 20 mikrogrammaa fenolia.

5.2. Waterbath, thermostatically controlled at 37 oC ± 1 oC.

Jos tämä raja-arvo ylittyy, laimennetaan sopiva määrä 6.1.1 kohdan mukaan veteen sekoittamalla tehtyä maitoa sopivalla määrällä tätä maitoa, joka on fosfataasin inaktivoimiseksi huolellisesti keitetty 6.2.2 kohdan mukaisesti.

5.3. Comparator, with special disc containing standard colour glasses calibrated in μg p-nitrophenol per ml milk, and 2 x 25 mm cells.

7. STANDARDIN VALMISTAMINEN

6. PROCEDURE

7.1 Neljään 100 ml:n mittapulloon pipetoidaan 1, 3, 5 ja 10 ml standardiliuosta, joka on laimennettu 4.8 kohdan mukaisesti ja täytetty merkkiin asti vedellä; nämä liuokset sisältävät vastaavasti 2, 6, 10, ja 20 mikrogrammaa fenolia millilitrassa.

Precautions:

7.2 Pipetoidaan 1 ml vettä tai 1 ml kutakin standardiliuosta (7.1) koeputkiin sellaisen näytesarjan saamiseksi, joka sisältää 0 (vettä käyttäen saatu nolla-arvo) - 2 - 6 - 10 ja 20 mikrogrammaa fenolia millilitrassa.

1. After use, test tubes must be emptied, rinsed in water, washed in hot water containing an al kaline detergent, followed by thorough rinsing in clean hot tap water. Finally, they must be rinsed in water and dried before use.

7.3 Kuhunkin koeputkeen pipetoidaan peräkkäin 1 ml kuparisulfaatti(II)-liuosta (4.7), 5 ml värin laimennuksen puskuriliosta (4.6), 3 ml vettä ja 0,1 ml liuosta E (4.5). Sekoitetaan.

Pipettes must be thoroughly rinsed in clean cold tap water immediately after use, followed by rinsing in water and dried before use.

7.4 Koeputkien annetaan 30 minuutin ajan olla huoneenlämpötilassa suoralta auringonvalolta suojassa.

2. The test tube stoppers must be thoroughly rinsed in hot tap water immediately after use, followed by boiling for two minutes in water.

7.5 Kussakin koeputkessa olevan liuoksen absorbanssi mitataan verrattuna sokeakokeeseen 5.3 kohdassa mainitulla aallonpituudella.

3. The buffer substrate solution (4.2) should remain stable for at least one month if stored in a refrigerator at 4 oC or less. Any instability is denoted by the formation of a yellow colour. Whilst the test is always read against a boiled product control containing the same buffer substrate solution, it is recommended that the solution should not be used if it gives a colour reading in excess of 10 μg when read in a 25 mm cell in the comparator using distilled water in the other 25 mm cell.

7.6 Standardikuvaaja laaditaan merkitsemällä kuvaan 7.2 kohdassa saatuja fenolin mikrogrammamääriä vastaavat absorbanssiarvot.

4. Use a separate pipette for each sample and avoid contaminating the pipette with saliva.

8. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

5. The test must not be exposed to direct sunlight at any time.

8.1 Laskeminen

6.1. Preparation of sample

8.1.1 Muunnetaan 6.2.9 kohdassa määritetyt luvut mikrogrammoiksi fenolia standardikuvaajan avulla.

Dissolve 10 g of the powder in 90 ml of water. The temperature for dissolving the powder must not exceed 35 oC.

8.1.2 Lasketaan fosfataasiaktiivisuus, joka ilmoitetaan mikrogrammoina fenolia millilitrassa veteen sekoittamalla tehtyä maitoa, seuraavasta kaavasta:

6.2. Determination

Fosfataasiaktiivisuus = 2,4 × P

6.2.1. Pipette 15 ml of buffer substrate (4.2) into a clean, dry test tube, followed by 2 ml of the reconstituted sample (6.1) to be tested. Stopper the tube, mix by inversion and place in the 37 oC water bath (5.2).

jossa P = fenolin määrä mikrogrammoina 8.1.1 kohdan mukaan.

6.2.2. At the same time, place in the water bath a control tube containing 15 ml of buffer substrate and 2 ml of boiled reconstituted sample similar to that under test.

8.1.3 Jos 6.2.10 kohdan mukainen laimentaminen oli tarpeen, kerrotaan 8.1.2 kohdassa saatu tulos laimennuskertoimella.

6.2.3. After two hours remove both tubes from the water bath, add 0,5 ml of zinc sulphate precipitant (4.3.1), replace the stopper, shake vigorously and allow to stand for three minutes. Add 0,5 ml of potassium hexacyanoferrate (II) precipitant (4.3.2), mix thoroughly and filter through the fluted filter paper (5.4) and collect the clear filtrate in the clean test tube.

8.2 Toistettavuus

6.2.4. Transfer the filtrate to a 25 mm cell and compare against the filtrate of the boiled sample control in the comparator using the special disc (5.3).

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 2 mikrogrammaa fenolia, joka on vapautunut 1 ml:sta veteen sekoittamalla tehtyä maitoa, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

7. EXPRESSION OF RESULTS

7.1. Calculation

The direct reading obtained under 6.2.4 is recorded as μg p-nitrophenol per ml sample or per ml of reconstituted sample.

MENETELMÄ 8: FOSFATAASIAKTIIVISUUDEN MÄÄRITYS (ASCHAFFENBURG & MÜLLEN-MENETELMÄ)

7.2. Repeatability

1. SOVELTAMISALA

The difference between the results of two determinations carried out simultaneously or in rapid succession on the same sample, by the same analyst, under the same conditions, shall not exceed 2 μg of p-nitrophenol liberated by 1 ml of reconstituted milk.

Tällä menetelmällä määritetään fosfataasiaktiivisuus seuraavissa valmisteissa:

--------------------------------------------------

- kuivattu, runsasrasvainen maito tai runsasrasvainen maitojauhe;

- kuivattu täysmaito tai rasvainen maitojauhe,

- kuivattu, vähärasvainen maito tai vähärasvainen maitojauhe,

- kuivattu, rasvaton maito tai rasvaton maitojauhe.

2. MÄÄRITELMÄ

Kuivattujen maitojen fosfataasiaktiivisuus mittaa tuotteessa olevan aktiivisen alkalifosfataasin määrän. Tulos osoittaa, kuinka monta mikrogrammaa p-nitrofenolia vapautuu 1 ml:sta veteen sekoittamalla tehtyä maitoa selostetuissa olosuhteissa.

3. PERIAATE

Veteen sekoittamalla tehty näyte laimennetaan puskurisubstraatilla pH 10,2:ssa ja haudutetaan vesihauteessa 37 °C:ssa kaksi tuntia. Näytteessä oleva alkaalinen fosfataasi vapauttaa näissä olosuhteissa p-nitrofenolia lisätystä dinatrium p-nitrofenyylifosfaatista. Vapautunut p-nitrofenoli määritetään suoraan vertaamalla väriä standardivärilaseihin yksinkertaisessa vertailulaitteessa heijastuneen valon avulla.

4. REAGENSSIT

4.1 Natriumkarbonaatti-bikarbonaatti-puskuriliuos.

Liuotetaan 3,5 g vedetöntä natriumkarbonaattia ja 1,5 g natriumbikarbonaattia veteen ja laimennetaan vedellä 1 000 ml:ksi mittapullossa.

4.2 Puskurisubstraatti.

Liuotetaan 1,5 g dinatrium-p-nitrofenyylifosfaattia natriumkarbonaatti-bikarbonaattipuskuriin (4.1) ja laimennetaan puskuriliuoksella (4.1) 1 000 ml:ksi mittapullossa.

Tämä liuos on jääkaapissa säilytettynä (≤ 4 °C) kuukauden ajan stabiili, mutta näin säilytetyille liuoksille tulisi tehdä väritesti, ks. 6, 3 kohta.

4.3 Selkeytysliuokset

4.3.1 Sinkkisulfaattiliuos.

Liuotetaan 30,0 g sinkkisulfaattia (ZnSO4) veteen ja laimennetaan vedellä 100 ml:ksi mittapullossa.

4.3.2 Kaliumheksasyanoferraatti(II)liuos.

Liuotetaan 17,2 g kaliumheksasyanoferraatti(II)trihydraattia (K4Fe(CN)6 73H2O) veteen ja laimennetaan vedellä 100 ml:ksi.

5. LAITTEET

5.1 Analyysivaaka.

5.2 Vesihaude, termostaatilla säädetty 37 °C ± 1 °C.

5.3 Vertailulaite, jonka erikoiskiekolle sijoitetut, kalibroidut standardivärilasit osoittavat, montako milligrammaa p-nitrofenolia on millilitrassa maitoa, ja 2 × 25 mm kyvetit.

6. MENETTELY

Varotoimenpiteet:

1. Koeputket on käytön jälkeen tyhjennettävä, huuhdeltava vedessä, pestävä alkaalista pesuainetta sisältävässä kuumassa vedessä ja sen jälkeen huolellisesti huuhdeltava puhtaassa kuumassa vesijohtovedessä. Lopuksi ne on huuhdeltava vedessä ja kuivattava ennen käyttöä.

Pipetit on huolellisesti huuhdeltava puhtaassa kylmässä vesijohtovedessä heti käytön jälkeen ja sen jälkeen huuhdeltava vedessä ja kuivattava ennen käyttöä.

2. Koeputkien tulpat on huolellisesti huuhdeltava kuumassa vesijohtovedessä heti käytön jälkeen ja sen jälkeen keitettävä kaksi minuuttia vedessä.

3. Puskuriliuoksen (4.2) pitäisi pysyä stabiilina vähintään yhden kuukauden, jos sitä säilytetään jääkaapissa enintään 4 °C:ssa. Hajoaminen näkyy keltaisen värin muodostumisesta. Vaikka koe luetaan aina verrattuna vastaavaan keitettyyn tuotteeseen, joka sisältää samaa puskurisubstraattiliuosta, on suositeltavaa, että liuosta ei käytetä, jos sen värilukema ylittää 10 mikrogrammaa, kun lukema saadaan vertailulaitteen 25 mm:n kyvetistä käyttäen tislattua vettä toisessa 25 ml:n kyvetissä.

4. Jokaiselle näytteelle on käytettävä eri pipettiä, eikä sylkeä saa päästää pipettiin.

5. Koetta ei missään vaiheessa saa suorittaa suorassa auringonvalossa.

6.1 Näytteen valmistelu

Liuotetaan 10 g jauhetta 90 ml:aan vettä. Jauheen liuotuslämpötila ei saa olla enemmän kuin 35 °C.

6.2 Määritys

6.2.1 Pipetoidaan 15 ml puskurisubstraattia (4.2) puhtaaseen kuivaan koeputkeen ja sen jälkeen 2 ml tutkittavaa veteen sekoittamalla tehtyä näytettä (6.1). Putki suljetaan tulpalla, sekoitetaan ylösalaisin kääntäen ja asetetaan 37 °C:iseen vesihauteeseen (5.2).

6.2.2 Samanaikaisesti vesihauteeseen asetetaan tarkistuskoeputki, joka sisältää 15 ml puskurisubstraattia ja 2 ml keitettyä, veteen sekoittamalla tehtyä näytettä kuten kokeessakin.

6.2.3 Kahden tunnin kuluttua otetaan molemmat putket pois vesihauteesta, lisätään 0,5 ml sinkkisulfaatti-saostusainetta (4.3.1), laitetaan tulppa paikoilleen ja ravistellaan voimakkaasti sekä annetaan seistä kolme minuuttia. Lisätään 0,5 ml kaliumheksasyanoferraatti(II)-saostusainetta (4.3.2), sekoitetaan perusteellisesti ja suodatetaan poimusuodattimen läpi (5.4) sekä kerätään kirkas suodos puhtaaseen koeputkeen.

6.2.4 Siirretään suodos 25 mm:n kyvettiin ja verrataan vastaavaan keitetyn tarkistusnäytteen suodokseen vertailulaitteessa käyttäen erikoiskiekkoa (5.3).

7. TULOSTEN ILMOITTAMINEN

7.1 Laskeminen

Edellä 6.2.4 kohdan mukainen mittarilukema osoittaa, kuinka monta mikrogrammaa p-nitrofenolia 1 ml näytettä tai veteen sekoittamalla tehtyä näytettä sisältä.

7.2 Toistettavuus

Kahden tuloksen välinen ero ei saa olla suurempi kuin 2 mikrogrammaa p-nitrofenolia 1 ml:ssa näytettä tai veteen sekoittamalla tehtyä maitoa, kun määritykset on suorittanut sama analysoija samanaikaisesti tai peräkkäin samoissa olosuhteissa.

Top

BG CS DA DE EL EN ES ET FI FR HU IT LT LV MT NL PL PT RO SK SL SV	BG CS DA DE EL EN ES ET FI FR HU IT LT LV MT NL PL PT RO SK SL SV
en	fi

Bilingual display

en

fi